朱广旗；吴远华；胡细佑
目的:基因芯片技术检测消瘤保肺丸对肿瘤转移相关基因表达的影响.方法:采用消瘤保肺丸中药灌胃、采集兔含药血清.消瘤保肺丸含药血清与PG细胞培养48 h后,观察用药后细胞肿瘤转移相关基因表达的变化.结果:PG细胞空白组与用药组比较:经药物干预后,用药组有30多个基因表达上调大于1.5倍,其中包括DCC,GPNMB,MCAM,ETV4,FN1等,无表达下调基因.结论:消瘤保肺丸对肺癌转移的调控是多层次、多靶点的；同时也反映出该药对于转移潜能不同的细胞类型其作用靶点可能也不尽相同.
作者：段铮；陈璐；蒋艳玲 刊期： 2013年第20期
目的:对国内不同产区栝楼进行种源间亲缘关系的分析.方法:采用烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术对不同种源栝楼过氧化物同工酶(POD)进行研究.结果:不同产区栝楼过氧化物同工酶在酶带数、迁移率和酶量等方面存在差异.栝楼POD酶谱共有10条谱带,分为5个类群,Ⅰ,Ⅴ和其他4个类群亲缘关系都较远,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ这3个类群的亲缘关系较近.结论:过氧化物同工酶谱可以作为不同种源栝楼遗传多样性鉴定的参考依据.
作者：张荣超；辛杰；韩琳娜；周凤琴 刊期： 2013年第20期
目的:比较不同溶剂提取何首乌对肝细胞毒性的差异,探讨提取方式对何首乌安全性的影响.方法:制备不同提取方式的何首乌样品,均按生药量的5 g·L-1给药,以CCK-8法检测人肝细胞(L02细胞)抑制率为评价指标,考察提取溶剂,溶剂量和提取时间3个因素对何首乌肝细胞毒性的影响.同时建立何首乌的UPLC指纹图谱,采用偏小二乘法(PLS)回归分析肝细胞毒性与化学成分之间的关系.结果:建立了基于CCK-8比色的何首乌对人正常肝细胞毒性的检测方法.何首乌75％乙醇提取物的肝细胞毒性显著＞水提取(P＜0.01).进一步正交试验显示,乙醇浓度对何首乌肝细胞毒性具有显著性影响(P＜0.01),提取物肝细胞毒性顺序:50％乙醇提取物＞75％乙醇提取物＞95％乙醇提取物.通过偏小二乘法回归分析,发现了2个与毒性密切相关的色谱峰.结论:不同提取溶剂对何首乌肝细胞毒性有较大影响,50％乙醇提取物毒性强,而何首乌泡酒主要采用50度左右的白酒,提示何首乌泡酒服用的方式可能有较大肝损害风险,应予以高度重视.
作者：吕旸；王伽伯；嵇扬；赵艳玲；马致洁；李奇；邹正升；梁庆生；滕光菊 刊期： 2013年第20期
目的:建立白头翁中白头翁皂苷D的含量测定方法.方法:采用HPLC测定白头翁皂苷D的含量,色谱条件为依利特Hypersil ODS2C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相乙腈-水-甲酸(38∶62∶0.1),流速1.0 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温25℃,考察不同产地白头翁中白头翁皂苷D的含量差异.结果:白头翁皂苷D线性范围0.3112～3.112 μg(r =0.9999),精密度RSD 1.36％,重复性RSD 1.65％,供试品溶液在24 h内稳定,平均加样回收率98.07％(RSD 0.64％).吉林产白头翁中白头翁皂苷D含量高(0.256％),比广东产白头翁高了约20倍.结论:该测定方法简便易行、结果准确、重复性好.不同产地的白头翁中白头翁皂苷D的含量差异较大,选用时应慎重.
作者：尹姗；饶小勇；何雁；杨世林；罗晓健 刊期： 2013年第20期
目的:观察小檗碱吴茱萸碱对胃癌细胞株(AGS)细胞增殖及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-8)含量的影响.方法:采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法测定小檗碱、吴茱萸碱及两药联用对AGS细胞生长的影响；流式细胞技术检测小檗碱、吴茱萸碱及两药联用对AGS细胞细胞周期的影响；ELISA法测定小檗碱、吴茱萸碱及两药联用对AGS细胞TNF-α和IL-8含量的影响.结果:小檗碱15 μmol·L-1和吴茱萸碱45 μmol·L-1联用时对AGS细胞增殖的抑制作用弱于吴茱萸碱单用；小檗碱83 μmol· L-和吴茱萸碱14 μmol·L-1联用时对AGS细胞增殖的抑制作用稍优于两药单用,两药联用阻滞细胞周期于G2/M期的作用较两药单用无显著差异.进一步研究发现,小檗碱83μmol· L-1和吴茱萸碱1.4 μmol· L-1联用增加AGS细胞培养上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的作用优于两药单用.小檗碱具有降低AGS细胞培养上清IL-8含量的趋势,而吴茱萸碱能够显著增强AGS细胞培养上清IL-8的含量(P＜0.01),两药联用能够显著降低AGS缅胞培养上清中IL-8的含量(P＜0.01).结论:不同剂量的小檗碱吴茱萸碱联用对AGS细胞增殖的影响不同.小檗碱能够抑制吴茱萸碱诱导的AGS细胞IL-8的表达上调.
作者：石海莲；谢建群 刊期： 2013年第20期
目的:优选宝藿苷Ⅰ的超声波辅助酶解工艺.方法:采用HPLC测定宝藿苷Ⅰ含量,色谱条件为Diamond C18色谱柱(4.60 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(25∶75),流速1.0 mL· min-,柱温30℃,检测波长270 nm.以宝藿苷Ⅰ转化率为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察超声功率、pH、温度、酶用量及反应时间对超声酶解工艺的影响.结果:佳酶解条件为超声功率200W,pH5.0,温度40℃,酶用量5％,反应时间4h;宝藿苷Ⅰ转化率97.4％.结论:超声波辅助酶解法制备宝藿苷Ⅰ具有转化率高、反应温度低、反应时间短、酶用量少等优点,优选的工艺简单稳定,适合工业化生产.
作者：于海帅 刊期： 2013年第20期
目的:探讨四逆散加味治疗肝纤维化的疗效及其作用机制.方法:将80只Wister大鼠随机分为正常组,模型组,四逆散组(4.0g·kg-1),四逆散加昧高、中、低剂量组(依次为14,7,3.5g·kg-1),四逆散加味预防组(7 g·kg-1),秋水仙碱组(0.2 mg·kg-1),除正常组外,其余各组均采用猪血清ip诱发肝纤维化每周2次,每次0.5 mL/只,连续10周.采用反转录-聚合酶反应(RT-PCR)和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(S-P)检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)及其受体基因和蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠肝组织中TGF-β1及其受体基因和蛋白大量表达(P＜0.01)；经四逆散加味治疗后与模型组比较,大鼠肝组织中TGF-β1及其受体基因和蛋白表达量显著下调(P＜0.01)；与秋水仙碱组比较,四逆散加味中剂量组、四逆散加味预防组TGF-β1及其受体基因和蛋白表达下调更为显著(P＜0.01).结论:四逆散加味治疗肝纤维化的可能作用机制是通过减少肝组织中TGF-的产生及下调转化生长因子受体(TGFR)表达丽减少肝星状细胞活化,减少肝组织中细胞外基质(ECM)的生成,而起到抗肝纤维化和保护肝细胞损伤的作用.
作者：王剑锋；王付；苗小玲；尚立芝 刊期： 2013年第20期
目的:建立五味子指纹图谱测定方法,分析比较五味子醋制前后物质基础的变化.方法:采用HPLC,以乙腈-15 mmol· L-1磷酸二氢钾溶液(pH 2.0)为流动相,梯度洗脱,检测波长210,254 nm,流速1.0 mL· min-1,柱温35℃,分别测定生、醋五味子指纹图谱.结果:五味子醋制前后指纹图谱有明显的差异,其中以5-羟甲基糠醛含量变化显著.结论:建立的方法可以较好体现出五味子醋制前后物质基础的差异,为五味子饮片的质量评价标准及炮制原理提供了科学依据.
作者：朱明贵；李丽；肖永庆；于定荣；麻印莲；顾雪竹 刊期： 2013年第20期
目的:比较不同等级川芎饮片中藁本内酯和阿魏酸的含量,为传统川芎饮片分等方法提供理论依据.方法:采用高效液相色谱法测定藁本内酯、阿魏酸含量,色谱条件为Comatex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温30℃,进样量10 μL,流速1 mL·min-1；藁苯内酯、阿魏酸流动相分别为甲醇-水(70∶ 30),甲醇-1％乙酸溶液(30∶ 70),检测波长分别为326,321 nm.结果:一等、二等、统货川芎饮片中藁本内酯含量分别为3.14％,2.91％,0.30～2.84％；阿魏酸含量分别为0.26％,0.23％,0.1 ～0.21％.结论:川芎饮片中藁本内酯和阿魏酸含量为一等饮片高,二等饮片次之,统货低,证明川芎饮片的传统分级方法具有一定合理性.
作者：吕非非；胡昌江；吴珊珊；熊瑞 刊期： 2013年第20期
目的:建立雷公藤多苷中雷公藤对醌B定性分析和含量测定方法.方法:利用高效液相色谱-电喷雾-质谱(HPLC-ESI-MS)联用结合LC-DAD技术,通过和标准化合物雷公藤对醌B的保留时间、紫外吸收光谱以及质谱中的准分子离子峰[M+Na]+相对照,快速鉴定雷公藤多苷中的雷公藤对醌B,对其含量的测定则采用了高效液相色谱方法.结果:一级质谱扫描结果表明雷公藤多苷中保留时间tR=13.2 min的峰化合物结构为雷公藤对醌B,准分子离子峰[M+Na]+为353.1,高效液相色谱结果表明雷公藤多苷中雷公藤对醌B在0.115～1.15 μg呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率和RSD分别为99.32％,0.7％.结论:该方法简便、准确,可作为雷公藤多苷中雷公藤对醌B的含量测定方法.
作者：付辉政；钟瑞建；罗跃华；王栋；周国平；张东明；万凯化 刊期： 2013年第20期
目的:研究番茄红素对鱼藤酮诱导PC12细胞线粒体损伤的保护作用.方法:采用鱼藤酮(0.5 μmo1·L-1)诱导PC12细胞损伤模型,给予番茄红素(3,10,30 μmol·L-1)预处理2h后,加入鱼藤酮,使终浓度达到0.5μmol·L-1,培养24 h后,CCK-8法检测细胞存活率,倒置相差显微镜观察细胞形态改变、透射电镜观察细胞线粒体超微结构,罗丹明123染色检测线粒体膜电位,以观察番茄红素的保护作用.结果:CCK-8结果显示与正常对照组比较,模型组细胞存活率下降为70.34％±2.81％ (P ＜0.05),与模型组比较,番茄红素(3,10,30μmol·L-1)预处理后其细胞存活率分别提高到83.09％±3.15％,87.24％±2.15％,89.17％±2.26％(P＜0.05);倒置相差显微镜观察显示鱼藤酮可导致PC12细胞凋亡,经番茄红素处理后,模型细胞凋亡情况明显改善；透射电镜观察显示鱼藤酮可导致PC12细胞线粒体超微结构发生改变,经番茄红素处理后,模型细胞凋亡情况明显改善；流式细胞仪检测结果显示与正常对照组比较,模型组细胞线粒体膜电位平均荧光强度下降为151.63±12.25(P＜0.05),经番茄红素(3,10,30 μmol·L-1)预处理后线粒体膜电位平均荧光强度分别提高到202.24±26.28,226.21±9.71,238.83±10.29 (P＜0.05).结论:番茄红素对鱼藤酮诱导的PC12细胞线粒体损伤有保护作用.
作者：罗连响；李晓玲；朱少平；曾敏娟；鲍波 刊期： 2013年第20期
目的:探讨观察百令胶囊对Graves病(Graves' disease,GD)患者T淋巴细胞亚群及远期预后的影响.方法:选择GD患者60例,分为常规治疗组、百令胶囊治疗组,每组30例,常规治疗组予甲巯咪唑治疗,百令胶囊治疗组在常规治疗组治疗的基础上加用百令胶囊,4粒/次,3次/日,连续用药12个月,观察两组治疗前后外周血T淋巴细胞亚群、甲状腺功能、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、自身抗体变化,停药后随访1年,观察GD复发率.结果:治疗结束时两组甲状腺功能差异不显著,百令胶囊治疗组治疗后外周血CD4+,CD4/CD8,IFN-γ,促甲状腺激素受体抗体(TRAb)[CD4+ (30.6±2.1)％,CD4/CD8(1.5±1.7),IFN-γ(25.8 ±4.2) μg·L-1,TRAb(18.2±10.6) U·L-1]较常规治疗组[(35.9±1.8)％,(1.7±1.3),(34.8±2.4)μg·L-1,(25.9±8.8)U·L-1]下降更明显,且差异有统计学意义(P＜0.05),CD8+T细胞亚群数、IL-4水平升高更明显[CD8+(23.1±1.8)％vs(20.2±1.3)％,IL-4(14.8±3.2) μg· L-1 vs (12.5±1.7) μg·L-1],且差异有统计学意义(P＜0.05)；停药1年后随访,百令胶囊治疗组16.7％,较常规治疗组40％复发率明显降低,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:百令胶囊能有效的调节GD患者细胞免疫,降低GD患者自身抗体水平.
作者：黄虹；杨丕坚；李舒敏；吕以培；黄中莹 刊期： 2013年第20期
目的:在回医理论的指导下对香药性味归类并研究其组方的配伍规律,为回药治疗脑卒中的现代制剂开发研究提供理论依据.方法:对前期筛选得到的101首回药治疗脑卒中方剂中香药按回药性味分类；运用Microsoft Excel 2003软件对单味香药、两味药以及三味药所组成的药物组合进行频数统计,将得出的数据进行组方配伍规律分析.结果:按冷热干湿对47味香药的性味分类；单味药出现频次在10次以上有胡椒等；组方中两味药物组合出现频次以“胡椒+荜拔”多,三味药组成的药物组合出现频次以“胡椒+荜拔+撒法郎”高.结论:治疗脑卒中的方剂均为复方方剂,且所使用的回族香药多为热、于性药物.
作者：李婷婷；王星；马学琴；陈靖；付雪艳 刊期： 2013年第20期
目的:建立间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)用于测定剑叶龙血素A(CA)含量.方法:合成半抗原剑叶龙血素A-4'-羧甲基醚(CA-4'-CME),再用碳二亚胺法将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)分别偶联制备免疫原(CA-BSA)和包被原(CA-OVA),免疫小鼠制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA法并评估其分析性能.结果:通过紫外扫描分析CA-BSA和CA-OVA的偶联比分别为18∶1和24∶1.抗血清效价高达到12000.用四参数logistic方程拟合CA标准曲线,在分析范围0 ～0.80 mg·L-1内,相关系数(R2)≥0.99,IC500.66 mg·L-1,低检测限0.045 mg·L-1,批内CV≤12.5％,批间CV≤14.7％,回收率92.7％ ～ 118.7％,对5种CA类似物的交叉反应率＜5.38％.此方法检测龙血竭和龙血竭总黄酮中CA含量分别为1.27％,3.08％.结论:剑叶龙血素A间接竞争ELISA法精密度、准确度和特异性均较好,可方便地用于药物检测和分析.
作者：沈洲；雷丽云；龙蓉；陈素；刘向明 刊期： 2013年第20期
目的:探讨香附油滴丸抗炎镇痛作用及其物质基础,为香附油滴丸运用于防治妇科痛经疾病提供依据.方法:采用角叉菜胶致小鼠足跖肿胀、二甲苯致小鼠耳廓肿胀及醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性升高模型,考察香附油滴丸的抗炎作用；运用醋酸致小鼠扭体、热刺激致小鼠疼痛模型,考察香附油滴丸的镇痛作用,并与阿司匹林和四制香附丸比较.采用高效液相色谱法检测香附油滴丸灌胃给药后在大鼠血清中的移行成分,考察其抗炎镇痛作用的可能物质基础.结果:香附油滴丸连续5 dig给药,100,200 mg· kg-1组均可显著减轻小鼠足跖及耳廓肿胀,降低小鼠腹腔毛细血管通透性,提高小鼠扭体法、热板法致疼痛的痛阈,香附油滴丸在血清中的移行成分主要为理-香附酮.结论:香附油滴丸具有明显的抗炎镇痛作用,其物质基础可能主要是α-香附酮.
作者：丁平；田友清；陈国胜；苟琼心；刘杨 刊期： 2013年第20期
目的:探讨参芎化瘀胶囊对全脑缺血大鼠海马CA1区生长相关蛋白43(GAP-43)和神经营养因子低亲合力受体(P75NTR)表达的影响.方法:清洁级SD雄性大鼠72只,分正常对照组、全脑缺血模型组和参芎化瘀胶囊+全脑缺血组(灌胃剂量:480 mg·kg-1 ·d-1,每日1次,早上8:00给药),每组24只,取3,7,14d3个时间点.制备全脑缺血模型.水迷宫评价学习记忆能力,HE染色观察组织病理学的变化,免疫组化法观察GAP-43表达,蛋白印迹分析检测GAP-43和P75 NTR蛋白含量.结果:①行为学:和正常对照组比较,模型组大鼠各个时间点逃避潜伏期时问明显延长(P＜0.05),参芎化瘀胶囊组大鼠逃避潜伏期时间较模型组缩短(P＜0.05)；②HE染色显示:与正常组比较,模型组大鼠海马CA1区神经元3～14 d进行性坏死,存活神经元减少,参芎化瘀胶囊组各个时间点正常神经元计数和模型组比较有差异(P＜0.05)；③GAP-43免疫组化和蛋白印迹结果:和正常组比较,模型组GAP-43的表达3d升高,7d明显,14 d下降；和模型组比较,参芎化瘀胶囊组3,7,14d持续性升高,各个时间比较均有差异(P＜0.05)；④P75NTR蛋白印迹结果分析:和正常组比较,模型组的表达3d升高,7d明显,14 d下降；和模型组比较,参芎化瘀胶囊组3,7,14 d持续性升高,所有时间点比较均有差异(P＜0.05).结论:参芎化瘀胶囊增强全脑缺血大鼠海马CA1区GAP-43和P75 NTR的表达.
作者：黄海玲；李建民；赵雅宁 刊期： 2013年第20期
目的:研究5种紫珠属药材中总酚、总黄酮与其抗氧化活性的相关性.方法:采用紫外分光光度法测定5种紫珠属药材总酚和总黄酮的含量；采用清除O2-·,DPPH·,ABTS+·,·OH评价法、Cu2+螫合法、Fe3+还原法及对大豆卵磷脂脂质过氧化的抑制效果评价它们之间抗氧化活性的差异.结果:5种药材的总酚和总黄酮含量相差较大,其中,裸花紫珠含量大；各种方法所得抗氧化活性强弱顺序有区别；除了抗脂质过氧化外,其他方法所得结果均与总酚和总黄酮含量呈正相关.结论:5种紫珠属药材富含总酚和总黄酮成分,具有较强抗氧化活性,可以作为天然抗氧化剂进行开发.
作者：蔡灏；吴翠萍；孙秀漫；彭光天；谢智勇；廖琼峰 刊期： 2013年第20期
目的:探讨定经汤调节卵巢早衰的生物学机制.方法:SD大鼠90只,随机分为3组:正常组、模型组、定经汤干预组；分别检测其与卵巢早衰相关的生物分子:β-内啡肽(β-EP)、白介素-1(IL-1)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、促性腺激素释放激素(GnRH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(CORT);利用因子分析方法探究定经汤干预下各生物分子之间的相互调控关系,并探寻定经汤调节卵巢早衰过程中的关键生物分子.结果:定经汤干预状态的生殖内分泌网络主调控因子主要包括垂体-卵巢轴上的4个生物分子,垂体-肾上腺轴靶腺层生物分子CORT以及部分下丘脑生物分子；IL-1是定经汤干预状态生殖内分泌网络主调控因子与其他公共因子共有的下丘脑部位的生物分子.结论:定经汤一方面可以直接调节垂体-肾上腺轴生物分子,另一方面又可以通过下丘脑间接调节垂体-肾上腺轴生物分子；各调控因子之间起枢纽作用的生物分子为IL-1.
作者：张磊；邓树泳；张琰；王秀凤；罗来成 刊期： 2013年第20期
目的:对中药材藿香枝叶中的多糖进行提取,并测试其抗氧化活性,为藿香药材资源的综合利用提供科学依据.方法:采用超声法辅助提取藿香枝叶中的多糖,设计L9(34)正交试验考察料液比、pH和超声提取时间对藿香枝叶中多糖提取的影响,确定其多糖的佳提取工艺,并对藿香多糖进行清除·OH试验.结果:藿香多糖的佳提取工艺为料液比1∶10、超声提取30 min、pH为6,可使藿香多糖的提取率高达7.50％,藿香多糖对Fenton反应产生的·OH有明显的清除作用.结论:藿香多糖具有抗氧化活性,可从藿香枝叶中提取多糖,其多糖有开发价值.
作者：刘存芳；田光辉 刊期： 2013年第20期
目的:观察溃疡性结肠炎相关癌变(ulcerative colitis associated carcinogenesis,UCAC,简称溃结相关癌变)小鼠组织形态、超微结构以及结肠黏膜β-catenin、T细胞因子4(T cell factor-4,TCF-4)的表达变化,探讨健脾清热活血方药防治溃结相关癌变的可能机制.方法:120只清洁级BALB/c小鼠随机分6组,每组20只,设正常组、模型组、美沙拉嗪0.4 g·kg-1阳性对照组、健脾清热活血方低、中、高剂量治疗组(4.29,8.58,17.16 g·kg-1);除外正常组,其余各组采用1,2-二甲肼(DMH)/葡聚糖硫酸钠(DSS)复合法制备溃结相关癌变模型,模型组予等剂量生理盐水,对照组予美沙拉嗪,治疗组予不同剂量健脾清热活血方药水提液,连续干预16周.应用光镜、透射电镜观察溃结相关癌变小鼠结肠组织形态学以及超微结构变化；免疫组化、Western-bolt及实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测结肠黏膜β-catenin、TCF-4蛋白及其mRNA表达变化.结果:模型组小鼠结肠光镜下可见黏膜上皮脱落,腺体萎缩、高级别上皮内瘤变,部分癌变,电镜下可见大、小不等、排列紊乱的上皮细胞,胞核不规则、核仁增大并上移；治疗组光镜下见黏膜充血肿胀,个别轻度不典型增生和淋巴滤泡出现,未见溃疡及癌变,电镜下可见上皮细胞体积明显变小,核染色质边集、核固缩或碎裂,核膜断裂,凋亡小体形成；与模型组比较,治疗组结肠黏膜损伤有不同程度改善(P＜0.05).模型组结肠β-catenin,TCF-4蛋白及其mRNA呈高表达特点；治疗组结肠β-catenin、TCF-4蛋白及其mRNA表达均呈下降趋势,与模型组比较,有统计学意义(P＜0.05).结论:健脾清热活血方药可能通过调控β-catenin,TCF-4表达,促进炎症缓解,发挥防治溃疡性结肠炎相关癌变的效应.
作者：张保静；陈远能；黄斌；张涛 刊期： 2013年第20期
中国实验方剂学杂志
主管:国家中医药管理局
主办：中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
