目的 研究注射用盐酸甲氯芬酯及有关物质的小鼠异常毒性及细胞毒性.方法 预实验确定给药剂量,正式实验120只小鼠随机分组(雌雄各半,每组12只),给药后连续观察30 min,记录小鼠异常反应情况.应用小鼠肝脏细胞AML-12观察药物的细胞毒性.结果 盐酸甲氯芬酯的杂质根据结构可分为对氯苯氧乙酸类似物和胆碱类.对氯苯氧乙酸类似物具有镇静作用,且安全范围高于盐酸甲氯芬酯,胆碱类杂质具有明显的外周胆碱类反应,具有刺激性毒性.各杂质对注射用盐酸甲氯芬酯的体外细胞毒性基本无影响.结论 盐酸甲氯芬酯胆碱类杂质毒性较高,需重点关注.该研究为制定注射用盐酸甲氯芬酯质量标准提供科学依据,提高临床用药的安全性及有效性.
作者：赵巍；吴兆伟；张喆；胡琴；王琳 刊期： 2018年第05期
目的 研究刺五加植物内生放线菌CWJ-256次级代谢产物及其生物活性.方法 采用16S rRNA基因同源进化分析对菌株CWJ-256进行初步分类鉴定,采用抗菌活性追踪方式,对CWJ-256发酵液通过硅胶柱层析、凝胶柱层析、薄层色谱显色以及高效液相色谱等方法对目标化合物分离纯化,利用核磁共振波谱法和质谱法鉴定化合物的结构.采用MTT法测试其抗肿瘤细胞增殖活性.基于Gluc报告系统对化合物3的体外抗流感病毒药效学进行初步评价.结果 菌种鉴定显示Streptomyces sp.CWJ-256为生黑孢链霉菌Streptomyces melanosporofaciens;从该菌株的发酵代谢产物中分离得到3个活性化合物,经结构鉴定为efomycin G(化合物1)、11,11'-O,O-dimethylelaiophylin(化合物2)、elaiophylin(化合物3);抗肿瘤细胞增殖活性评价显示,化合物1和3对体外培养的人乳腺癌细胞MDA-MB-231具有增殖抑制作用(IC50分别为4.385和2.118μmol/L).体外抗流感病毒药效学评价显示,化合物3对流感病毒A/WSN/33(H1N1)具有一定抑制效果.结论 刺五加内生放线菌Streptomyces sp.CWJ-256可产生多个洋橄榄叶素类次生代谢产物,显示出抗细胞增殖、抗病毒等多种活性.
作者：王新位；郭文强；赵建元；余利岩；席楠；何宁；王珊珊；袁丽杰；解云英 刊期： 2018年第05期
目的 探讨PLCE1基因启动子甲基化与食管鳞癌发生发展的关系.方法 分别用免疫组化(IHC)和甲基化特异PCR(MSP)方法检测51例新疆哈萨克族食管鳞癌及相应癌旁正常组织中PLCE1蛋白表达水平及其启动子甲基化水平,分析其与病理资料相关性;分别用Western blot及MSP检测食管鳞癌细胞在5-aza-dC作用前后PLCE1蛋白表达及启动子甲基化变化情况.结果 新疆哈萨克族食管鳞癌组织中PLCE1蛋白表达高于癌旁正常组织,而其基因甲基化水平则较低(P<0.001),且蛋白高表达的癌组织中其甲基化水平低于蛋白低表达的癌组织(P=0.028),PLCE1甲基化水平与其蛋白表达水平具有明显的相关性(χ2=4.791,P=0.028),并与患者的淋巴结及远处转移(χ2=7.242,P=0.027)和TNM分期(χ2=7.883,P=0.019)明显相关;在食管鳞癌细胞系中PLCE1甲基化程度同样与蛋白表达水平成反比,5-aza-dC处理可抑制TE-1和Kyse150的PLCE1甲基化,提高其蛋白表达.结论 食管鳞癌组织中PLCE1甲基化低与其蛋白表达高、淋巴结和远处转移及TNM分期相关,5-aza-dC处理可抑制PLCE1甲基化程度,增高其蛋白表达.
作者：王彬；彭昊；陈云昭 刊期： 2018年第05期
目的 探讨常见多瘤病毒和疱疹病毒感染与肺癌的关系.方法 巢式PCR检测26例肺癌样本和10例非瘤肺部样本中的BK多瘤病毒、JC多瘤病毒、疱疹病毒HHV-6、HHV-7、HHV-8和EB病毒的存在情况.结果 肺癌组织中HHV-6、HHV-7和EB病毒DNA阳性率分别为17.4％、13.0％和60.9％,非瘤肺部样本中HHV-6、HHV-7和EB病毒DNA阳性率分别为0、12.5％和12.5％.在肺癌组织的EB病毒感染与非瘤组织EB病毒感染存在显著性差异(P<0.05).所有样本中均未检出BK多瘤病毒、JC多瘤病毒和HHV-8 DNA.结论 EB病毒在肺癌和非瘤肺组织的表达存在显著性差异,肺癌组织的EB病毒的感染在肺癌患者中普遍存在,可能对肺癌患者的治疗和预后有一定影响.
作者：赵巍；胡秦；路通；程渊；李劲涛 刊期： 2018年第05期
目的 制备一种HS15/Tween-80混合胶束,提高姜黄素的口服生物利用度.方法 采用薄膜水化法制备姜黄素混合胶束;采用动态光散射法测定胶束粒径大小、Zeta电位、载药量和包封率;考察混合胶束中药物的体外稳定性及其释药行为;通过大鼠灌胃给药的方式考察姜黄素混悬液和姜黄素混合胶束的口服生物利用度.结果 姜黄素混合胶束平均粒径大小为13 nm,Zeta电位为 –20 mV;姜黄素混合胶束载药量为4.4％,其包封率大于95％,姜黄素混合胶束体外稳定性好,体外药物释放结果显示其具有一定的缓释效果;姜黄素混悬液和混合胶束100 mg/kg,灌胃给药30 min之后,姜黄素混合胶束给药组大鼠血药浓度水平显著高于姜黄素混悬液给药组(P<0.05),药物生物利用度提高至原来的1.7倍.结论 姜黄素混合胶束可以有效地提高姜黄素的稳定性和生物利用度.
作者：王婷；刘伟；吴筱霓；费小凡 刊期： 2018年第05期
目的 构建重组人 β2微球蛋白表达体系,高效快速获取 β2微球蛋白,为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础.方法 优化人 β2微球蛋白序列,人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人 β2微球蛋白表达质粒.使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)对重组质粒进行诱导表达,TEV蛋白酶切除MBP,全自动生化仪测定 β2微球蛋白浓度.对重组蛋白在4℃和 –20℃储存条件下的稳定性进行检测,对 β2微球蛋白纯品与校准品的互通性进行分析.结果 成功构建重组人 β2微球蛋白表达质粒,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)成功诱导重组蛋白表达,MBP-β2微球蛋白(MBP-β2-MG)浓度可达100 mg/L,β2微球蛋白浓度可达185 mg/L.在4℃和 –20℃储存条件下监测64周,β2微球蛋白稳定存在.β2微球蛋白纯品与RANDOX生化校准品互通性良好.结论 通过密码子优化,成功构建了重组 β2微球蛋白的高效表达系统,β2微球蛋白可溶性高,稳定性好,与国际通用校准品互通性好,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求.
作者：邹丽辉；王萌；黄薇；张恩毅；肖飞；王玉梅 刊期： 2018年第05期
目的 建立布氏菌疫苗效力评价小鼠模型,为布氏菌疫苗有效性评价奠定基础.方法 测定感染布氏菌株动物的脾脏细菌数,比较菌株毒力,筛选出布氏菌疫苗效力评价用布氏菌株.通过小感染剂量的测定为效力评价的感染剂量提供基础数据.检测动物体内布氏菌增殖情况,确定动物解剖时间.将不同剂量的布氏菌活疫苗免疫小鼠,4周后用布氏菌强毒菌株皮下感染,感染4周后将动物解剖测定脾脏细菌数,分析疫苗保护效果.结果 筛选出布氏菌疫苗效力评价感染用布氏菌株,该菌株的皮下小感染剂量为300 CFU,感染后4周动物脾脏细菌数达到较高且稳定水平.布氏菌活疫苗免疫小鼠后能产生较好的保护效果,免疫剂量与保护力水平之间有较好的量效关系.结论 建立了布氏菌疫苗效力评价小鼠模型,为新型布氏菌疫苗的研制奠定了基础.
作者：魏东；李天柱；陈成；尤明强；王国治 刊期： 2018年第05期
目的 从分子生物学水平探讨杜仲中松脂醇二葡萄糖苷(PDG)对光老化人真皮成纤维细胞(HDF)ER/TGF-β1/Smads信号通路的调控机制.方法 建立以长波紫外线模型损伤HDF细胞.给予不同浓度PDG和通路阻断剂进行干预,用MTT检测细胞增殖率,Real time-PCR和Western blot法检测各组细胞内含有的信号转化生长因子(TGF-β1)、转导分子(Smad3)、I型胶原(COL1A1)对应mRNA和蛋白的表达.结果 与空白组比较,模型组增殖率及TGF-β1、Smad3、COL1A1 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组增殖率和TGF-β1、Smad3、COL1A1 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01);与PDG高浓度组比较,TGF-β1、Smad3、ER三个阻断剂组相对应的TGF-β1、Smad3和COL1A1相应mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01).结论 PDG能增加HDF细胞TGF-β1、Smad3、COL1A1对应mRNA和蛋白表达,对光老化HDF细胞胶原合成有促进作用;但这种作用能被TGF-β1、Smad3和ER阻断剂所抑制,PDG促进胶原合成的作用机制可能与ER/TGF-β1/Smads信号通路有关.
作者：高海娜；蔡周权；林莺；文霞；孙慧峰 刊期： 2018年第05期
石蒜碱(lycorine)是存在于石蒜科植物石蒜鳞茎内含量较高的异喹啉类生物碱,分子式为 C16H17NO4,相对分子量为 287.313,无色棱柱状晶体,熔点 275 ～ 280℃,有右旋光性.近年来国内外报道了很多石蒜碱衍生物(表 1),如盐酸石蒜碱(lycorine hydrochloride)、二氢石蒜碱(dihydrolycorine)、伪石蒜碱(pseudolycorine)等.随着研究的深入,石蒜碱及其衍生物的药理作用研究有了很大进展,本文对此进行综述.
作者：果婷婷；王辉强；李玉环；于莲 刊期： 2018年第05期
细菌外膜囊泡(outer membrane vesicles,OMVs)是由革兰阴性细菌以出芽的方式分离出来的直径为 20 ～ 300 nm的球形双层纳米结构.细菌产生的膜囊泡保留了源细菌的理化特性,但不能再生和复制.
作者：刘畅；李桂玲 刊期： 2018年第05期
乌苯美司(ubenimex)商品名为百士欣(Bestatin),是细胞表面氨基肽酶 N/CD13(aminopeptidase N/CD13, APN/CD13)、氨基肽酶 B的抑制剂,主要通过调节机体免疫功能及诱导肿瘤细胞凋亡等发挥抗肿瘤作用.本文就乌苯美司来源及特点、药代动力学特性、抗肿瘤作用及联合用药研究进展作一简要综述.
作者：倪隽；陈淑珍 刊期： 2018年第05期
癌症是世界范围内仍然没有得到很好解决的公共卫生问题[1].鼻咽癌(nasal pharyngeal cancer,NPC)是我国华南地区高发的恶性肿瘤,早期鼻咽癌治疗后的 5年生存率高达 95％以上[2-3],但由于鼻咽癌发生部位隐蔽,早期症状不易发现,诊断时绝大多数都已发展为中晚期,尽管采用先进的适形调强放射治疗加同步化疗使其总体 5年生存率显著改善[4],但仍然有约 15％以上的患者发生远处转移或局部复发[5].而且,传统化疗多为静脉给药,全身分布,对肿瘤缺乏精确的靶向性,易产生耐药性,多次大剂量给药对机体会产生较大的毒副作用.因此,改进传统化疗药物的理化性状、开发新的靶向药物或靶向递药系统成为目前肿瘤治疗研究的热点.纳米材料以其界面效应、量子尺寸效应等特殊的优势弥补了传统化疗药物的某些不足,一些纳米载体(如脂质体、白蛋白纳米粒以及聚合物胶束等)已被批准用于癌症治疗[6-7].目前,针对 HIV相关卡波西肉瘤、HER2阳性乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌等恶性肿瘤的纳米载体药物已应用于临床治疗.针对鼻咽癌的纳米药物研究已在国内外广泛开展,本文就其优势、种类、作用方式、作用机制综述如下.
作者：钟颖；黎权明；苗湘琬；谢慧芬；谢民强 刊期： 2018年第05期
近年来,随着传染病防治、科研及医药生产活动的规模不断扩大,病原微生物的使用机会也大大增加.病原微生物菌(毒)种是国家重要的生物资源,其保藏具有特殊要求.菌种和病毒都需要保持稳定性状和基因,以便于日后的科学研究[1-2].对于公共卫生事业来说,生物安全是重中之重,出于对生物安全方面的考虑,应该对实验室人员、菌(毒)种保藏、操作规范、个人防护、消毒设施、销毁等方面严格把控,国家出台的相关法律法规也明确规定菌(毒)种保藏必须合乎规范,避免生物武器、生物恐怖和重大传染病暴发流行等生物安全问题的发生.但目前,国内大量病原微生物有无序使用和保存的情况,存在巨大的实验室生物安全隐患,因此,病原微生物的规范保藏迫在眉睫.当前,物联网技术飞速发展,各行各业都已进入信息化时代[3-6],但我国大部分实验室仍采用传统人工方式来管理和保藏病原微生物,不仅效率低下,且耗费大量人力,资源浪费的同时准确度也得不到保证.菌(毒)种资源数量庞大,而人工管理方法误差大,样本信息容易混乱,远达不到规定的要求.即使是在实验室内保存的菌(毒)种,也因年代久远或样本杂乱无章,实验时需要耗费大量时间和精力才能找出所需样本.另外,纸质记录信息是有限的,且实验室人员流动性较大,很多资源信息就在流动中丢失,影响了菌(毒)种的信息完整性.人工保存管理菌(毒)种时,没有监控和报警设备,不仅仅是微生物的活性得不到保障,且一旦外泄,生物安全也无法保证,这就需要智能技术和规范的方法来统一管理.在此背景下,我们依靠无线射频识别(RFID)技术探索出了一套菌(毒)种智能定位信息管理系统,以期建立一套标准化、规范化的数据库平台,为菌(毒)种的规范管理和科研开发奠定基础.
作者：乔乔；杨华富；傅明慧 刊期： 2018年第05期
病理档案包括组织、细胞、体液样本,石蜡蜡块,各种类型的切片和纸质档案、数字化档案等,也是近年来陆续建立的疾病生物样本库的重要组成部分[1-2].病理档案资料的完整、安全保存对防止医疗差错、保障医疗安全、提升病理诊断质量、指导制定患者后续治疗方案及医学研究均具有重要的价值.随着《病理科建设与管理指南》等管理文件的发布和临床病理学科建设的日益规范,对于病理档案的长期保存也提出了一系列具体要求(如保存时间至少为 15年等).但是,随着医院病理科规模的扩张、运营时间的延长、检测项目的增加,病理科每天均会产生大量的病理实物档案资料,仅以石蜡切片和石蜡蜡块为例,有的科室每个工作日生产的石蜡切片和石蜡蜡块均在千张(个)以上.因此,病理档案的长期保存已成为几乎所有病理科和医院的沉重负担,并为此付出巨大的场地、资金、能源、人力成本[3].而与此同时,伴随着多中心大样本研究项目的广泛开展,病理档案已成为众多研究者广泛关注且有待深度挖掘的生物样本宝库和资源.因此,重新梳理病理档案的保存流程,降低保存成本,在确保病理档案的医疗价值的同时,深度挖掘病理档案的生物样本库属性及其研究价值,将具有重要的科学价值和社会意义[4].该文拟就病理档案保存的相关问题进行讨论,以期为制定更为合理的病理档案保存和应用规范提供参考.
作者：杨军 刊期： 2018年第05期
微生物发酵主要分为固态和液态两种模式,在实验室和工业生产中,固态和液态发酵培养均具有广泛的应用.在科研单位微生物实验室中,琼脂平板(或培养皿)和摇瓶分别是微生物固态与液态发酵培养的常用器皿;琼脂培养基平板不仅可以用于制备液态发酵的起始种子或孢子悬液,更可以为科研单位微生物实验室提供一定数量的发酵培养物,用于分离纯化或积累目标样品化合物.
作者：王静；孙桂芝；江冰娅；李书芬；黎林丽；胡笑文；胡晓敏；左利杰；武临专 刊期： 2018年第05期
