聚合酶链反应检测HGV RNA方法的建立及应用

常锦红；王豪；杜绍财；孙焱；陶其敏

关键词：庚型肝炎病毒, 聚合酶链反应, RNA, 病毒/分析

摘要：目的:了解我国不同人群中庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)感染的状况.方法:以NS5区序列分析为基础设计引物,建立聚合酶链反应方法,并对我国几个地区、不同疾病状况的268例患者进行庚型肝炎病毒核酸的检测.结果:有输血史的健康人群、HBV和HCV感染者及慢性非乙非丙型肝炎患者的GBV-C/HGV RNA阳性率均高于自然人群,分别为13.3%,18.4%,19.8%,8.9%,其中有明确血液暴露史者的检出率达20.1%.结论:庚型肝炎在我国有广泛的流行,输血等肠道外途径为重要危险因素.

北京大学学报（医学版）杂志相关文献

大鼠脑脊液、脊髓灌流液和脊髓背部单胺类递质及其代谢产物的含量比较

目的:比较大鼠脊髓单胺类神经递质的含量和基础释放量.方法:以反相离子高效液相色谱电化学检测法对样品中的单胺类递质及其代谢产物进行定量分析.结果:(1)分别测得了大鼠脑脊液、脊髓灌流液和脊髓背部组织提取液中单胺类递质及其代谢产物的含量;(2)在大鼠脊髓背部组织中同时含有5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺,但在脊髓灌流液和脑脊液中只能检测到去甲肾上腺素,部分样品中能测到多巴胺;(3) 递质代谢产物在脑脊液和脊髓灌流液中的含量均高于其对应的递质.结论:该方法的分辨率和灵敏度均能满足实验要求,所得数据为进一步研究脊髓水平单胺类递质的代谢和生理功能奠定了基础.

作者：田津斌；方明；刘雪松；许伟；韩济生刊期： 1998年第01期
检测卵巢癌细胞活性的XTT比色法的建立

XTT(2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino) carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide)是一种与MTT类似的四唑氮(tetrazolium)衍生物,可被活细胞线粒体脱氢酶还原而形成水溶性的棕黄色的甲月赞(formazan)产物.当XTT与电子偶合剂共同使用时其甲月赞产物的生成量与活细胞数量成正相关,在波长近450 nm处有大吸收峰.Scudiero等[1]首次采用XTT进行体外细胞增殖和药敏检测.此后,国外有许多学者将XTT比色法用于细胞活性检测[2～6],国内目前尚未见其应用的报道.为了获得更为敏感、简便的卵巢癌细胞活性检测方法,我们建立了XTT比色法,摸索了具体的实验条件,并进行相应的MTT对照实验.

作者：吴楠；崔恒；钱和年；冯捷；傅天云；李小平刊期： 1998年第01期
冬虫夏草及其发酵菌丝体的鉴定及质量分析

本室对从青海甘南地区采集的冬虫夏草样品经分离所得的菌株进行培养,通过S-450型扫描电镜和Olympus BX-50型光学显微镜,对其形态特征进行观察,鉴定为中国拟青霉Paecilomyces sinensis sp.nov..并对上述菌株经发酵生产的产物与天然冬虫夏草进行化学分析和对比.结果表明:二者均含有人体所必须的各种主要氨基酸,但发酵产物中氨基酸的含量较低.通过ELAN500型等离子体质谱仪,测定58种微量元素,发酵产物中Zn、B、Cd、Pt、Rb、Br的含量均比天然冬虫夏草的高,但却不含Be、Se、Tm、Lu 4种元素.通过高效液相(HPLC)对所含活性成分腺苷进行含量测定,结果显示发酵产物所含的腺苷比天然冬虫夏草所含的要低.

作者：张治针；韩京艳；彭朝晖；果德安；郑俊华刊期： 1998年第01期
深低温在肝细胞移植中减轻免疫排斥反应的作用

目的:探讨深低温减轻肝细胞移植免疫排斥作用.方法:抗体依赖性细胞毒性(ADCC)检测猪肝细胞溶解率,圆二色测定其膜蛋白构象.移植新鲜或冻存猪肝细胞于肝衰鼠腹腔内,并行SD鼠冻存肝细胞同种移植,观察鼠存活率.结果:ADCC显示新鲜细胞数0.24×105,冻存细胞0.68×105;新鲜肝细胞膜蛋白中α螺旋为47.5%,液氮处理后,α螺旋增至56.5%.肝衰鼠33.3%存活,新鲜猪肝细胞移植鼠66.7%;移植冻存猪肝细胞后,存活率显著提高到94.1%,但与SD鼠冻存肝细胞同种移植组(71.4%)间无显著差异.结论:深低温使膜蛋白中α螺旋增加,并导致移植细胞的免疫反应原性降低;冻存肝细胞移植可提高急性肝衰治愈率.

作者：林丛；侯宽永；张文秀；吕京宁；公衍道；丁晓岚；张秀芳；赵南明刊期： 1998年第01期
血小板α-颗粒膜蛋白分子数在慢性肾炎发生及发展中的作用

目的:观察慢性肾炎(CGN)时血小板α-颗粒膜蛋白(GMP-140)活性的改变及其与肾小球滤过率(GFR)的关系.方法:采用抗人活化血小板α-颗粒膜蛋白125I标记的单克隆抗体,以单位点放射免疫法直接定量测定43例CGN患者和20例正常人血小板GMP-140,并用99m Tc-DTPA检测GFR.结果:发现CGN患者GMP-140分子数显著高于正常对照组,随GFR下降GMP-140也逐渐下降,二者呈正相关.结论:GMP-140测定有助于肾小球疾病发病机理及进行性肾脏损害的研究,对于抗血小板药物的选用具有指导意义.

作者：朱军；高沪滨；邱歆海；田松；于仲元刊期： 1998年第01期
肾癌细胞的增殖和凋亡状态

目的:探讨肾癌的发生和发展机制.方法:采用免疫组织化学和原位缺口末端标记方法对48例肾癌和30例癌旁正常肾组织进行细胞增殖和凋亡状态的研究.结果:48例肾癌组织增殖指数为35.79,对照组为2.23,两组间经统计学分析差异非常显著(P＜0.001). 48例肾癌组织凋亡指数为1.21,对照组为0.16,两组间统计学分析差异非常显著(P＜0.01).并且增殖指数和凋亡指数均随肿瘤分级的增加而增高. 48例肾癌组织凋亡指数与增殖指数比值(0.035)明显低于对照组(0.13),统计学分析差异显著(P＜0.01),并随肿瘤分级的增加,凋亡指数与增殖指数比值逐渐减小.结论:肾癌组织中细胞凋亡处于抑制状态,细胞增殖的增加和凋亡的相对减少在肾癌的发生和发展中均起重要作用.

作者：杨宝龙；顾方六；刘德祥；宓培；苏晋伟；孔祥田；邓方明刊期： 1998年第01期
大肠杆菌致IgA肾病的实验动物模型

IgA肾病是世界范围内的一种常见的肾小球疾病,特别是包括中国在内的远东地区具有较高的发病率.有报道认为泌尿系统感染与IgA肾病的发病有关[1],而大肠杆菌(Escherichia coli, E. coli)是引起人类泌尿系统感染为常见的革兰氏阴性致病菌.本文试图以大肠杆菌为免疫原,构建实验性IgA肾病的动物模型.

作者：韩庆烽；范敏华；邹万忠刊期： 1998年第01期
降脂冲剂治疗原发性高脂血症的临床观察

目的:观察降脂冲剂治疗原发性高脂血症的临床效果.方法:用降脂冲剂对50例原发性高脂血症患者进行服药2个月前后临床疗效观察.结果:用药前后血清总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、极低密度脂蛋白(VLDL-C)变化有显著性差异.结论:降脂冲剂有较好的降脂作用.

作者：张淑娥刊期： 1998年第01期
染色体原位抑制杂交在急性早幼粒细胞白血病研究中的应用

目的:将荧光染色体原位抑制(CISS)杂交法运用于急性早幼粒细胞白血病(APL)染色体畸变的检测,提高异常核型的检出率.方法:以生物素标记的人类15号染色体特异的DNA为探针,对10例APL患者骨髓中期分裂相进行杂交,所有病例均进行G显带分析.结果:CISS杂交法异常核型的检出率较传统G显带高或在G显带无法分析时,提供结果.结论:CISS杂交结果更全面反映白血病细胞的遗传学特性,在检测细微结构异常、复杂易位以及残留白血病细胞等方面,具有快速、敏感、特异及对嵌合细胞群体可定量分析的优点.

作者：洪波；丘镜滢；史慧琳；何琦；谭家怀；师岩；党辉；荣亿迎；王德炳；陆道培刊期： 1998年第01期
高血压大鼠血浆肾上腺髓质素和肾上腺升压素的变化

目的:观察高血压大鼠血浆肾上腺髓质素(adrenomedullin,Adm)和肾上腺升压素(adrenotensin,Adt)的变化及其与内皮素(endothelin,ET)的关系.方法:在Wistar大鼠上用一氧化氮合酶抑制剂L-NAME复制大鼠高血压模型,用放射免疫分析法测定血浆Adm、Adt和ET.结果:血浆Adm明显升高[(7.6±1.2) pmol/L比对照组[(3.4±0.7) pmol/L,P＜0.01],与高血压和心肌肥大程度正相关[r值分别为0.76(P＜0.01)和0.48(P＜0.05)],反之,血浆Adt降低[(10.0±2.0) pmol/L比对照组(12.7±1.7) pmol/L,P＜0.01).血浆Adm和Adt与血浆ET分别呈正和负相关.ETA受体颉颃剂JKC-301治疗不仅可使高血压大鼠血压明显下降,并且可以逆转Adm和Adt的上述变化.结论:Adm、Adt和ET间相互作用参与高血压动物的发病过程.

作者：苏加林；汪丽蕙；夏冰；张连元；唐朝枢；常英姿刊期： 1998年第01期
mRNA差异展示法检测氧化镍所致基因表达差异

目的:建立一种简便快速的从经染毒处理细胞中分离差异表达基因的新方法.方法:基于AP-PCR技术的mRNA差异展示分析法.结果:用黑色氧化镍染毒处理人胚肺2倍体细胞株,用基于AP-PCR技术的mRNA差异展示分析法,琼脂糖凝胶电泳直接EB染色分离AP-PCR产物,对未染毒和经染毒处理的人胚肺2倍体细胞株的基因表达情况进行分析,发现在染毒组与对照组细胞株间存在明显的基因表达差异.对其中1个差异片段pDL回收纯化并作RNA斑点杂交.结论:非同位素mRNA差异展示方法可快速从经染毒处理细胞株中分离差异基因.

作者：鲁凤民；刘霜；吴卫东；安文锋；刘翔；刘世杰刊期： 1998年第01期
L型细菌与肿瘤

在生物性致癌因素中除病毒感染外,尚有细菌感染一大类.但后者在国际肿瘤研究领域中未予足够重视.细菌进入机体后,几乎不可避免地被诱导为L型.L型属缺壁微生物,它在宿主细胞内定居、增殖,通过阻断溶酶体的溶合或抵抗酸性环境而长期潜入细胞内引起细胞增生和异型增生;刺激巨噬细胞产生自由基活性氧及其他小分子量的断裂因子,导致DNA链的损伤、断裂或使DNA发生错误修复,从而引起细胞突变或发生恶性转化.

作者：汪万英；朱应葆；韩云；贾廷珍刊期： 1998年第01期
化学性腰交感神经切除术治疗下肢缺血性疾病

目的:减少腰交感神经切除术的并发症和降低死亡率.方法:用腰椎拍片定位法行化学性腰交感神经切除术治疗18例下肢缺血性疾病.结果:显效8例(44.4%);改善7例(38.9%),获得满意效果,特别是止痛效果更明显,对雷诺病患者可收到立杆见影的效果.结论:对于下肢动脉闭塞性疾病而又没有良好的流出道可供血管重建或血管重建术后效果不佳,特别是雷诺病,均可考虑施行化学性腰交感神经切除术.

作者：董国祥；赵军刊期： 1998年第01期
骨髓巨噬细胞系QXMSC1诱导成年小鼠同种异基因移植耐受

抗原呈递细胞(antigen presenting cells, APC)不但在免疫应答中起关键作用,同时也是对自身反应淋巴细胞进行阴性选择的重要细胞.专职APC(professional APC)主要是树突状细胞(dendritic cells,DC)和巨噬细胞(macrophage).

作者：秦凤华；谢蜀生刊期： 1998年第01期
Cr(Ⅵ)在细胞内外价态的变化规律

铬(Cr)具有多种价态,其中Cr(Ⅵ)毒性大, Cr(Ⅲ)毒性小; Cr(Ⅵ)又是强致癌剂和氧化剂.Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)生物学效应明显差异的原因是二者的细胞生物利用率不同[1].1979年Jennette就曾提出Cr(Ⅵ)摄入、还原代谢模型,Cr(Ⅵ)以四面体铬离子形式利用细胞上普通阴离子运输系统进入细胞,Cr(Ⅲ)主要以八面体存在,只能通过简单扩散,而不易穿过细胞膜.它很好地解释了Cr(Ⅵ)和Cr(Ⅲ)在细胞生物利用率上的差别.此后大量的化学体系[2]及模拟生物体系[3]研究均证明,Cr(Ⅵ)确实存在价态变化,同时在还原过程中伴有活性氧产生.但在完整的、特别是在人体细胞体系内,这方面的研究则很少.为此,我们用K2Cr2O7提供Cr(Ⅵ), 以人胚肺(HEL)细胞作为受试对象,观察了Cr(Ⅵ)在细胞内外价态变化的规律.

作者：贾光；刘世杰；王耐芬；王小燕刊期： 1998年第01期
孔源性视网膜脱离复位手术后视功能恢复

目的:研究孔源性视网膜脱离眼复位手术后功能恢复情况.方法:165只解剖复位的孔源性视网膜脱离眼术后半年行视力,矫正视力,眼底三面镜检查.其中53例在术后不同时间行眼底荧光血管造影检查.结果:解剖复位后的视网膜功能恢复不甚理想,其影响因素有黄斑脱离及脱离的时间,术后黄斑前膜的形成.结论:对伴有黄斑脱离的孔源性视网膜脱离眼应尽快手术,选择适当的手术方式并避免过度冷凝.

作者：许艺民；张惠蓉刊期： 1998年第01期
胃癌高发区肠上皮化生与异型增生的关系

目的:研究两型肠上皮化生中异型增生的发生率并探讨其在胃癌发生中的作用.方法:对我国胃癌高发区山东省临朐县35～64岁的居民3 401人进行了胃内7个标准部位的胃镜活检,对所有的活检材料均进行了病理检查,并研究肠化生类型及其与异型增生的关系.结果:这一人群的肠化生检出率为52.8%,异型增生检出率为20.1%,小肠型肠化生中异型增生的发生率为33.6%,大肠型肠化生中的发生率为51%(P＜0.01).结论:研究表明,与小肠型化生相比较,大肠型化生更易于发生异型增生,因此,终发生癌变的危险性可能高于小肠型化生.

作者：谢玉泉；李吉友；胡綝；游伟程；金懋林；徐光炜刊期： 1998年第01期
青藏高原2种大黄生理生态学特性的研究

植物的生长、生殖过程中,光合作用和呼吸作用始终相伴随.这两种生理作用对植物的正常生长至关重要.我们首次采用ADC公司生产的LCH4便携式光合-呼吸测定仪对青藏高原2种大黄的各生理指标进行日进程测定,表明此法

作者：谢宗强；尚安明；薛峰；果德安；郑俊华刊期： 1998年第01期
一个新的倍半萜化合物curcumafuranol

目的:研究和对比广西产莪术和日本屋久岛产莪术中的有效成分.方法:采用甲醇提取,甲醇/正己烷分配,硅胶柱分离和光谱、CD分析以分离纯品并确定结构.结果:确定了新的倍半萜化合物curcumafuranol的结构包括立体结构.结论:提取、分离和确定常用植物药莪术中不稳定成分curcumafuranol的结构,包括绝对构型,这对莪术的研究和应用有一定意义.

作者：蔡阳刊期： 1998年第01期
新生儿窒息血浆内皮素及降钙素基因相关肽的变化

目的:探讨新生儿窒息血浆内皮素(endothelin, ET)及降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)的变化.方法:对24例足月新生儿窒息患儿及18例对照新生儿,用放射免疫学方法测定出生后第1天和第5天血浆ET-1及CGRP浓度.结果:生后第1天窒息患儿血浆ET-1及CGRP水平均显著高于对照组; 生后第5天患病组二者水平显著下降.实验组第1、5天血浆ET-1及CGRP呈正相关性.结论:新生儿窒息血浆ET生成增加可能起着损伤机体的作用;而CGRP升高可能是机体的自我保护机制.

作者：郭在晨；王东红；王颖；黄丽英刊期： 1998年第01期