郑铃；洪新如；陈豪；郑秀芬；陈锦英
目的构建产志贺毒素大肠杆菌O138 stx2e基因重组质粒,并比较不同型Stx之间的区别.方法根据GenBank发表的stx2e序列设计了一对特异性引物,用PCR的方法扩增从临床分离到的产志贺毒素大肠杆菌O138的stx2e基因,将其克隆到pGEM-T载体中,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,经酶切和PCR鉴定,而后进行测序.并利用DNASIS序列分析软件对GenBank报道的O22菌株和噬菌体P27的stx2e和O138菌株的stx2e基因序列进行了比较分析,并对O138的stx2e氨基酸残基序列与stx1、stx2和O22菌株stx2e序列进行比较.结果所克隆的O138的stx2e与O22菌株和噬菌体P27的stx2e在碱基序列上同源性达到99.6%,O138的Stx2e与O22的Stx2e在氨基酸水平上其序列完全相同.Stx2e与stx2的同源性在85%以上,而stx2e与stx1的同源性只有42%左右.结论克隆了stx2e基因,为研究stx2e的结构和功能奠定了基础.
作者：刘军；孙洋；冯书章；郭学军 刊期： 2004年第10期
目的观察弓形虫感染昆明鼠后对小鼠受孕及产仔的影响.方法将弓形虫AH株包囊感染雌性昆明鼠,一周后与雄性昆明鼠交配,确认阴栓,记录受孕及产仔情况.同时设对照组.结果实验组33.3%受孕,平均每鼠产仔为4.4只;对照组100%受孕,平均每鼠产仔为12只,实验组与对照组受孕率经卡方检验(χ2=15.45,P＜0.01),有非常显著性差异.结论急性弓形虫感染可使昆明鼠的受孕率及产仔率明显降低.病理检查结果也显示子宫、输卵管有炎症病变.
作者：鲁敏；杨连第；陈昌源；吴秀枝；魏敏 刊期： 2004年第10期
目的建立两种免疫捕获PCR法快速检测E.coli O157∶H7,并探讨其灵敏度和特异性.方法运用免疫磁珠集菌(IMS)和抗体包被扩增管(mACT)两种方法富集待测样品中E.coli O157∶H7,再应用巢式PCR法检测编码E.coli O157∶H7 O抗原的rfbE基因,对13株E.coli O157菌和10株非E.coli O157菌进行检测.结果应用两种icPCR检测,所有E.coli O157∶H7和E.coli O157:NM菌株均为阳性结果,而其它包括与O157抗血清能交叉凝集的菌株检测结果均为阴性;对于含有4.8×102cfu/ml 以上浓度的E.coli O157∶H7菌悬液,两种方法,所有试验管都能检测到特异性扩增;并证实了这两种方法可用于检测鲜牛奶中E.coli O157∶H7,样品中E.coli O157∶H7的含量只要不少于101cfu/ml,经过6小时增菌均能检测出来.结论 IMS-icPCR和mACT-icPCR用于检测E.coli O157∶H7,是快速、灵敏且高特异的方法.
作者：牛建军；黄建炜；李莉；彭宣宪 刊期： 2004年第10期
目的建立巨细胞病毒(MCMV)感染的动脉粥样硬化动物模型,观察CMV感染是否可促使动脉粥样硬化发生.方法 apoE基因敲除的C57BL/6雌性小鼠,随机分为四组,根据不同处理分为:对照组、高脂高胆固醇饮食组、注射MCMV组和联合高脂高胆固醇饮食并注射MCMV组,每组9只.分别于饲养8、12和16周时处死小鼠,分离主动脉,病理切片观察动脉粥样硬化改变.结果对照组8周开始有内膜增厚,炎症细胞浸润,至16周尚无明显斑块形成;CMV感染组各阶段的炎症细胞浸润及泡沫细胞形成均比对照组和高脂饮食组严重,16周有明显的粥样斑块形成.而CMV感染合并高脂饮食组的病变为严重.结论 MCMV感染ApoE-KO小鼠可导致动脉粥样硬化的发生,高脂饮食与CMV感染对促动脉粥样硬化有协同作用.
作者：牛玉宏；许从峰；史剑慧；葛均波 刊期： 2004年第10期
采集浙江省9家医院、6家超市中央空调冷却塔的15份水样中有8份检出嗜肺军团菌,阳性率高达53.33%.玻片凝集试验结果证实,4份医院水样、1份超市水样存在两种不同血清型的嗜肺军团菌,13株嗜肺军团菌中Lp1型8株、Lp6型4株、Lp7型1株.上述菌株PCR扩增结果均为阳性.
作者：朱水荣；叶菊连；孟真；陈恩富；杨仕贵 刊期： 2004年第10期
TORCH是一组围产期非细菌致畸性病原体感染,包括TOX、CMV、风疹病毒(RV)及单纯疱疹病毒(HSV)等,常导致胎儿或新生儿脑发育不良,脑瘫及智力低下[1].笔者搜集16例脑TORCH感染,分析其发病机制及CT表现特点,旨在早期诊断,提高对本病的认识,减少后遗证及死亡率.
作者：许崇永；赵雅萍；谢武军；程建敏 刊期： 2004年第10期
湖北省是中国主要发生洪涝灾害的地区,近40年曾发生过5次规模较大的钩体病流行,均发生在内涝型洪涝灾害之年,多次因洪涝灾害造成钩体病暴发流行,给疫区人民生产生活带来了严重危害.
作者：程均福；秦进才；张险峰；林凤荣；伍佩仪 刊期： 2004年第10期
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)属假单胞菌属,是一种常见的人兽共患病病原菌,也是医院获得性感染的重要条件致病菌之一,在院内感染病原菌检出率高[1].该菌耐药性强,耐药谱广,故治疗其所致感染可供选择的有效抗菌药物甚少.目前临床上使用的抗Pa较为有效的药物为碳青霉烯类抗生素.近年来随着碳青霉烯类抗生素在临床上广泛大量使用,Pa对其耐药率有上升趋势.这给治疗带来极大的困难,因此研究Pa对碳青霉烯类抗生素的耐药机制,可以帮助临床医师制定合理给药方案,减少耐药菌的产生.本实验探讨主动外排系统MexAB-OprM中外膜蛋白OprM的结构基因oprm在临床分离Pa中的分布与表达,现报道如下.
作者：彭少华；金正江；李从荣；顾剑；詹燏 刊期： 2004年第10期
汉坦病毒引起的疾病是一种人兽共患性疾病,它在世界上有着广泛的流行区域.目前发现汉坦病毒有二十余种血清/基因型,引起人类肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome, HFRS)主要是汉滩病毒(Hantaan Virus, HTNV)、汉城病毒(Seoul Virus, SEOV)、普马拉病毒(Puumala Virus, PUUV)和Dobrava病毒(DOBV),疫源地在亚洲与欧洲.而引起人类汉坦病毒肺综合征(hantavirus pulmonary syndrom, HPS)除辛诺柏病毒(Sin Nombre Virus, SN)外,还发现有纽约病毒(New York Virus, NYV),长沼病毒(Bayou Virus), 黑渠港病毒(Black Creek Canal Virus, BCCV)等,主要在美洲流行.近年来随着分子生物学技术的发展及对汉坦病毒基因结构的深入研究,其流行病学和致病机制正逐步被阐明,汉坦病毒疫苗的研制也有了显著发展.其中核酸疫苗是近年来发展起来的一项新生物技术,具有广阔的应用前景,本文主要就这方面进行简要综述.
作者：黄汉菊；吴志洪 刊期： 2004年第10期
目的应用基因工程技术,对日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase,HGPRT)进行亚克隆,试图构建真核重组DNA质粒pcDNA3-HGPRT.方法通过筛选日本血吸虫成虫cDNA文库,克隆HGPRT基因片段,然后将目的片段亚克隆入真核表达载体pcDNA3.结果成功构建了真核重组DNA质粒pcDNA3-HGPRT,为进一步研究HGPRT的功能奠定了基础.
作者：何卓；汪世平；吕志跃；余俊龙；彭先楚；周松华；李文凯；徐绍锐；吴仕筠；曾少华；肖小芹；戴橄；车宏丽；姜孝新 刊期： 2004年第10期
P1363:台湾创伤弧菌(Vibrio vulnificus)台湾居民常因海洋食物和职业暴露接触海洋微生物.自1985年报道首例创伤弧菌患者以来,感染该菌的病例数有所增加.病例数的增加可能是因为疾病更为活跃,也可能是因为临床医生或实验室人员鉴别技术的提高.我们分析了1995-2002年的84例创伤弧菌病例的临床症状,描述这些病例中分离到的病原的分子流行病学特征.研究临床表现和结果特征,抗菌剂的治疗方案的选择以及毒力的代谢.该地区人和海洋环境中分离的创伤弧菌的分子分型结果有高度特异性.为预防该种新出现传染病应进行教育和检测.
作者：林春芳 刊期： 2004年第10期
目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasion protein A,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法.方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门氏菌标准菌株的invA基因及6种非沙门氏菌株进行PCR扩增,并将扩增的片段进行克隆及序列分析.结果 3种沙门氏菌标准菌株PCR均扩增出283 bp的特异条带,非沙门氏菌皆无特异带扩增;DNA序列分析证实,沙门氏菌的invA基因核苷酸序列比较保守.结论本研究建立的检测沙门氏菌方法具有较高的特异性与灵敏性,invA基因的序列分析为进一步研究沙门氏菌不同分离株的流行病学、遗传学与分子致病机理奠定了基础.
作者：陈金顶；索青利；廖明；辛朝安 刊期： 2004年第10期
目的实现恙虫病东方体56kD表膜蛋白的原核表达并评价重组蛋白作为抗原的免疫诊断价值.方法亚克隆技术构建原核表达质粒载体pGEX-Sta56,转化宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST-Sta56融合蛋白,亲和层析纯化融合蛋白,应用ELISA以评价其免疫诊断价值.结果 pGEX-Sta56经测序鉴定Sta56基因以正确的表达框架连入载体,经过诱导表达得到正确大小的融合蛋白,应用纯化的GST-Sta56的ELISA检测结果与全细胞抗原有很高线性相关性,在小鼠血清检测中敏感性,特异性和准确性分别大于90%,70%和80%.结论成功表达重组的56kD表膜蛋白并可能替代传统的全细胞纯化蛋白,为建立快速、敏感和特异的免疫学诊断奠定了基础.
作者：赖延东；郑小英；李秀英；何蔼；吴瑜；李卓雅；詹希美 刊期： 2004年第10期
隐孢子虫病是由隐孢子虫引起肠道感染的一种人兽共患传染病.其临床特征主要为腹泻.免疫功能低下和营养不良儿童可长期排出囊合子,在免疫缺陷者腹泻则可持续而严重,甚至死亡.对于隐孢子虫病的治疗,目前认为螺旋霉素和大蒜素治疗隐孢子虫病疗效尚可[1,2],但所观察的病例数均较少.进一步考核乙酰螺旋霉素及大蒜素对隐孢子虫感染者的治疗效果,以选择佳治疗药物和治疗方案,笔者选择高危人群(吸毒者)隐孢子虫感染者进行药物疗效考核,现将结果报道如下.
作者：黄民主；李登清；关岚；谢梅芝；刘浩；戴卫平 刊期： 2004年第10期
细胞凋亡(apoptosis)是机体在生长发育、细胞分化和病理过程中,细胞接受某种信号或受到某种因素刺激后为了维持内环境稳定而发生的一种由基因决定的自动结束生命的过程.由于细胞凋亡受到严格的程序性调控,所以又称程序性细胞死亡(Programmed cell death,PCD).可是在许多种疾病中,细胞程序性死亡会出现异常,如退行性疾病可能导致细胞过量凋亡(或为细胞过量凋亡的结果),而癌症则好似抑制了细胞死亡而导致细胞过量、失控地增殖.近年来,人们陆续发现一些病毒、细菌、真菌及其代谢产物可以诱导或抑制宿主细胞凋亡.本文对大肠杆菌感染与细胞凋亡的关系进行综述,以更好地理解大肠杆菌的致病机制,为治疗和预防提供新思路.
作者：闻晓波；崔玉东；朴范泽 刊期： 2004年第10期
目的比较红霉素、阿奇霉素、磺胺嘧啶和大蒜素体外抗弓形虫的效果.方法用弓形虫RH株速殖子感染培养在盖玻片上的人包皮成纤维细胞(HFF),每一种药物设立2～3个浓度,分别在速殖子侵入细胞前和侵入细胞后作用于虫体,每隔1hr在倒置显微镜下观察细胞、弓形虫的形态及生长情况,3d后经吉氏染色,镜下观察,并将培养液注入小鼠腹腔,观察发病情况.结果红霉素的浓度在100μg/mL和150μg/mL时可抑制弓形虫的生长与繁殖,与剂量大小相关.阿奇霉素的浓度在20μg/mL 时具有致虫体死亡的作用,＞40μg/mL 时对HFF有明显的毒性,其对弓形虫的作用效果与剂量大小相关.没有观察到100μg/mL、200μg/mL的磺胺嘧啶和20μg/mL、40μg/mL的大蒜素对弓形虫生长繁殖的抑制作用.结论红霉素在浓度大于100μg/mL时,可抑制弓形虫生长繁殖.阿奇霉素具有明显的杀灭速殖子的作用,但对细胞的毒性较大.磺胺嘧啶、大蒜素对弓形虫的生长抑制作用弱或无.
作者：许丽芳；杨秋林；沈元琼；王北冰；曾桥；梁瑜；张愉快；伍和平 刊期： 2004年第10期
目的在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌(简称Hp)HspA-UreB融合蛋白,并探索其免疫反应性,为Hp基因工程疫苗的研制奠定基础.方法用PCR方法扩增郑州分离Hp菌株MEL-HP27的hspA 和ureB基因,分别克隆入pNEB193中.测序后,回收两种基因片段,并以hspA-ureB的顺序连接插入原核表达载体pMAL-C2x进行融合表达.采用蛋白印迹法对表达产物进行鉴定.结果特异PCR法和酶切鉴定证实融合基因hspA-ureB克隆入表达载体中;重组质粒转化大肠杆菌TB1后,经IPTG诱导3h,SDS-PAGE电泳显示在119 kDa处出现一条特异蛋白带,即麦芽糖结合蛋白(MBP)与HspA-UreB的融合表达形式,约占细菌总体蛋白含量的31%;该融合蛋白与Hp免疫小鼠血清和Hp阳性病人血清的Western blot分析结果显示,在119 kDa处出现特异杂交带.结论成功地在大肠杆菌中实现了Hp融合蛋白HspA-UreB的高效表达,并证实其具有良好的免疫反应性.
作者：代丽萍；段广才；范清堂 刊期： 2004年第10期
深部组织的病原菌感染会引起严重的临床症状,对于深部组织病原菌的快速检测鉴定有非常重要的临床意义.常规实验室主要依靠非特异性的革兰染色和耗时较长的培养法.分子生物学方法如荧光原位杂交技术为感染诊断可提供更快更特异的服务[1].将荧光原位杂交技术用于深部组织的病原菌感染诊断有两个优点:1.可确认标本中有无病原菌.2.无须培养,能直接对标本中的病原菌进行快速鉴定.这里我们报告3例临床病例.荧光原位杂交法的方法见[2].
作者：王沛；邬家平；何永贵；Welling GW 刊期： 2004年第10期
探讨Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原在形成肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁中的作用及其临床意义.采用免疫组织化学方法检测Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原在40例肝包虫囊肿周围纤维囊壁中表达.Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原在肝包虫囊肿周围纤维囊壁中出现特异性分层表达.靠近虫体侧纤维囊壁中,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原的表达阳性率分别为50.0%、37.5%和40.0%.靠近肝实质侧纤维囊壁中,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原的表达阳性率分别为87.5%、82.5%和85.0%.Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原在两层中表达的差异均有显著意义(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.01).肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁分层,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原与肝实质侧纤维囊壁的形成有密切关系.
作者：吴向未；陈雪玲；彭心宇；张示杰；牛建华；孙红 刊期： 2004年第10期
目的探讨胃肠引流液中幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的检出率及患者VitC水平.方法用PCR技术、细菌培养、快速尿素酶试验检测胃肠引流液中的Hp,用反相液相色谱法检测患者胃肠引流液及血浆中VitC含量.结果 282例患者胃肠引流液中Hp检出率为41.1%(116/282),PCR、细菌培养及快速尿素酶试验阳性率分别为42.9%(121/282)、11.3%(32/282)、41.1%(116/282).胃溃疡、十二指肠溃疡、复合溃疡、胃癌、急性肠梗阻、急性胆囊炎及门静脉高压合并食管胃底静脉曲张患者Hp检出率分别为54.6% (30/55)、52.2% (24/46)、58.3% (7/12)、48.2% (27/56)、22.2% (8/36)、27.6% (16/58)、21.1% (4/19),差异具显著性(P＜0.01).胃溃疡、十二指肠溃疡、复合溃疡、胃癌Hp阳性患者与Hp阴性患者血浆及胃肠引流液VitC浓度相比,差异均具有显著性(P＜0.01).结论胃肠引流液中可检出Hp,且能分离培养出活菌;PCR技术是一种敏感、有效的检测胃引流液中Hp的方法.Hp感染人体后引起胃肠引流液及血浆中VitC含量的减少,可能与胃十二指肠疾病的发生有关.
作者：汪雪峰；王克霞；李朝品 刊期： 2004年第10期
中国人兽共患病学报杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国微生物学会
