赵志虎；张经余；朱晨燕；刘萱；刘传暄；马清钧
目的:建立灵敏、可靠的梭曼光学异构体气相分析方法以测定小鼠皮下染毒后脑与膈肌中游离梭曼的浓度.方法:大进样量气相色谱仪及手性毛细管柱实现梭曼4个异构体的分离;用二异丙基氟磷酸酯作内标,测定小鼠皮下染毒后脑与膈肌中游离C(±)P(-)梭曼.结果:梭曼4个异构体在确定的气相条件下得到了较好的分离; C(±)P(-)梭曼在小鼠脑匀浆中及膈肌匀浆中,0.5～10ng/2ml浓度范围的标准曲线线性关系良好 ,r>0.999.日间、日内精密度在10% 以内,提取方法的回收率为53.6%～60.2%.用气相色谱分析方法考察了小鼠皮下染毒后,脑与膈肌中游离C(±)P(-)梭曼的浓度,方法重复性好.结论:大进样量气相色谱仪及手性毛细管柱测定小鼠皮下染毒后脑与膈肌中游离C(±)P(-)梭曼的浓度,方法灵敏、可靠,重复性好.
作者：李劲彤；阮金秀；袁淑兰；张振清；宋争艳 刊期： 2001年第04期
目的:观察人工胶原膜(代号rackderm)对皮肤创伤创面的作用及其机制,为进一步将其作为人工皮肤支架提供试验依据.方法:扫描电镜观察rackderm的表面结构,应用图像分析技术测量孔径大小;制备动物背部创伤模型,分别应用人工胶原膜和油纱布包扎创面,分阶段取材后,宏观观察伤口愈合情况,并应用病理学手段,结合图像分析观察rackderm的生物学作用.结果:扫描电镜显示rackderm为多孔结构,孔径介于20～40μm,允许成纤维细胞和毛细血管的长入;宏观观察rackderm组伤口愈合时间明显早于油纱布组,组织学观察显示该组肉芽组织含量明显多于油纱布组,免疫组织化学染色显示促进伤口愈合的生长因子在该组表达明显增强.结论:rackderm初步满足作为人工皮肤支架的物理条件,作为人工敷料,对创伤后造成的皮肤缺损,具有促进伤口愈合的作用.
作者：刘杰；王德文；彭瑞云；崔雪梅；高亚兵；曹晓哲；赵梅兰；李杨 刊期： 2001年第04期
目的:提高抗肝癌靶向人肿瘤坏死因子(hScFv25-hTNFα)的稳定性和杀伤活性,构建二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体-突变体人TNFα融合基因(ds-ScFv-hTNFα),并在CHO细胞中表达.方法:常规构建ds-ScFv-hTNFα融合基因,并克隆入真核表达载体pCI(dhfr1),磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠卵巢细胞株(CHO-dhfr-),甲氨蝶呤(MTX)高压筛选高表达细胞株,免疫荧光染色和MTT法检测重组蛋白的抗体和突变体hTNFα的双重活性.结果:目的基因在CHO(dhfr-)中获得了表达,表达产物具有抗体和突变体hTNFα的双重活性,且稳定性得到大幅度提高,达到4℃放置4个月活性无明显下降. 结论:抗肝癌人源化ds-ScFv- hTNFα融合基因在CHO细胞中获得功能性表达,为进一步的临床应用研究奠定了基础.
作者：孙志伟；俞炜源；吕国华；吴涛；林建波；韩素文 刊期： 2001年第04期
蛋白的高级结构、折叠进程是由一级结构确定的,而大量数据表明,蛋白的平均荷电数(E,D,K,R的数目)、转角形成残基数(G,S,N,P)、半胱氨酸数(C)等是影响蛋白折叠进程和可溶性的主要因素.根据上述不同氨基酸对蛋白可溶性影响大小的统计规律,我们建立了一种数学模型,并设计了一种程序CalSorINS.利用该程序,可以根据蛋白的氨基酸序列预测外源蛋白在大肠杆菌中表达的可溶性指数.以分子伴侣如GroELS,DnaK,GrpE,折叠酶系如肽酰脯氨酰顺反异构酶PPI、蛋白质二硫键异构酶PDI、一些分子内伴侣如硫氧还蛋白(Trx)、甘露糖结合蛋白(MBP)、谷胱甘肽转移酶(GST)等一些可溶蛋白以及一些细胞因子,如不同白介素IL-1,IL-1β,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-11、不同集落刺激因子、干细胞因子(SCF)、肿瘤坏死因子等作为检验蛋白.结果发现,
作者：赵志虎；张经余；朱晨燕；刘萱；刘传暄；马清钧 刊期： 2001年第04期
脑胶质瘤是中枢神经系统中常见的肿瘤,也是神经外科的一个治疗难题.常规手术加放疗或化疗等措施虽然有效,但结果不能令人满意.以生物降解聚合体做载体的化疗药缓释剂型瘤内应用,具有选择性高、神经毒性低的优点,为胶质瘤的治疗开辟了新途径.
作者：关良；张纪 刊期： 2001年第04期
目的:检测胶原海绵的类型以及止血作用.方法:利用酸碱法从牛腱提取精制可溶性胶原蛋白,冻干制成海绵状止血材料;SDS-PAGE电泳分析胶原海绵的组分;动物内脏和肠系膜的止血处理方法.结果:胶原海绵由Ⅰ型胶原蛋白组成;胶原海绵不仅止血时间短、减少出血量、促进创面愈合,而且能被机体较好地吸收.结论:胶原海绵可作为创面止血修复材料应用于手术外科.
作者：武继民；苗明山；关静；张西正；李瑞欣；郭勇；叶萍 刊期： 2001年第04期
蛋白折叠即氨基酸序列究竟如何决定蛋白质的高级结构及其功能,是现代分子生物学的一个重要问题.蛋白折叠规律的揭示,对于蛋白质的结构预测、从头设计、结构与功能性基因组的研究等具有重要的意义.大肠杆菌是常用的遗传宿主,因此希望以氯霉素乙酰基转移酶CAT、β-半乳糖苷酶Lac-Z的α片段为报道基因,利用目的蛋白--CAT/α-小片段融合蛋白中目的蛋白的折叠状态与报道基因功能之间的相关性,在大肠杆菌中建立一种简便、通用、快速的遗传筛选模型,对蛋白折叠的遗传学规律问题进行研究.
作者：赵志虎；刘萱；张经余；朱晨燕；刘传暄；马清钧 刊期： 2001年第04期
目的:对铜绿假单胞菌(PA)进行随机扩增多态性DNA(RAPD)法基因分型.方法:以优化的反应体系和扩增条件对临床分离的274株PA进行用RAPD法的分型并按指纹图上DNA条带数及片段大小绘制全部基因分型图谱,同时对8例个体感染PA的连续性或跳跃性进行观察与分析.结果:274株PA共得RAPD型133种; 8例个体感染PA的RAPD指纹图有7例完全一致而1例出现跳跃性.结论:RAPD法可将PA分型133种; 个体可能存在感染两株基因型不同的PA.
作者：叶明亮；吴海寰；王全立 刊期： 2001年第04期
本文论述了抗抑郁药的发展历史和抗抑郁药的类型,并对动物抑郁模型的原理作了简要阐述.后,指出了目前临床使用的抗抑郁药存在的问题,并展望了将来抗抑郁药的发展方向.
作者：张中启 刊期： 2001年第04期
目的:研究pc-1基因表达产物在细胞内的定位.方法:采用巢式PCR技术,从原始克隆质粒中扩增出可编码蛋白分子的pc-1 cDNA片段,分别将其克隆入含EGFP和MYC标签的真核表达载体中;用脂质体介导法将其转染入人前列腺癌细胞C4-2中;通过免疫细胞化学方法和激光共聚焦显微镜技术检测pc-1表达产物在细胞内的定位.结果与结论:pc-1表达产物定位于细胞质中,为进一步研究其生理、生化功能奠定了基础.
作者：张浩；周建光；孙玉龙；李杰之；袁兰；黄翠芬 刊期： 2001年第04期
目的:讨论保留乳腺治疗乳癌的可行性.方法:对15例临床Ⅰ、Ⅱ期乳癌患者实施了乳癌区段切除加同侧腋窝淋巴结清扫术;术后辅以化疗,放疗,或抗雌激素(TAM)治疗.结果:13例获随访,2例失随访.4例患者随访10～14年,6例随访8～9年,3例随访5～7年.所有患者随访期内存活,其中1例于术后4年10个月患侧乳癌局部复发,行患乳单纯切除;术后6年7个月发现对侧腋淋巴结转移而行乳癌改良根治术,随访10年仍健在.全组患者无病生存率92.31%,复发率7.69%,治疗效果不低于乳癌改良根治术.结论:保留乳腺治疗临床Ⅰ、Ⅱ期乳癌可作为同期乳癌根治性手术的替代术式.
作者：尉承泽；江泽飞；黄焰；赵立；宋志武；陈立军；曲楠；王钢乐；王勇；宋廷惠；宋三泰 刊期： 2001年第04期
前列腺癌是危害男性健康的常见恶性肿瘤之一,临床主要采用外科手术结合放疗的治疗方法.但放射治疗的效果在患者中个体差异较大,这种差异主要与肿瘤细胞的辐射敏感性有关.快中子对肿瘤细胞杀伤有较高的RBE值,可弥补低LET射线,如X射线等治疗肿瘤的不足.前列腺癌发生在较浅表部位,是快中子治疗的适应证,但患者的正确选择仍是快中子治疗存在的主要问题之一.
作者：苑宾；薛文成；王宝勤；唐锦华 刊期： 2001年第04期
目的:构建人CD81分子胞外大环(EC2)的原核表达质粒,并研究胞外大环同HCV E2蛋白的结合性能.方法:从人外周血淋巴细胞中经RT-PCR克隆出CD81胞外大环序列,插入原核表达载体pBVIL1中,构建表达质粒pBVIL1-EC2并在大肠杆菌中表达.表达产物经纯化后用间接ELISA法测定同E2蛋白的结合能力.结果:经序列测定证明,CD81分子胞外大环正确插入载体.融合蛋白得到高效表达,以包涵体形式存在,经Q-Sepharose FF阴离子交换柱得到有效纯化.初步结果表明,重组CD81胞外大环能同原核表达的截短的HCV E2(384-661)蛋白结合.结论:本研究为进一步研究CD81同E2及HCV的相互作用和制备抗EC2单克隆抗体奠定了基础.
作者：张国君；凌世淦；宋晓国；张贺秋；陈坤；朱翠霞；修冰水 刊期： 2001年第04期
新血管生成在个体发育、创伤愈合及肿瘤生长等过程中具有十分重要的意义.多种促血管生成因子作用于血管内皮细胞,通过不同的信号转导途径调节细胞的迁移、增殖、凋亡、分化、分泌及管腔状结构的形成.本文回顾了多肽类生长因子、脂类介质,如鞘氨醇-1-磷酸酯(sphingosine-1-phosphate,SPP)、溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)以及一氧化氮分子等在血管内皮细胞中的信号转导途径及其在血管生成过程中的主要作用,并简述了电离辐射对血管生成影响的研究进展.
作者：谷庆阳；彭瑞云；王德文 刊期： 2001年第04期
介入治疗是晚期恶性肿瘤的有效治疗方法之一,在成年人中已被广泛开展运用,取得了公认的治疗效果.儿童恶性肿瘤,尤其是幼儿恶性肿瘤由于配合困难,穿刺不易掌握等原因致使介入治疗的发展滞后.笔者用Seldinger法穿刺技术,对6 例幼儿腹膜后恶性肿瘤进行动脉化疗,取得了较好疗效.
作者：王泳；胡梅芬；黄河；李迪 刊期： 2001年第04期
目的:建立简便快速的单链抗体检测方法.方法:用PCR法和DNA重组技术构建了突变型碱性磷酸酶基因和单链抗体-突变型碱性磷酸酶融合基因;利用IPTG诱导融合基因的表达,并用pNPP底物液检测碱性磷酸酶的活性,用ELISA法检测和比较了不同单链抗体的相对活性.结果:实现重组突变型碱性磷酸酶基因在大肠杆菌中的功能性表达,且活性较重组野生型碱性磷酸酶活性高30倍左右.重组单链抗体-突变型碱性磷酸酶融合基因在大肠杆菌中获得功能性表达,周质中表达产物具有双功能,并成功地利用该系统分析了不同单链抗体的相对活性.结论:该单链抗体-碱性磷酸酶检测系统能够方便地应用于单链抗体的活性分析.
作者：林建波；刘志刚；俞炜源 刊期： 2001年第04期
*目的:确定表皮细胞培养的佳条件,为进一步将其作为皮肤组织工程种子细胞奠定基础.方法:以DMEM作为基础培养液,改变培养条件后 ,计数2周内克隆形成数,检测细胞增殖能力,确定佳条件.结果:表皮细胞以分离酶分离可得到大多数基底细胞,在培养液pH值为7.0～7.2,钙离子浓度为0.4 mmol/L,血清浓度为18%, 温度为36℃, CO2浓度为6%时,表皮细胞克隆形成数高. 结论:在佳培养条件下,表皮细胞生长状态良好,为人工表皮的构建奠定了基础.
作者：刘杰；王德文；崔雪梅 刊期： 2001年第04期
丙型肝炎是一种在全球流行甚广的病毒性传染病,目前还没有特效的治疗药物和预防方法,对人类健康危害很大,因此,急需发展预防性和治疗性疫苗来控制丙型肝炎病毒的感染.T细胞介导的细胞免疫因具有清除病毒感染的重要作用,在丙型肝炎疫苗研究中受到越来越大的关注,本文就T细胞免疫的重要性及CD4+和CD8+ T细胞抗原表位的研究进展作一综述.
作者：闫瑾琦；凌世淦 刊期： 2001年第04期
目的:研究多种生长因子及其受体在急性放射性皮肤溃疡组织中的表达及对溃疡形成和发展的影响.方法:采用雌性Wistar大鼠,以手术法建立单纯皮肤伤口动物模型,以60Co γ射线局部照射法建立急性放射性皮肤溃疡动物模型.观察病变55d,采用免疫组化、原位杂交和图像分析等方法检测单纯伤口及皮肤溃疡组织中表皮生长因子(EGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),血管内皮生长因子(VEGF),血小板衍生生长因子-B(PDGF-B),转化生长因子-β1(TGF-β1)等及其受体的转录和表达水平.结果:照后14d照射野内开始出现皮肤溃疡,之后逐渐扩大、融合、加深.皮肤受照射区多种细胞,特别是溃疡床表皮细胞、成纤维细胞及血管内皮细胞中EGF,bFGF,PDGF-B,VEGF等因子及其受体的转录及表达水平均较正常皮肤组织有所增强,但与单纯伤口组比较,溃疡组织上述因子及其受体的转录及表达水平明显降低.TGF-β1 及TGF-βR1在受照射皮肤中表达增强,溃疡床的阳性细胞数量较单纯伤口中减少,强度未见减弱.结论:急性放射性皮肤溃疡组织中多种生长因子及其受体表达水平降低可能与放射性皮肤溃疡发生、发展及难愈合(不能形成有效肉芽组织)的分子机制相关.
作者：谷庆阳；曹卫红；杨志祥；杨文锋；孙向黎；高亚兵；杨红 刊期： 2001年第04期
目的:研究沙纳唑对人宫颈癌细胞(HeLa)的放射增敏作用及其与谷胱甘肽的关系.方法:用通氮法造成培养细胞乏氧模型,给药和60Co γ照射后用集落形成的方法观察HeLa细胞存活率,由单靶多击模型拟合后测出放射增敏比来评价增敏效果;用四氧嘧啶紫外分光光度法检测谷胱甘肽含量以探讨增敏作用机制.结果:SER大于1.4,谷胱甘肽含量随照射剂量和药物浓度的增加而降低,尤以乏氧时更为明显.结论:沙纳唑具有明显的放射增敏作用,沙纳唑复合60Co γ照射使肿瘤谷胱甘肽含量明显降低可能是其放射增敏作用的机制之一.
作者：周厚清；王鲁明；董敏；李伯南；邢成 刊期： 2001年第04期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
