王振光;孙善珍;施琳;王东关
目的:探讨胃癌组织中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响.方法:应用免疫组化法检测P-gp及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性.结果:在48例胃癌中,P-gp及MRP阳性率分别为41.7%、29.2%,共同表达率为25.0%.癌旁组织与癌组织的P-gp、MRP阳性表达率无显著差异.在顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、鬼臼乙叉甙(VP-16)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、羟基喜树碱(HCPT)、甲氨蝶呤(MTX)中,ADM、VP-16、HCPT耐药组P-gp、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高.结论:胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药.P-gp、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素.
作者:许洪伟;丛衍群;王万忠;姜军梅;秦成坤;秦成勇 刊期: 2005年第07期
目的:观察偏头痛患者颅内动脉血流动力学和血浆内皮素-1(ET-1)含量的变化,探讨二者在偏头痛发病中的作用.方法:选择偏头痛患者(病例组)95例,其中66例行经颅多普勒超声(TCD)检查及CO2试验,82例测血浆ET-1,53例同时行TCD及血浆ET-1检查.选择60例健康人作对照(对照组),均行TCD检查及CO2试验,并测血浆ET-1.对血浆ET-1和颅内动脉血流动力学参数进行相关性分析.结果:病例组颅内动脉血流速度包括平均血流速度(Vm)、收缩期血流速度(Vs)、舒张期血流速度(Vd)均高于对照组(P均<0.05).过度换气降低体内CO2浓度后,病例组患者颅内动脉血流速度下降,其下降量高于对照组(P均<0.01).病例组血浆ET-1为(80.89±28.70)pg/ml,高于对照组的(6655±14.97)pg/ml(P<0.05).病例组血浆ET-1与颅内动脉Vs呈正相关(r=0.428 2,P<0.01).结论:偏头痛患者颅内动脉血流速度、CO2反应性及血浆ET-1含量增高.颅内动脉血流动力学变化及血浆ET-1含量增高均与偏头痛的发病有关.
作者:崔才三;郭春妮;韩丹春;初秀瑜 刊期: 2005年第07期
目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)的99Tcm-MIBI显像特点及临床应用价值.方法:正常对照组12例,病例组MM患者42例(Ⅰ期12例,Ⅱ期22例,Ⅲ期8例),其中初诊37例,复发5例.注射99Tcm-MIBI(555MBq)后10 min进行全身成像,根据图像特点可分为4种表现类型,即N型、D型、F型和F+D型,依据显像的范围(E)和程度(I)对图像进行半定量计分,并分析其与临床血液学指标的相关性.结果:不同临床分期患者的图像表现形式和半定量计分均有显著差异.若以99Tcm-MIBI显像阳性(F、F+D型或D型并S>2)作为多发性骨髓瘤处于活动期的判断标准,其诊断准确性为100%,且图像计分与血液中M蛋白含量和骨髓中浆细胞含量呈正相关,而与外周血血红蛋白含量呈负相关.结论:在判断MM病灶的活动性及病情评估等方面,99Tcm-MIBI显像是一种简便、有效且可靠的方法.
作者:刘岱;杨付勇;王瑾;吕学民;黄亚丽;董艳;韩建奎 刊期: 2005年第07期
目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)基因治疗对下颌骨缺损修复的促进作用.方法:新西兰大耳白兔30只,平均分为10组,在兔下颌骨体部造成直径5 mm圆形贯通性骨缺损,其中5组将含有人HGF全长cDNA片段的表达型质粒-pUDKH按照每只250μg的剂量直接应用于骨缺损局部,另外5组应用等剂量空质粒pUDK作为对照.于手术后第2、4、6、8、12周分批处死两组动物,拍摄骨缺损区的X线片,并记录X线片的相对骨密度值,比较两组骨缺损愈合的情况.结果:手术后X线片示,HGF组优于对照组.两组间相对骨密度(RBD)差异显著(P<0.05).手术后第2、4周HGF组高于对照组(P<0.05),第6、8、12周两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论:pUDKH对下颌骨缺损的修复具有促进作用,HGF基因治疗有望用于促进骨缺损的修复.
作者:刘少华;魏奉才;哈小琴;刘铖;吴祖泽;刘云生 刊期: 2005年第07期
目的:探讨组织相容性复合体Ⅰ、Ⅱ(MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ)类抗原表达与胃癌发生发展的关系.方法:应用流式细胞仪检测胃癌、癌旁组织、慢性胃炎及正常胃粘膜组织MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原的表达,并结合临床病理进行分析.结果:MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原在胃癌组织的表达分别为26.58±11.21、29.85±10.84,显著低于癌旁组织(72.36±25.59,63.89±18.46)、慢性胃炎(78.51±21.26,66.55±23.24)、胃溃疡(74.88±24.29,61.36±27.71)及正常胃粘膜组织(76.13±16.22,66.32±16.53)(P均<0.01),而癌旁组织、慢性胃炎、胃溃疡及正常组织之间无明显差异(P均>0.05);高、中、低分化胃癌组织MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原表达分别为(40.32±19.56,31.67±14.38)、(29.51±17.16,30.29±13.78)、(10.83±5.51,28.71±11.64),MHC-Ⅰ在各组比较差异显著(P均<0.05),MHC-Ⅱ比较无明显差异(P均>0.05);伴远处淋巴结转移较局部转移和无转移MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原表达明显降低,后二者也有明显差异(P均<0.05);伴肠上皮化生及不典型增生胃粘膜MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原表达较单纯慢性胃炎明显降低(P均<0.05);肠上皮化生较轻、中度不典型增生无明显差异(P>0.05);而重度不典型增生较轻、中度不典型增生及肠上皮化生胃粘膜MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原表达明显降低(P均<0.05).结论:MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ类抗原表达降低在胃癌发生发展中起重要作用.
作者:杨纯珍;程宝泉;上官红;钟宁;樊薇 刊期: 2005年第07期
目的:对健康男性志愿者进行单剂量和多剂量口服奥昔布宁缓释片/胶囊药代动力学的研究,考察缓释制剂达稳态的趋势和程度.方法:18名健康志愿者分别口服试验制剂奥昔布宁缓释片(T1)、缓释胶囊(T2)和参比制剂(R)10 mg,取血浆经去蛋白处理,采用液相-质谱法(LC-MS)测定单剂量和多剂量给药奥昔布宁血浓度,计算各制剂奥昔布宁主要药代动力学参数.结果:单剂量给药奥昔布宁缓释胶囊、缓释片半衰期延长,血药浓度峰值降低,相对于普通片生物利用度F(%)分别为(107.17±10.89)%和(104.52±10.48)%.多剂量给药,奥昔布宁缓释胶囊波动系数明显小于普通片.结论:试验制剂与参比制剂为生物等效制剂.试验制剂具有释放缓慢(达峰时延迟)、波动度小的特点.
作者:吕惠兰;温清;王本杰;郭瑞臣 刊期: 2005年第07期
目的:观察大蒜油对HL-60细胞的诱导分化作用.方法:MTT法检测大蒜油对HL-60细胞的增殖抑制,Giemsa染色观察细胞形态改变,流式细胞术分析细胞周期改变,并检测CD11b、CD15的表达.RT-PCR检测bcl-2、c-myc/mad、mpo基因mRNA的表达.同时设ATRA、As2O3为阳性对照,与大蒜油的作用进行比较分析.结果:大蒜油明显抑制了HL-60细胞增殖,使大部分细胞阻滞于G0/G1期,作用强于ATRA和As2O3:诱导细胞成熟分化的能力与ATRA接近,优于As2O3;通过抑制bcl-2、c-myc和mpo基因的表达,促进mad基因的表达来发挥作用.结论:大蒜油对HL-60细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用,有可能成为新的临床诱导分化剂.
作者:李颢;李大庆;赵川莉;冯进波;张锑;陈学良 刊期: 2005年第07期
目的:评价强的松龙关节上腔注射对山羊颞下颌关节骨关节病的治疗效果.方法:将12只山羊的双侧颞下颌关节上腔一次性注射胶原酶诱导骨关节病变,随机分为对照组和治疗组,每组6只,处死后对标本进行X线、组织学和扫描电镜观察,对治疗组疗效进行评价.结果:在光镜和扫描电镜下观察,对照组髁状突、关节盘、关节凹表现为骨关节病变化,治疗组表现出较对照组更严重的病理变化.结论:强的松龙关节上腔封闭能加重骨关节病的程度.
作者:来庆国;宋代辉;朱莉;金延武;谢坤;崔永新 刊期: 2005年第07期
目的:研究Fas蛋白在口腔黏膜癌变过程中的表达及变化规律.方法:用DMBA诱导的金黄地鼠颊囊癌变模型,采用免疫组化SP法检测在黏膜上皮癌变过程(正常黏膜、单纯增生、轻度增生、中度增生、重度增生与鳞癌)中Fas蛋白的表达.结果:Fas在正常地鼠口腔黏膜中广泛表达,在黏膜癌变过程的不同阶段中Fas表达下调,尤其在鳞癌组织中明显降低(P<0.05),且表达部位由细胞胞膜转向胞浆内.结论:Fas参与口腔黏膜肿瘤癌变过程,对口腔癌的早期诊断及治疗提供研究方向.
作者:王霞;孙善珍;王振光;张晓英;马伯龙 刊期: 2005年第07期
目的:探索新型肿瘤坏死因子(TNF)相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对乙型肝炎病毒(HBV)感染后的免疫监视效应.方法:应用酶联免疫吸咐(ELISA)和噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞术检测52例HBV感染者和24例健康对照者血清中可溶性TRAIL(sTRAIL)的表达,在转染HBV全基因组并稳定表达病毒抗原的HepG2.2.15肝癌细胞系研究TRAIL在γ-干扰素(IFN-γ)的作用下对HepG2.2.15细胞的生长抑制效应和凋亡诱导效应.结果:HBV感染者的外周血sTRAIL的表达量明显高于正常对照组(P<0.001).各组HBV感染者sTRAIL的表达量与丙氨酸氨基转换酶(ALT)的值呈正相关.而细胞学的研究结果显示,在IFN-γ的协同作用下,TRAIL能够显著抑制HepG2.2.15细胞的恶性增殖,并能够显著诱导HBV相关肿瘤细胞发生凋亡.结论:TRAIL是参与到HBV感染后所致疾病中的一个重要的免疫监视分子,TRAIL的作用效应极有可能直接影响疾病的预后与转归.
作者:韩丽辉;孙汶生;贾晓青;张利宁;曹英林;高立芬;朱法良;郭春 刊期: 2005年第07期
目的:探讨脂肪组织源性间充质干细胞体外分离培养的方法并将其向心肌细胞方向诱导分化.方法:无菌条件下获取2月龄SD大鼠腹部肠系膜脂肪组织,0.08%胰酶消化分离出单个核细胞,接种7~10 d后形成单层贴壁长梭形细胞.0.25%胰酶消化传代,第3代细胞用于鉴定细胞表面分子及诱导分化.浓度为10 μmol/L 5-氮胞苷与分离细胞共同培养24 h,3周后应用抗desmin及抗α-actnin抗体对诱导细胞进行免疫化学鉴定.结果:所分离细胞约90%表达间充质干细胞表面抗原CD13、CD44.5-氮胞苷诱导后3周,所培养的细胞形成desmin及α-actnin染色阳性的心肌细胞团.结论:体外通过消化法可从脂肪组织中分离出大量间充质干细胞,这些细胞经5-氮胞苷诱导后分化为心肌细胞.
作者:王燕;陈光辉;邵建华;田新利 刊期: 2005年第07期
目的:探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对缺氧/复氧培养大鼠心肌细胞损伤后MDA、IL-1β和TNF-α的影响.方法:将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为对照组、模型组和GSH组,GSH组缺氧、复氧前均给予160 mg/L浓度GSH,缺氧2 h,复氧1 h.复氧1 h后,用比色法检测丙二醛(MDA)含量,用RT-PCR法检测细胞内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA水平.结果:与对照组相比,模型组MDA水平、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达显著升高(P<0.01).GSH预处理可以减轻MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的上调(P<0.01 vs模型组).MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达在各组间均呈正相关(P<0.05).结论:在缺氧/复氧损伤的过程中,炎性细胞因子和氧自由基的作用相互联系,还原型谷胱甘肽能清除氧自由基,抑制IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的升高,从而保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞.
作者:赵丽丽;王一彪;赵敬杰;朱晓波;王进 刊期: 2005年第07期
目的:探讨EGF对人舌鳞癌细胞株MMP-3表达的影响及其机制.方法:对体外培养的人舌鳞癌细胞株用重组人表皮生长因子(rhEGF)作为刺激因子,采用半定量RT-PCR和Western Blot方法测定癌细胞中MMP-3mRNA和蛋白含量变化.结果:与未处理组相比,用不同浓度(0.1,1,10 ng/ml)EGF处理舌鳞癌细胞后MMP-3表达随浓度的增加而增加,酪氨酸激酶抑制剂Genistein(10μg/ml)能够抑制EGF对癌细胞MMP-3表达的诱导作用.结论:EGF通过酪氨酸激酶通路诱导口腔癌细胞MMP-3的表达.
作者:施琳;孙善珍;王振光;王东关 刊期: 2005年第07期
目的:探讨重组人白细胞介素18(rhIL-18)对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的影响,为rhIL-18用于临床移植免疫提供理论基础.方法:受体鼠(BALB/c)接受9.0Gy剂量的X-射线照射之后,通过其尾静脉注射供体鼠(C57BL/6)的骨髓细胞和脾细胞,并于移植的-2~+2d腹腔注射rhIL-18.移植后观察受体鼠的临床症状和存活状况,同时检测其肝脏、结肠和耳朵的病理变化.结果:移植后aGVHD期内,用rhIL-18治疗的受体鼠GVHD症状积分较未接受rhIL-18治疗的受体鼠低(P<0.05),肝脏和结肠的病理变化轻(P<0.05),短期存活时间延长(P<0.05),但对长期生存率无明显影响.结论:受体鼠早期接受rhIL-18治疗,可在移植后aGVHD期内降低aGVHD的病变程度,为rhIL-18在临床上预防和治疗aGVHD提供了实验依据.
作者:刘兴田;张利宁;王玉坤;王晓燕;高丽芬;王群;李娜;刘军莉 刊期: 2005年第07期
目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因临床表型与高血压病和颈动脉硬化之间的关系.方法:应用聚合酶链反应结合限制性内切酶法检测AT1R基因的AC基因和C1166等位基因在正常人和高血压病患者中的频率.结果:高血压病患者AT1R基因AC型频率和C1166等位基因频率均明显高于正常对照组(P<0.05~0.01);高血压病患者AC基因型组颈动脉内膜中层厚度(IMT)和IMT/D比率均比AA基因型组明显增高(P<0.05~0.01).相关分析发现,高血压发病与年龄、颈动脉IMT和AT1R基因型呈显著正相关(P<0.05~0.01);AT1R基因型与收缩压、舒张压及颈动脉IMT呈显著正相关(P<0.01~0.001).结论:AT1R基因多态性与高血压的发生、发展有关,AC基因型对颈动脉IMT增厚有重要影响,AT1R基因多态性与高血压病患者颈动脉硬化关系密切.
作者:朱世明;谢国红;王立启 刊期: 2005年第07期
目的:探讨复发性急性胰腺炎的病因学和复发特点.方法:回顾分析1992年1月~2002年12月间山东省10地市157例复发性急性胰腺炎,将每个病人资料以统一的标准格式进行记录、整理和分析.结果:157例复发性急性胰腺炎中,男性占63%,女性占37%,平均年龄41岁(13~82岁).胆道结石和酒精为常见的病因,均为20.4%,其次为饮食因素(高脂饮食、暴饮暴食)占13.4%、高血脂症8.3%、胆系感染5.7%、其它原因占5.1%、特发性占26.8%.复发病因男性中酒精占第一位(30.3%),女性胆道结石占第1位(34.5%).复发1次者占79.6%.并发症出现频率依次为胰腺假性囊肿、腹腺炎和腹水、多脏器功能衰竭、2型糖尿病、休克等.结论:复发性急性胰腺炎是一常见疾病,胆道结石和酒精是其常见病因,不明病因者仍占相当比例.
作者:高艳景;李延青;黄柳业;李森林;曾宪中;王青;王福贤;袁圣安;刘春安;李国庆;马骥 刊期: 2005年第07期
本院自2003年4月~2004年3月,将异丙酚联合米索前列醇用于妊娠10~14周插管钳刮术中,效果良好.1资料与方法1.1一般资料选择临沂市河东区2003年4月~2004年3月计划外妊娠妇女1 000例,既往体健,无心、肝、肺、肾病变,21~40岁,平均32.5岁,孕次1~5次,产次0~2次,均经B超及产科检查确诊为妊娠10~14周.随机分为观察组和对照组,每组500例,手术由专人操作,实行经阴道插管及钳刮术.
作者:袁悦明 刊期: 2005年第07期
目的:了解环氧化酶2(COX-2)在大鼠肝脏癌变过程中的表达规律及与肝癌的关系.方法:用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法,检测COX-2在大鼠肝脏癌变过程中的表达.结果:COX-2表达在大鼠肝脏癌变过程中呈动态变化,在诱癌的第6周即可出现,在肝癌晚期表达明显,而在正常肝组织未见表达.结论:COX-2表达与大鼠肝脏癌变关系密切,COX-2参与了大鼠肝癌的发病过程.
作者:谢英慧;袁孟彪 刊期: 2005年第07期
目的:探讨罗勒多糖抑瘤作用和机制以及基因芯片技术在中药分子作用机制研究中的应用.方法:建立荷NuTu-19卵巢癌大鼠模型及相应对照,观察中药罗勒多糖对荷瘤鼠肿瘤生长及转移行为的影响;同时提取肿瘤组织总RNA,用RT-PCR逆转录合成cDNA,分别用Cy3-dUTP、Cy5-dUTp标记对照组和药物组cDNA,与含有2 000点的大鼠基因表达谱芯片杂交,杂交芯片扫描结果用ImaGene3.0软件进行分析统计.结果:对照组与药物组之间共有168条差异表达基因,经归类分析,表达差异基因主要为:①肿瘤转移相关基因;②与免疫应答有关的基因;③与细胞能量代谢有关的酶类;④与药物代谢及敏感性有关酶类的基因;⑤与信号转导以及转录过程有关的基因等.结论:罗勒多糖可能通过多种作用途径抑制肿瘤生长及转移,基因芯片技术可从基因水平解释中药的可能作用机制,并为进一步确切机制的研究提供重要信息.
作者:邹明瑾;杨美香;郭文静;闫实;曲迅 刊期: 2005年第07期
目的:探讨胚芽干细胞的提取、培养和体外扩增的佳条件;筛选胚芽干细胞在体外培养中的活力佳时期.方法:分离受精11d小鼠生殖腺嵴,经消化制备成胚芽干细胞悬液,将细胞分别接种于基础培养液、同种胎鼠成纤维细胞条件培养液、添加LIF的基础培养液、有饲养层的培养基和与胎鼠成纤维细胞共培养5种不同的培养体系中,比较观察在5种培养体系中胚芽干细胞的形态学、碱性磷酸酶染色和体外分化情况.结果:①在含15%胎牛血清的DMEM/F12基础培养液中培养时,胚芽干细胞贴壁明显减少,EGC克隆形成很少,传代率很低;②在基础培养液中添加白血病抑制因子(LIF)或同种胎鼠成纤维细胞条件培养液时,细胞生长情况与基础培养液培养相比无明显差异;③有饲养层存在时,4~6 d后出现鸟巢状胚芽干细胞集落.传4代后集落逐渐减少、变小.6~7代后集落消失;④与胎鼠成纤维细胞共培养时,2~4 d即可见EGC集落形成.传6代后细胞的集落逐渐减少、变小;⑤在与胎鼠成纤维细胞共培养时,第2、3代细胞的生长曲线基本相同,接种24 h后细胞呈对数生长.培养液的更新可以显著影响小鼠胚芽干细胞的生长.第5代的细胞增殖速度减慢.结论:与饲养层细胞或腹壁组织成纤维细胞共培养可较好地培养和扩增胚芽干细胞:第3代细胞的活力好.
作者:刘晓萍;高英茂;邴鲁军 刊期: 2005年第07期