柳鹏;赵庆杰
目的推导并验证适合CRW定向系统靶点计算的计算机应用程序.方法根据CRW定向仪的定位原理,将靶点与定位架中点坐标的换算关系编制成计算机应用程序,应用计算机程序代替屏幕测量法计算靶点坐标,并将计算结果与屏幕测量法的计算结果进行对比,判定计算机辅助算法的准确性.结果与屏幕测量法经统计学对比分析,说明改进算法计算靶点坐标准确,且节省时间;分析得出计算机辅助算法较屏幕测量法计算误差更小.结论屏幕测量法坐标计算过程繁琐,易受人为因素影响导致误差加大,且耗时较长;计算机辅助算法简便实用、计算准确.
作者:王晓峰;林志国;康雪晨;张晶;栾彧 刊期: 2004年第01期
基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类.哺乳动物细胞的表达系统能识别和除去外源基因中的内含子,剪接加工成熟的mRNA,易被重组的DNA质粒转染,具有遗传的稳定性和可重复性,并且蛋白产品提纯工艺简单、成本低,应用前景广泛.稳定表达是指导入基因已被整合入受体细胞的基因组中,从而能长期进行表达,对这类表达的检测,需借助筛选标记才能测知.在表达蛋白的基因中共表达一选择标记基因,在选择压力下进行共扩增[1],能使外源基因达到较高的拷贝数.其中有效的种表达扩增体系是二氢叶酸还原酶(DHFR)扩增系统.本文将对这一系统做一综述.
作者:张玉石;高治忠;陈照彦 刊期: 2004年第01期
目的研究纳洛酮对脑缺血大鼠皮层体感诱发电位(SEP)和Ca2+-ATP酶活性的影响,探讨纳洛酮对急性脑缺血损伤的脑保护作用机制.方法在大鼠大脑中动脉栓塞动物模型基础上,侧脑室注射不同剂量纳洛酮,以皮层SEP和Ca2+-ATP酶活性为指标,观察纳洛酮对脑缺血的作用.结果脑缺血后,皮层SEP主波消失,Ca2+-ATP酶活性显著降低(P<0.001),纳洛酮可在一定程度上恢复SEP(P<0.01),并使Ca2+-ATP酶活性升高(P<0.01).结论纳洛酮对大鼠急性脑缺血损伤有一定的保护作用.
作者:曲丽辉;李玉荣;贾淑伟;田淑君;祖英秋;张颖;邹向晖 刊期: 2004年第01期
目的体外培养大鼠骨髓间充质干细胞并向软骨细胞表型分化,探讨其作为组织工程软骨种子细胞的可行性.方法取成年大鼠股骨骨髓,体外培养、纯化.取第三代成年大鼠骨髓间充质干细胞,实验组用HG-DMEM无血清培养液诱导;对照组用含10%胎牛血清的HG-DMEM培养液自然分化.形态学观察,免疫组化检测Ⅱ型胶原分泌.结果大鼠骨髓间充质干细胞为均一的成纤维细胞样.实验组与对照组Ⅱ型胶原免疫组化阳性率有显著差异(P<0.01).结论成年大鼠骨髓间充质干细胞在特定的培养基能向软骨细胞方向转化,作为软骨组织工程种子细胞具有可行性.
作者:李冬梅;金连弘;张宇;李呼伦;刘慧雯;张宝东 刊期: 2004年第01期
目的评价血清肌钙蛋白T(cTnT)定量测定对心肌微小损伤患者的诊断价值.方法对30例健康对照者,20例心肌炎患者,240例疑似心肌炎患者,39例射频消融术(RFCA)后患者,分别进行血清cTnT及CKMB测定.结果 20例心肌炎患者中,有5例CKMB超过参考值,占25%,cTnT超过参考值的有15例,占75%,cTnT升高的百分数与CKMB升高的百分数比有显著差异(P<0.05);39例接受RFCA患者术前及术后12h内cTnT有显著性差异(P<0.05),CKMB无显著性差异(P>0.05).结论 cTnT是反映心肌细胞微小损伤的灵敏和特异的指标,其升高为诊断病毒性心肌炎等心肌微小损伤患者的诊断提供可靠依据.
作者:冯磊光;曹鸿雁;马学华;周秀荣 刊期: 2004年第01期
脂质代谢异常是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的重要慢性并发症,脂质紊乱作为一种危险因子与糖尿病肾病(diabetes nephrapathy,DN)的发生、发展有密切关系.本文采用病例对照研究的方法,观察2型DM和DN患者主要血脂异常变化情况.
作者:阮颖新;李淑英;陈云波;刘素雁 刊期: 2004年第01期
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对C57BL/6小鼠肺癌的抑制作用.方法制作C57BL/6小鼠皮下肺癌模型30只,分为VEGF反义寡核苷酸(ASODN)治疗组、VEGF正义寡核苷酸(SODN)治疗组及对照组.接种Lewis肺癌细胞后24h内,用ASODN及SODN皮下注射治疗,对照组只注射生理盐水,观察小鼠肿瘤的生长情况以及组织形态学改变.标本常规石蜡切片,HE染色.结果对照组、VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组平均瘤重分别为(7.83±0.78)g、(4.49±0.43)g和(7.73±0.69)g.VEGF反义寡核苷酸治疗组、VEGF正义寡核苷酸治疗组抑瘤率分别为42.7%、5.9%.结论原位注射VEGF反义寡核苷酸能抑制小鼠肺癌生长.
作者:王颖;李春艳;林春艳;鲁平 刊期: 2004年第01期
目的探讨腔镜甲状腺切除术的方法及效果.方法 2002年11月~2003年3月间采用经胸部皮下入路的腔镜甲状腺切除术治疗结节性甲状腺肿6例.结果 6例均成功施行了腔镜下甲状腺切除术,平均手术时间120min,术后住院时间为3~7天,平均4天,术中无神经、血管损伤或误伤甲状旁腺等并发症.结论腔镜甲状腺切除术治疗结节性甲状腺肿安全、可行,且具有美容效果,是目前治疗结节性甲状腺肿的理想术式,值得临床推广应用.
作者:许军;孙备;周尊强;黄大伟 刊期: 2004年第01期
目的克隆抗原处理相关转运体亚基TAP2基因片段并构建真核表达载体.方法从EB病毒刺激的人B淋巴母细胞系(B-LCL)中提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出TAP2 cDNA.将TAP2 cDNA插入表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建重组表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO-TAP2,并进行测序分析.结果经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人TAP2 cDNA.结论获得了人TAP2 cDNA并构建了重组真核表达载体,对TAP2基因产物在体外表达、进一步研究TAP2分子在肿瘤基因治疗方面的作用具有重要的意义.
作者:王兰;李殿俊;吕雪莹;杨秋霞;刘玉 刊期: 2004年第01期
分泌性中耳炎(otitis media effusion,OME)是一种常见耳部疾病,在儿童中发病率尤高,长时间发病可引起粘连性中耳炎,引起听力损失,尤其是儿童可造成语言智力发育迟缓.近几十年来,人们一直在探索OME的病因及治疗方法.尽管目前所知OME的病因很多,如感染、局部免疫学条件和咽鼓管功能障碍等,但咽鼓管功能障碍在其发生过程中具有重要作用,越来越被人们所重视.咽鼓管障碍主要表现为不能自主开放的管道顺应性异常,影响中耳通气和清除功能,咽鼓管黏膜表面张力对管道顺应性有很重要的作用.研究表明咽鼓管(eustachian tube,ET)自身分泌的表面活性物质通过改变黏膜表面张力进而改善管道的顺应性,故ET表面活性物质在OME发病机理中愈加受人重视.现将有关方面研究进展简要综述如下.
作者:侯昭晖;肖玉丽;徐秀玉 刊期: 2004年第01期
目的确定重组血红素加氧酶-2在大肠杆菌中表达与纯化方法.方法将已构建的血红素加氧酶-2(HO-2)的重组质粒pMW172a/HO-2转入大肠杆菌BL-21,分析不同温度及摇床转速对HO-2表达的影响,确定可溶性表达佳条件.使用超声波、超速离心、分级盐析、分子筛层析等方法纯化HO-2.检测酶活性.结果确定了HO-2可溶性表达佳条件为37℃,(85±5)r/min;确定了HO-2具体纯化路线.得到蛋白纯度为95.0%,纯化倍数为2.9倍,收得率为40.9%的活性HO-2蛋白.结论获得了纯度高、具有活性的HO-2蛋白,为进一步进行HO-2结构与功能之间关系的研究提供了可行的纯化路线.
作者:滕悦秋;王秀宏;赵炜明;王志刚;刘明;周虹 刊期: 2004年第01期
目的对6只充血性心力衰竭犬模型行心脏减容手术减小左心室容积,观察缓解心力衰竭的疗效.方法 6只犬均行右心室快速起搏建立充血性心力衰竭模型,4周后检查及血液动力学指标测定确认模型合格.在非体外循环下施行左心室折叠术以减小左室容积,术中行血液动力学监测,以及经食管内超声心动指导并确认减容程度.结果除1例术中死亡无法完成监测全部指标外,其余指标均提示心功明显改善.中心静脉压、平均肺动脉压、肺楔压、左室舒张末压、左室收缩压明显降低.左室收缩末期内径、左室舒张末期内径均减少.心输出量、射血分数显著提高.结论非体外循环心脏减容术是一种新的、有效的治疗终末期扩张型心肌病的外科手术方法.近期效果满意,但远期效果尚有待于进一步观察.
作者:颜峻;席振山 刊期: 2004年第01期
目的克隆TAP1(抗原处理相关转运1)基因cDNA序列,构建其真核表达载体pcDNA3.1/V5-His TOPO TA-TAP1.方法从人类B-LCL细胞中提取总RNA,以RT-PCR技术扩增TAP1基因片段,将该段基因克隆到表达载体pcDNA3.1/V5-His TOPO TA上测序.结果通过RT-PCR扩增获得1个2 593bp的DNA片段,测序分析表明为TAP1基因.结论通过RT-PCR等技术成功克隆出人类TAP1基因并成功构建了表达载体pcDNA3.1/V5-His TOPO TA-TAP1.
作者:刘玉;李殿俊;吕雪莹;杨秋霞;王兰 刊期: 2004年第01期
目的探讨IL-15在支气管哮喘发病机制中的作用.方法收集20例哮喘急性发作患者、20例缓解期患者、20例健康人的血清,采用ELISA测定IL-15和IgE的含量;采外周血按常规做嗜酸性粒细胞(EOS)计数.结果急性发作期患者血清IL-15水平明显高于缓解期及正常对照组(P<0.05),发作期IL-15水平与EOS计数呈正相关(r=0.696,P<0.01),与IgE水平呈正相关(r=0.593,P<0.01).结论 IL-15参与了哮喘的发病过程,其机制可能是通过抑制EOS凋亡、提高IgE水平参与哮喘的变应性炎症.
作者:高巍;韩守信;陈复辉;吴晓梅 刊期: 2004年第01期
目的观察腺苷A1受体激动剂2-氯化腺苷(2-CAdo)对马桑内酯致痫大鼠海马神经细胞bcl-2,Bax基因表达的影响.方法采用马桑内酯诱导癫痫发作模型,通过免疫组织化学方法检测bcl-2,Bax蛋白来观察大鼠海马CA1区神经细胞凋亡的动态变化及2-CAdo对其的影响.结果海马CA1区癫痫发作后24h bcl-2表达量增多,48h明显下降,72h仅有少量表达,7天时其表达量再度升高.而Bax表达则在癫痫发作24h开始增多,48h显著增多,72h表达达高峰,之后逐渐减少,7天表达量少.给予2-CAdo组各相应时间点bcl-2表达量较对照组明显增高(P<0.05),Bax表达量较对照组明显减少(P<0.05),经统计学处理均有显著性差异.结论 2-CAdo减少癫痫发作后海马神经细胞的凋亡,对神经细胞有保护作用.
作者:吴春燕;胡孟英;张爱启 刊期: 2004年第01期
目的通过对低温冻存的同种异体半月板和半月板脱细胞基质移植效果的比较,寻找更好的同种异体半月板的保存方法.方法取成年大耳白兔64只,按照体重配成32对,分别作为供体动物和受体动物.取出供体动物的双膝内侧半月板,将右侧的冻存(-80℃),左侧半月板制成脱细胞基质冻存.将供体半月板移植到对应受体动物的膝关节中,术后4、8、12和16周分批取材进行大体、影像学、组织学观察.结果实验侧(左)的半月板较对照侧(右)萎缩程度轻、速度慢,对照侧膝关节退变较实验侧明显,实验侧的组织结构明显优于对照侧.结论兔半月板脱细胞基质移植效果优于低温冻存的半月板移植,半月板脱细胞基质可以作为同种异体半月板供体保存方法.
作者:邵林;王新亮;魏劲松;郝晨光;刘建宇 刊期: 2004年第01期
目的探讨哮喘大鼠气道重塑与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的关系以及地塞米松的干预作用.方法建立大鼠哮喘模型,采用免疫组化技术结合计算机病理图像分析系统,测定3组大鼠气道形态学参数及支气管上皮细胞MMP-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的相对含量.结果哮喘组支气管总管壁厚度和平滑肌厚度明显高于对照组(P<0.01)和地塞米松组(P分别<0.05,<0.01);哮喘组MMP-9、TIMP-1在气道黏膜上皮的表达量明显高于对照组(P<0.01)和地塞米松组(P分别<0.01,<0.05);哮喘组MMP-9/TIMP-1比例失衡.结论吸入地塞米松可抑制气道壁和平滑肌厚度的增加;MMP-9过度表达、MMP-9/TIMP-1比例失衡在哮喘气道重塑发生机制中发挥重要作用;地塞米松可能通过下调MMP-9的表达,调节MMP-9/TIMP-1之间的平衡,干预气道重塑.
作者:邓立力;邵玉霞;杨敏 刊期: 2004年第01期
目的探讨软脂酸(PA)引起血管内皮细胞损伤的机制. 方法选择13种可能阻断PA引起血管内皮细胞损伤作用的物质,与PA共同培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用MTT比色法测定HUVEC在不同条件下的存活率.结果①一氧化氮合酶阻断剂(-N-硝基L-精氨酸,L-NNA)能部分阻断PA引起血管内皮细胞死亡[15μmol/L L-NNA+200μmol/L PA组与200μm/L PA单独作用组比较细胞生存率增加了43.5%,两者差异显著(P<0.01)].②一氧化氮供体(硝普钠, SNAP)可加重细胞死亡[5μmol/L SNAP+200μmol/L PA组细胞生存率较200μmol/L PA单独作用组减少了32.5%, 两者差异显著(P<0.01)].④ Ca2+阻断剂、Ca2+通道拮抗剂、PPARr激动剂、PKC阻断剂、PKA抑制剂、神经酰胺(CER)阻断剂、抑制K内流的异黄酮、前列腺素(PGE)、Vit E、抑制蛋白合成的ML-7均未能阻断PA诱导的细胞死亡.结论过量的NO生成与软脂酸引起的血管内皮细胞损伤有关.Ca2+、PKC、PKA、CER、PPARr、PGE均未参与软脂酸引起的血管内皮细胞死亡过程.
作者:詹晓蓉;母义明;肖彧君 刊期: 2004年第01期
目的探讨抗Ia抗体对移植皮片存活期的影响.方法用A.TL鼠(H-2k)皮肤及淋巴细胞免疫A.TH鼠(H-2S),取脾细胞与骨髓瘤细胞(P3U1)融合后,经HAT培养基选择性培养,得到杂交瘤细胞,用补体依赖的细胞毒试验检测上清中的抗体与人B细胞反应的活性,阳性孔细胞以有限稀释法进行克隆化,得到抗Ia单克隆抗体,预先将抗Ia抗体注入异基因皮肤移植的受体小鼠腹腔后,观察移植皮片存活期.结果实验组皮肤移植物存活期与对照组相比明显延长(P<0.01).结论抗Ia单克隆抗体能延长异基因移植皮片存活期.
作者:逯晓辉;张凤蕴;筱原信贤;刘晨;王丽群 刊期: 2004年第01期
目的观察病变侧亚低温(32~33℃)对局灶脑缺血再灌注后星形胶质细胞活性和组织病理变化的影响.方法采用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,将雄性Wistar大鼠随机分为缺血常温组、亚低温组和假手术组.根据缺血时间不同,每组又分为缺血3h和12h.缺血30min后应用反馈控温半导体制冷块对大鼠病变侧给予亚低温治疗,并持续至再灌期.采用免疫组织化学方法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达及HE染色观察组织病理变化.结果缺血常温组GFAP阳性细胞数量增多,突体粗大,胞体肿胀;亚低温组GFAP表达数量明显减少.结论病变侧亚低温能明显抑制脑缺血后星形胶质细胞反应性增生和肥大,并能减轻组织损伤程度.
作者:李宗敏;赵瑞波;张玉华;赵刚 刊期: 2004年第01期