学术投稿

登革2型病毒B株E基因部分序列原核蛋白表达及单克隆抗体制备

刘世国;郑红;陈姗;李勤;张里克;严春潮

关键词:登革2型病毒, E基因序列, 原核表达, 单克隆抗体
摘要:目的 通过构建登革2型病毒B株E基因区1~476 bp的原核表达载体,进行原核表达,并制备单克隆抗体,为研制登革病毒诊断试剂奠定基础.方法 将登革2型病毒B株E基因序列克隆入原核表达载体pET28a(+),构建原核表达重组体pET28a(+)-E,将重组表达载体转化BL21(DE3)菌株进行原核表达.纯化后的蛋白免疫BALB/e小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体.结果 成功构建了pET28a(+)-E原核表达重组质粒,SDS-PAGE分析表明,E基因区部分序列获得高效表达,获得了1株持续分泌抗E蛋白抗体的杂交瘤细胞株8B3,该单抗为IgG2a亚类.结论 成功制备了抗E蛋白mAb,为对登革病毒引起感染的早期诊断提供了有力的工具.
公共卫生与预防医学杂志相关文献
  • 支气管肺泡灌洗术治疗婴幼儿重症肺炎应用效果观察

    ICU肺部严重感染患儿,因其免疫功能和咳嗽反射较差,常合并其它系统的疾病,极易出现肺部感染加重、肺不张等情况,使病情恶化,增加住院时间和费用.纤维支气管镜因可直接冲洗支气管中分泌物、减轻肺不张、缓解肺部急症等优点,目前已广泛应用于成人以及大龄儿童肺部感染,但在婴幼儿重症肺炎中应用及疗效等情况目前报道颇少.

    作者:许慧;黄成姣;任加红;周小勤;张姝 刊期: 2011年第02期

  • 黄石市2008-2010年上半年手足口病流行病学分析

    目的 分析黄石市2008-2010年上半年手足口病发病情况,探讨流行规律,为制定手足口病防控策略提供科学依据.方法 采用描述性流行病学方法,对黄石市手足口病疫情报告资料进行统计分析.结果 2008-2010年上半年黄石市共发生手足口病4666例,死亡2例,发病率有明显上升趋势.全年均有病例报告,但有明显的季节性发病高峰,主要集中在第15~30周;发病年龄主要集中于5岁以下年龄组,占总发病数的96.25%,发病率男性高于女性;发病职业以散居儿童、幼托儿童为主,分别占总发病数的70.04%和25.68%;病原监测结果提示由EV71、COXA16和其他肠道病毒混合感染,2010年主要由EV71引起,占送检样本的37.50%.结论 手足口病发病具有明显的季节性和年龄、性别、职业差异,应注重重点人群监管,加强疫情监测,减少发病和死亡.

    作者:钱足庶;赵克提;褚智杰;周军;陈海莲 刊期: 2011年第02期

  • 重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用

    目的 观察重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因(Ad-HGF)对铅致动脉内皮细胞损伤的保护作用,为Ad-HGF保护血脑屏障提供理论依据.方法 实验设正常组、转染组、铅染组、转染加铅染毒组.转染加铅染毒组用Ad-HGF转染动脉内皮细胞48 h后,加入20μmol/L的醋酸铅,24h、48 h后分别用Giemsa染色法观察细胞形态学变化;细胞免疫化学法检测P53的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 染色显示出铅单独染毒组细胞成凋亡形态学改变.转染加铅染毒组动脉内皮细胞的免疫化学结果显示P53阳性表达较对照组下降.MTT结果表明铅处理不同时间点(6 h、12 h、18 h、24 h、48 h)后,转染加铅染毒组细胞增殖率与铅单独染毒组比较没有显著升高(P>0.05),转染组的增殖率略高于对照组(P<0.05).醋酸铅组细胞凋亡率较对照组明显升高,转染组较未转染组比较细胞凋亡率明显下降.结论 Ad-HGF具有抗细胞凋亡作用,为解释Ad-HGF对铅致血脑屏障的损伤保护效应提供有力的理论和实验依据.

    作者:贾庆华;徐娟;杨志华;杨霄鹏;哈小琴;昌业伟 刊期: 2011年第02期

  • 登革2型病毒B株E基因部分序列原核蛋白表达及单克隆抗体制备

    目的 通过构建登革2型病毒B株E基因区1~476 bp的原核表达载体,进行原核表达,并制备单克隆抗体,为研制登革病毒诊断试剂奠定基础.方法 将登革2型病毒B株E基因序列克隆入原核表达载体pET28a(+),构建原核表达重组体pET28a(+)-E,将重组表达载体转化BL21(DE3)菌株进行原核表达.纯化后的蛋白免疫BALB/e小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体.结果 成功构建了pET28a(+)-E原核表达重组质粒,SDS-PAGE分析表明,E基因区部分序列获得高效表达,获得了1株持续分泌抗E蛋白抗体的杂交瘤细胞株8B3,该单抗为IgG2a亚类.结论 成功制备了抗E蛋白mAb,为对登革病毒引起感染的早期诊断提供了有力的工具.

    作者:刘世国;郑红;陈姗;李勤;张里克;严春潮 刊期: 2011年第02期

  • 湖北省市售酱油中氯丙醇的调查分析

    氯丙醇是现代酱油生产工艺中由于使用酸水解植物蛋白(hydrolyzed vegetable protein,HVP)而引入的一种致癌物,具有肾脏和生殖毒性,甚至遗传毒性,因此酱油中氯丙醇污染已成为国际性的食品安全问题倍受关注.

    作者:罗苹;姚永祥;聂晓明;陈明 刊期: 2011年第02期

  • 黄冈市2005-2010年狂犬病疫情分析

    目的 了解黄冈市近6年来狂犬病流行特点、趋势及影响因素,为狂犬病的防治提供科学依据.方法 采用描述流行病学方法对全市2005-2010年狂犬病个案进行分析.结果 全市2005-2008年共报告130例狂犬病病例,年均发病率为0.316/10万,病死率为100%.全市10个县市区均有病例报告,黄梅、蕲春、麻城是我市狂犬病高发地区,共报告69例(53.08%);发病人群以中老年人为主,主要集中在40~70岁之间,报告79例(60.77%);以农民为主,报告病例占总发病数的71.54%;男性多于女性;伤人动物以犬为主.被动物致伤后78.37%的病例对伤口未做任何处理或自行简单处理,75.68%的病例未接种疫苗/或注射抗血清.结论 近几年来黄冈狂犬病疫情虽然有所下降,但是狂犬病的病死率为100‰,因此,我们仍应加强狂犬病尤其是农村狂犬病的综合防制工作.

    作者:王芬;舒天翅 刊期: 2011年第02期

  • 秦州区外出务工人员以农村文化为载体的艾滋病健康干预活动效果评价

    近年来,流动人口成为艾滋病病毒(HIV)感染的潜在危险[1.2].中国流动人口的主流是农村剩余劳动力进城务工,成为性病艾滋病在城乡间传播的桥梁人群[3].秦州区现有户籍人口约64万,外出务工人群14万.

    作者:周秦元;何亮;李九鹤;杨斌;赵迎春;刘霞 刊期: 2011年第02期

  • 柳州市2009年乙类传染病流行病学分析

    为了解柳州市法定乙类传染病流行规律和变化趋势,为制定全市传染病的预防控制策略和措施提供科学依据,现将柳州市2009年法定乙类传染病疫情分析如下.

    作者:沈潘燕;钟柳青;俸卫东 刊期: 2011年第02期

  • 武汉市结核病防治医防合作模式的利益相关集团分析

    目的 探讨武汉市结核病医防合作模式各相关利益集团及其相互作用,分析现阶段医防合作中存在的问题.方法 采用利益相关集团分析,根据各利益集团在医防合作模式中的特点,明确各个集团的利益、资源、动用能力和立场.结果 政府、结防机构、结核病专科医院、综合医院、社区卫生服务机构和结核病患者是医防合作模式中的主要利益集团,拥有组织资源、技术资源、信息资源、人力资源和经费等;武汉市医防合作实施的外部环境较好.结论 武汉市医防合作模式的顺利开展和实施必须发挥政府的主导作用,解决集团之间的沟通不畅、补偿不到位、人力资源不足、过度检查等问题,保证医防合作的顺利实施.

    作者:杨瑞;赵凌波;卢祖洵 刊期: 2011年第02期

  • 碘海醇注射液临床前安全性试验研究

    碘海醇是一种非离子型X线造影剂,以它为主要成分的碘海醇注射液,可广泛应用于血管造影、蛛网膜下造影及体腔内造影等临床检查[1].本试验根据<化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则>[2]的要求,对其安全性进行了评价,为新药注册及临床安全用药提供参考依据.

    作者:杨文祥;瞿晶菁;刘春霞;刘瑶;唐晓荞;孙凡中;樊柏林 刊期: 2011年第02期

  • 湖北血吸虫病流行区防治人员理论及实践技能竞赛结果分析

    湖北省是我国血吸虫病流行较严重的地区之一,属于湖沼型流行区,有螺面积居湖北(36.5%)、湖南(31.2%)、江西(17.7%)、安徽(7.9%)及江苏(5.9%)[1]5省之首.近年来实施以传染源控制为主的防治策略,全面开展人畜查治、钉螺查灭、晚血救治、健康教育、粪便管理等血吸虫病综合治理工作,顺利实现了以行政村为单位人畜感染率降至3%以下的年度目标.

    作者:罗伟;元艺;罗智敏;苏正明;代凌峰 刊期: 2011年第02期

  • 武汉市2001-2009年乙型肝炎流行病学特征分析

    目的 了解武汉市乙型肝炎发病情况及流行病学特征,为制定控制策略和措施提供科学依据.方法 采用描述流行病学方法,对2001-2009年武汉市乙型肝炎疫情资料进行统计分析.结果 0~14岁年龄组发病率明显下降,其他各年龄组发病率均呈上升趋势.城区发病明显高于郊区.农民(含民工)所占比例高,占乙型肝炎发病总数的19.20%,除农民(含民工)外,其余职业构成呈下降趋势.结论 应在加强新生儿及儿童乙肝免疫接种工作的同时,加大对成人及农村成年人乙肝疫苗的免疫接种工作.

    作者:杜虹;陈剑;李秋玲 刊期: 2011年第02期

  • 武汉市江夏区血吸虫病疫情变化趋势分析

    江夏区是湖北省武汉市血吸虫病重流行区之一,全区境内湖泊、河流众多,有金水河、西凉斧头湖、梁子湖、汤逊湖和长江五大水系,属典型湖沼型血吸虫病流行区,每年受长江水位影响,防治难度极大,为实现国家2004-2015年防治血吸虫病中长期规划目标,2004年以来全区开展了以控制传染源为主的防治策略,血吸虫病疫情发生了较大变化,为了解全区疫情控制效果,对2004-2009年查治病和查灭螺工作数据建库分析,评价疫情变化趋势.

    作者:余芳;帅勤然;康丽君;余文杰;高兰;肖瑛;朱惠国 刊期: 2011年第02期

  • 医用空气净化消毒机效果评价

    KJ360-CMD型医用空气净化消毒机是一种可对微小环境空气进行净化、消毒的设备.主要应用医院手术室、病房、候诊室等需对空气质量、细菌浓度进行控制的环境.通过模拟现场实验,对空气净化消毒机不同运行时间段进行相关指标检测.在空气净化功能、消毒效果、设备运行排风量、设备功能是否符合国家相关标准规定要求,并采用概数计算方法对设备功能实验结果进行计算,为空气消毒净化设备功能性评价工作提供一个新的方法[2].

    作者:李泉;罗文斌;柳振安 刊期: 2011年第02期

  • 重视医院洁净环境的卫生监测与卫生监督管理

    随着我国经济的发展及卫生管理部门对医院环境越来越严格的要求,特别是2003年SARS在医院爆发流行后,医院洁净环境建设越来越普遍.在未来数年内,我国将在县一级以上的医院中广泛开展以洁净手术室为代表的医院洁净环境建设.由此,对医院洁净环境的卫生监测和卫生管理也成为一个日益突出的问题.

    作者:李十月;唐利军 刊期: 2011年第02期

  • 湖北省淡水鱼中孔雀石绿、结晶紫监测结果分析

    目的 了解湖北省淡水鱼中孔雀石绿、结晶紫残留状况.方法 采用高效液相色谱法-荧光检测器对180份淡水鱼样品进行孔雀石绿、结晶紫检测.结果 180份淡水鱼中分别有22份、1份检测出孔雀石绿、结晶紫,其检出率分别为12.22%、0.56%.结论 部分淡水鱼存在孔雀石绿残留,应加强水产品在养殖、运输和储存等过程的监管.

    作者:邵生文;闻胜;王艳;聂晓明;刘晓燕 刊期: 2011年第02期

  • 医护人员对医院洁净环境感受状况分析

    医院洁净环境是洁净技术在医院中的应用,是人工建造的、相对独立的、对空气进行三级过滤(初、中、高效空气过滤器)集中处理的环境[1].人们在不同的环境下工作会对环境产生感受,进而影响他们对这一环境的评价,而这一评价将直接影响到他们的工作[2,3].

    作者:谢曙光;唐利军;梅国良;陈如程;吴培华;燕虹;李十月 刊期: 2011年第02期

  • 随州市受HIV/AIDS影响子女关怀支持调查

    自2001年4月随州市发现首例艾滋病人以来,受艾滋病影响家庭的子女就面临着学习、家庭、心理和社会歧视等各方面的问题,他们对社会各方面的关怀支持也就显得十分迫切.因此,及时向受HIV/AIDS影响子女提供关怀支持,引导他们积极健康的成长显得尤为重要.2010年8月,对随州市受HIV/AIDS影响子女2009年获得的关怀支持情况进行了调查,以了解随州市对受HIV/AIDS影响子女的关怀支持现状.

    作者:何雨桥;金晓舟 刊期: 2011年第02期

  • 不同分娩方式对盆底功能近期影响的临床观察

    盆底功能障碍性疾病对妇女尤其是老年妇女的日常生活和身心健康均造成了严重影响.大量研究证明,盆底功能障碍性疾病与妊娠相关.通过对2007年11月至2008年4月在湖北省妇幼保健院分娩后进行盆底功能测定的149名产妇进行分析,以评估分娩方式对盆底功能的近期影响.

    作者:雷亚兰;高鹰;任为;唐婉;刘芳 刊期: 2011年第02期

  • B-Lynch缝合治疗19例难治性产后出血临床效果观察

    产后出血(PPH)是产科严重并发症,产后迅速大量的失血可导致失血性休克,危及产妇生命.当前,PPH依然是孕产妇死亡的首位因素[1].由于我国剖宫产率明显上升,剖宫产术中发生难治性大出血例数也相应增多,其病因主要为前置胎盘、胎盘植入、双胎、巨大儿、子宫收缩乏力等.

    作者:赵云;肖梅;汤斐 刊期: 2011年第02期

公共卫生与预防医学杂志

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主管:湖北省卫生计划生育委员会

主办:湖北省预防医学会;中华预防医学会;湖北省疾病预防控制中心