学术投稿

云南个旧肺鳞癌YTMLC细胞cDNA文库构建和鉴定

李海红;马丽菊;王秦秦

关键词:肺癌, cDNA, 文库, 构建, 鉴定
摘要:目的构建云南个旧人肺鳞癌YTMLC-90细胞cDNA文库.方法从培养的人肺鳞癌YTMLC-90细胞株中提取总RNA,利用经修饰的oligo(dT)引物(含SfiⅠB酶切位点)合成cDNA第一链,同时根据真核生物mRNA5'端帽子结构特点,利用SMART寡核苷酸(含SfiⅠ A酶切位点)作为cDNA第一链在mRNA 5'端延伸出去的模板,进而以此序列为引物,利用LD-PCR(long-distance PCR)合成双链cDNA,双链cDNA经Sfi Ⅰ(Ⅰ A和Ⅰ B)酶切和过柱分级分离后,克隆入经Sfi Ⅰ酶切的载体后经体外包装而成cDNA文库.结果人肺癌细胞YTMLC-90的cDNA文库获得1.01×106 pfu/ml个重组子,重组率为93.2%,文库扩增后,滴度达5.24×109pfu/ml,插入cDNA的长度为7.50~3000bp.结论所构建的cDNA文库具有较好的质量,该文库为进一步筛选、克隆肺癌特异表达基因莫定了基础.
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    作者:李海红;马丽菊;王秦秦 刊期: 2004年第01期

  • 我国β链异常血红蛋白发生率、基因频率和分布

    目的研究我国β链异常血红蛋白发生率、基因频率和分布.方法应用群体遗传学研究方法对我国β链异常血红蛋白进行群体遗传学分析.结果我国β链异常血红蛋白平均发生率为0.157%,平均基因频率为7.844×10-4,各省区均有β链异常血红蛋白分布,发生率和基因频率各省区不同.结论我国β链异常血红蛋白有高度的分布不均一性和遗传多态性.

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    作者: 刊期: 2004年第01期

  • 复杂上尿路结石手术中纤维胆道镜的应用

    目的探讨纤维胆道镜在复杂上尿路结石手术中的应用价值.方法将纤维胆道镜应用于输尿管多发结石、输尿管结石并肾结石以及输尿管结石移位的手术中取出结石.结果21例中19例纤维胆道镜取石成功(其中1例有2个米粒大结石残留于肾盏内,出院后2周内排出),2例失败后改行传统手术.结论纤维胆道镜应用于复杂上尿路结石手术中治疗效果较好、损伤小、是一种安全有效的方法,值的推广应用;对于用纤维胆道镜取石困难、估计损伤较大的病例,采用传统方法延长切口取石为宜.

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  • 有机磷中毒患者血清心肌酶学变化的临床探讨

    有机磷农药中毒是基层医院常见的内科急症之一,人们对其毒理与救治已经有了较深入的研究,但对其引起心肌损害导致心肌酶学的变化的研究报道较少.

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    作者:张伟伦;李明;刘彦信;郑德先 刊期: 2004年第01期

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    作者:潘先海;何启亚;林鸿忠 刊期: 2004年第01期

  • 微机在多参数诊断颈部肿块临床研究中的应用

    颈部是肿块的好发部位,即有胚胎发育过程中所产生一系列先天性肿块;又有许多急、慢性炎症性肿块;还有原发性肿瘤(良、恶性)肿块及转移性癌瘤等.其诊断的关键在于如何鉴别其性质和来源,只有明确这些问题才能制定出合理的治疗计划.由于颈部肿块的诊断需要多方面的综合分析,而每一位医生均根据个人临床经验来判断,难免诊断水平高低不一,甚至产生错误的诊断,影响治疗.

    作者:徐文华;李国军;黄昊红;赵治明;刘秋虹;杨滇;赵玉柱;刘志涛 刊期: 2004年第01期

  • 扩大HBV-DNA PCR-ELISA定量方法的测量范围

    目的扩大HBV-DNA PCR-ELISA定量方法的测量范围,以及解决高值计算误差较大的问题.方法对PCR产物40倍稀释后再进行微板杂交;用四参数方程代替正比例函数公式计算结果.结果用原法、改进法及实时荧光定量法分别测量30份乙肝病人血HBV-DNA,改进法、原法与实时荧光定量法的测量结果在低值范围内一致性很好,但高值区(> 105拷贝/ml),原法与实时荧光定量法差异较大,而改进法与实时荧光定量法结果差异不明显.结论扩大HBV-DNA PCR-ELISA法测量范围的方法可普遍用于临床检验工作中.

    作者:尚文章;罗云杰;郭长河 刊期: 2004年第01期

  • 真皮下血管网皮瓣的开发与拓展应用的研究

    各种烧、创伤所致的皮肤组织缺损,形态畸形和功能障碍都十分常见且常毁容致残,严重影响患者的生活能力、劳动技能,为家庭和社会带来极重负担.长期以来,一直采用皮片移植和皮瓣移植这两种主要的手段来修复.

    作者:高建华;司徒朴;陈伯华;姜平;肖能坎;熊明根;肖添有;徐达传;胡志奇;钟世镇 刊期: 2004年第01期

  • 白细胞介素-2联合拉米夫定治疗慢性HBV感染疗效观察

    目的观察IL-2联合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎及慢性乙型肝炎病毒携带者的疗效.方法47例慢性乙型肝炎患者中19例为联合治疗组,接受IL-2应用1个月后继用拉米夫定的治疗;28例患者为单独应用拉米夫定的对照组.21例肝功能正常的慢性乙型肝炎病毒携带者中11例接受IL-2联合拉米夫定的治疗;10例同样患者单独接受拉米夫定治疗.疗程均为12个月.结果慢性肝炎联合治疗和单用组,HBV-DNA阴转率于治疗后3、6、12个月,分别为78.9%、84.2%、78.9%和67.9%、67.9%、75.0%.治疗后12个月,两组HBeAg阴转率分别为33.3%和17.8%,E抗原血清转换率分别为29.4%和10.7%,联合治疗组明显高于单独治疗组.慢性乙型肝炎病毒携带者,联合或单独治疗组,HBV-DNA阴转率分别为66.7%和80%,未见HBeAg阴转和发生血清转换者.结论拉米夫定有抗乙型肝炎病毒的确切作用;对于慢性肝炎组,联合IL-2治疗较单独应用拉米夫定血清转换率更高.应用IL-2可使患者OKT4/OKT8比值升高,CT4细胞上升,其有明确的提高细胞免疫之作用.

    作者:郭雁宾;王芳;徐文祥;李卓;陈新月;刘建京;黄德庄;闫惠平;贺莉香;郝娃 刊期: 2004年第01期

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