苏磊;周殿元;唐柚青;文强;白涛;孟繁甦;唐丽群;段鹏凯
目的 探讨乌司他丁联合胸腺肽α1对脓毒症、多器官功能衰竭(MODS)免疫状态的影响,分析其在免疫调理中的合理性.方法 46例脓毒症、18例MODS患者均随机分为对照组和治疗组.对照组给予SSC经典治疗,治疗组则给予乌司他丁联合胸腺肽α1免疫调理疗法,进入程序时及治疗结束时采用ELISA方法检测IL-6、IL-10含量.结果 脓毒症治疗组IL-6、IL-10明显下降,与脓毒症对照组相比差异显著(P<0.05),进一步将仅给予SSC经典治疗的对照组分为存活亚组和死亡亚组,其中存活亚组IL-6、IL-10在后期均下降,与死亡亚组相比差异显著(P<0.05).MODS治疗及对照组治疗前后IL-6、IL-10差异无显著性(P>0.05).结论 乌司他丁联合胸腺肽α1能够均衡下降脓毒症炎症/抗炎介质的水平,调整脓毒症免疫状态,但对MODS患者的免疫调理作用有待进一步观察.
作者:苏磊;周殿元;唐柚青;文强;白涛;孟繁甦;唐丽群;段鹏凯 刊期: 2007年第02期
目的 分析非糖尿病人群尿白蛋白与肌酐比值(ACR)的测定结果之间的性别差异,为中国制定诊断微量白蛋白尿的性别特异性标准提供参考数据.方法 对北京石景山地区中老年人群进行流行病学调查,无糖尿病者行口服75g葡萄糖耐量试验(OGTT),同时进行问卷调查并对体检的1 580例非糖尿病完整资料进行统计,分析ACR的性别差异及原因.结果 非糖尿病人群中,男性尿肌酐浓度显著高于女性(8.1 vs 5.5mmol/L,P<0.05);男性ACR显著低于女性(2.6 vs 3.1mg/g,P<0.05).正常血糖(NGT)人群、糖调节受损(IGR)人群及合并后的非糖尿病人群中男性ACR的95%正常上限均为23mg/g,女性ACR的95%正常上限分别为27、32和28mg/g.结论 过夜晨尿(次尿)测定ACR诊断不同性别微量白蛋白尿确实存在差异,不同性别应采用不同的诊断标准.
作者:卢艳慧;陆菊明;王淑玉;李春霖;刘力生;郑润平;田慧;王先令;杨丽娟;张育青;潘长玉 刊期: 2007年第02期
目的 观察不同的腹部外科手术操作对大鼠肠道运动功能以及肠神经系统内乙酰胆碱酯酶(AchE)神经元和一氧化氮合酶(NOS)神经元的影响,探讨腹部外科手术对肠道运动功能影响的神经机制.方法 48只SD大鼠随机分为单纯开腹组、肠道按摩组、肠道手术组和正常对照组(n=12),各组术后灌服炭末,测定小肠炭末推进率,同时取各组相同部位的小肠和大肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色观察AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况.结果 炭末推进率(%)肠道手术组、肠道按摩组低于单纯开腹组和正常对照组(P<0.01),肠道手术组低于肠道按摩组(P<0.05),单纯开腹组与对照组比较降低不明显(P>0.05);与正常对照组比较,肠道手术组、肠道按摩组的小肠和大肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量(个/200倍视野)减少(P<0.01),阳性表达减弱,NOS阳性神经元数量增多(P<0.01),阳性表达增强,节间束纤维粗大,而单纯开腹组的变化不明显;与肠道按摩组比较,肠道手术组小肠和大肠肌间神经丛内的NOS阳性神经元数量较多(P<0.01),胞体大而染色深,节间束纤维较粗大,而AchE阳性神经元数量和染色的差异不明显.结论 腹部外科手术在一定程度上会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是腹部外科手术后发生肠道运动功能障碍的神经机制之一.
作者:张军明;任艳华;郑膺;张婵;刘芬;余正平;雷亚宁 刊期: 2007年第02期
解放军第251医院自2002年8月以来采用颅骨穿刺碎吸术引流并配合注入尿激酶治疗各种类型颅内血肿患者50例,手术收到较好效果,现报道如下.
作者:张海东;张奇芳;袁进国 刊期: 2007年第02期
目的 探讨人类成纤维细胞生长因子受体1的Ⅲb亚型(FGFR1-Ⅲb)在胰腺癌细胞中的作用. 方法 以脂质体法将人类全长FGFR1-Ⅲb表达质粒pSVK4/FGFR1-Ⅲb稳定转染入PANC-1胰腺癌细胞,通过MTT试验、软琼脂试验、细胞迁移试验、单个细胞运动试验和裸鼠移植瘤试验检测FGFR1-Ⅲb在转染的胰腺癌细胞中的功能. 结果 转染FGFR1-Ⅲb受体的胰腺癌细胞,在细胞生长、细胞迁移、细胞运动、移植瘤形成及生长方面均受抑,且移植瘤Ki-67表达减低、肿瘤组织中坏死灶减少. 结论 人类FGFR1-Ⅲb受体为胰腺癌细胞的功能性受体,对胰腺癌细胞具有抑制作用.
作者:刘占兵;杨尹默;乔岐禄;赵建勋;黄莚庭;Marko Kornmann 刊期: 2007年第02期
目的 探讨荷人胃癌皮下移植瘤及细胞免疫功能重建的裸鼠模型构建方法及其特征.方法 10只裸鼠随机分为2组,实验组(n=5)腹腔注射人外周血T淋巴细胞(HuPBTL)并皮下接种人胃癌细胞,对照组(n=5)仅皮下接种人胃癌细胞.观察肿瘤潜伏期、成瘤率和肿瘤体积,流式细胞仪检测裸鼠外周血中人T细胞,MTT法检测实验组鼠脾T细胞体外杀伤作用.皮下瘤行病理组织学检查.结果 两组肿瘤潜伏期无统计学差异(P>0.05),成瘤率均为100%.第3周末,两组肿瘤体积相比无统计学差异(P>0.05);实验组鼠外周血中人CD3+、CD4+和CD8+T细胞分别为46.86%±9.14%、31.68%±10.17%和17.91%±1.38%,而对照组鼠外周血中则无人T细胞;当效靶比为20∶1和40∶1时,实验组鼠脾T细胞的特异性杀伤率分别为15.37%±1.58%和19.86%±2.86%,且随着效靶比增高而增强(P<0.05).两组荷瘤鼠均无肝、肺转移;胃癌细胞保持亲代细胞的形态学特征.结论 采用腹腔注射HuPBTL和皮下接种人胃癌细胞的方法成功构建了人胃癌-HuPBTL-裸鼠模型,能模拟具有一定细胞免疫功能的胃癌患者的荷瘤状态.
作者:李保东;付泽娴;陈小贺;孟繁杰;薛平;蔡建辉 刊期: 2007年第02期
目的 构建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神经氨酸酶(HN)基因的真核表达载体并进行产物表达.方法 采用RT-PCR法从病毒RNA中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体pcDNA3.1-HN,脂质体法转染CHO-K1,G418筛选稳定表达克隆.用Western blot、免疫荧光法检测HN蛋白的表达.结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实真核表达载体pcDNA3.1-HN构建正确.Western blot和免疫荧光分析表明HN基因在CHO-K1中成功表达.结论 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功克隆,所构建的真核表达载体pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1细胞中稳定表达.
作者:张华;边惠洁;尉丁;李亚琳;杨滨;陈志南 刊期: 2007年第02期
目的 参照2005年NASH临床研究网络病理学会(NASH-CRN)评估方案,研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的病理特点.方法 对130例NAFLD的肝穿组织进行常规HE、网状纤维和Masson三色染色,观察分析NAFLD的病理改变.采用免疫组织化学染色排除其他非NAFLD肝病.结果 脂肪变性、肝细胞气球样变、小叶内炎症和纤维化发生普遍,脂肪变性以大泡型为主,肝腺泡3带为著,肝细胞气球样变发生率为94.6%,小叶内炎症多为轻度炎症.统计学分析示,脂肪变性与小叶内炎症、纤维化、肝细胞气球样变程度间呈正相关(r值分别为0.587、0.374、0.488,P均<0.01).随脂肪变性、小叶内炎症、纤维化程度的加重,微肉芽肿、脂性肉芽肿和凋亡小体出现频率呈增加趋势.随气球样变程度加重,巨大线粒体和糖原核发生率明显增高(P均<0.01).结论 在NAFLD的评估中,除脂肪变性、肝细胞气球样变、小叶内炎症和纤维化外,汇管区炎症也应予以重视.微肉芽肿、脂性肉芽肿和凋亡小体是否可作为NAFLD病情进展的组织学指标尚需进一步验证.
作者:周光德;赵景民;丁效蕙;潘登;孙艳玲;杨建法;赵雨来 刊期: 2007年第02期
目的 构建人survivin特异性siRNA,探讨其对骨肉瘤细胞MG63细胞周期及survivin表达的影响.方法 构建survivin特异性的RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系,以Western blot法检测survivin蛋白表达变化,透射电镜、Hoechst染色检测细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功构建了survivin基因siRNA真核表达载体PsiS,获得了稳定转染的细胞系.与正常MG63细胞、阴性对照细胞相比,MG63/PsiS细胞中survivin蛋白表达减少,部分细胞核致密浓染或碎块状浓染,凋亡率增加了7倍,而G2/M期细胞减少近50%.结论 特异性siRNA能够明显抑制survivin基因在MG63细胞中的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
作者:杨彤涛;李存孝;黄立军;张志培;范清宇;马保安;周勇 刊期: 2007年第02期
目的 探讨术前区域性动脉灌注化疗对晚期乳腺癌细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法 将56例晚期乳腺癌患者随机分为治疗组(术前动脉灌注化疗)和对照组(未行术前化疗),各28例.利用TUNEL法检测两组的癌细胞凋亡情况,运用免疫组化方法检测两组bcl-2、bax基因的表达状况.结果 乳腺癌细胞凋亡指数(AI)治疗组为7.28%±2.68%,对照组为4.21%±1.87%;bcl-2基因的表达,治疗组为0.68±0.06,对照组为2.24±0.36;bax基因的表达,治疗组为0.72±0.06,对照组为0.38±0.04.上述指标两组间比较均有显著性差异(P<0.05).结论 术前区域性动脉灌注化疗能诱导肿瘤细胞凋亡,而术前化疗后肿瘤细胞AI上升与化疗的疗效有关;术前化疗可影响乳腺癌细胞凋亡相关基因的表达,bcl-2/bax在诱导细胞凋亡中起重要作用,可作为预测化疗效果的指标.
作者:何建苗;蒲永东;马小军;杨波;董立国;曹志宇;刘卫平 刊期: 2007年第02期
糠秕马拉色菌毛囊炎临床十分常见,尤其年轻军人发病率较高.2002年5月~2005年11月于南京军区福州总医院皮肤科门诊就诊的年轻男性军人中,疑似糠秕马拉色菌毛囊炎者3 180例,刮皮屑直接镜检后初步诊断的共2 842例,现将其检查及治疗经过报道如下.
作者:刘向农;陈向齐;陈胜平 刊期: 2007年第02期
目的 探讨低钾右旋糖酐液(LPD)中加入抑肽酶对供体肺功能的保护作用及供体肺细胞凋亡的影响.方法 24只健康纯种新西兰大白兔随机分为两组,A组用LPD液(70ml/kg)经肺动脉灌注供体肺,B组用含150kU/ml抑肽酶的LPD液(70ml/kg)灌注供体肺,4℃保存16h,应用肺移植动物模型模拟肺移植过程1h.循环灌注期间每隔10min记录肺动脉压(PaP)、气道峰压(PawP),并检测供体肺血气标本(PaO2、PaCO2),计算肺泡-动脉血氧差(A-aDO2)、肺顺应性(CL).光镜、电镜观察各组供体肺移植前后的组织变化;TUNEL-Fluorescein及PI双染色法定量观察各组供体肺移植前后细胞凋亡变化,分析细胞凋亡与供体肺功能的关系.结果 再灌注早期(前20min)两组供体肺氧合能力无差异,再灌注30min后各时段,A组PaO2低于B组(54.42~118.87mmHg vs 112.33~183.73mmHg,P<0.01);B组供体肺在整个灌注过程中能保持良好的氧合能力(PaO2≥112.33mmHg).再灌注末期,A组PaCO2及含水量均明显高于B组(50.96mmHg vs 41.42mmHg,P<0.01;88.90% vs 82.48%,P<0.001),B组供体肺的PaP、PawP、CL则明显优于A组.光镜及电镜观察见A组供体肺细胞结构破坏,间质水肿,而B组则基本保持正常结构.两组供体肺移植后均出现明显的细胞凋亡,且A组凋亡指数明显高于B组(24.67% vs 15.50%,P<0.01).供体肺凋亡指数与PaO2、CL呈负相关(r=-0.895,r=-0.683,P<0.001).结论 LPD液中加入抑肽酶可提高移植术后供体肺功能,抑制移植后早期供体肺细胞的凋亡;细胞凋亡可能是供体肺移植术后早期肺功能减低的原因之一.
作者:陈兴澎;吴清玉;潘广玉;杨研;王东;刘小燕;唐隶 刊期: 2007年第02期
目的 检测乙型肝炎病毒(HBV)全基因组转染对人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞中microRNA(miRNA)表达的影响,为进一步探讨肝细胞中HBV复制的分子生物学机制提供平台.方法 分别提取HepG2.2.15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞,实验组)和其亲本HepG2细胞(对照组)的总RNA并分离miRNA,采用含509条探针的哺乳动物miRNA表达谱芯片对两组之间差异表达的miRNA进行分析.用SAM软件针对差异miRNA筛选的标准为在两组之间荧光强度差异4倍以上,差异miRNA的整体假阳性率为0.选择其中2个miRNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法对芯片结果进行验证.结果 HepG2.2.15细胞与HepG2细胞间差异表达的miRNA共27个(占5.3%),其中7个表达上调,20个表达下调.miR-181d和miR-15a的实时荧光定量RT-PCR验证结果与芯片表达结果基本一致.结论 肝细胞中存在着与HBV复制相关的miRNA,这些上调和下调表达的miRNAs可能参与了HBV在肝细胞中的复制.
作者:刘妍;张亮;戴久增;王琳;赵建晴;徐东平 刊期: 2007年第02期
目的 比较老年患者结肠镜检查时靶控输注和静脉推注异丙酚的麻醉作用和对呼吸循环功能的影响.方法 50例55岁以上行结肠镜检查的患者,随机分为两组.靶控组靶控输注异丙酚,目标血药浓度3μg/ml;静注组静脉推注异丙酚2mg/kg,间断追加每次20~50mg.记录患者检查过程中的血压、心率、血氧饱和度及体动反应,麻醉后患者呼唤睁眼时间和应答时间.结果 两组的检查时间和体动反应发生情况没有显著差异.靶控组异丙酚用量高于静注组,呼唤睁眼时间较静注组长(P<0.05).靶控组的低收缩压、低舒张压显著高于静注组,靶控组低血压的发生率显著低于静注组(P<0.05).结论 靶控输注异丙酚麻醉可以维持相对稳定的循环功能,比静脉推注更适合老年患者结肠镜检查的麻醉.
作者:孙雪峰;郝建华;靳恒;吕宏大 刊期: 2007年第02期
目的 研究Caspase-1激活的细胞因子在实验性重症急性胰腺炎(SAP)肾损害中的作用.方法 SD大鼠32只,随机分为正常对照组(HC组)、SAP6h组、SAP12h组、SAP18h组,每组8只.采用5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发大鼠SAP模型.通过HITACHI-7150型自动生化分析仪检测大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),ELISA法测定血清IL-1β水平,酶化学法测定肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性,半定量RT-PCR检测肾内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA的表达.结果 SAP造模后各组血清BUN、Cr和IL-1β水平显著升高,并伴有肾组织MPO显著增加,与HC组相比差异均具有统计学意义(P<0.01).HC组肾内可见Caspase-1及IL-18 mRNA表达,但IL-1β mRNA表达较弱;SAP各组肾内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA表达显著上调(P<0.01).结论 Caspase-1激活、IL-1β及IL-18的过度表达可能与SAP肾损害有关.
作者:张晓华;朱人敏;许文安;万海军;陆恒 刊期: 2007年第02期
目的 建立与爆炸性武器冲击波原发效应致伤机制近似的犬颅脑爆炸伤模型.方法 将1g TNT当量的球形爆炸源距致伤犬的右颞顶部9mm、13mm处引爆,记录致伤前后生理指标的变化、致伤后存活时间,观察致伤犬的动作改变及脑组织病理变化.结果 动物伤后均出现呼吸暂停、心率减慢、平均动脉压降低等脑干抑制现象.所有动物存活均超过6h.硬膜下血肿和蛛膜下腔出血较为明显.两致伤组颅脑伤情完全不同.结论 本实验所建立的动物模型可模拟冲击波原发效应,且重复性和稳定性好,安全易操作,适用于颅脑爆炸伤的实验研究.
作者:高波;贺世明;王占江;朱少君;于嘉;张广林;高国栋 刊期: 2007年第02期
目的 研究内源性睾酮对高脂饮食去势雄性家兔早期动脉硬化的影响.方法 将30只雄性新西兰白兔随机分为3组:单纯去势组、生理水平组[去势后肌注十一酸睾酮(TU)]和假手术组,每组各10只.制备不同睾酮水平的高脂雄兔模型,饲养12周后测定血脂及载脂蛋白水平,随后处死动物观察并测量冠状动脉及肾动脉的内膜厚度.结果 单纯去势组血清TC、TG、LDL-C、ApoB、LDL-C/HDL-C、ApoB/ApoA1明显高于假手术组和生理水平组(P<0.01),冠状动脉早期动脉硬化程度重于假手术组和生理水平组(P<0.05),而肾动脉内膜厚度与假手术组和生理水平组比较无显著性差异(P》0.05).结论 内源性睾酮水平的降低对高脂饮食雄兔冠状动脉早期动脉硬化有促进作用.
作者:王蓉;范利;李晓鹰;武强 刊期: 2007年第02期
目的 观察高效抗逆转录病毒治疗(HAART)前后人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)慢性感染儿童外周血HIV-1特异性CTL的反应特点,并分析其影响因素.方法 采集24例HIV-1 慢性感染儿童外周血并分离PBMCs,常规进行CD4 T细胞绝对数和血浆病毒载量测定.应用tetramer染色技术和ELISPOT技术分别测定HIV-1表位特异性CTL频率和IFN-γ产生细胞的数量.结果 在80%的HIV-1慢性感染儿童外周血可检测到HIV-1特异性的tetramer+ CTL细胞和HIV-1表位肽刺激的IFN-γ产生细胞.未经HAART治疗和HAART治疗失败的儿童,其体内CTL反应明显强于HAART治疗成功的儿童,并且这种CTL反应与HAART治疗时间呈明显的负相关.结论 HAART治疗后外围血HIV-1特异性CTL反应明显降低,持续的HIV-1抗原刺激是维持外周血HIV-1特异性CTL反应的主要因素.
作者:金磊;赵清霞;张政;福军亮;何云;姚金霞;王福生 刊期: 2007年第02期
微透析(microdialysis)技术是一种在不破坏生物体内环境的前提下,对生物体细胞间液的内源性或外源性物质进行连续取样和分析的微量生物化学检测技术[1-2].由于微透析技术具有对组织损伤小,可以大程度地获取代表机体生理或病理生理情况下的样本,真实地反应取样点目标化合物的浓度,而且能够应用于心[3]、肝[4]、肺[5]甚至是气道[6]等几乎所有的器官和组织,可多个位点同时取样及进行不间断的实时监测,与诸如高效液相色谱(HPLC)和高效毛细管电泳(HPCE)均可直接联机在线分析[7]等优点,现已广泛应用于自然科学的众多基础研究领域,尤其是在药物代谢动力学方面为常用.
作者:安潇;肖湘生 刊期: 2007年第02期
肝病患者发生肺曲霉菌病的报道较少,一旦发生则预后不良,特别是在重型肝炎患者中,病死率很高.为提高对本病的认识及救治成功率,现对解放军第302医院2000~2005年严重肝病合并肺曲霉菌病的病例进行临床分析.
作者:王晓峰;程勇前;王红旗;赵平;周华 刊期: 2007年第02期