辛晓芳;秦进才;薄淑英
目的建立以查菲埃立克体P28融合蛋白为抗原的诊断犬埃立克体感染的免疫印迹.方法诱导PinPointTMXa-3/P28重组质粒在E coli细胞内高效表达查菲埃立克体P28融合蛋白,以该重组蛋白作抗原与犬血清行免疫印迹.结果 P28融合蛋白与已知的3份犬埃立克体感染血清呈阳性反应,与正常犬血清反应为阴性,在165份来自犬埃立克体病疫区的待检犬血清中有43份(26%)与P28反应阳性.结论查菲埃立克体P28融合蛋白可作为犬埃立克体感染的特异性诊断抗原,以其建立的免疫印迹可用于犬埃立克体病的诊断.
作者:蹇锐;温博海;方玉强;潘华;刘世忠 刊期: 2001年第06期
目的分析我国大鼠源卡氏肺孢子虫的基因序列特征.方法以Wistar大鼠建立肺孢子虫肺炎动物模型,收集鼠肺,抽提DNA,以PCR方法扩增卡氏肺孢子虫的5S rRNA基因、线粒体rRNA大亚基基因(mtLSU rRNA)、胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因(TS).纯化扩增产物,直接测序.检索基因库(GenBank),进行序列比较.结果三个基因的PCR扩增呈阳性.感染Wistar大鼠的卡氏肺孢子虫5S rRNA基因与gb|S78185|S78185、gb|M28193|PMCRAA两个序列同源性分别为93.3%和91.7%;mtLSU rRNA基因与gb|U20173|PCU20173 、gb|U20169|PCU20169 两个序列同源性分别为76.2%和55.2%;TS基因与gb|M25415|PMCTHYSY、gb|S77510|S77510两个序列同源性均为90.9%.结论 Wistar大鼠感染的卡氏肺孢子虫的三个基因与GenBank内的相应基因序列同源性较高.
作者:叶彬;陈雅棠 刊期: 2001年第06期
目的为深入研究阿尔泰山林区莱姆病伯氏疏螺旋体致病之病理特征.方法采用从当地林区媒介分离到的螺旋体接种于20d龄的实验小鼠腹腔和皮下,于接种后30d、60d、90d分别处死实验鼠,取肝脏做病理切片,HE染色,光镜下观察.结果肝组织切片,实验鼠9张(只),对照鼠3张(只),光镜下7只实验鼠肝组织呈散在嗜酸性变,肝细胞核固缩,胞浆红染,肝细胞浊肿,散在肝细胞坏死,淋巴细胞浸润于静脉血管周围.结论小白鼠感染伯氏螺旋体后可导致肝细胞损害,致肝细胞坏死改变.
作者:华满堂;金兆清;陈大仓;陆红斌;刘长林;吴庆军 刊期: 2001年第06期
肺炎支原体(Mp)肺炎是小儿呼吸道感染的主要病原之一,占所有肺炎总数的10%~30%[1],鉴于近年来其发病率有明显增加趋势,故将我院我科住院及门诊2000年2月至2001年8月共收治的Mp肺炎98例分析报告如下.
作者:李健;华雪玲;陈征;郑浩 刊期: 2001年第06期
伤寒、副伤寒以外的沙门菌感染在老年人中少见.为了解老年人沙门菌肠炎的临床特点,将我院1990年以来收治的患者进行临床小结.
作者:王晓峰;张文瑾;李景云 刊期: 2001年第06期
近期美国遭遇炭疽袭,引发恐慌,恐怖组织欲利用生物武器,由来已久.
作者:杨婷婷;施强 刊期: 2001年第06期
构建弓形虫速殖子表面抗原蛋白SAG1的真核表达载体,直接注入小鼠骨骼肌,观察该基因的表达程度和表达定位,研究利用骨骼肌异源表达SAG1,探讨发展一种简易、有效和安全的基因免疫途径的可能性.免疫组化结果显示,直接肌肉注射重组真核表达载体pcDAN3-SAG1可使SAG1在免疫小鼠骨骼肌中表达,并分泌到肌间隙.
作者:陈海峰;陈观今;王又红;郑焕钦;郭虹 刊期: 2001年第06期
弓形虫病是一种人兽共患的寄生性原虫病.人类感染弓形虫后常常无明显临床症状,多呈隐性感染状态.当机体免疫功能低下或有免疫缺陷时可引起急性发作.弓形虫与优生优育有着密切的关系,当孕妇感染弓形虫后,无论有无临床症状,都会直接影响胎儿的发育,可导致孕妇异常妊娠,流产、早产、胎儿畸型与死亡[1].因此,弓形虫病在临床上越来越受到重视,弓形虫病的免疫诊断试剂盒也就应运而生.然而,目前市场上弓形虫病的各种诊断试剂盒质量参差不齐,既无统一标准,又在无序生产与使用,给弓形虫病的诊断与防治造成严重危害[2].为了解国内外弓形虫病诊断试剂盒质量及其质量标准.我们抽查国内外6个厂商生产的10种弓形虫IgG抗体和IgM抗体诊断试剂盒,采用弓形虫国际标准血清进行质量比较.
作者:辛晓芳;秦进才;薄淑英 刊期: 2001年第06期
钩端螺旋体(下称钩体)病是湖北省重点流行的传染病,从1960年报告钩体病人以来,至1999年累计发病15万余例,病死2 000余例,其发病率和病死率均居法定报告传染病前10位.为了控制钩体病流行,掌握钩体病流行规律,我们从1990年开始,按照全国钩体病监测方案要求,在长江流域一带选择了仙桃、宜都、新州等市钩体病流行较为严重的地区作为钩体病监测点,进行了传染源、血清学等监测,结果报告如下:
作者:程均福;林凤荣;张流波 刊期: 2001年第06期
齿龈内阿米巴(Entamoeba gingivalis,E.g)寄生于人及多种哺乳动物口腔龈沟、牙垢的一种原虫,它是牙周病病原体之一,提高它在口腔的检出率对疾病防治和获取虫体提供研究有一定意义;为了研究需要,培养大量的虫体能否成功与培养基的种类、pH、培养温度有关外,亦与细菌有关.我们经多年培养发现,在改良的LES培养基液面若有一层菌膜形成,就可能有E.g生长,否则就少虫或无虫生长,哪些细菌能促进E.g生长、繁殖?国内未见报道,国外仅Gannon等报道小肠结肠炎耶尔森氏菌有促进E.g生长作用,为此,进行E.g培养成功率与口腔共生菌的关系研究.
作者:刘光英;陈金富;温旺荣 刊期: 2001年第06期
目的运用表达序列标签(Expressed Sequence Tag,EST)技术快速、经济地发现日本血吸虫(中国大陆株)新基因.方法随机挑取日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA文库单个重组克隆进行部分测序以获得EST,获得的EST通过BLAST程序同EMBL寄生虫数据库和GenBank数据库进行比较及同源性分析.结果本研究共随机挑取日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA 文库单个重组克隆200个,获得了76个有EST价值的序列,其中7.9%为日本血吸虫已知序列,5.3%为日本血吸虫同源序列.曼氏血吸虫或其他生物的同源序列占有EST价值的序列的22.4%,未知序列占59.2% .在获得的76个有EST价值的序列中,66个成功在GenBank dbEST中登录.通过同源性分析,发现了一些令人感兴趣的基因.结论 EST方法有助于快速、经济地发现日本血吸虫(中国大陆株)成虫新基因.
作者:卞国武;余新炳;吴忠道;徐劲;单志新;马长玲 刊期: 2001年第06期
目的观察一氧化氮(NO)供体亚硝基铁氰化钠(SNP)处理的弓形虫速殖子的超微结构特征.方法应用透射电镜观察SNP处理的速殖子的超微结构.结果发现SNP处理的速殖子大部分具有凋亡的典型形态学特征:核染色质凝集,核固缩,核碎裂,凋亡小体形成(个别速殖子形态表现为胀亡细胞、溶解性坏死细胞和坏死型凋亡细胞特征).结论从形态学上证明NO供体SNP可诱导弓形虫速殖子凋亡及坏死.
作者:林京;胡建石;林建银 刊期: 2001年第06期
目的建立酵母菌快速鉴定新方法.方法依据双歧鉴定法和层次分析原理建立了双歧层次分析法(DHPA),用DHPA法及API 20C AUX试条鉴定酵母菌.结果 DHPA法和API法对酵母菌43个KIU鉴定的正确性均为100%.DHPA法与API法对酵母菌2 238个试验代码分析的总符合率为77.3%,对256株临床酵母菌的鉴定符合率为81.3%.在48株两种方法鉴定不符合的菌株中,有8株为API法缺码,占鉴定不符合菌株的16.7%,而DHPA法则无缺码现象.结论 DHPA法解决了API法存在的的缺码或不能鉴定问题,是酵母菌准确、快速、简便、经济和实用的鉴定方法.
作者:何林;李芳芳;吴劲松;卢月梅;梁训宏;杨发达 刊期: 2001年第06期
目的在大肠杆菌中表达并纯化流行性乙型脑炎病毒NS5蛋白,为进一步研究乙脑病毒NS5蛋白的结构与功能奠定基础.方法根据乙脑病毒NS5蛋白的基因序列,设计两对PCR引物,采用RT-PCR法分别扩增乙脑病毒JaOH0566株部分及全长NS5基因.将扩增产物分别克隆到表达载体pQE30.筛选重组质粒,转化大肠杆菌表达重组蛋白.重组蛋白经金属柱亲和层析纯化.结果与结论获得了含部分及全长乙脑病毒NS5基因的重组质粒,重组质粒经限制性酶双酶切、DNA序列分析及PCR扩增筛选证实.在大肠杆菌中表达出了带6个组氨酸头的部分及全长的重组乙脑病毒NS5蛋白.经SDS-PAGE及Western-blot分析证实表达蛋白确实是重组乙脑病毒NS5蛋白.
作者:余福勋;何家荣;长谷部太;五十岚章 刊期: 2001年第06期
疯牛病(Mad cow disease)是个俗名,科学名称是牛海绵状脑病(Bovine spongiform encephalopathy),此传染病的病原是一种蛋白质,称为朊粒(prion),许多人称朊粒是朊病毒,因为过去认为是病毒,但又不能证明是那种的DNA或RNA病毒,故列为未分类病毒项下.现已明确,它是一种致病的能传染的蛋白质,不是病毒.朊粒有两种,正常动物的朊粒(PrPc或PrP-sen)及致病性朊粒(PrPsc或PrP-res),引起疯牛病的朊粒称PrPBSE.
作者:廖延雄 刊期: 2001年第06期
目的测定恶性疟原虫(P.f)海南株CTP基因序列,了解该虫株CTP基因序列与其它种类的CTP基因序列的差异,用于药物靶位的筛选.方法用PCR的方法特异性的扩增CTP基因,并将此基因克隆于测序载体pUC19,采用Sanger双脱氧链末端终止法测序.结果我国海南株的CTP基因序列与其它的CTP基因有不同程度的差异.结论 P.f CTP作为潜在的抗疟药物靶值得进一步深入研究.
作者:陈慧红;余新炳;吴忠道;陆家海;徐劲 刊期: 2001年第06期
依据传统计数方法,毛毕吸虫尾蚴在光亮处以腹吸盘牢固地吸壁、吸底,吸管吸取耗时费力,且反复吸取极易造成虫尾部折断死亡.采用日本血吸虫尾蚴收集方法,用解剖针挑取尾蚴,效果也不理想,后依据尾蚴的趋光性及其遮光后离壁又自由运动的特性,试用了滴瓶遮光法,既易于收集大量完整的尾蚴,又便于计数和感染雏鸭.
作者:盛似春 刊期: 2001年第06期
目的构建恙虫病东方体sta56基因的重组表达质粒,并在E.coli中表达Sta56重组抗原.方法从恙虫病东方体Karp株基因组中扩增出sta56基因的ORF及其中长1 053bp的大片段,用TA克隆技术将此大片段克隆,并以重组质粒为模板,扩增编码Sta56抗原亲水氨基酸区的一段长342bp的DNA,插入pProEX HTb载体,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western blot进行分析.结果从恙虫病东方体基因组中扩增出sta56基因的ORF,以截短片段构建了重组表达质粒pHTbOt342,SDS-PAGE显示蛋白表达带的分子量约为15.4kDa,Western blot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别.结论在大肠杆菌中表达的Sta56重组蛋白具有免疫反应性.
作者:邓艳琴;严延生;何似;翁育伟;陈亮 刊期: 2001年第06期
探讨弓形虫感染与新生儿先天畸形的关系,有着十分重要的临床意义和现实意义.乌鲁木齐市是个以汉、维为主的多民族聚居区,有关这方面的报道资料很少.为了解本市不同民族、不同职业孕妇弓形虫感染状况,为有效地防治本病提供科学依据,进行了本次调查,结果如下.
作者:白润苓;赵尔民 刊期: 2001年第06期
猪颚口线虫病的临床症状是病猪经常呕吐、食欲减退、消瘦和体重减轻,早期血检嗜酸性细胞增高.本病的主要致病器官是胃和肝脏.胃的主要病变是胃底布满虫洞、粘膜增厚、发炎和溃疡.肝的病变是结缔组织增生、虫道出血、肝细胞索紊乱、肝细胞脂肪变性、萎缩和坏死.文中讨论了幼虫在体内的移行途径和本病的防治问题.
作者:陈美;陈清泉;叶向群;林秀敏 刊期: 2001年第06期