于婷;赵洪萍;周颖;赵卫东;刘培淑
目的:探讨慢性乙型肝炎以及肝硬化患者的肠道菌群变化及其与细胞因子、肝功能之间的关系。方法选取30例健康志愿者、50例肝炎后肝硬化患者以及50例慢性乙型肝炎患者,采用实时荧光定量 PCR 法检测粪便中九种肠道菌群含量,比较三组间肠道菌群变化;同时采用 ELISA 法检测慢性乙型肝炎患者血清中细胞因子如白介素-17A(IL-17)、白介素-1β( IL-1β)、白介素-6( IL-6)、干扰素-α( INF-α)、CXC 趋化因子(CXCL-13)的浓度,分析肠道菌群与细胞因子以及肝功能之间的关系。结果与健康对照组相比,慢性乙型肝炎以及肝硬化患者体内的双歧杆菌、乳酸杆菌、拟杆菌属以及瘤胃球菌属含量减少;肠杆菌科细菌、肠球菌、梭菌属、白色念珠菌以及普雷沃氏菌含量明显增加。慢性乙型肝炎患者体内的肠杆菌科细菌与凝血酶原时间(PT)呈正相关性,肠球菌与谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)呈正相关性;双歧杆菌与 AST、碱性磷酸酶(AKP)以及 HBV DNA水平呈负相关性,普雷沃氏菌属与 AST、AKP 以及 PT 呈负相关性,拟杆菌属与 AST 和 PT 呈负相关性,瘤胃球菌属与白蛋白(ALB)呈负相关性。另外,9种肠道菌群中只有肠球菌与 IL-17A 呈正相关性。结论慢性乙型肝炎以及肝硬化患者体内存在不同程度的肠道菌群失调,其中乙肝患者体内过度繁殖的肠球菌与 IL-17A 协同参与肝脏炎症反应过程,以致于肝功能受损呈恶性循环状态。
作者:陈萌萌;郑吉顺;刘艳艳;李家斌 刊期: 2015年第05期
目的:探讨体外受精(IVF)周期人卵丘细胞(CCs)中lncRNA ENST00000502521的表达与卵母细胞成熟及胚胎发育的关系,判断其对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的预测价值。方法收集40例首次接受长方案超促排卵患者的卵丘细胞,根据卵丘细胞围绕的卵母细胞受精后胚胎发育情况将卵丘细胞分成两组,优质胚胎组和低质胚胎组,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测两组卵丘细胞中 lncRNA ENST00000502521的相对表达量,分析其与胚胎发育及妊娠结局的关系;采用受试者工作特征曲线(ROC)评价 lncRNA ENST00000502521相对表达量对临床妊娠结局的预测价值。结果 IVF 患者低质胚胎组中 ln-cRNA ENST0000050252表达较优质胚胎组明显增高( P <0.05),且未妊娠组 lncRNA ENST00000502521相对表达量较妊娠组增高(P <0.05);lncRNA ENST00000502521预测妊娠结局的 ROC 曲线下面积(AUC)为0.71(P <0.05,95% CI:0.55~0.87),灵敏度为84.2%,特异性为61.9%。结论lncRNA ENST00000502521可能参与影响卵母细胞成熟及胚胎发育,可作为一个潜在的分子标志物预测胚胎质量和妊娠结局。
作者:李娟;曹云霞;刘婷婷;许孝凤 刊期: 2015年第05期
目的:探究 microRNA-21 inhibitors 对大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法应用 LipofectamineTM 2000 Reagent 向大鼠心肌成纤维细胞瞬时转染 microRNA-21 in-hibitors 24、48 h 后,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测 microRNA-21、I 型胶原前胶原 A1(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;Western blot 法检测 Col1A1和α-SMA 的表达水平;MTT 法检测 microRNA-21 inhibitors对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。结果转染 microR-NA-21 inhibitors 的心肌成纤维细胞中,microRNA-21表达下调,Col1A1和α-SMA 的表达下降;转染 microRNA-21 inhibi-tors 的心肌成纤维细胞增殖活性明显减弱。结论 microR-NA-21 inhibitors 可明显抑制心肌成纤维细胞增殖活性,提示microRNA-21是心肌成纤维细胞活化增殖的潜在靶向分子,有利于为干预和预防心肌纤维化的发生发展提供新思路。
作者:张猛;陶辉;陈泽文;张家贵;宣海洋;占红英;石开虎 刊期: 2015年第05期
目的:观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血及肺组织中调节性 T 淋巴细胞(Treg)的表达并与肺功能正常者进行对照比较,探讨 Treg 在 COPD 患者气道炎症中的作用以及吸烟对其表达的影响。方法收集24例肺功能正常的不吸烟者(NS 组)、22例肺功能正常的吸烟者(S 组)、25例患有 COPD 的吸烟者(COPD 组)为研究对象,分别采用流式细胞术、免疫组织化学染色法检测3组研究对象外周血及肺组织中 Treg 表达。结果 COPD 组的外周血中 Treg 表达均显著高于 S 组及 NS 组,差异均有统计学意义( P <0.01),S 组的外周血 Treg 表达高于 NS 组,差异有统计学意义(P <0.01);COPD 组的肺组织中 Treg 表达均显著低于 S组及 NS 组,差异均有统计学意义(P <0.01),S 组的肺组织中 Treg 表达水平低于 NS 组,差异无统计学意义;3组外周血Treg 总表达与第1秒用力呼气容积(FEV1)/预计值(%)负相关(P <0.0001),与吸烟量(年支)呈显著正相关( P <0.0001),3组肺组织中 Treg 总表达与 FEV1/预计值(%)无相关性(P =0.338),与吸烟量(年支)呈显著负相关( P =0.031)。结论 COPD 患者外周血中 Treg 表达上调,其肺组织中 Treg 表达下调。吸烟量与外周血中 Treg 表达呈正相关,与肺组织中 Treg 表达呈负相关。
作者:章颖妹;严青;刘辉;石建邦;夏淮玲;徐晓玲 刊期: 2015年第05期
目的:探讨检测 ERCC1 C8092A 在指导晚期食管癌患者个体化治疗中的作用及其意义。方法选取114例晚期食管癌患者入组,分为个体化治疗组(n =76)和标准治疗组(n =38)。标准治疗组采用顺铂联合紫杉醇化疗。采集随机入组到个体化治疗组患者外周血标本,均进行 ERCC1 C8092A 基因型的检测;如果基因型为非 C/ C 型,采用顺铂联合紫杉醇化疗(同标准治疗组),如果基因型为 C/ C 型,采用氟尿嘧啶联合紫杉醇化疗。主要观察指标包括缓解率,次要指标包括化疗毒副反应、无进展时间及总生存时间。两组间比较采用χ2检验。采用 Kaplan Meier 模型进行生存分析,生存率的比较采用 Log Rank 检验。结果个体化治疗组的缓解率为53.9%,标准治疗组缓解率为31.6%,两组差异有统计学意义(P <0.05)。个体化治疗组在化疗毒副反应中恶心呕吐(32.9%),血红蛋白减少(11.8%),Ⅲ~Ⅳ级发生率较标准治疗组(68.4%,28.9%)下降,两组差异有统计学意义(P <0.001,P =0.001)。个体化治疗组中位无疾病进展时间、总生存时间均优于标准治疗组,两组差异有统计学意义(P =0.004,P =0.007)。结论个体化治疗组的缓解率、化疗毒副反应、中位无进展时间及生存时间均优于标准治疗组,提示 ERCC1基因检测指导晚期食管癌个体化治疗可能具有一定临床价值。
作者:姚艺玮;何义富;季楚舒;韩兴华;胡冰 刊期: 2015年第05期
目的:观察骨髓间充质干细胞的条件培养基(BMSC-CM)局部移植对脊髓损伤修复的作用。方法采用改良的Allen 装置制作大鼠 T9脊髓损伤模型,随机分为对照组(脊髓损伤后局部微量注射生理盐水10μl)和实验组(脊髓损伤后局部注射 BMSC-CM 10μl),两组均采用 BBB 评分、斜板实验法观察大鼠运动功能恢复情况,苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓损伤处血管生长及空洞体积的改变情况。结果实验组大鼠的 BBB 后肢功能评分、斜板倾斜角度优于对照组(P <0.05),脊髓损伤处空洞体积明显小于对照组,血管直径大于对照组。结论 BMSC-CM 能够减小脊髓损伤处的空洞体积和促进血管生长,从而促进脊髓损伤后神经功能的恢复。
作者:张峰;申才良;宋旆文;章仁杰;董福龙;杨昆 刊期: 2015年第05期
目的:通过实时定量逆转录 PCR(RT-PCR)、肾脏免疫组化和 ELISA 3种方法研究儿童狼疮性肾炎(LN)中 EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白1(LMP-1)的表达,试图探讨 LMP-1在儿童 LN 中的致病机制。方法41例 LN 患儿和12例健康对照组,分别用 RT-PCR 法、免疫组化法、ELISA 法检测两组外周血单核细胞(PBMCs)、肾脏组织及血清中 LMP-1的表达。结果① RT-PCR 法、免疫组化法、ELISA 法检测 LN患儿和健康对照者的阳性率分别为65.9% vs 8.3%,95.1%vs 16.7%,22.0% vs 8.3%,差异有统计学意义(P <0.05);②3种方法检测 LMP-1的表达,免疫组化法检测阳性率高于其他两种方法,差异有统计学意义(P <0.05)。结论儿童 LN 中存在 EBV 潜伏期基因 LMP-1表达异常,其中肾脏组织中表达阳性率高,提示 LMP-1可能参与了儿童 LN 的发病。
作者:丁艳;廖旺;向伟;杨慧兰;何小解;党西强;易著文 刊期: 2015年第05期
目的:研究程序化细胞死亡分子5(PDCD5)在晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达,探讨其与化疗药物敏感性的关系。方法收集经病理证实为晚期 NSCLC 患者40例作为肺癌组,体检健康者20例为正常组。肺癌组给予铂类药物联合其他化疗药物进行化疗,治疗周期为21 d,治疗2周期后进行疗效评估,分为有效组和无效组。采用ELISA 法分别检测肺癌组化疗前后及正常组血清中 PDCD5蛋白的水平,并分析其与疗效、临床特征的关系。结果正常组血清中 PDCD5蛋白的水平高于肺癌组,差异有统计学意义(P <0.05)。化疗前 PDCD5蛋白的水平有效组高于无效组,差异有统计学意义(P <0.05)。化疗后 PDCD5蛋白的水平有效组显著高于无效组,差异有统计学意义( P <0.01)。有效组化疗后 PDCD5蛋白的水平高于化疗前,差异有统计学意义(P <0.05)。无效组化疗后 PDCD5蛋白的水平低于化疗前,差异有统计学意义(P <0.05)。肺癌组血清中 PDCD5蛋白的水平与有无淋巴结转移及肿瘤的分化程度有关(P <0.05),与患者是否吸烟、性别、病理类型均无关(P>0.05)。结论晚期 NSCLC 患者血清中 PDCD5蛋白的水平有望成为化疗敏感性的预测因子,其表达水平降低可能与肺癌的发生有关,也可能为晚期 NSCLC 患者不良预后因素。
作者:赵丹宁;李焕焕;林芷伊;李晶;苏帆;巩平 刊期: 2015年第05期
收集30例三叉神经痛(TN)患者、17例恶性肿瘤患者、17例普通炎症患者及20例健康患者空腹静脉血,ELISA法检测血清中白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。 TN 组患者血清中 IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P <0.05);而与恶性肿瘤组和普通炎症组比较,差异无统计学意义。 IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子与 TN 发病有一定关联。
作者:黄姗姗;徐文华;马腾飞;肖芳莉;刘衍钊;王烈成;王元银 刊期: 2015年第05期
目的:探讨沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)在骨性关节炎(OA)正常滑膜组织及细胞中表达的差异性。方法膝关节滑膜细胞培养传代,甲苯胺蓝染色观察细胞形态,Western blot 法检测滑膜组织及细胞中 SIRT1的表达情况;免疫组织化学法对滑膜细胞检测 SIRT1表达情况及表达部位。结果甲苯胺蓝实验显示 OA 及正常滑膜细胞无明显形态学差异;免疫细胞化学法显示 SIRT1在滑膜细胞胞质中广泛表达,染色强度 OA 组较正常组明显降低(t =20.208, P <0.01);Western blot 法显示在滑膜细胞中 OA 组 SIRT1表达明显低于正常对照组((t =8.619,P <0.01);在滑膜组织中 OA 组 SIRT1的表达亦明显低于正常对照组(t =7.664,P<0.01)。结论 SIRT1与 OA 导致滑膜炎的发生发展密切相关,为 SIRT1可以作为 OA 治疗的靶点提供一个新的理论依据。
作者:丁辉;胡勇;常俊;张琪琪;阙玉康;许唐兵;魏伟 刊期: 2015年第05期
采用 ELISA 法检测70例标本(肝癌组39例、肝硬化组31例)血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)和高尔基体蛋白73(GP73)的水平,qRT-PCR 法检测相同标本外周血单个核细胞(PBMC)中 GPC3 mRNA 和 GP73 mRNA 的相对表达量。结果显示肝癌组血清中 GPC3和 GP73表达量显著高于肝硬化组(P <0.0001);两组间 PBMC 中 GPC3 mRNA 和GP73 mRNA 水平差异无统计学意义;相关性分析结果显示,肝硬化组和肝癌组血清中 GPC3、GP73含量均有正相关性(P <0.01)。血清中 GPC3和 GP73的水平均能预测原发性肝癌,且 GPC3和 GP73的水平具有一定的相关性;PBMC 中GPC3 mRNA 和 GP73 mRNA 的表达水平不能很好的区分肝癌组与肝硬化组,提示 ELISA 法检测血清中 GPC3和 GP73的表达水平是临床预测原发性肝癌的首选方法。
作者:马洁;汪顺才;朱梦琪;马久明;周华;虞腊青;杨永峰;经继生 刊期: 2015年第05期
收集6例符合治疗指征的宫颈癌患者,采用西门子的Artiste 自适应放疗系统行适形调强放疗,分别于治疗前、8次治疗后、16次治疗后进行图像采集并重新勾画靶区,制定新的计划,分别比较3组计划间靶区与危及器官的剂量学差异与位置变化。结果显示在放疗过程中,治疗靶区体积逐渐缩小,3组计划的靶区剂量差异无统计学意义;膀胱、直肠位置变化较大,其中以头脚方向为明显;膀胱、直肠的 V40、V45、V50在3组计划中依次减少且差异均有统计学意义( P <0.05)。结果表明宫颈癌体外离线式自适应放疗可根据图像反馈信息调整计划,对治疗靶区影响较小,但对膀胱、直肠等重要正常器官组织的保护具有积极意义。
作者:张宁;王凡;童铸廷;吴黎明 刊期: 2015年第05期
目的:采用 shRNA 沉默 Piwil2基因的表达,探讨其对宫颈癌细胞株增殖和衰老特性的影响。方法通过脂质体 Lipofectamine2000转染技术和嘌呤霉素筛选,建立稳转Sh-piwil2宫颈癌细胞株,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和 Western blot 法验证沉默效果。采用细胞增殖实验、集落形成实验、细胞周期和细胞衰老等实验观察沉默 Piwil2表达对宫颈癌细胞生物学特性的影响。结果建立稳定转染 Sh-piwil2宫颈癌细胞株,与对照组相比,沉默Piwil2表达后细胞的增殖和集落形成能力均显著降低(P <0.05);细胞 G0/ G1期比例增加、S 期比例明显下降( P <0.05),同时沉默 Piwil2后细胞衰老数量明显增多( P <0.05)。结论沉默 Piwil2基因可发挥抗宫颈癌作用,推测Piwil2基因可作为宫颈癌临床治疗的一个潜在靶点。
作者:张红丽;冯定庆;凌斌;尤青叶;李兵;伍娇娇;赵婷婷 刊期: 2015年第05期
目的:探讨电化学发光法(ECLIA)不同批号癌胚抗原(CEA)试剂室内质控发生明显偏倚时对患者检测结果的影响。方法留取两批次 CEA 试剂检测的标本数:批号为171617检测的临床标本66例;批号为172356检测的临床标本58例。用批号为172356 CEA 试剂重新检测,计算两次检测结果的偏倚。结果不同批号试剂检测结果差异有统计学意义(P =0.012);不同批号试剂检测结果偏倚与相同批号试剂检测结果偏倚两者比较差异有统计学意义( P <0.001);不同批号试剂检测结果正向偏倚和负向偏倚的比例与相同批号试剂检测结果正向偏倚和负向偏倚的比例,两者比较差异有统计学意义(P <0.001)。用室内质控的偏倚确定校正因子纠正患者结果,不同批号试剂纠正后结果差异没有统计学意义(P =0.828);不同批号试剂纠正后偏倚与相同批号试剂偏倚比较差异无统计学意义(P =0.092);不同批号试剂纠正后正向偏倚和负向偏倚的比例与相同批号试剂正向偏倚和负向偏倚的比例比较差异无统计学意义(P =0.774)。结论不同批号 CEA 试剂室内质控靶值存在明显偏倚时,患者检测结果会产生相似的偏倚,该偏倚可以通过校正因子进行纠正。
作者:李涛;刘亚婷;闫川;徐元宏;周敏;肖春红;郝丽 刊期: 2015年第05期
目的:观察塞来昔布对人成骨细胞增殖的影响及其作用机制。方法将人成骨细胞分为3个组:空白对照组、IL-1刺激组(阴性对照组)、塞来昔布+ IL-1刺激组(药物干预组),用 RT-PCR 法和 Western blot 法分别检测三组成骨细胞环氧化酶-2( COX-2)、膜相关前列腺素 E2合成酶1(mPGES-1) mRNA 和蛋白的表达。 MTT 法检测塞来昔布对阴性对照组人成骨细胞增殖的影响。结果 RT-PCR 法和Western blot 法实验结果显示,同空白对照组相比,阴性对照组的人成骨细胞中 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达均增加;同阴性对照组相比,药物干预组的 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达均降低。塞来昔布对 IL-1刺激的人成骨细胞的生长具有抑制作用,呈现剂量依赖性,浓度越大,抑制作用越大;并且随着作用时间的延长,细胞的抑制作用增大。结论塞来昔布可以抑制炎性状态下人成骨细胞的生长,可能是通过调控 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达,使其表达下调而发挥作用。
作者:高杰;桂斌捷;胡孔足;王斯晟 刊期: 2015年第05期
目的:探讨乳腺癌化疗后患者合并抑郁情绪与其认知障碍发生的关系。方法采用抑郁自评量表和成套认知神经心理学量表分别对68例乳腺癌术后未合并抑郁状态的患者进行化疗前和化疗后测查,比较化疗前后抑郁评分及认知神经心理学特征的变化。结果与化疗前相比,化疗后患者在抑郁自评量表、简易精神状况检查表、延迟记忆和数字广度倒背成绩方面差异有统计学意义(P <0.05);化疗后合并抑郁患者的简易精神状况检查表、词语流畅性测验量表、即刻记忆、延迟记忆及数字广度倒背得分低于化疗后无抑郁组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论乳腺癌化疗后合并抑郁患者存在总体认知及记忆功能下降,推测抑郁可能进一步加重乳腺癌术后化疗后认知障碍。
作者:杨明慧;程怀东;陈振东;黄忠连;王小磊 刊期: 2015年第05期
通过运用三维有限元方法建立Ⅰ~Ⅳ类骨质中种植体不同角度倾斜种植模型24个,垂直集中加载300 N。分析研究显示,在同一骨质中,随着种植体倾斜角度的增加,密质骨和松质骨中的大应力及应变量均逐渐增大;而相同角度的种植体于不同质量的颌骨中时,大应力发展趋势为:密质骨:Ⅳ类骨质>Ⅲ类骨质>Ⅱ类骨质>Ⅰ类骨质;松质骨:Ⅲ类骨质>Ⅳ类骨质>Ⅱ类骨质。
作者:夏琳;张志宏;刘红红;杜双松;冯昌乐;韩倩;陈佳 刊期: 2015年第05期
超声测量168例孕20~26周正常胎儿脐带胎盘插入点、距脐孔50 mm 范围内游离段、腹内段3处的脐静脉血流量(QPI、QFL、 QIA)以及左门静脉血流量( QLPV),计算QLPV/ QIA,拟合 QPI 及 QIA 随孕周增长的回归方程,比较QPI 和 QIA、QFL 和 QIA。 QLPV/ QIA 在恒定范围内,95%参考值范围:0.42~0.58;QPI 及 QIA 与孕周的增长呈直线关系,回归方程:(QPI:^Y =21.25X -385.92,R2=0.970;QIA:^Y=17.26X -314.75,R2=0.954);QPI 和 QIA 比较差异有统计学意义(P <0.05),QFL 和 QIA 比较差异无统计学意义。
作者:张贤月;姜凡;谭捷;梁婧;罗平 刊期: 2015年第05期
目的:研究在异丙肾上腺素(ISO)致大鼠心肌肥厚模型中,培哚普利对大鼠心肌组织硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶(H2 S/ CSE)合成途径的影响。方法40只大鼠随机均分为模型组、培哚普利+模型组、培哚普利对照组和空白对照组,采用皮下注射 ISO 制备心肌肥厚模型。检测大鼠心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI),心肌组织中 H2 S 含量及其生成酶活性,心肌组织中 CSE 蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,模型组大鼠 HMI、LVMI 升高( P <0.01),心肌肥厚明显,H2 S 含量及其生成酶活性减少(P <0.01),CSE 表达下降(P <0.05),培哚普利对照组大鼠心肌H2 S 含量及其生成酶活性升高(P <0.01),CSE 表达增加(P<0.05)。与模型组比较,培哚普利+模型组大鼠 HMI、LV-MI 下降(P <0.01),心肌中 H2 S 含量及其生成酶活性升高(P <0.01),CSE 表达增加(P <0.05)。与培哚普利对照组比较,培哚普利+模型组大鼠 HMI、LVMI 升高(P <0.01),心肌中 H2 S 含量及其生成酶活性下降(P <0.01),CSE 表达下降(P <0.05)。结论培哚普利能够提高大鼠心肌中 H2 S含量及其生成酶活性,可能与其能够提高 CSE 表达,影响H2 S/ CSE 合成途径相关,其中在治疗 ISO 所致大鼠心肌肥厚模型中作用更加明显。
作者:鲁艳;王爱玲;陈森;郭增;李丽;王春苗;郭晓琳 刊期: 2015年第05期
心血管疾病的慢性炎症状态是存在多年的命题,但没有明确证实,因此还是一个较新的研究课题,许多研究资料证实慢性血管炎症反应可能是高血压重要的发病机制,是与动脉粥样硬化的桥梁,炎症与高血压互为因果、相互影响,是一个恶性循环的关系,因此对炎症信号通路的研究并在此基础上开发新的药物至关重要,Toll 样受体4是研究较为广泛的炎症信号通路,以其为靶点来调控血压取得了一定疗效,文章介绍了近年来药物基于 TLR4信号通路治疗高血压及其靶器官损害的机制研究。
作者:丁康(综述);方祝元(审校) 刊期: 2015年第05期