张军明；任艳华；郑膺；张婵；刘芬；余正平；雷亚宁
近年,有关S100β的研究非常活跃.本文研究了急性颅脑外伤手术患者血清S100β的变化,并在手术后6个月时对患者进行简易智能量表(mini-mental state examination, MMSE)评分,以探讨其相关性.
作者：甘国胜；祝松；陈利民；陈敏；林俊明 刊期： 2007年第02期
随着肝移植手术的开展,术后长期存活病例不断增多,而各种原因致移植肝失功能需再次肝移植的患者也在增加.我们回顾性分析了第二军医大学长征医院自1996年开展肝移植手术以来的20例再次肝移植患者的麻醉资料,总结再次肝移植的麻醉管理经验,供临床参考.
作者：徐海涛；石学银；袁红斌；叶军青；何星颖；蒋京京 刊期： 2007年第02期
目的 参照2005年NASH临床研究网络病理学会(NASH-CRN)评估方案,研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的病理特点.方法 对130例NAFLD的肝穿组织进行常规HE、网状纤维和Masson三色染色,观察分析NAFLD的病理改变.采用免疫组织化学染色排除其他非NAFLD肝病.结果 脂肪变性、肝细胞气球样变、小叶内炎症和纤维化发生普遍,脂肪变性以大泡型为主,肝腺泡3带为著,肝细胞气球样变发生率为94.6%,小叶内炎症多为轻度炎症.统计学分析示,脂肪变性与小叶内炎症、纤维化、肝细胞气球样变程度间呈正相关(r值分别为0.587、0.374、0.488,P均＜0.01).随脂肪变性、小叶内炎症、纤维化程度的加重,微肉芽肿、脂性肉芽肿和凋亡小体出现频率呈增加趋势.随气球样变程度加重,巨大线粒体和糖原核发生率明显增高(P均＜0.01).结论 在NAFLD的评估中,除脂肪变性、肝细胞气球样变、小叶内炎症和纤维化外,汇管区炎症也应予以重视.微肉芽肿、脂性肉芽肿和凋亡小体是否可作为NAFLD病情进展的组织学指标尚需进一步验证.
作者：周光德；赵景民；丁效蕙；潘登；孙艳玲；杨建法；赵雨来 刊期： 2007年第02期
肝病患者发生肺曲霉菌病的报道较少,一旦发生则预后不良,特别是在重型肝炎患者中,病死率很高.为提高对本病的认识及救治成功率,现对解放军第302医院2000～2005年严重肝病合并肺曲霉菌病的病例进行临床分析.
作者：王晓峰；程勇前；王红旗；赵平；周华 刊期： 2007年第02期
目的 探讨荷人胃癌皮下移植瘤及细胞免疫功能重建的裸鼠模型构建方法及其特征.方法 10只裸鼠随机分为2组,实验组(n=5)腹腔注射人外周血T淋巴细胞(HuPBTL)并皮下接种人胃癌细胞,对照组(n=5)仅皮下接种人胃癌细胞.观察肿瘤潜伏期、成瘤率和肿瘤体积,流式细胞仪检测裸鼠外周血中人T细胞,MTT法检测实验组鼠脾T细胞体外杀伤作用.皮下瘤行病理组织学检查.结果 两组肿瘤潜伏期无统计学差异(P＞0.05),成瘤率均为100%.第3周末,两组肿瘤体积相比无统计学差异(P＞0.05);实验组鼠外周血中人CD3+、CD4+和CD8+T细胞分别为46.86%±9.14%、31.68%±10.17%和17.91%±1.38%,而对照组鼠外周血中则无人T细胞;当效靶比为20∶1和40∶1时,实验组鼠脾T细胞的特异性杀伤率分别为15.37%±1.58%和19.86%±2.86%,且随着效靶比增高而增强(P＜0.05).两组荷瘤鼠均无肝、肺转移;胃癌细胞保持亲代细胞的形态学特征.结论 采用腹腔注射HuPBTL和皮下接种人胃癌细胞的方法成功构建了人胃癌-HuPBTL-裸鼠模型,能模拟具有一定细胞免疫功能的胃癌患者的荷瘤状态.
作者：李保东；付泽娴；陈小贺；孟繁杰；薛平；蔡建辉 刊期： 2007年第02期
肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)是由69kD的α链及34kD的β链组成的异二聚体蛋白[1-2],因初发现其活性与肝细胞再生有关,故名肝细胞生长因子,后研究发现HGF是一种可以作用于多种组织与细胞的生长因子,具有促进细胞增殖、细胞运动、形态发生、血管新生、抑制凋亡等作用.HGF的主要来源有成纤维细胞、平滑肌细胞、肥大细胞、巨噬细胞和白细胞等[3].IL-1、PDGF、bFGF和G-CSF等可诱导HGF的表达,TGF和糖皮质激素等则抑制其表达[3].
作者：胡舜英；王立生；陈国伟 刊期： 2007年第02期
微透析(microdialysis)技术是一种在不破坏生物体内环境的前提下,对生物体细胞间液的内源性或外源性物质进行连续取样和分析的微量生物化学检测技术[1-2].由于微透析技术具有对组织损伤小,可以大程度地获取代表机体生理或病理生理情况下的样本,真实地反应取样点目标化合物的浓度,而且能够应用于心[3]、肝[4]、肺[5]甚至是气道[6]等几乎所有的器官和组织,可多个位点同时取样及进行不间断的实时监测,与诸如高效液相色谱(HPLC)和高效毛细管电泳(HPCE)均可直接联机在线分析[7]等优点,现已广泛应用于自然科学的众多基础研究领域,尤其是在药物代谢动力学方面为常用.
作者：安潇；肖湘生 刊期： 2007年第02期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞的可能性.方法 将SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体大鼠体内.75只受体大鼠随机分为5组(n＝15):肺损伤组、MSCs治疗组、MSCs对照组、单个核细胞对照组和正常对照组.分别于MSCs、单个核细胞注入受体大鼠体内1、2、4周后观察肺组织结构变化,检测肺组织中植入细胞情况及广谱细胞角蛋白的表达水平.结果 MSCs治疗组大鼠肺组织在各时间点均有少量植入的细胞,并且部分植入的细胞表达广谱细胞角蛋白.MSCs植入后2周大鼠细支气管壁有少量植入的细胞同时表达广谱细胞角蛋白.其余各组未发现植入细胞的标记.结论 MSCs可在损伤的大鼠肺组织中分化为肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞.
作者：赵峰；李圣青；张宇飞；陈卫强；侯志峰；吴昌归；戚好文 刊期： 2007年第02期
目的 探讨乌司他丁联合胸腺肽α1对脓毒症、多器官功能衰竭(MODS)免疫状态的影响,分析其在免疫调理中的合理性.方法 46例脓毒症、18例MODS患者均随机分为对照组和治疗组.对照组给予SSC经典治疗,治疗组则给予乌司他丁联合胸腺肽α1免疫调理疗法,进入程序时及治疗结束时采用ELISA方法检测IL-6、IL-10含量.结果 脓毒症治疗组IL-6、IL-10明显下降,与脓毒症对照组相比差异显著(P＜0.05),进一步将仅给予SSC经典治疗的对照组分为存活亚组和死亡亚组,其中存活亚组IL-6、IL-10在后期均下降,与死亡亚组相比差异显著(P＜0.05).MODS治疗及对照组治疗前后IL-6、IL-10差异无显著性(P＞0.05).结论 乌司他丁联合胸腺肽α1能够均衡下降脓毒症炎症/抗炎介质的水平,调整脓毒症免疫状态,但对MODS患者的免疫调理作用有待进一步观察.
作者：苏磊；周殿元；唐柚青；文强；白涛；孟繁甦；唐丽群；段鹏凯 刊期： 2007年第02期
目的 探讨低钾右旋糖酐液(LPD)中加入抑肽酶对供体肺功能的保护作用及供体肺细胞凋亡的影响.方法 24只健康纯种新西兰大白兔随机分为两组,A组用LPD液(70ml/kg)经肺动脉灌注供体肺,B组用含150kU/ml抑肽酶的LPD液(70ml/kg)灌注供体肺,4℃保存16h,应用肺移植动物模型模拟肺移植过程1h.循环灌注期间每隔10min记录肺动脉压(PaP)、气道峰压(PawP),并检测供体肺血气标本(PaO2、PaCO2),计算肺泡-动脉血氧差(A-aDO2)、肺顺应性(CL).光镜、电镜观察各组供体肺移植前后的组织变化;TUNEL-Fluorescein及PI双染色法定量观察各组供体肺移植前后细胞凋亡变化,分析细胞凋亡与供体肺功能的关系.结果 再灌注早期(前20min)两组供体肺氧合能力无差异,再灌注30min后各时段,A组PaO2低于B组(54.42～118.87mmHg vs 112.33～183.73mmHg,P＜0.01);B组供体肺在整个灌注过程中能保持良好的氧合能力(PaO2≥112.33mmHg).再灌注末期,A组PaCO2及含水量均明显高于B组(50.96mmHg vs 41.42mmHg,P＜0.01;88.90% vs 82.48%,P＜0.001),B组供体肺的PaP、PawP、CL则明显优于A组.光镜及电镜观察见A组供体肺细胞结构破坏,间质水肿,而B组则基本保持正常结构.两组供体肺移植后均出现明显的细胞凋亡,且A组凋亡指数明显高于B组(24.67% vs 15.50%,P＜0.01).供体肺凋亡指数与PaO2、CL呈负相关(r＝-0.895,r＝-0.683,P＜0.001).结论 LPD液中加入抑肽酶可提高移植术后供体肺功能,抑制移植后早期供体肺细胞的凋亡;细胞凋亡可能是供体肺移植术后早期肺功能减低的原因之一.
作者：陈兴澎；吴清玉；潘广玉；杨研；王东；刘小燕；唐隶 刊期： 2007年第02期
目的 建立与爆炸性武器冲击波原发效应致伤机制近似的犬颅脑爆炸伤模型.方法 将1g TNT当量的球形爆炸源距致伤犬的右颞顶部9mm、13mm处引爆,记录致伤前后生理指标的变化、致伤后存活时间,观察致伤犬的动作改变及脑组织病理变化.结果 动物伤后均出现呼吸暂停、心率减慢、平均动脉压降低等脑干抑制现象.所有动物存活均超过6h.硬膜下血肿和蛛膜下腔出血较为明显.两致伤组颅脑伤情完全不同.结论 本实验所建立的动物模型可模拟冲击波原发效应,且重复性和稳定性好,安全易操作,适用于颅脑爆炸伤的实验研究.
作者：高波；贺世明；王占江；朱少君；于嘉；张广林；高国栋 刊期： 2007年第02期
目的 制备胃癌相关蛋白GCRG224的多克隆抗体,为进一步深入研究其生物学功能及其在胃癌发生发展中的作用奠定基础.方法 在大肠杆菌中表达Thioredoxin/GCRG224融合蛋白,并以所获蛋白免疫新西兰兔,制备抗GCRG224的多克隆抗体.分别用ELISA、Western blot法鉴定抗体的效价及特异性.结果 在大肠杆菌中高效表达出相对分子量约为16.8kD的Thioredoxin/GCRG224融合蛋白,经凝胶回收法得到纯度近100%的蛋白产品.制备了抗GCRG224多克隆抗体.ELISA法检测抗体的效价达到1∶256 000,Western blot证实该抗体可与原核表达的GCRG224蛋白特异性结合.结论 成功地制备了胃癌相关蛋白GCRG224多克隆抗体.
作者：伍银桥；王刚石；王孟薇；吴本俨；尤纬缔；王卫华 刊期： 2007年第02期
目的 检测乙型肝炎病毒(HBV)全基因组转染对人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞中microRNA(miRNA)表达的影响,为进一步探讨肝细胞中HBV复制的分子生物学机制提供平台.方法 分别提取HepG2.2.15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞,实验组)和其亲本HepG2细胞(对照组)的总RNA并分离miRNA,采用含509条探针的哺乳动物miRNA表达谱芯片对两组之间差异表达的miRNA进行分析.用SAM软件针对差异miRNA筛选的标准为在两组之间荧光强度差异4倍以上,差异miRNA的整体假阳性率为0.选择其中2个miRNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法对芯片结果进行验证.结果 HepG2.2.15细胞与HepG2细胞间差异表达的miRNA共27个(占5.3%),其中7个表达上调,20个表达下调.miR-181d和miR-15a的实时荧光定量RT-PCR验证结果与芯片表达结果基本一致.结论 肝细胞中存在着与HBV复制相关的miRNA,这些上调和下调表达的miRNAs可能参与了HBV在肝细胞中的复制.
作者：刘妍；张亮；戴久增；王琳；赵建晴；徐东平 刊期： 2007年第02期
目的 人工合成A型肉毒毒素Hc段基因,并在大肠杆菌中进行高效表达.方法 人工合成Hc段基因,选择宿主细胞偏爱的同义密码子替换其原有稀有密码子,使AT含量降至57.3%,然后将其克隆入pQE-60表达载体,在大肠杆菌中进行可溶性表达.结果 可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的11.5%左右,表达产物可被A型肉毒毒素马血清抗毒素识别.结论 成功地表达并鉴定了A型肉毒毒素Hc蛋白,为进一步进行A型肉毒毒素的疫苗或抗体研究奠定了基础.
作者：张效云；刘进军；董明纲；徐志伟 刊期： 2007年第02期
目的 构建人survivin特异性siRNA,探讨其对骨肉瘤细胞MG63细胞周期及survivin表达的影响.方法 构建survivin特异性的RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系,以Western blot法检测survivin蛋白表达变化,透射电镜、Hoechst染色检测细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功构建了survivin基因siRNA真核表达载体PsiS,获得了稳定转染的细胞系.与正常MG63细胞、阴性对照细胞相比,MG63/PsiS细胞中survivin蛋白表达减少,部分细胞核致密浓染或碎块状浓染,凋亡率增加了7倍,而G2/M期细胞减少近50%.结论 特异性siRNA能够明显抑制survivin基因在MG63细胞中的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
作者：杨彤涛；李存孝；黄立军；张志培；范清宇；马保安；周勇 刊期： 2007年第02期
目的 构建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神经氨酸酶(HN)基因的真核表达载体并进行产物表达.方法 采用RT-PCR法从病毒RNA中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体pcDNA3.1-HN,脂质体法转染CHO-K1,G418筛选稳定表达克隆.用Western blot、免疫荧光法检测HN蛋白的表达.结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实真核表达载体pcDNA3.1-HN构建正确.Western blot和免疫荧光分析表明HN基因在CHO-K1中成功表达.结论 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功克隆,所构建的真核表达载体pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1细胞中稳定表达.
作者：张华；边惠洁；尉丁；李亚琳；杨滨；陈志南 刊期： 2007年第02期
目的 探讨艾司洛尔对心肺复苏后大鼠心肌线粒体ATP酶活性的影响.方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、肾上腺素(AD)组、肾上腺素+艾司洛尔(AD+Es)组,每组22只,制备窒息致大鼠心跳骤停模型,窒息10min后行心肺复苏,测定复苏后30、120、180min心肌线粒体ATP酶活性.复苏期间监测心电图、心率、体温、平均动脉压.结果 与Sham组相比,AD组复苏后心率加快(P＜0.01),AD、AD+Es组复苏后心肌线粒体ATP酶活性降低(P＜0.01);与AD组相比,AD+Es组ATP酶活性升高(P＜0.05或0.01).结论 艾司洛尔有保护复苏后大鼠心肌线粒体ATP酶活性的作用.
作者：陈延英；孟凌新；贾有海；赵广翊；崔健君 刊期： 2007年第02期
目的 探讨术前区域性动脉灌注化疗对晚期乳腺癌细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法 将56例晚期乳腺癌患者随机分为治疗组(术前动脉灌注化疗)和对照组(未行术前化疗),各28例.利用TUNEL法检测两组的癌细胞凋亡情况,运用免疫组化方法检测两组bcl-2、bax基因的表达状况.结果 乳腺癌细胞凋亡指数(AI)治疗组为7.28%±2.68%,对照组为4.21%±1.87%;bcl-2基因的表达,治疗组为0.68±0.06,对照组为2.24±0.36;bax基因的表达,治疗组为0.72±0.06,对照组为0.38±0.04.上述指标两组间比较均有显著性差异(P＜0.05).结论 术前区域性动脉灌注化疗能诱导肿瘤细胞凋亡,而术前化疗后肿瘤细胞AI上升与化疗的疗效有关;术前化疗可影响乳腺癌细胞凋亡相关基因的表达,bcl-2/bax在诱导细胞凋亡中起重要作用,可作为预测化疗效果的指标.
作者：何建苗；蒲永东；马小军；杨波；董立国；曹志宇；刘卫平 刊期： 2007年第02期
目的 建立简便实用的类风湿性关节炎大鼠模型.方法 利用小牛软骨Ⅱ型胶原加福氏完全佐剂充分乳化后作为造模剂,对Wistar大鼠足底、尾根部、背部多点皮内注射,7天后加强注射一次.结果 二次注射后2周,大鼠四肢严重肿胀,踝关节直径、脚爪体积增大,血清TNF-α水平明显升高,胫骨远端骨小梁吸收破坏,可累及骨皮质,关节软骨可见坏死脱落、纤维化,关节软骨可见坏死脱落、纤维化,关节腔狭窄,动物造模全部成功.结论 Ⅱ型胶原加完全费氏佐剂是一种良好的类风湿性关节炎大鼠模型造模剂.
作者：熊国林；黄海潇；谢玲；余祖胤；王欣茹；刘耀文；邢爽；赵振虎；董波；罗庆良 刊期： 2007年第02期
糠秕马拉色菌毛囊炎临床十分常见,尤其年轻军人发病率较高.2002年5月～2005年11月于南京军区福州总医院皮肤科门诊就诊的年轻男性军人中,疑似糠秕马拉色菌毛囊炎者3 180例,刮皮屑直接镜检后初步诊断的共2 842例,现将其检查及治疗经过报道如下.
作者：刘向农；陈向齐；陈胜平 刊期： 2007年第02期
解放军医学杂志
主管:中国人民解放军总后勤部卫生部
主办：人民军医出版社
