丛蔚；刘波；蒋玉玲；肖晶
目的：目的：研究与牙齿发育相关的骨形态发生蛋白7（bone morphogenetic proteins 7，BMP7）信号分子在小型猪乳磨牙胚中的特异性时空表达情况。方法：采用小型猪第三乳磨牙胚作为研究对象，获取不同孕期的小型猪胎猪胚胎的下颌骨，分别进行 HE 染色、免疫组织化学染色、放射性核素标记探针的原位杂交及实时定量 RT －PCR 检测 BMP7分子在小型猪乳磨牙不同发育时期的表达情况。结果：HE 染色显示小型猪第三乳磨牙在胚胎 E40、E50、E60分别处于帽状期、钟状期以及钟状晚期（分泌期）。免疫组织化学染色从蛋白水平显示，BMP7在 E40时在成釉器和间充质均有表达，成釉器表达相对强于间充质；在 E50时，BMP7仍然表达在牙胚成釉器和间充质，与 E40表达情况类似；在 E60时则主要集中表达在间充质特别是前成牙本质细胞和前成釉细胞。原位杂交与实时定量 RT －PCR 从 mRNA 水平也验证了其表达趋势与免疫组织化学基本一致。结论：BMP7信号分子在小型猪乳磨牙发育过程中呈特异性的时空表达，提示其与牙齿形态发生和细胞分化相关。
作者：高振华；范志朋；张春梅；王松灵 刊期： 2015年第02期
目的：研究小鼠舌肌发育的分子调控机制。方法：取胚胎第13．25天（E13．25）及 E15．5小鼠舌组织。应用 Affy-metrix Mouse GeneChip，对胎鼠舌发育过程中的差异基因进行筛选。应用 DAVID 网络分析工具对基因进行功能和聚类分析。结果：基因功能和聚类分析表明，在 E13．25高表达的基因主要与细胞周期相关因子（Exo1、Gsk3B、Kif20b、Skp2）和细胞粘附因子（Neo1、lama1）等相关。在 E15．5高表达的基因主要与细胞骨架（titin、Hspb7）相关。结论：小鼠舌组织增殖和特化与细胞周期和细胞粘附基因相关，舌组织分化和成熟主要与细胞骨架相关。
作者：丛蔚；刘波；蒋玉玲；肖晶 刊期： 2015年第02期
作者：《口腔生物医学》杂志编辑部 刊期： 2015年第02期
目的：通过优化条件培养基用于非牙源性上皮细胞的体外扩增，为进一步开展组织工程牙提供上皮种子细胞来源奠定基础。方法：获取出生后1 d C57BL 鼠原代口腔黏膜上皮细胞，接种于含有 Y27632的上皮条件培养基的培养瓶内。细胞长满后，消化传代，采用条件培养基与3T3饲养层细胞共培养进行扩增并连续传代，观察细胞生长情况及连续传代后的生物学特性，免疫组织化学进行干细胞鉴定。结果：与传统上皮细胞培养方式相比，含 Y27632的条件性培养基加3T3饲养层方式培养的上皮细胞生长迅速，细胞呈立方形或多角形，呈铺路石样排列。免疫组织化学染色表明这些干细胞表达 CK14，SOX2和LGR5。连续传代至第7代后，细胞形态、生长曲线和干细胞标志没有明显变化。结论：含有 Y27632的条件培养基可有效用于体外大量扩增非牙源性上皮细胞，并能保持干细胞生长特性，有望用于组织工程牙的种子细胞来源。
作者：杨敏；王胜楠；李孟倩；刘昭岑；刘玲伶；张满金；王福 刊期： 2015年第02期
目的：检测维甲酸（Retinoic acid，RA）诱导小鼠胚胎腭裂模型中胎鼠舌体发育过程中肌相关 microRNAs（MyomiRs）、成肌调节因子（Myogenic regulatory factors，MRFs）以及 Pax 基因的表达变化，探究 MyomiRs 在舌肌分化过程中的调控作用，推测RA 致胎鼠腭裂伴发舌异常的可能机制。方法：建立 RA 诱导小鼠胚胎腭裂模型，分别在 E13．5、E14．5、E15．5收集胎鼠舌体组织，用 SYBR GreenⅠ实时定量 PCR 检测舌体中 MRFs 和 Pax 基因的表达；用 TaqMan 探针实时定量 PCR 检测舌体中 MyomiRs 的表达。结果：胎鼠舌体发育过程中，正常组 miR-1和 miR-206相对表达量均持续上升，RA 诱导组二者变化趋势与正常组相似，但相对表达量均低于正常组，miR-1的结果在 E14．5和 E15．5具有统计学意义（P ＜0．01），miR-206的结果在 E13．5具有统计学意义（P ＜0．05）。正常组和 RA 诱导组胎鼠舌体中 MyoD 和 Myf5相对表达量都在 E14．5达到峰值，随后下降。RA 诱导组 MyoD 的表达在 E14．5显著低于正常组（P ＜0．05），在 E15．5显著高于正常组（P ＜0．01）；RA 诱导组 Myf5的表达在 E15．5显著低于正常组（P ＜0．05）。正常组和 RA 诱导组胎鼠舌体中 Pax3表达均在 E14．5达到峰值，Pax7表达均在 E15．5达到峰值。RA 诱导组 Pax3的表达在 E14．5显著高于正常组（P ＜0．05）；Pax7的表达则在 E13．5显著高于正常组（P ＜0．01）。结论：在舌肌分化过程以及RA 诱导腭裂胎鼠的舌发育异常中，miR-1／miR-206与 Pax3／Pax7及 Myf5／MyoD 的表达趋势具有相关性。RA 可能通过下调 miR-1／miR-206而靶向上调 Pax3／Pax7，进而下调 MyoD ／Myf5表达，从而抑制舌肌分化，导致舌肌发育异常。
作者：李楠；胡子钰；刘波；丛蔚；肖晶 刊期： 2015年第02期
1．牙科浸泡着色氧化锆陶瓷的细胞毒性研究／石连水…／／实用口腔医学杂志．－2015，31（1）．－20－22采用浸泡着色的方法制备 NH4 VO3、FeCl3、Co （NO3）3、Ni（NO3）3、MoCl35种过渡金属着色的氧化锆3Y-TZP 瓷块，用瓷块浸提液体外培养小鼠成纤维细胞（L-929）3 d，观察细胞形态并用 MTT 法测试吸光度值评价各着色瓷块的细胞毒性。结果：各组细胞培养3 d 后生长良好，形态正常，各实验组的毒性评级为0～I 级。结论：5种染色液浸泡着色所得氧化锆陶瓷无细胞毒性。
作者： 刊期： 2015年第02期
目的：探究两种 fimA 型牙龈卟啉单胞菌对人脐动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法：采用组织块贴壁法培养人脐动脉平滑肌细胞。在厌氧条件下培养ⅠfimA、ⅣfimA 型牙龈卟啉单胞菌，并与人脐动脉平滑肌细胞共同培养；在共培养2、8、24和48 h 时，采用 CCK-8法检测细胞生长状况。结果：ⅠfimA 型牙龈卟啉单胞菌刺激人脐动脉平滑肌细胞后8 h，促增殖作用明显，但是24和48 h 平滑肌细胞增殖受到抑制（P ＜0．05）；ⅣfimA 型牙龈卟啉单胞菌对人脐动脉平滑肌细胞没有明显促细胞增殖或细胞毒性作用。结论：ⅠfimA 型和ⅣfimA 型牙龈卟啉单胞菌对人脐动脉平滑肌细胞的作用存在差异，ⅠfimA 型牙龈卟啉单胞菌有明显的促平滑肌细胞增殖和细胞毒性作用。
作者：贾惠杰；李文军；葛颂 刊期： 2015年第02期
本文介绍了 JMJD2基因家族的成员组成，简述了其在组蛋白甲基化修饰中的作用及其机制，指出 JMJD2D 基因通过调控组蛋白甲基化及去甲基化过程参与多种基因重组过程。对 JMJD2D 基因在干细胞分子机制水平的研究将促进其在干细胞组织生物工程学中的发展和应用，为未来的研究指明方向。
作者：王京京；单兆臣；范志朋 刊期： 2015年第02期
作者：[1]中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会；[2]山东大学口腔医院 刊期： 2015年第02期
1．不同牙科设备对植入型心率转复除颤器的影响（英）／Ma-heshwari KR…／／J Endod．－2015，41（5）．－692－695植入型心率转复除颤器通过导线和电极向心脏发射电流信号，用于心率监控和治疗。电子的牙科设备会产生电磁场，因此，我们猜测其可能会影响植入型心率转复除颤器的功能。该研究使用多种牙科电子设备，包括携热头、根尖定位仪、牙髓电活力测试仪、单极电刀、马达、光固化灯和牙胶枪头，用来测试对四个植入型心率转复除颤器的影响，包括两个单腔除颤器和两个双腔除颤器。用特定程序监控植入型心率转复除颤器的活动，并通过电图测试条评估。发现马达、光固化灯、电活力测试仪都会对设备产生干扰，但没有电磁扰乱的情况出现。热压胶枪头、携热头和根尖定位仪的测试中，没有发现对除颤器设备的电磁干扰。然而，单极电刀会影响双腔除颤器，在没有房颤发生的时候发射治疗房颤的治疗电流。实验结果表明单极电刀会产生电磁干扰，导致不需要的治疗出现，可能会导致休克及一些潜在的临床症状。
作者： 刊期： 2015年第02期
目的：骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）在调节颅骨锁骨发育不全（cleidocranial dysplasia，CCD）患者骨结构中发挥关键作用，本研究通过与正常 BMSCs 比较分析，探讨 CCD 患者 BMSCs 的体外增殖、成骨分化、干性及衰老特征。方法：分离培养 CCD 患者及正常同龄人 BMSCs；甲基噻唑基四唑（MTT）法及流式细胞周期分析其增殖能力；成骨诱导后采用Western blot 及茜素红染色分析其成骨能力；检测多潜能转录因子及克隆形成，分析其干性能力；检测衰老调控关键基因 p16、p21表达及通过β-gal 衰老染色分析其衰老特征。结果：与正常 BMSCs 相比，BMSCs-CCD 增殖活性低，且细胞周期中处于 S期、G2的细胞比例较低；两组细胞成骨诱导1、3、7 d 后，BMSCs-CCD 组中 Runt 相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、成骨细胞特异性转录因子 Osterix、骨桥蛋白（Osteopontin，Opn）表达水平较正常组低；成骨诱导14 d 后，BMSCs-CCD组形成的钙化结节较正常组少；BMSCs-CCD 组中多潜能转录因子 Oct4、Nanog、Sox2表达及克隆形成率均较正常组低；相反， BMSCs-CCD 组中 p16、p21等衰老标记分子表达及衰老细胞阳性染色比例均较正常组高。结论：同正常 BMSCs 比较，CCD 患者 BMSCs 的增殖能力、成骨能力、干性强度均较差，且更易衰老。这些特征可能是 CCD 患者易发骨质疏松及骨折的生物学机制之一。
作者：张娟；戈杰；李光南；周培培；江宏兵 刊期： 2015年第02期
目的：研究人骨形态发生蛋白-2（bone morphogenetic protein，BMP-2）对人炎症牙髓组织来源的牙髓干细胞（dental pulp stem cells from inflamed pulps，DPSCs-IPs）体外骨向诱导分化的影响。方法：取第三代 DPSCs-IPs，按是否于培养基中加入 BMP-2分成：BMP-2＋DPSCs-IPs 组（实验组）和 DPSCs-IPs 组（对照组）。无成骨诱导条件培养1周后，对各组分泌的胶原基质行 Tri-chrome 染色，观察并比较实验组和对照组之间的骨向诱导分化情况；实时定量 RT-PCR 检测二者的Ⅰ型胶原蛋白（collagenⅠ，COL-Ⅰ）mRNA 表达情况。在成骨诱导条件下，培养3周后对各组分泌的钙化基质行 Von Kossa 染色，通过实时定量 RT-PCR 检测转录因子及成骨相关基因的表达。结果：无成骨诱导培养1周后，实验组 DPSCs-IPs 分泌的胶原基质 Trichrome 染色较对照组深， COL-ⅠmRNA 的表达水平显著上调（P ＜0．05），说明 BMP-2可诱导 DPSCs-IPs 沉积更多的胶原基质；成骨诱导培养3周后，相对于对照组，实验组 DPSCs-IPs 沉积了更多的钙化基质，Nanog、八聚体结合转录因子4（octamer-binding transcription factor 4，Oct4）、性别决定区因子（SRY-related high-mobility group box 2，Sox2）等转录因子表达升高，碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、骨钙素（osteocalcin，OCN）、骨涎蛋白（bone sialoprotein，BSP），牙骨质蛋白1（cementum protein 1，CEMP-1）、COL-Ⅰ等成骨相关基因表达水平显著上调（P ＜0．05）。结论：BMP-2在成骨诱导条件下可促进 DPSCs-IPs 进行体外骨向诱导分化。
作者：邓云贞；李珏丹；魏虹；石建峰；李昂；苟建重 刊期： 2015年第02期
王松灵，1962年11月出生，男，教授，主任医师。1979年至1989年本科、硕士、博士就读于北京医科大学口腔医学院；1991年至1992年在日本东京医科齿科大学攻读博士后，1996至1998年在美国国立牙颅颌研究所做高级访问学者；1999年至2005年任首都医科大学口腔医（学）院副院长；2005年2月至今，任首都医科大学副校长。主要研究方向为唾液腺疾病诊治及研究、牙齿发育和再生研究。在《PNAS 》、《Blood 》、《Stem Cells》等发表 SCI 收录英文论文99篇；获 William J．Gies 奖、《JDR》佳封面论文奖，2003年及2010年以第一完成人两次获得国家科技进步二等奖；为全国百篇优博论文指导教师，中华口腔医学会口腔生物医学专委会主任委员，口腔医学教育专委会主任委员；8本国际期刊编委，《中华口腔医学杂志》等6本国内医学期刊副主编，主编专著及教材8部。
作者： 刊期： 2015年第02期
唇腭裂是口腔颌面部常见的一种先天性发育畸形，是一种复杂的、由遗传和环境因素相互作用所致的多基因多因素遗传病。现已发现很多与唇腭裂相关的基因，包括 TGFα、F13A、BCL3、MSXl、RARA、TGF-β3、SHH 等。本文综述了 TGF-β信号通路中2个与唇腭裂发病相关的热点基因 TGF-β3和 TGFBR1的研究现状，着重介绍了 TGF-β3和 TGFBR1在腭部发育中的作用，拟为唇腭裂的机制研究提供线索。
作者：孙林栋；杜娟 刊期： 2015年第02期
目的：比较不同蛋白质提取方法在牙胚蛋白提取中的效果，寻找适合牙齿发育高通量蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。方法：取猪胚胎第40、50、60天第三乳磨牙牙胚，利用碱性碳酸盐溶液提取牙胚初步钙化部分的蛋白，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳比较液氮研磨法和电动研磨器研磨法提取牙胚总蛋白效果，BCA（bicinchoninic acid）蛋白浓度测定法比较 RIPA 裂解液与尿素溶液提取牙胚总蛋白含量。结果：与液氮研磨法相比，电动研磨法提取蛋白后的聚丙烯酰胺电泳图谱蛋白条带明显更深，蛋白含量高。尿素溶液对牙胚总蛋白的提取量高于 RIPA 裂解液组，蛋白电泳分离效果均可。结论：采用电动研磨器研磨牙胚，组织损失量小，提取蛋白效果好于液氮研磨；采用尿素溶液提取牙胚总蛋白效果优于 RIPA 裂解液。初步找到适合下游高通量蛋白质组学分析的牙胚蛋白提取方法。
作者：李阳；龚依伊；谢亦林；王劲松；张春梅；王松灵 刊期： 2015年第02期
作者：《口腔生物医学》杂志编辑部 刊期： 2015年第02期
目的：研究深低温冻存对牙周膜干细胞膜片增殖和分化能力的影响。方法：将牙周膜干细胞膜片用90％胎牛血清＋10％ DMSO 冻存液冻存3月后复苏，采用甲基噻唑基四唑（MTT）法、von Kossa 染色和油红 O 染色法检测冻存对增殖和分化的影响。结果：冻存牙周膜干细胞膜片与新鲜牙周膜干细胞膜片的增殖率和成骨、成脂分化能力没有明显差异。结论：牙周膜干细胞膜片经深低温保存后可继续保持冻存前原有的增殖能力和多向分化能力。
作者：魏福兰；马晓妮；张凡 刊期： 2015年第02期
口腔生物医学杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
