林思勇；时冀川
许多眼科疾病在中老年人群中的患病率高于其他年龄组,随着全球老龄化社会的到来,眼科医师面临着年龄相关性眼病疾病谱迅速扩大的挑战,加强年龄相关性眼病的预防对于中老年人的健康有着重要意义.因此,了解年龄相关性黄斑变性(AMD)、青光眼和葡萄膜黑色素瘤易在老年人中发病的原因至关重要.我们先前的动物实验研究表明,正常的老化过程伴随着炎症反应,这种反应增加了眼部疾病发病的风险,而加重炎症反应的环境因素是吸烟.目前已发现炎症参与AMD的发病和进展,并且可能在青光眼、葡萄膜黑色素瘤的病理过程中发挥作用,巨噬细胞和淋巴细胞增加了肿瘤转移的风险.一些实验研究也表明,巨噬细胞在脉络膜/视网膜炎症、眼内肿瘤等疾病中发挥关键作用.巨噬细胞分为M1型和M2型,前者刺激特异性免疫反应,后者可刺激血管的生成.在机体老化过程中,M1型的功能可以向M2型转化,从而可能促进AMD和肿瘤的进展.深入研究巨噬细胞的特性有助于老化过程的干预和年龄相关性眼病的预防.
作者：Martine J.Jager；L.Ho；L.V.Ly 刊期： 2013年第01期
背景 糖尿病视网膜病变、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等视网膜血管性疾病的发病率逐年提高,客观有效地评价视网膜的血管情况是视网膜血管性疾病防治研究的关键.异硫氰酸荧光素-葡聚糖(FITC-dextran)眶后注射法是评价C57BL/6J小鼠视网膜血管的新方法,但目前少有关于此方法是否适合于其他小鼠及大鼠研究的报道. 目的 评估用FITC-dextran眶后注射法观察实验常用鼠种视网膜血管的可行性,为相关的实验研究提供参考依据.方法 选择SPF级C57BL/6J小鼠、昆明小鼠、SD大鼠、Wistar大鼠各12只,均分为实验组和对照组各6只.实验组动物右眼眶后注射9 ml/kg FITC-dextran溶液,对照组右眼眶后注射等体积PBS溶液.注射10 s后大鼠以过量麻醉法处死,小鼠以颈椎脱臼法处死,摘取双侧眼球,荧光显微镜下行双侧眼球后组织以及视网膜铺片检查.结果 C57BL/6J小鼠、昆明小鼠实验组双眼均可以观察到FITC-dextran绿色荧光标识的视网膜血管,但对照组各眼均观察不到视网膜血管形态；SD大鼠、Wistar大鼠实验组及对照组受检眼在荧光显微镜下均未观察到FITC-dextran标识的视网膜血管.小鼠、大鼠实验组右眼均可见由FITC-dextran浸染的绿色球后组织,而左眼球后组织均未见荧光. 结论 FITC-dextran眶后注射法适合于观察小鼠的视网膜血管,不适于观察大鼠的视网膜血管.
作者：郭凯；李士清；李静；蔡萌；李涛；田景毅；林少芬；罗燕；唐仕波 刊期： 2013年第01期
背景 血脂异常是年龄相关性黄斑变性(AMD)的发病因素之一,AMD的治疗方法一直是研究的热点. 目的 观察健脾祛瘀中药制剂对血脂异常ApoE基因缺失(ApoE-/-)小鼠视网膜和Bruch膜的治疗作用.方法 采用随机数字表法根据小鼠体质量分层随机分组.将36只2月龄ApoE-/-小鼠分为普通饮食组、高脂模型组及健脾祛瘀治疗组,每组12只.高脂模型组及健脾祛瘀治疗组小鼠均用高脂饲料喂养4个月,健脾祛瘀治疗组小鼠于6月龄开始给予健脾祛瘀制剂灌胃,每次0.3ml,每日2次,持续1个月；普通饮食组和高脂模型组小鼠同时间点开始用等量生理盐水灌胃,从6月龄开始3个组均给予普通饲料喂养.于小鼠7月龄时抽取股静脉血检测各组小鼠血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和血浆甘油三脂(TG)浓度,抽血后以过量麻醉法处死,制备视网膜组织切片并行Masson染色,光学显微镜和透射电子显微镜下观察视网膜和Bruch膜的组织形态学改变.采用Mias 2000型图像分析系统半定量检测各组小鼠视网膜外核层细胞、视网膜色素上皮(RPE)层细胞数及Bruch膜厚度.结果 7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠TC、LDL和TG浓度分别为(6.47±0.49)、(1.46±0.10)、(0.62±0.21) mmol/L,比同龄高脂模型组小鼠的(10.53±0.30)、(1.90±0.13) mmol/L和(1.15±0.29) mmol/L以及普通饮食组小鼠的(9.63±0.18) mmol/L、(1.12±0.15)、(0.88±0.21) mmol/L均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05～0.01).7月龄高脂模型组小鼠及同龄普通饮食组小鼠外核层和RPE层细胞排列紊乱,细胞萎缩明显,Bruch膜纤维分叉,高脂模型组部分小鼠可见玻璃膜疣；而同龄健脾祛瘀治疗组小鼠外核层和RPE层细胞排列较整齐,细胞萎缩减轻,Bruch膜纤维未见分叉,未见玻璃膜疣.7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠外核层和RPE层细胞数分别为(23 124.00±755.18)个及(10.75±0.59)个,比同龄高脂模型组小鼠的(19 107.00±1436.82)个和(8.55±1.11)个以及普通饮食组的(21 663.00±1073.27)个和(9.75±0.58)个明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05).7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠Bruch膜厚度为(0.89±0.05) μm,明显比高脂模型组小鼠的(1.02±0.13)μm薄,差异有统计学意义(P＜0.01).7月龄健脾祛瘀治疗组小鼠RPE、Bruch膜组织的超微结构形态明显改善. 结论 健脾祛瘀中药制剂可降低血脂异常ApoE-/-小鼠的高脂血症,改善视网膜外核层、RPE层、Bruch膜的组织结构形态.
作者：王毅；马玉兰；李娟；曾庆华；李罗翔 刊期： 2013年第01期
背景 巩膜的活体测量对于了解巩膜本身的厚度及一些相关疾病均有较大帮助. 目的 观察年龄相关性白内障人群前部巩膜厚度及其与相关眼部参数间的关系.方法 分别采用超声角膜测厚仪、角膜曲率仪及眼部A型超声对105例年龄相关性白内障患者进行双眼中央角膜厚度(CCT)、角膜屈光力(CCV)及眼轴长度测量,同时采用超声生物显微镜(UBM)测量颞侧巩膜突后2 mm处的前部巩膜厚度(AST).分别采用配对t检验及独立样本t检验对不同眼别、不同性别间的CCT、CCV、眼轴长度和AST参数进行比较；采用Pearson积矩线性相关分析法分析上述各参数间的相关性,并采用单因素方差分析比较不同眼轴长度患者CCT及AST的差异. 结果 受试者双眼间CCT、CCV、眼轴长度及AST值的差异均无统计学意义(t=0.584,P=0.561；t=1.161,P=0.248；t=0.140-P=0.889；t=0.342,P=0.773).男性组测量的平均CCT厚度值小于女性组,但差异无统计学意义(右眼:t=0.469-P=0.641；左眼:t=0.465,P=0.643)；与女性组比较,男性组的眼轴明显较长,平均CCV值明显降低,平均AST明显增厚,差异均有统计学意义(左右眼均P＜0.01).本组受试者右眼颞侧巩膜突后2 mm处AST为(0.59±0.05)mm.相关分析表明,CCV与眼轴长度呈显著负相关(r=-0.50,P＜0.01),但年龄、CCT、眼轴长度及AST间无明显相关性(P＞0.05).不同眼轴长度组间受试者CCT和AST的差异无统计学意义(CCT:F=0.998,P=0.372；AST:F=1.919,P=0.383). 结论 年龄相关性白内障患者的AST与CCT间无明显相关；一定程度的眼轴变长可能不伴随前部眼球壁的变薄；男女间眼部的部分参数可能存在一定差异.
作者：李梅；才瑜；潘英姿；乔荣华；方圆；王捷 刊期： 2013年第01期
背景 研究表明硫酸软骨素蛋白多糖(CSPGs)是促进视皮层可塑性终止的关键因子,而新发现酪氨酸磷酸酶蛋白受体σ(PTPσ)是CSPGs发挥抑制性作用的受体,但PTPσ及其下游分子是否参与成年大鼠视皮层可塑性的再激活尚不明确. 目的 观察成年大鼠视皮层可塑性再激活后PTPσ、神经元周围网络(PNNs)及其下游分子N-cadherin和β-catenin的表达变化. 方法 选择健康SPF级Long Evans大鼠54只,按出生后周龄分为出生后1、3、5、7、9周组,各组分别有6、6、6、24、12只大鼠,其中出生后7周组12只大鼠双眼上下睑缝合14d建立视皮层可塑性再激活模型.采用免疫组织化学法观察视皮层中PTPσ、PNNs的表达情况,采用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)法分别观察PTPσ、N-cadherin和β-catenin mRNA随大鼠发育以及成年大鼠视皮层可塑性再激活后的表达变化.结果 出生后9周组大鼠视皮层PTPσ mRNA的表达量明显高于正常出生后7周组和同龄双眼形觉剥夺组大鼠,差异均有统计学意义(t=1.965、3.526,P＜0.01).大鼠视皮层中PTPσ的阳性表达定位于细胞膜、细胞质及轴突,出生后9周组大鼠视皮层Ⅱ～Ⅲ层、Ⅳ层及Ⅴ～Ⅵ层PTPσ阳性细胞密度明显高于正常出生后7周组大鼠(t=24.593、23.444、13.556,P＜0.01)及双眼形觉剥夺组大鼠,差异均有统计学意义(t=44.111、43.000、16.556,P＜0.01).出生后9周组大鼠视皮层Ⅳ层、Ⅴ～Ⅵ层PNNs阳性细胞密度值较出生后7周组明显增加,差异均有统计学意义(t=1.926,P＜0.01；t=1.370,P＜0.05),而Ⅱ～Ⅲ层PNNs阳性细胞密度值比较差异无统计学意义(t=0.889,P＞0.05).双眼形觉剥夺组大鼠视皮层Ⅱ～Ⅲ层、Ⅳ层PNNs阳性细胞密度较出生后9周组大鼠明显下降,差异均有统计学意义(t=2.556、4.185,P＜0.01),但Ⅴ～Ⅵ层的PNNs阳性细胞密度值差异无统计学意义(t=1.037,P＞0.05).与出生后1周组大鼠比较,出生后3、5、7、9周组大鼠视皮层组织中的N-cadherin mRNA表达量明显降低,差异均有统计学意义(t=28.932、28.988、27.083、28.908,P＜0.01),出生后7周组大鼠N-cadherin mRNA表达量升高,与出生后3、5、9周组比较差异均有统计学意义(t=1.848、1.904、1.825,P＜0.01).出生后9周组和同龄双眼形觉剥夺组比较,N-cadherin mRNA表达差异无统计学意义(t=0.072,P＞0.05).出生后1周组大鼠视皮层β-catenin mRNA表达明显高于其他各组,差异均有统计学意义(t=3.918、3.534、2.645、4.652,P＜0.01),双眼形觉剥夺组β-catenin mRNA表达量较出生后9周组明显升高,差异有统计学意义(t=0.570,P＜0.01). 结论 PTPσ、PNNs及其下游通路分子β-catenin参与了成年大鼠视皮层可塑性再激活的过程.
作者：刘慧；徐海伟；余涛；刘瑶；阴正勤 刊期： 2013年第01期
背景 遗传性视网膜变性是主要致盲性眼病之一,包括一系列以慢性进行性视网膜变性为病理特征的异常；白细胞介素-1(IL-1)参与变性与凋亡过程的调节,而白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1 ra)对细胞凋亡的影响了解较少,IL-1 ra是否能阻止视网膜变性值得研究. 目的 研究IL-1 ra对自发性遗传性视网膜变性大鼠视细胞凋亡的影响. 方法 选择SPF级出生后9、15、16、25、30、35、40、50、60 d的RCS大鼠各9只9只眼制备视网膜切片,采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测不同年龄大鼠视网膜凋亡细胞.选择出生后15d的RCS大鼠9只,右眼玻璃体腔注射质量浓度1.8 g/L IL-1ra 1μl,左眼玻璃体腔注入PBS 1μl作为对照,分别待大鼠20日龄、25日龄时各重复注射药物1次,30日龄时处死实验大鼠并制备视网膜切片,采用TUNEL凋亡检测试剂盒检测及分析视网膜细胞凋亡情况.采用单因素方差分析比较不同鼠龄视网膜中阳性细胞核面积百分率的差异,采用配对t检验比较大鼠IL-1 ra注射组与PBS注射组视网膜各层厚度的差异. 结果 RCS大鼠视网膜视细胞自出生后第25天出现凋亡,第30 ～35天达高峰,不同鼠龄间大鼠视网膜TUNEL阳性视细胞核面积百分率的差异有统计学意义(F=28.020,P＜0.01).TUNEL凋亡图像分析结果显示,30日龄大鼠IL-1ra注射眼视网膜TUNEL阳性染色弱于PBS注射眼,且阳性染色细胞数少于PBS注射眼；IL-1 ra注射眼大鼠视网膜TUNEL阳性视细胞核总面积及相对面积均明显低于PBS注射眼,差异均有统计学意义[总面积:(223.052±153.092) μm2 vs.(1235.050±359.767) μm2,t=4.370,P＜0.01；相对面积:(2.206±1.531)％ vs.(7.269±1.624)％,t=3.250,P＜0.01].IL-1 ra注射组和PBS注射组视锥与视杆细胞层厚度分别为(15.324±9.035) μm和(49.566±4.605) μm,差异有统计学意义(t=22.674,P＜0.01),但2个组间外核层(即由视锥细胞与视杆细胞的细胞体和细胞核组成)厚度比较差异无统计学意义(t=0.268,P＞0.05).结论 遗传性视网膜变性眼中IL-1对视网膜凋亡发挥一定的调控作用,IL-1 ra对遗传性视网膜变性早期具有潜在的临床治疗价值.
作者：李爱军；房军；朱秀安；于文贞；狄春辉；杨丽萍 刊期： 2013年第01期
糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病严重的微血管并发症之一,也是导致糖尿病患者低视力和致盲率升高的主要原因之一,严重影响了糖尿病患者的生活质量.DR的发病机制目前尚不明确,近年来有文献报道,炎症反应以及C反应蛋白(CRP)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清淀粉样蛋白A(SAA)等炎性因子与该病变的发生发展密切相关,应用糖皮质激素、非甾体类抗炎药(NSAIDs)、盐酸米诺环素及炎性因子拮抗剂抑制炎症反应过程可为治疗DR开辟新的途径.就炎症反应和炎性因子在DR发病机制中作用的研究进展以及利用抑制炎症反应及炎性因子的方法治疗DR的机制进行综述.
作者：马燕 刊期： 2013年第01期
背景 增生型糖尿病视网膜病变(PDR)导致患者视力下降的主要原因是纤维血管膜的收缩、牵拉引起的玻璃体积血及视网膜脱离,因此研究视网膜增生膜形成的病理机制、抑制新生血管和纤维血管膜的形成及其进展是治疗PDR的重要研究方向之一. 目的 研究玻璃体腔注射avastin后PDR增生膜中血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)及色素上皮衍生因子(PEDF)表达的变化. 方法 采用前瞻性随机对照研究设计.选择2008年1-6月在天津医科大学眼科医院拟行手术治疗的PDR患者24例26眼,用随机数字表法将患者随机分为单纯玻璃体切割术组和avastin注射+玻璃体切割术组,每组12例13眼,两组间性别、年龄及病程等基线资料均匹配.Avastin注射+玻璃体切割术组患者玻璃体腔注射avastin1.25 mg(0.05 ml),10d后行玻璃体切割术；单纯玻璃体切割术组患者仅行玻璃体切割术.术中收集术眼视网膜增生膜,采用免疫组织化学法检测增生膜中VEGF、CTGF和PEDF的表达. 结果 2个组患眼视网膜增生膜中VEGF、CTGF和PEDF的表达均位于细胞质.与单纯玻璃体切割术组比较,avastin注射+玻璃体切割术组患者视网膜增生膜中VEGF阳性表达率明显下降(30.77％ vs.100.00％),CTGF阳性表达率上升(92.31％ vs.62.54％),差异均有统计学意义(U=4.000,P＜0.01;U=7.500,P=0.048),而avastin注射+玻璃体切割术组与单纯玻璃体切割术组间PEDF的阳性表达率差异无统计学意义(100.00％ vs.92.31％,U=65.500,P=0.299). 结论 PDR患者玻璃体腔注射avastin后视网膜增生膜中VEGF的表达率明显降低,CTGF的表达率明显升高,而PEDF的表达率无明显变化.
作者：胡博杰；曾勍；刘新玲；李筱荣；宋文静 刊期： 2013年第01期
背景 神经丝蛋白200(NF200)是特异性分布于神经元轴突内,维持神经元形态、反映其功能、检测轴突再生状况的一个间接指标.NF200是否参与了视网膜缺血-再灌注损伤(RIRI)后整个视觉传导通路的异常变化有待进一步研究. 目的 研究RIRI后各时间点大鼠视觉传导通路中视网膜、外侧膝状体、上丘脑及视皮质等部位NF200的表达.方法 应用随机数字表法将40只SD大鼠随机分为RIRI1、2、3、4、6、8周组,伪手术组和正常对照组,每组5只大鼠.RIRI组采用前房灌注生理盐水法制作RIRI模型,以右眼为损伤眼；伪手术组仅行前房穿刺而不灌注生理盐水.于RIRI后1、2、3、4、6、8周处死大鼠,摘除大鼠眼球,并取外侧膝状体、上丘脑及视皮质组织制备冰冻切片,采用免疫组织化学法检测NF200在上述大鼠各部位神经元及轴突中的表达. 结果 大鼠RIRI 1、2、3、4、6、8周组、伪手术组和正常对照组损伤眼视网膜神经节细胞(RGCs)层NF200的表达量(A值)总体比较差异有统计学意义(F=78.855,P=0.000),其中RIRI 1周组NF200表达较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t=36.563,P＜0.01).RIRI 1周后可见损伤眼对侧外侧膝状体NF200的表达较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t=6.483,P＜0.01),而损伤4周、6周后对侧外侧膝状体NF200的表达较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=2.904、4.313,P＜0.01).RIRI1周可见损伤眼对侧上丘脑NF200的表达较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(t=2.966,P＜0.05),2周对侧上丘脑NF200的表达较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=7.397,P＜0.01).RIRI 2、3、4周后双侧视皮质NF200的表达较正常对照组明显增加,差异均有统计学意义(对侧:t=18.728、18.213、15.088,P＜0.01；同侧:t=8.690、5.704、7.805,P＜0.01).结论 RIRI可造成损伤眼的RGCs、对侧外侧膝状体、上丘脑及双侧视皮质神经元轴突的损伤.
作者：魏婷；康前雁；李雪颖 刊期： 2013年第01期
背景 优化人视网膜血管内皮细胞的培养和鉴定方法在视网膜血管性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功培养了人视网膜血管内皮细胞,但进一步简化其方法并达到获取量大而纯的细胞是基础研究和临床研究的基础. 目的 探索一种更为简便快速、收获量大且纯度高的视网膜血管内皮细胞的改良培养方法,并对目标细胞的抗原表达特点进行分析,比较眼科新生血管性疾病研究中常用的两种血管内皮细胞的标志性蛋白表达情况.方法 利用正常人角膜移植供体眼球分离视网膜组织,采用质量分数2％胰蛋白酶和质量分数0.133％胶原酶Ⅰ用二步消化法获取人视网膜血管内皮细胞,在传统培养方法中采用含质量分数10％胎牛血清的人血管内皮细胞培养液的基础上,添加内皮细胞生长因子-β(β-ECGF)和肝素钠,对分离的细胞进行体外培养,培养皿用纤维黏连蛋白(FN)包被以促进培养细胞的贴壁.观察收获的目标细胞的形态特征,采用活体显微镜进行形态学观察、常规组织病理学观察目标细胞的生长状态,免疫组织化学法检测Ⅷ因子、CD31、CD34在细胞中的表达以鉴定目标细胞. 结果 应用胰蛋白酶、胶原酶二步消化法可成功获取人视网膜血管内皮细胞,原代培养的细胞72 h贴壁,第9～10天细胞达到融合状态,呈铺路石样.常规组织学观察显示,细胞核呈鲜亮蓝色,细胞质呈淡红色.培养的细胞对Ⅷ因子、CD31、CD34相关抗原表达呈阳性反应.结果显示培养的血管内皮细胞均有CD31、CD34同时表达,但其阳性染色程度低于Ⅷ因子相关抗原阳性反应,人脐静脉血管内皮细胞(UVECs)与人血管内皮细胞相同. 结论 在胰蛋白酶、胶原蛋白酶消化法的基础上用含10％优质胎牛血清的人内皮细胞培养基中添加生长因子和肝素钠,并用FN包被培养皿进行体外培养,可达到快速、大量分离和纯化人视网膜血管内皮细胞的目的.
作者：毛羽翔；林少芬；曾美珍；田景毅；唐仕波 刊期： 2013年第01期
背景 糖尿病可以诱发视网膜细胞凋亡并下调视网膜内源性降钙素基因相关肽(CGRP)表达,辣椒素可引起CGRP等感觉神经递质释放并且参与器官保护,然而CGRP在糖尿病视网膜病变(DR)细胞凋亡中的作用如何尚待进一步阐明. 目的 观察辣椒素预处理对链脲佐菌素(STZ)诱发的DR视网膜细胞凋亡的影响以及视网膜和血清CGRP表达的变化. 方法 将40只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为DR模型组、药物干预组、药物对照组、DR对照组和空白对照组,每组8只.DR模型组大鼠腹腔内注射质量分数1％ STZ溶液(60 mg/kg)1.2 ml制作DR模型；DR对照组大鼠腹腔内注射0.1 mol/L、pH4.5的柠檬酸缓冲液1.2 ml;药物干预组大鼠造模前3d皮下注射质量分数1％辣椒素溶液(20 mg/kg)0.4 ml,第4天腹腔注射STZ溶液；药物干预对照组大鼠造模前3d皮下注射1％辣椒素溶液(20 mg/kg)0.4 ml,第4天腹腔注射0.1 mol/L、pH4.5的柠檬酸缓冲液1.2ml;空白对照组不做任何处理.造模成功后饲养10周,采用TUNEL法染色和半胱氨酸天冬蛋白酶3(caspase-3)活性检测法分别检测各组大鼠视网膜细胞凋亡程度,同时采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组视网膜和血清中CGRP的表达. 结果 DR模型组大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)层凋亡率为(43.4±5.0)％,明显高于药物干预组的(30.0±5.1)％,差异有统计学意义(t=5.930,P＜0.01)；DR对照组和药物对照组大鼠RGCs凋亡率分别为(12.4±9.9)％和(17.6±6.1)％,与各自的DR组比较,差异均有统计学意义(t=8.800、4.925,P＜0.01).空白对照组大鼠RGCs凋亡率为(16.2±6.9)％,与DR对照组和药物对照组比较,差异均无统计学意义(t=-0.989、0.951,P＞0.05).DR模型组大鼠视网膜中caspase-3比活性值为2.19±0.86,药物干预组为1.96±0.56,差异有统计学意义(t=-0.515,P＜0.05),而DR对照组和药物对照组大鼠视网膜caspase-3的活性比值分别为1.47±0.14和0.74±0.27,与各自的实验组比较,差异均有统计学意义(t=2.142、2.797,P＜0.05).DR模型组视网膜和血清中CGRP质量浓度分别为(424.4±44.2) ng/L和(148.8±39.1)ng/L,明显低于药物干预组的(543.2±74.4)ng/L和(237.5 ±78.7) ng/L,差异均有统计学意义(t=3.070、2.359,P＜0.05).结论 DR可引起RGCs凋亡,小剂量辣椒素可减少凋亡细胞数量,并诱导视网膜组织和血液内CGRP水平上调,提示CGRP对DR引起的RGCs凋亡可能有保护作用.
作者：张廷；杨继红；郭政 刊期： 2013年第01期
背景 瞳孔对光反射检查在诊断和评价视觉系统及神经系统疾病中有重要价值.小鼠动物模型的视觉系统评价技术复杂,其神经系统的评价过程受多种因素的影响,准确测量瞳孔对光反射对于快速评价动物模型的视网膜功能及诊断神经系统病变有重要意义. 目的 探讨瞳孔直径变化分析系统在小鼠瞳孔对光反射测量中的应用价值及不同的刺激光亮度对相关参数的影响. 方法 纳入10只SPF级雄性C57BL/6小鼠,受检前进行2h暗适应,然后采用瞳孔直径变化分析装置对每只小鼠均依次给予2、8、32、128、256 cd/m2 5个光亮度的白色光刺激,每次刺激与上次刺激之间至少间隔60 s,每次持续时间为100 ms,同时在暗环境中采用红外线摄像头及视频捕捉卡获取小鼠瞳孔对光反射过程的数字图像,摄取速度为60帧/s,以*.AVI格式保存文件.运用自行开发的软件系统确定瞳孔直径并输出瞳孔对光反射动态变化曲线图,获取瞳孔直径初始值(R1)、收缩幅度(CA)、收缩速度(CV)、光刺激开始时到瞳孔开始收缩时之间的潜伏期(T1)、开始收缩时至大收缩速度时的时间(T2)、开始收缩时到收缩大程度时的时间(T3)、收缩大程度时到瞳孔复张10.1％ R1时的时间(RT)及快速复张速度(RV)等参数,用Searman秩相关法分析刺激光亮度与各参数间的相关性. 结果 5个刺激光亮度组小鼠的R1值变化总体比较差异无统计学意义(F=1.117,P=0.361).刺激光亮度等级与CA变化值间呈线性正相关(r=0.508,P＜0.01),与CV及RV均呈线性负相关(r =-0.625、-0.609,P＜0.01).不同刺激光亮度组间T1值、T2值的总体比较差异均无统计学意义(F=0.202,P=0.936;F=1.584,P=0.195),刺激光亮度等级与T3值变化及RT值均呈线性正相关(r=0.791、0.609,P＜0.01).结论 瞳孔直径变化分析系统可以反映C57B L/6小鼠的瞳孔对光反射功能变化.小鼠瞳孔对光反射动态曲线分析参数受刺激光亮度的影响.瞳孔直径变化分析系统可作为视觉系统及神经系统功能评价小鼠模型的检测工具.
作者：刘锐；张磊；张浩；胡文治；夏峰；耿佳；张作明 刊期： 2013年第01期
点状内层脉络膜病变(punctate inner choroidopathy,PIC)是少见的多灶性脉络膜炎性眼病,病因不明,青年近视女性多发,常累及双眼,表现为视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)及内层脉络膜的多发小点状、边界清楚的黄白色病灶,多局限于后极部,前房和玻璃体腔无炎症[1].Watzke等[2]于1984年首次描述了PIC.国内报道较少,多被误诊为多灶性脉络膜炎、病理性近视眼底改变、特发性脉络膜新生血管(choriodal neovascularization,CNV)等.国外研究主要为高加索人群,本研究旨在分析国内PIC患者的临床特征及预后情况.
作者：沈肇萌；张琳轶；李志国；张娴；崔红波 刊期： 2013年第01期
非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)是引起中老年人视功能严重损害的常见视神经疾病,目前其发病机制尚不完全清楚,因此治疗效果并不理想,NAION的实验研究成为该病预防和治疗的方向,而建立较为理想的实验动物模型(包括啮齿类和灵长类动物)的研究已成为研究热点.近年来,NAION动物模型的建立方法不断进步,应用光动力学的方法成功建立的NAION模型使人们对该病的病理生理机制有了更加深入的了解,也为探索有效的治疗方法奠定了基础.就NAION动物模型制备过程中的实验动物选择、不同造模方法以及存在的问题进行分析综述,为进一步的实验研究提供参考.
作者：王文娟；马伟娜 刊期： 2013年第01期
背景 糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病主要的微血管并发症之一,已成为糖尿病患者致盲的首要原因.新生血管形成是DR的主要病理表现,但其作用机制不明,对其发病机制的探讨有助于为DR的早期治疗提供潜在靶点. 目的 观察内脏脂肪素(visfatin)和血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠视网膜中的表达和分布特点,探讨visfatin和VEGF在DR发生发展过程中的作用机制.方法 将60只雄性SPF级SD大鼠按随机数字表法分为糖尿病组和对照组,糖尿病组大鼠腹腔内一次性注射链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg(0.60 ml/100 g)诱导糖尿病大鼠模型,血糖≥16.7 mmol/L为造模成功,对照组以同样的方法注射等体积柠檬酸钠缓冲液.于模型建立后12周处死大鼠并提取视网膜组织,采用免疫荧光法和Western blot法分别从形态学和分子生物学水平观察和检测visfatin和VEGF在视网膜中的表达. 结果 造模后12周糖尿病组大鼠平均体质量为(189.02±11.34)g,明显低于对照组的(489.57±14.48)g,差异有统计学意义(t=5.236,P=0.003)；造模后12周糖尿病大鼠血糖水平为(29.25±3.86) mmol/L,明显高于对照组的(5.32±1.01)mmol/L,差异有统计学意义(t=11.778,P=0.000).免疫荧光双标法检测显示,对照组大鼠视网膜中visfatin和VEGF主要在视网膜神经纤维层和星形胶质细胞中呈少量表达,但在早期糖尿病大鼠视网膜全层中可见visfatin及VEGF强阳性染色,且二者呈共表达.Western blot检测显示,造模后12周糖尿病大鼠视网膜中visfatin表达水平(A值)为346.26±41.23,对照组为102.07±65.01,差异有统计学意义(t=8.291,P=0.000)；造模后12周糖尿病组大鼠视网膜中VEGF蛋白表达量(A值)为415.88±92.15,明显高于对照组大鼠的113.06±32.06,差异有统计学意义(t=10.067,P=0.000). 结论 早期糖尿病大鼠视网膜中visfatin呈高表达,提示visfatin在DR发生发展过程中可能起关键作用,其机制可能与局部高糖低氧诱导Müller细胞分泌产生,进而上调VEGF的表达有关.
作者：路强；杨晓静；崔巍；高伟 刊期： 2013年第01期
患者,男,27岁,因电焊施工后突然出现双眼红肿、疼痛、畏光、流泪、视物不清、异物感8h于济南市第二人民医院眼科就诊.急诊检查:视力右眼0.3,左眼0.5,不能矫正;裂隙灯下检查可见双眼睑皮肤红肿,球结膜混合充血(+++),可见角膜上皮点状剥脱,因患者眼部刺激症状明显未行眼底检查.诊断:双眼电光性眼炎.立即给予质量分数1％盐酸丁卡因滴眼液点眼,刺激症状消失,给予氧氟沙星眼膏、重组牛碱性成纤维细胞生长因子眼用凝胶夜间点眼以预防感染并促进角膜上皮愈合.
作者：林琳；王玉；盛艳娟 刊期： 2013年第01期
视网膜血管瘤样增生(RAP)是湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)的一种特殊类型,其基本病变为新生血管形成,但与起源于脉络膜的新生血管性疾病如隐匿性脉络膜新生血管(CNV)、经典型CNV及息肉状脉络膜新生血管病变(PCV)不同,多数学者认为RAP的新生血管起源于视网膜深层毛细血管网.目前对此病的认识尚不足,临床上存在诊断困难、疗效不理想且预后差等问题.近年来,随着对湿性AMD的深入研究以及吲哚青绿血管造影(ICGA)技术和新一代光学相干断层扫描(OCT)技术的应用,对RAP有了进一步的认识.就RAP的分期、组织学起源及组织病理学、自然病程、眼底表现特点、鉴别诊断及治疗现状进行综述.
作者：马楠 刊期： 2013年第01期
背景 糖尿病并发症的发生与脂质过氧化有关,而醛脱氢酶(ALDH)是已知的抗脂质过氧化物之一,研究ALDH在糖尿病眼组织中的活性与表达量的变化能为糖尿病性眼部并发症的诊断和治疗提供依据. 目的 研究ALDH在不同时期糖尿病大鼠眼组织中的活性与质量分数的变化趋势,探讨其在糖尿病所致眼部疾病发病过程中的作用机制.方法 将健康7～8周龄清洁级雄性SD大鼠28只按随机数字表法分为糖尿病模型组和正常对照组.糖尿病模型组大鼠腹腔注射65 mg/kg溶于柠檬酸钠缓冲液的链脲佐菌素(STZ),血糖达16.7 ～ 22.2 mmol/L为造模成功.正常对照组大鼠腹腔以同样的方式注射等量柠檬酸钠缓冲液.于造模成功后的2个月、4个月分别处死7只大鼠,制备大鼠角膜、晶状体及视网膜匀浆液,测定蛋白质质量浓度.采用M5多功能酶标仪测量角膜、晶状体及视网膜各组织中ALDH活性,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测ALDH在角膜、晶状体和视网膜匀浆中的表达量. 结果 模型建立后2个月、4个月糖尿病模型组大鼠血糖水平明显高于正常对照组,而体质量明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(均P=0.000).造模后2个月、4个月时糖尿病模型组大鼠角膜、晶状体及视网膜中ALDH活性均明显高于相应时间点的正常对照组大鼠,差异均有统计学意义(F=396.601,P=0.000)；上述各组织中ALDH活性(A 340值)均随着造模时间的延长而升高,差异有统计学意义(F=53.139,P=0.000),其中4个月时糖尿病模型组大鼠角膜、晶状体、视网膜中ALDH活性较2个月时高,差异均有统计学意义(P＜0.01),而正常对照组大鼠角膜、晶状体及视网膜中的ALDH活性在2个时间点间相比差异均无统计学意义(P＞0.05)；2个时间点正常对照组与糖尿病模型组大鼠眼组织中ALDH活性均为角膜高,视网膜次之,晶状体低,差异有统计学意义(F=6973.000,P=0.000).造模后2个月、4个月时糖尿病模型组大鼠角膜、晶状体及视网膜匀浆中ALDH表达量均明显高于正常对照组大鼠,差异有统计学意义(F=312.985,P=0.000)；2个组大鼠ALDH表达均随着造模时间的延长而增加,差异有统计学意义(F=19.203,P=0.000),2个时间点各组大鼠眼组织中ALDH表达量均表现为角膜高,视网膜次之,晶状体低,差异有统计学意义(F=3243.000,P=0.000). 结论 ALDH可减轻糖尿病大鼠眼组织的脂质氧化损伤,可能在预防糖尿病相关性眼部并发症发生方面发挥一定的作用.
作者：王明玲；胡淑芳；曹建雄；王安安；肖天林 刊期： 2013年第01期
背景 玻连蛋白是一种多功能糖蛋白.本研究组前期的动物实验表明,玻连蛋白在缺氧小鼠视网膜中表达明显增高,体外细胞实验表明高糖可以诱导人脐静脉内皮细胞人(UVECs)中玻连蛋白表达的增加.但目前尚未证实玻连蛋白在视网膜新生血管病变中的作用机制. 目的 观察玻连蛋白对高糖培养下人UVECs的细胞骨架结构、细胞迁移、细胞成管能力的影响. 方法 建立高糖培养的人UVECs体外模型,利用干扰RNA技术干扰玻连蛋白的表达.实验分为高糖组(含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养人UVECs)、阴性干扰组(对照用siRNA预干扰人UVECs后,再用含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养)和阳性干扰组(玻连蛋白siRNA预干扰人UVECs后,再用含50 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养),在各组中分别利用Western blot法检测玻连蛋白的表达量,免疫荧光细胞化学染色结合荧光显微镜观察人UVECs微丝骨架,划痕法观察人UVECs的迁移情况,Matrigel法检测人UVECs的成管能力.各组的总体差异比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用LSD-t检验. 结果 Western blot结果显示,0h时3个组间玻连蛋白表达量的差异无统计学意义(F=1.064,P＞0.05)；培养24 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白的表达量依次降低,差异有统计学意义(F=15.519,P＜0.05)；培养48 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白表达量也依次降低,3个组间的差异亦有统计学意义(F=37.521,P＜0.05).免疫荧光结果显示,24 h时高糖组中的细胞微丝骨架结构明显,阴性干扰组次之,阳性干扰组不明显；培养48 h细胞微丝骨架分布亦然.划痕实验表明,培养24 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中迁移入划痕区的细胞数量依次减少,3个组间的差异有统计学意义(F=90.685,P＜0.05)；培养48 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中迁移入划痕区的细胞数量也呈递减趋势,3个组间的差异有统计学意义(F=67.880,P＜0.05).Matrigel法证实培养6h高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中细胞形成的血管腔数目逐渐减少,3个组间的差异有统计学意义(F=86.653,P＜0.05)；培养12h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中细胞形成的血管腔数目也依次减少,3个组间的差异有统计学意义(F=18.992,P＜0.05). 结论 玻连蛋白可以引起高糖培养的人UVECs发生细胞骨架重塑、细胞迁移能力增加、细胞成管能力增强,可能是糖尿病视网膜病变(DR)新生血管形成的一个重要影响因素.
作者：王玉风；杨侠；董晓光 刊期： 2013年第01期
良性淋巴上皮病变(BLEL)又称Mikulicz病,以双侧或单侧泪腺弥漫性无痛性肿大为主要的眼部临床表现.关于该病病因及发病机制有性激素假说、转化生长因子-β(TGF-β)参与假说、基底细胞浸润增生假说、IgG4相关性假说等；该病典型的病理改变为腺体的淋巴细胞增生浸润、腺体实质萎缩、肌上皮岛在腺导管内的增生浸润所引起的腺管扩张.目前有关该病的诊断尚无统一公认的标准,临床上主要应与Sj(o)gren 综合征及炎性假瘤进行鉴别,应用糖皮质激素为其主要的治疗手段,效果不佳时则辅以泪腺区体外放射治疗和/或手术切除.
作者：崔忆辛 刊期： 2013年第01期
中华实验眼科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
