高温纤维素分解菌筛选及JSU-5产纤维素酶条件的优化

乳酸钠在生物合成L-苯基乙酰基甲醇中的应用

用乳酸钠作为丙酮酸的前体物质,生物合成L-苯基乙酰基甲醇(L-Phenylacetylcarbinol,L-PAC),控制NADH来抑制醇脱氢酶的活性降低副反应,提高酵母活细胞生物合成的L-PAC产量.实验结果表明,乳酸钠合成L-PAC的佳反应条件为时间8 h,温度30℃,pH6.5,乳酸钠用量是22 mmol/L,L-PAC产量为12.3g/L.生产等量L-PAC所耗的丙酮酸为160 mmol/L,采用乳酸钠作为丙酮酸的替代品,可大幅度降低生产成本,并有利于工业化生产.

作者：周娴；汤峰；许激扬 刊期： 2009年第03期

基因工程菌生物合成叔亮氨酸的条件研究

研究酶法合成叔亮氨酸的反应条件.利用产亮氨酸脱氢酶基因工程菌和产甲酸脱氢酶基因工程菌进行混合全细胞生物转化反应合成叔亮氨酸,考察了诱导剂IPTG浓度、诱导温度和诱导时间等不同诱导条件对产亮氨酸脱氢酶基因工程菌和产甲酸脱氢酶基因工程菌产酶比活力的影响,确定了两种基因工程菌优化的诱导表达条件;通过单因子试验(如转化pH值、转化温度、底物浓度和菌体浓度等)来研究不同反应条件对基因工程菌催化合成叔亮氨酸的影响.结果:工程菌催化合成叔亮氨酸的适pH是9.5,适合的反应温度为30℃,且两种重组菌的反应湿重比为2∶1时,可达到高的产量.较高的底物浓度会对反应产生抑制作用,适当提高菌体浓度可以降低底物的抑制作用.通过采用底物分批流加的添加方法,得到了更好的转化效果,后可达到叔亮氨酸产量为42 mg/ml.

作者：黎舒婷；王旻 刊期： 2009年第03期

抗生素生物合成基因的克隆策略

微生物产出众多结构和生物活性多样的抗生素,其生物合成基因簇的克隆是深入研究其合成机制、提高产量和改造其结构的必要前提.文章对抗生素生物合成基因的克隆策略,从比较传统的方法如鸟枪克隆、变株互补克隆、抗性基因连锁克隆、反向克隆、基因同源克隆等至比较现代发展起来的基因异源表达、直接测序和直接合成获得目标生物合成基因簇等新进展进行了综述.

作者：王以光 刊期： 2009年第03期

一种流感疫苗脂质体的制备工艺开发

探讨一种制备流感疫苗脂质体的方法及其佳处方并对其免疫原性及稳定性进行初步考查.以大豆卵磷脂、胆固醇为原料,采用薄膜分散法制备流感疫苗脂质体,用均匀设计法筛选流感疫苗脂质体的佳处方.以包封率为指标,考查各因数对制备工艺的影响.结果表明佳制备工艺为:PBS pH:7.0,卵磷脂与胆固醇用量比:300:100,流感疫苗用量:11ml,PBS用量:20ml.根据优化处方制得的流感疫苗脂质体包封率可达84.78%,呈圆形和椭圆形,粒度分布均匀,平均粒径为2.5μm左右,低温保存稳定,免疫原性好.

作者：林意菊；马波；鲁卫东；代云波；陆伟；赵琼英 刊期： 2009年第03期

麦冬多糖通过S1P1通路保护OGD条件下细胞生存

为研究1-磷酸鞘氨醇受体1(S1P1)通路在模拟缺血的OGD(氧气和糖剥夺)条件下麦冬多糖MDG-1的细胞保护作用中的角色,以阐明MDG-1细胞保护作用机制.利用RT-PCR和Western blotting实验,研究MDG-1对S1P1通路的调节作用,并利用化学合成siRNA阻断S1P1表达,同时构建S1P1-全长cD-NA序列的真核表达载体作为阳性对照,在OGD条件下,用LDH法检测细胞死亡率.结果表明MDG-1具有显著的细胞保护作用,可保护细胞减少OGD诱导的细胞死亡,上调S1P1蛋白表达,而转染siRNA能阻断S1P1表达,并使MDG-1的细胞保护作用受到明显抑制.限制性酶切消化、PCR、测序结果证实S1P1-pcDNA3.1b载体构建成功,转染入S1P1-pcDNA3.1b载体的HEK293细胞S1P1表达增强,并可减少OGD诱导的细胞死亡.这些结果表明MDG-1可能是通过激活S1P1通路,减少OGD诱导的细胞死亡,起到细胞保护作用.

作者：王硕；冯怡；丁侃；王新平；徐德生 刊期： 2009年第03期

合欢皂甙julibroside J12抑制血管生成的实验研究

研究合欢皂甙julibroside J12对血管生成的影响.体外细胞培养模型的实验研究表明合欢皂甙julibroside J12在0.1～1.0 g/ml的浓度下能显著抑制人微血管内皮细胞(HMEC)的增殖以及体外小管的形成,当浓度为0.2 g/ml时抑制HMEC的迁移.体内鸡胚尿囊绒膜(chorioallantoic membrane,CAM)模型的实验研究表明在一定浓度范围内(10～50 g/鸡胚)可明显抑制CAM的血管生成.

作者：花慧；冯磊；张小平；张莲芬；金坚 刊期： 2009年第03期

地高辛与喹诺酮类抗菌药相互作用的研究进展

文章综述了地高辛与喹诺酮类药物相互作用研究进展.结果显示:喹诺酮类抗菌药与地高辛相互作用小,基本不引起药代动力学的改变,除加替沙星外未发现喹诺酮类抗菌药与地高辛合用引起地高辛中毒的病例,因此喹诺酮类药物可作为服用地高辛治疗的心力衰竭患者在发生感染时选择的药物.

作者：陈强；于慧斌；范书峤；杨洁 刊期： 2009年第03期

SUMO-BMP7融合蛋白的表达及纯化

采用融合表达技术,将BMP-7与SUMO(Small ubiquitin-related modifier)基因通过PCR技术连接起来,组成SUMO-BMP7基因片段,双酶切后插入到pET28a载体中克隆,挑取单克隆进行酶切及菌落PCR检测,提取检测结果为阳性的质粒,转化进大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.SUMO属于小泛素样修饰因子,具有帮助蛋白质折叠的作用,可提高目的蛋白的表达量和增加目的蛋白的可溶性,经特异性酶切后,目的蛋白能够得到天然的N末端;结果:表达后经超声、Ni-NTA纯化得到SUMO-BMP7融合蛋白.确定了可溶性SUMO-BMP7适宜的诱导温度、诱导时间和IPTG浓度,得到了电泳纯度大约98%的SUMO-BMP7融合蛋白;获得的可溶性融合蛋白,具有很高的表达量.分离纯化后,SDS-PAGE纯度可达到98%左右.为其下一步的酶切和活性研究提供基础.

作者：于杰淼；曹鹏；卢悟广；蔡雪婷；张娟；王旻 刊期： 2009年第03期

甲型H1N1流感的流行现状及处理对策的思考

2009A/H1N1流感在世界各地传播,许多国家进入公共卫生紧急状态.认识甲型H1N1病毒基因组序列结构和其抗原的遗传漂移,生产有效的接种疫苗,寻找积极的应对策略具有重要的意义.

作者：吕正兵；李谦；黄宏杰；何靖；陈剑清；张耀洲；王友同；吴梧桐 刊期： 2009年第03期

丹参杂交育种及其异源四倍体的诱导与鉴定

通过杂交育种技术对丹参的两个不同品种进行杂交,得到的子一代试管苗经同工酶电泳分析,根据亲本与子代之间农艺性状的差异,鉴定得h-1等几个杂交种株系.并进行了杂交株系田间农艺性状观察比较及根部药材主要有效化学成分的HPLC测定.对杂交种F1代大量扩繁后,采用秋水仙碱进行化学诱导异源多倍体,并鉴定所得诱导株系.试验结果表明秋水仙素浓度为(10～15)μg/g是诱导多倍体的适宜浓度,并鉴定得到hz4-3、hz4-11等7个异源四倍体株系.为进一步选育异源多倍体优良品种奠定了基础.

作者：刘竟飞；高山林；黄和平；刘利；李晓瑜 刊期： 2009年第03期

葛根素对腹膜透析液诱导腹膜间皮细胞氧化应激反应的影响

为了解葛根素对体外培养的人腹膜间皮细胞氧化应激反应的影响,取择期手术患者的网膜间皮细胞体外培养,第三代细胞用于实验.细胞同步后分5组观察,对照组加入等量的RPMI1640与完全培养基,PDS组加入等量的腹膜透析液(PDS)与完全培养基,A、B、C组均为加入等量的含葛根素的PDS与完全培养基,葛根素终浓度分别为50 μg/ml、100μg/ml、200μg/ml.细胞培养48 h后,用比色的方法检测细胞上清液中氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)浓度并比较.结果显示腹膜间皮细胞在PDS干预下,上清液MDA含量较对照组显著升高,SOD水平和GSH水平较对照组显著降低.添加葛根素再干预的A、B、C组MDA水平都显著低于PDS组,SOD水平和GSH水平都显著高于PDS组.实验表明葛根素具有抑制葡萄糖PDS对腹膜间皮细胞氧化应激反应的作用.

作者：张苗；蒋春明；陶娜娜；孙(王争) 刊期： 2009年第03期

靶向甘露糖受体的载体甘露糖化壳聚糖的全合成及其细胞毒性评价

全合成甘露糖化壳聚糖,为靶向递送药物至巨噬细胞和树突状细胞提供载体材料.实验以甘露糖为起始原料,通过6步反应合成预期取代度为5%～10%的甘露糖化壳聚糖,分别用红外(FTIR)、元素分析等技术对其结构进行确证和表征,并通过HeLa和A549细胞毒性试验评价其细胞毒性.结果表明,所制备的甘露糖化壳聚糖为橘黄色固体,不溶于水,在pH低于6.0的醋酸盐缓冲液中溶解良好,取代度为7.35%;其细胞毒性较低,当浓度达到100μg/ml时,细胞存活率大于80%.合成的甘露糖化壳聚糖是一种安全的靶向递送载体.

作者：石艳；张惠斌；宗莉 刊期： 2009年第03期

高温纤维素分解菌筛选及JSU-5产纤维素酶条件的优化

从牛粪麦秸秆堆肥筛选出高温纤维素分解菌,用单因素实验筛选了产纤维素酶的条件:碳源、氮源、pH值、NaCl、装液量等,后进行正交实验来确定佳的发酵条件.从筛选出的分解纤维素的高温菌种11株中,试验得出第5号(JSU-5)菌株的酶活力较高.对第5号高温菌株产酶单因素试验分析,培养基组分中影响纤维素酶活性的主要因素为水份、碳源和氮源,通过正交试验确定第5号菌种产纤维素酶的培养基的佳营养组成(g/L)为麦草装量50,黄豆饼粉30,NaCl 2,装液量60 ml,pH为6.0.

作者：郑惠华；陈惠；张志才 刊期： 2009年第03期

海洋放线菌WBF16发酵产物蒽醌类抗菌活性成分的研究

对海洋放线菌WBF16发酵液中的抗菌活性成分进行研究.采用大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH20柱层析等方法进行分离纯化抗菌活性成分SR-A,并对其理化性质和生物活性进行初步研究.该成分对金黄色葡萄球菌敏感菌的低抑菌浓度为2μg/m,对乳腺癌细胞MCF-7m和肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为6.60μg/L和9.88μg/L,与阿霉素的抗肿瘤效价相当.该抗菌成分主要由2种极性相近、结构相似的化合物组成,初步确定为蒽醌类物质,具有较强的细胞毒性.

作者：王芬；徐长亮；杨家森；唐聪；高敏；邢莹莹；奚涛 刊期： 2009年第03期

文摘和文题

作者： 刊期： 2009年第03期

抗HIV整合酶抑制剂研究进展

HIV-1整合酶是pol基因在3'-末端编码的相对分子质量为32 000的蛋白质.HIV的DNA整合人宿主细胞染色体DNA的过程包括DNA特定序列的剪切(3'-过程)和接合(整合)反应.病毒DNA整合入宿主DNA的结束标志着HIV病毒感染人体细胞(如,T-细胞)生物过程的完成.目前为止,经FDA批准的通过抑制HIV-1整合酶来治疗艾滋病的药物只有一种,其他抗艾滋病药物均是以HIV逆转录酶和HIV蛋白酶为治疗靶点.为了全面了解HIV-1整合酶抑制剂的研究方法和进展,对HIV-1整合酶的结构、功能、克隆表达、筛选方法以及目前处于临床研究阶段的分子结构进行了详细阐述.以HIV-1整合酶的生物学功能为基础,理解了目前整合酶抑制剂筛选方法的原理和应用;对几种具有开发潜力的抑制剂分子结构进行了分类,预测了将来的研究方向.

作者：张楠；张惠斌；黄山 刊期： 2009年第03期

α-葡萄糖苷酶三维结构的同源模建及其对接研究

文章构建了α-葡萄糖苷酶的三维结构,并研究其与抑制剂分子的作用方式.以蜡状芽孢杆菌聚-1,6-葡萄糖苷酶的晶体结构为模板,利用同源模建法对α-葡萄糖苷酶的三维结构进行了模拟,并采用分子动力学方法对模型进行了修正和优化.在此基础上,使用InsightⅡ软件包中的Biopolymer,Discover,Docking等模块,研究α-葡萄糖苷酶和其抑制剂伏格列波糖、米格列醇相互作用的结合位点和作用性质.模建出的α-葡萄糖苷酶三维结构,其可靠性经Ramachandran图和verify-3D图验证.α-葡萄糖苷酶与抑制剂主要通过氢键作用和疏水所用结合在一起.α-葡萄糖苷酶模型的建立和分子间作用的研究为α-葡萄糖苷酶抑制剂的虚拟筛选和对现有的抑制剂进行结构改造提供了一些有用的信息.

作者：徐雯；曹艳华；乔德水；郑珩；孔毅；吴梧桐 刊期： 2009年第03期

recql4基因的结构及其蛋白功能的研究进展

recql4(recQ protein-like 4)是RecQ螺旋酶家族的一个成员,这一家族在维持基因的稳定性中起重要作用,在人类中发现,它的突变可以引起一种常染色体隐性遗传病Rothmund-Thomson Syndrome(RTS),通过研究发现该蛋白在DNA复制和DNA断裂修复过程中有重要作用,但精确分子机制还不是很清楚,对于这一基因的研究工作在几个课题组相继展开,现对此基因做一综述.

作者：郭建国；卢卫红；孙野青 刊期： 2009年第03期

鹿角脱盘活性物质的研究与开发利用

鹿角脱盘为传统名贵中药鹿茸的副产品,其药用价值一直被忽视.随着科学技术的进步,对鹿角脱盘中生物活性物质的研究逐渐引起了人们的重视,文章综述了近年来鹿角脱盘的活性成分和药理作用的研究进展以及开发利用情况.

作者：钱璟；吉静娴；黄凤杰；吴梧桐；高向东 刊期： 2009年第03期

人源性组织因子在SP2/0细胞中的初步表达

构建组织因子表达质粒并转染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,分泌表达有活性的组织因子.用阳离子聚合物法将构建好的转染质粒pIRESneo3-TF1-213转染入SP2/0细胞,经G418抗性筛选后,蛋白可由SP2/0细胞无血清培养分泌表达.G418 800ug/ml筛选到的表达克隆,经无血清培养,可分泌表达,western blot证明其为人组织因子衍生物,Mr为40k,脂化后,具有促凝血活性.成功构建组织因子蛋白表达质粒pIRESneo3-TF1-218,转染细胞可分泌表达有活性的组织因子

作者：王羽雄；马春姑；顾银良；宋后燕；于敏 刊期： 2009年第03期