目的 考察丹酚酸B (SAB)对巨噬细胞胆固醇外排的影响.方法 分别采用巨噬细胞RAW 264.7和PMA诱导的THP-1细胞,利用流式细胞仪检测丹酚酸B对已摄取DiI-acLDL的细胞外排脂质作用的影响,对RAW 264.7细胞表面ABCA1蛋白表达水平的影响.采用ABCA1的抑制剂DIDS及小分子干扰RNA的方法检测ABCA1在丹酚酸B诱导的促进脂质外排过程中的作用.进而利用靶向CD36的小分子干扰RNA,通过抑制CD36的表达,检测CD36在丹酚酸B促进载脂巨噬细胞脂质外排过程中的作用.结果 采用DiI荧光标记的脂质检测巨噬细胞对脂质的外排作用,结果显示SAB显著增加了荷脂细胞对DiI-acLDL的外排作用.对脂代谢相关转运蛋白表达的检测结果显示,在荷脂的RAW 264.7细胞中,SAB能够以一定剂量依赖的方式增加细胞表面ABCA1蛋白水平的表达.进一步研究显示,上述SAB促进外排的作用可被ABCA1的抑制剂或者siRNA的作用消除,确证了ABCA1在SAB介导的脂质外排过程中的重要作用.同样利用CD36小分子干扰RNA将CD36表达抑制后,SAB促进外排的作用消失,说明SAB介导的细胞脂质的外排作用同样依赖于CD36.结论 丹酚酸B通过上调ABCA1的表达,促进巨噬细胞胆固醇或脂质的外排,且该作用依赖于ABCA1及CD36,为SAB抗动脉粥样硬化作用新机制的研究提供了重要依据.
作者：王丽；姜华军；杨帆；杜郁；贾晓健；司书毅；洪斌 刊期： 2013年第02期
目的 检测常规体外构建的组织工程骨中牛血清白蛋白残余量,并探讨减少其残留量的方法.方法 体外分离培养人骨髓基质干细胞,取第2代细胞(P2)接种于完全脱钙骨支架材料并成骨诱导培养2周,体外构建组织工程骨.成骨诱导液为含10％胎牛血清的条件培养液,并于检测前1天更换为无血清的条件培养液.待测组织工程骨先经1∶100 (v∶v)生理盐水浸洗3次,然后加入磷酸盐缓冲液(PBS),37℃振荡浸提24 h,获取浸提液.同法获取未接种细胞的单纯支架材料的浸提液作为对照组.采用酶联免疫法检测样品浸提液中牛血清白蛋白的残余量,比较两者牛血清白蛋白残余量的差异.结果 经生理盐水洗涤3次后,洗涤液中的牛血清白蛋白含量明显降低.酶联免疫法测定的组织工程骨与单纯支架材料的牛血清白蛋白残余量分别为(15.57±5.82)ng和(14.85±5.06)ng,单位重量的牛血清白蛋白残余量分别为(0.254±0.088)ng/mg和(0.306±0.079)ng/mg,两组相比均无显著性差异(P＞ 0.05,n=10).结论 酶联免疫法适用于组织工程骨中牛血清白蛋白残余量的检测.因为支架材料较细胞更易吸附牛血清白蛋白,现有条件下构建的组织工程骨牛血清白蛋白残余量仍然较高,需要继续探索降低其残余含量的新方法.
作者：邹文焘；刘广鹏；孙剑；崔磊 刊期： 2013年第02期
目的 建立实时荧光定量PCR检测B7-H4的方法并初步应用于人胃癌组织.方法 将B7-H4和内参GAPDH的PCR扩增产物经测序鉴定正确后克隆入载体pMD19-T,构建重组质粒标准品,并纯化、定量及梯度稀释,分别建立B7-H4和GAPDH的标准曲线,应用实时荧光定量PCR检测8例人胃癌组织中的B7-H4相对于GAPDH的表达情况.结果 B7-H4的低检测拷贝数为5.27拷贝,线性范围5.27×101 ～ 5.27 × 107拷贝,标准曲线方程y =-3.1395 x+41.805,直线回归相关系数r=0.994 904,批间变异系数范围2.39％ ～ 3.59％,扩增效率108.2％; GAPDH的低检测拷贝数为38.6拷贝,线性范围3.86×102～ 3.86×107拷贝,标准曲线方程y=-3.2436x+ 41.083,直线回归相关系数r=0.998 913,批间变异系数范围2.26％～3.86％,扩增效率103.4％.8例人胃癌组织的B7-H4相对于GAPDHmRNA表达水平在0.044～0.888之间.结论 荧光定量PCR检测B7-H4的方法具备较高的敏感性和特异性,且系统有良好的重复性和线性范围.
作者：王琦；蒋敬庭；魏文祥 刊期： 2013年第02期
目的 对自主研发的ZD6474衍生物进行抗肿瘤活性研究,从而为进一步的结构修饰、改造与药理学研究奠定良好的基础.方法 采用均相时间分辨荧光法以VEGFR-2、EGFR为检测靶点评价化合物的抑制活性；采用SRB法检测化合物对细胞的增殖抑制活性；移植人非小细胞肺癌H1299裸鼠模型作为体内抗肿瘤活性评价.结果 从大量化合物中筛选出4个有较好酪氨酸激酶抑制活性的化合物,分别编号为106、113、115、116.体外细胞实验结果显示化合物对肿瘤细胞生长增殖均有抑制作用,其中106对A431、H1975和A549细胞系均表现出良好的抑制活性.体内试验结果表明,106能够剂量依赖性抑制裸鼠肿瘤生长,且作用与ZD6474相当,25、75 mg/kg的106和ZD6474对H1299的相对肿瘤增殖率为57.3％、38.8％和52.5％、29.6％.结论 化合物106具有良好的体内外抗肿瘤作用,有进一步的研究价值.
作者：周祥；于冰；侯文彬；徐春秀；石玉；李祎亮 刊期： 2013年第02期
目的 借助计算机虚拟筛选技术设计并合成新型抗结核小分子化合物.方法 以氯丙嗪为模板分子,利用Discovery studio 3.0构建相应的3D药效团模型,并对虚拟化合物库进行筛选；对筛选结果进行手动择优选择,化学合成目标化合物并进行体外抗结核分枝杆菌的活性评价.结果 筛选得到活性化合物15个,并合成其中13个,其中化合物9(多巴胺)在体外对结核分枝杆菌表现出中等强度的抑制作用,MIC为8.0 μg/ml.结论 通过药效团的方法筛选得到了结构较吩噻嗪类化合物简单的抗结核活性小分子多巴胺,该化合物作为抗结核分枝杆菌的先导化合物,较吩噻嗪类具有更大的结构修饰空间.
作者：季兴跃；吴林韬；李思阳；易红；金洁；李卓荣 刊期： 2013年第02期
目的 研究益气解毒方对TgN (p53mt-LMP l)/HT转基因小鼠鼻咽黏膜上皮细胞周期相关蛋白p53、p21、CDK2和cyclinD1的影响.方法 TgN (p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠随机分为3组,分别为模型组(MG)、益气解毒方干预组(YG)、维甲酸阳性对照组(TG),每组24只;同品系C57BL/6J鼠24只作对照组(CG).各组均用诱癌剂二亚硝基哌嗪进行处理(每次剂量73 mg/kg,每周2次,共28次).采用免疫组织化学染色法检测小鼠鼻咽黏膜上皮细胞周期相关蛋白p53、p21、CDK2和cyclinD1的表达水平,并采用Western blot法进行验证.结果 YG组、TG组及CG组p53蛋白和cyclinD1蛋白表达均显著低于MG组(P＜0.05);YG、TG及CG组p21蛋白表达量高于MG组,差异有统计学意义(P＜0.05)；各组CDK2蛋白表达量差异无统计学意义.结论 益气解毒方逆转鼻咽黏膜癌前病变的发展可能与下调cyclin D1蛋白和上调p21蛋白表达有关.
作者：吴新正；田道法；戴娜；何迎春；刘刚；刘湘 刊期： 2013年第02期
目的 对豚鼠免疫重组PA抗原和甲醛灭活芽孢组成的炭疽候选疫苗,评价其免疫效果.方法 将豚鼠随机分成5个实验组,分别免疫高、中、低剂量候选疫苗、炭疽活疫苗或生理盐水;免疫后不同时间点采血进行抗体检测、XTT法淋巴细胞增殖检测以及皮肤迟发型超敏反应检测.结果 抗体检测结果显示,双组分炭疽候选疫苗能诱导较强的体液免疫应答;XTT细胞增殖结果显示,外周血淋巴细胞特异性增殖不明显,但所有候选疫苗组针对rPA DTH阳转率24 h后均为100％.结论 双组分炭疽候选疫苗能诱导豚鼠产生体液免疫和细胞免疫应答.
作者：卢锦标；魏东；王国治 刊期： 2013年第02期
蛋白质是生命活动的物质基础,是机体细胞的重要组成部分.新生蛋白质多肽需要经过翻译后修饰才能转变为成熟蛋白质.翻译后修饰包括:甲基化、羟基化、羧基化、糖基化、脂酰化、异戊烯基化等共价修饰[1].蛋白质磷酸化是重要的蛋白质翻译后修饰之一,在蛋白激酶催化作用下,磷酸基团由供体分子转移到蛋白质的含有羟基的氨基酸侧链上,具有可逆性[2].蛋白质磷酸化和去磷酸化几乎调节着生命活动的全部过程,文献显示在任何时间内真核细胞蛋白分子中约有1/3的数量在发生磷酸化[3],主要发生在丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸上,较少见的磷酸化氨基酸还有精氨酸、组氨酸、赖氨酸以及天冬氨酸和谷氨酸等.蛋白质磷酸化氨基酸有4种类型:①氧-磷酸盐,通过羟氨基酸的磷酸化形成;②氮-磷酸盐,通过精氨酸、赖氨酸或组氨酸的磷酸化形成;③酰基磷酸盐,通过天冬氨酸或谷氨酸的磷酸化形成;④硫-磷酸盐,通过半胱氨酸磷酸化形成[4].
作者：刘奇；尹磊淼；魏颖；王宇；徐玉东；冉君；杨永清 刊期： 2013年第02期
酶的固定化(enzyme immobilization)是将水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水但具有酶活性的一种衍生物,在催化反应中以固相状态作用于底物.固定化酶因具有载体与酶结合的可逆及重复性[1]、粗酶液与载体结合的直接性[2]以及因恰当的结合方式而产生的酶活性位点的充分暴露[3]等特质而在生物催化领域被广泛应用.
作者：李海凤；曾红宇；许岗；杨兆勇 刊期： 2013年第02期
狂犬病是由狂犬病毒(rabies virus,RV)引起的人畜共患疾病,一旦感染,如不及时采取有效防治措施,其病死率接近100％.狂犬病的暴露后预防(post-exposure prophylaxis,PEP)是防治狂犬病的主要措施.为获得快速的保护作用,世界卫生组织建议,对于严重暴露者应同时使用注射狂犬疫苗和狂犬病毒免疫球蛋白(rabies immune globulin,RIG)进行主动和被动免疫治疗[l].
作者：金晶；孙丽娜；梁米芳 刊期： 2013年第02期
骨性关节炎(osteoarthritis,OA)发病率高,致残率高,造成社会经济负担重.骨性关节炎晚期的病变不可逆转,其早期主要表现为关节软骨糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量的丢失,而这个阶段的病理过程是可逆的.因此,无创监测关节软骨GAG含量的变化成为早期诊断及治疗骨关节炎的重要手段.CT增强软骨成像技术(contrastenhanced computed tomography,CECT)是一种新兴的检测关节软骨GAG含量变化的影像诊断技术.本文就CECT软骨成像技术定量检测关节软骨GAG含量的研究进展做一综述.
作者：贾艳辉；卢世璧；汪爱媛；郭全义 刊期： 2013年第02期
短暂的缺血会对器官造成损伤,但是在恢复灌注后,损伤反而进一步加剧,这种现象称为缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI).临床上涉及缺氧/复氧过程的手术都不可避免地会发生IRI,比如重大器官的移植、冠脉搭桥、溶栓术等.IRI一直是医学研究的热点,近年来研究发现,缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)时,钙超载、供能不足和氧自由基的大量产生等理化因素刺激细胞,诱发信号介导的细胞损伤、凋亡是造成IRI的一个重要原因.本文就IRI与信号通路的研究进展做简要综述.
作者：凌今；凌人；黄彬彬；叶炜剑；丛维涛；金利泰 刊期： 2013年第02期
在生物医学和临床研究实践中,经常需要检测两种不同物质是否在同一样品或同一种细胞中共存,好使用双重染色法在同一个组织样本上进行杂交.双重染色的方法有两种类型,免疫酶组织化学和免疫荧光化学法.目前,在实体肿瘤中,由于甲醛固定石蜡包埋组织过高的荧光信号,免疫荧光法更适合用于冰冻保存的组织[1].双重免疫酶组织化学需要选择不同显色底物、不同的抗体、不同修复方法进行搭配,操作繁琐,在科研使用比较广泛,但临床操作要求稳定性高、操作简单,所以在临床不常规使用.
作者：陈慧；徐琳瑜；钟晓怡；郜恒骏 刊期： 2013年第02期
肿瘤组织生物样本在肿瘤的研究中扮演着重要的角色[1],生物样本库包括生物样本实体、生物分子及样本相关临床资料等综合资源,对于开展人类疾病预测、诊断、治疗研究具有重要的作用.转化医学的兴起和发展对生物样本资源的迫切需求与日俱增[2-3].在我国已有多家单位建立了不同规模、不同类型和不同管理与应用方式的组织和血液样本资源库[4-8].本文对磁县生物样本库的建设和管理进行介绍.
作者：宋国慧；陈志峰；孟凡书；李东方；张向东；冀鸿新；陈超 刊期： 2013年第02期
