何俊；徐文莉；曾思；曾因明；庞庆丰
目的 利用小干扰RNA(siRNA)技术特异性下调survivin基因的表达,检测SGC7901胃癌细胞转染前后对顺铂敏感性的变化.方法 实验分为空白对照组(control组)、单用顺铂组(CDDP组)、脂质体组(Lip组)、单用survivin siRNA组(siRNA组)、转染survivin siRNA(转染组)及转染survivin siRNA联合顺铂作用组(联合作用组).人工合成survivin siRNA,通过Lip包裹将siRNA转染胃癌细胞SGC7901,荧光显微镜下观察转染情况.MTT法检测各组细胞的增殖抑制率,Western blot及免疫细胞化学法检测survivin蛋白的表达,Hoechst染色观察细胞凋亡的形态改变.结果 Hoechst染色荧光显微镜下control组、Lip组及siRNA组细胞核呈正常的蓝色,而CDDP组、转染组及联合作用组细胞核染色增强、核质浓缩、核碎裂,呈凋亡改变;联合作用组细胞增殖抑制率(63.93±4.22)%明显高于其余各组(P<0.05);转染组及联合作用组survivin蛋白表达明显低于其他各组(P<0.05).结论 应用siRNA技术下调SGC7901胃癌细胞中survivin基因的表达,能够增加其对顺铂的药物敏感性.
作者：丁瑾；孔庆兖 刊期： 2010年第05期
目的 观察替米沙坦治疗原发性高血压的疗效和安全性.方法 选择原发性高血压患者78例,随机分为治疗组(替米沙坦组)39例,替米沙坦40～80 mg/d;对照组(非洛地平组)39例,非洛地平2.5～7.5 mg/d,治疗12周.结果 替米沙坦组降压总有效率89.74%,谷/峰(T/P)比值:收缩压(SBP)0.87,舒张压(DBP)0.88;非洛地平组降压总有效率87.17%,T/P比值:SBP T/P比值为0.84,DBP T/P比值为0.85.动态血压(ABPM)监测中的24 h SBP和24 h DBP治疗后降压值,2组差异无统计学意义(P>0.05),但与治疗前相比均降低(P<0.05).结论 替米沙坦能安全、平稳地治疗原发性高血压.
作者：尹丽俊 刊期： 2010年第05期
目的 通过测定不同胎龄早产儿血脂生化指标的变化,探讨其作为评价早产儿成熟度、营养状况及营养支持指标的临床意义.方法 早产儿组30例在入院后12 h内(出生后24 h)采集股静脉血2 ml,采血前2 h未喂养及输液.足月儿组30例在胎儿娩出、清理呼吸道后即刻采脐带血2 ml.测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)等生化指标.结果 早产儿组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB水平均低于足月儿组,2组之间差异具有统计学意义(P＜0.01).28～31 周的早产儿组血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB水平均低于32～36 周的早产儿组,2组之间差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 血脂生化指标可作为评价早产儿成熟度及营养状况的依据.检测血脂水平变化,对临床合理营养支持具有指导意义.
作者：尹力扬；王红兵；徐丽；刘淑华；董雪萍；梁世磊；张大葵；李文斌 刊期： 2010年第05期
目的 评价连续硬膜外神经阻滞联合药物用于带状疱疹后神经痛(PHN)的效果.方法 60例临床诊断为PHN的患者随机分为 2 组:Ⅰ组(n=30)为药物治疗组,Ⅱ组(n=30)为连续硬膜外神经阻滞联合药物综合治疗组,疗程4周.分别于治疗前,治疗后 1、2、3和4周进行视觉模拟评分(VAS)及匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评定,并对患者的疗效进行评价.结果 与治疗前比较,两组患者1周后VAS、PSQI评分明显降低(P<0.01),与Ⅰ组比较,Ⅱ组治疗后1、2、3和4周时VAS、PSQI评分明显降低,总有效率升高(P<0.01).结论 连续硬膜外神经阻滞联合药物是治疗PHN安全有效的方法.
作者：黄贤文；梁大干；黄英；莫惠飞；骆智宇 刊期： 2010年第05期
目的 构建靶向表皮生长因子受体(EGFR)的短发卡状RNA(shRNA)质粒表达载体并进行鉴定.方法 ①根据人类EGFR的mRNA序列,设计4条干扰片段,以PGPU6/GFP/Neo质粒为载体,构建shRNA重组体,转化入DH5a大肠杆菌,提取质粒,进行酶切和测序鉴定;②采用脂质体Lipofectamin 2000分别转染人皮肤鳞状细胞癌细胞株Colo-16细胞,用G418筛选阳性克隆.结果 ①经酶切及测序鉴定,成功构建了针对 EGFR的4个重组干扰质粒;②成功转染Colo-16细胞,经筛选后得到稳定表达的细胞克隆.结论 利用 RNAi技术原理成功构建针对 EGFR的shRNA重组质粒,并转染入Colo-16细胞.
作者：王慧；魏志平；刘彦群 刊期： 2010年第05期
金属硫蛋白(metallothionein, MT)是近来发现的人类肿瘤细胞表面表达的一个生物学标记.本文就MT与肿瘤的关系等方面的研究进行了综述,并对MT研究中存在的问题进行探讨及展望.
作者：赵晓迎；韩方正 刊期： 2010年第05期
目的 改良原代肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage, AM)培养技术,提高AM培养效果.方法 SD大鼠,在体支气管灌洗肺获取AM,通过预先注射空气、14号注射器针头回收灌洗液、低速离心、种板前多次吹打等改良措施分离和培养AM.倒置显微镜连续观察AM的形态变化,台盼蓝拒染实验鉴定AM存活率,瑞氏-姬姆萨染色鉴定AM纯度.结果 AM体外培养后40 min即见细胞贴壁;2～3天时,细胞形态多样,呈圆形、不规则形、梭形等形态,胞体变大,胞质丰富.台盼蓝拒染实验示AM存活率≥95%,瑞氏-姬姆萨染色示AM纯度≥95%.结论 本实验改良了原代AM培养的技术方法,提高了原代AM培养效果.
作者：何俊；徐文莉；曾思；曾因明；庞庆丰 刊期： 2010年第05期
目的 观察早期自然流产患者绒毛组织中RECK基因﹝基质金属蛋白酶(MMP)抑制基因﹞的表达及其与MMP-2、-9之间的关系.方法 采用半定量RT-PCR和Western blotting法检测20例早期自然流产患者和20例正常早期妊娠绒毛组织中RECK、MMP-2和MMP-9基因的表达情况.结果 ①早期自然流产患者绒毛组织中MMP-2及MMP-9的mRNA表达水平低于正常早期妊娠者,差异有统计学意义(P<0.05);RECK mRNA的表达高于正常早期妊娠者,差异有统计学意义(P<0.05).②自然流产患者绒毛组织中MMP-2、MMP-9蛋白表达低于正常早期妊娠者,差异有统计学意义(P<0.05);RECK蛋白表达高于正常早期妊娠者,差异有统计学意义(P<0.05).③RECK蛋白与MMP-2、MMP-9蛋白之间存在明显的负相关.结论 RECK表达的增加进而抑制MMP-2、MMP-9的活化,致使滋养细胞侵袭能力下降,可能与孕早期自然流产的发生有关.
作者：方媛媛；刘福民；朱学文；李晓博；万美容；刘小云；冯霞 刊期： 2010年第05期
目的 以大鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)为模型,用血晶素(hemin)诱导大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)表达,观察VILI时超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)活性变化及HO-1对SOD和MDA的影响,探讨在VILI过程中的抗氧化应激保护作用及其机制.方法 32只雄性SD大鼠随机分成4组(每组n=8):对照组只做气管切开术,保留自主呼吸;模型组气管切开后行机械通气4 h;诱导剂组于模型制备前24 h腹腔注射血晶素40 μmol/kg;抑制剂组于模型制备前24 h腹腔注射锌原卟啉(ZnPP)10 μmol/kg.机械通气4 h后处死大鼠,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF)标本,测定BALF中总蛋白含量,肺组织湿/干重比值(W/D),肺组织LDH、SOD活性和MDA含量,检测肺组织HO-1蛋白表达,光镜下行肺组织病理学观察.结果 与对照组相比,模型组大鼠肺组织病理损伤严重,肺W/D、BALF中总蛋白、LDH活性均明显增加,VILI模型复制成功.与模型组比较,诱导剂组肺组织HO-1表达增加,肺组织病理损伤明显减轻,SOD活性明显增加而MDA含量明显下降,用ZnPP抑制HO-1表达,此种保护作用消失.结论 血晶素诱导大鼠HO-1表达可以增加SOD活性,降低MDA含量,减轻肺的氧化应激损伤,降低VILI的程度.
作者：胡伟伟；赵文静 刊期： 2010年第05期
目的 探讨编码针对小鼠CD28的短发卡状RNA(short hairpin RNA, shRNA)的慢病毒载体对小鼠T细胞CD28基因表达的影响.方法 设计并合成3对靶向小鼠CD28的特异性干扰序列和1对非特异性干扰序列,亚克隆入慢病毒载体pLB中,构建出重组慢病毒干扰质粒,行PCR鉴定并进一步测序证实.分别将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞, 生产慢病毒颗粒, 并依据绿色荧光蛋白(GFP)表达水平检测病毒滴度.慢病毒感染小鼠脾淋巴细胞,实时荧光定量RT-PCR和Western blot技术分别从mRNA水平和蛋白水平检测CD28的表达.结果 PCR鉴定及测序结果证实4种重组慢病毒质粒均构建成功,重组慢病毒滴度均达1×1011 U/L.感染T细胞后,CD28基因mRNA和蛋白表达量均有明显下降.结论 成功构建了CD28 shRNA慢病毒载体,可有效下调小鼠T细胞CD28 基因的表达,其为进一步研究体内沉默CD28基因控制移植物抗宿主病奠定了基础.
作者：程娜娜；桑威；陈翀；徐开林 刊期： 2010年第05期
目的 观察异氟醚(isoflurane, ISO)后处理对盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)后大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的保护作用.方法 32只SD雄性大鼠随机分为4组(每组n=8):正常组(N组),未行任何处理;假手术组(Sham组),单纯行开腹关腹术;盲肠结扎穿孔术组(CLP组),行CLP建立大鼠ALI模型;异氟醚组(ISO组),建立CLP模型后4 h腹腔注射液态异氟醚2 ml/kg.术后12 h各组动物腹主动脉放血处死,右肺进行病理切片和肺湿/干比(W/D)测定,组织匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)的含量;左肺行支气管肺泡灌洗,取上清液测总蛋白、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)的含量.结果 肺组织病理学检测结果显示CLP组大鼠肺组织损伤严重,ISO组肺组织损伤较轻.与N组比较,CLP组和ISO组中SOD含量降低(P<0.01),其余检测指标均增加(P<0.01).与CLP组比较,ISO组SOD和IL-10含量较高(P<0.01);其余检测指标均低于CLP组(P<0.05或P<0.01).结论 在本实验条件下,大鼠腹腔注射液态ISO可发挥抗炎、抗氧化作用,对CLP所致大鼠ALI有部分保护作用.
作者：徐文莉；何俊；曾因明；庞庆丰 刊期： 2010年第05期
目的 探讨左束支传导阻滞(LBBB)患者行胸外科手术的麻醉处理方法.方法 回顾性分析64例LBBB患者行胸外科手术的麻醉处理.依据LBBB程度及有无合并右束支传导阻滞(RBBB)将患者分为3组:完全性LBBB组(CLBBB组)11例,左前分支传导阻滞组(ALBBB组)39例,ALBBB+RBBB组14例.所有患者均在有创动脉压监测下予麻醉诱导行双腔气管导管插管,并建立中心静脉压监测,以丙泊酚、芬太尼等维持麻醉.观察各组手术与麻醉的相关情况、手术与麻醉终结果及并发症、围术期心血管事件,并与同期本院胸外科手术整体情况进行对比研究.结果 64例患者无住院死亡,3组间手术与麻醉并发症、术中循环状况差异无显著性.手术并发症率与死亡率不高于同期所有胸外科手术.结论 在完善有创监测、选择合适麻醉方法、维持围术期循环平稳的基础上,CLBBB和ALBBB合并RBBB的患者可安全进行胸外科手术.
作者：吴东进；徐美英 刊期： 2010年第05期
目的 建立离体多巴胺(dopamin,DA)能神经细胞系MN9D细胞损伤模型.方法 离体细胞培养条件下,于培养液中加入不同浓度6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)作用于MN9D细胞30 min.24 h后,MTT比色法检测MN9D细胞的存活率、Hoechst 33258核染色和流式细胞仪检测MN9D细胞的凋亡变化.结果 6-OHDA以浓度依赖性的方式引起MN9D细胞的凋亡,导致细胞存活率降低.200 μmol/L 浓度的6-OHDA作用30 min、培养24 h后,MN9D细胞的存活率降低至68.8%左右,凋亡率增高至约37.8%.结论 6-OHDA能够引起MN9D细胞的存活率降低,而凋亡率增高,产生类似帕金森病时的DA能神经细胞损伤的表现.
作者：钮洪艳；张学文；刘淮东；高殿帅 刊期： 2010年第05期
目的 模拟缺血/再灌注诱导人离体的胃黏膜上皮细胞损伤模型,观察再灌注不同时间点胃黏膜上皮细胞凋亡情况并分析其规律.方法 采用人胃黏膜上皮细胞株进行体外培养并传代,细胞以缺氧(5% CO2、1% O2、94% N2)+无糖KR液模拟缺血、缺氧,复氧、复糖模拟再灌注诱导胃黏膜上皮细胞凋亡,用流式细胞仪、Hoechst33258染色法观察正常对照组及模拟损伤组于模拟缺血1 h,再灌注3、6、12 h细胞凋亡的情况及变化规律.结果 ①胃黏膜上皮细胞12～24 h贴壁,24 h后有少量上皮样细胞从周边爬出,48 h后细胞呈指数样生长,72 h后细胞已基本能达到融合.②模拟胃缺血/再灌注后细胞凋亡率于缺血1 h、再灌注6 h时出现高峰,且与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).经Hoechst33258染色,荧光显微镜下观察可见细胞于缺血1 h、再灌注6 h时产生典型的凋亡形态学变化如核浓染、核碎裂、边集等.结论 成功模拟了缺血/再灌注诱导人离体的胃黏膜上皮细胞损伤模型;该损伤模型可引起胃黏膜上皮细胞的凋亡,且在缺血1 h、再灌注6 h时为高峰.
作者：石玥；乔伟丽；王光明；吴金霞；闫长栋；张建福 刊期： 2010年第05期
目的 了解城市低保人员心理异常的发生情况并分析其影响因素,为制定提高该人群心理健康水平的措施提供参考.方法 采用系统和整群抽样的方法抽取徐州市低保人员445人,以面对面询问方式进行入户调查.结果 低保人员心理异常发生率较高,占59.10%.单因素χ2检验显示不能得到家人满意帮助、不常联系朋友、健康自评差、患慢性病以及没有社会保险等8个因素与心理异常有关.logistic回归分析显示不能得到家人满意帮助、健康自评差、患慢性病、没有社会保险以及孩子未参加工作是低保人员心理异常的危险因素.结论 低保人员心理健康状况较差,应针对危险因素采取综合性措施以提高其健康水平.
作者：覃朝晖；刘苏；杜鹃；张训保；卓朗；谷玉明 刊期： 2010年第05期
目的 评估早期非痴呆帕金森病(PD)患者全面认知功能和执行功能,探讨抑郁等相关因素对认知功能的影响.方法 41例早期PD患者进行PD统一评分量表(UPDRS)、Hoehn和Yahr分期、老年认知功能量表(SECF)、韦氏成人智力量表(WAIS-RC)操作智商(PIQ)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评估.结果 较高教育水平、较年轻和发病年龄较早的患者SECF、WAIS-RC测验得分较高,疾病严重程度和认知功能相关.患者出现执行功能减退而并非全面认知功能减退,并与抑郁的严重程度相关.当把患者分为较低教育水平组(≤5年学校教育,n=21)和较高教育水平组(＞6年学校教育,n=20),PIQ得分仅在较低教育水平组与抑郁存在负相关.结论 非痴呆PD患者早期即可出现认知功能障碍.抑郁可能使执行功能减退程度恶化,特别是对于较低教育水平的患者.
作者：郑鹏；王轶男；李继珍；樊红彬；徐凯；耿德勤 刊期： 2010年第05期
目的 观察瑞芬太尼与氯胺酮合用对小鼠学习记忆的影响.方法 按分层随机区组设计将小鼠分为3组:瑞芬太尼+生理盐水(R) 组、氯胺酮+生理盐水(K) 组、瑞芬太尼+氯胺酮(RK) 组.用跳台实验分别观察小鼠潜伏期和错误次数,以评估药物对小鼠的学习记忆功能的影响.结果 用药后第1天,与RK组相比,R组潜伏期和错误次数均减少(P<0.05),K组错误次数减少(P<0.05);用药后第2天,与RK组相比,R组和K组的潜伏期和错误次数均减少(P<0.05);用药后第3天,各组间潜伏期和错误次数差异无统计学意义(P>0.05).结论 瑞芬太尼与氯胺酮合用能增强损害小鼠学习记忆的能力,但不会造成持久的学习记忆能力障碍.
作者：宋苏沛；马蓉蓉；刘亚君；蒋亦男；王欢欢；戴体俊 刊期： 2010年第05期
目的 探讨纤维环穿刺法诱导椎间盘退变模型的可行性和科学性.方法 新西兰大白兔18只, 经右侧腹膜外入路用弯血管钳夹持16G 穿刺针准确刺入L3-4、L4-5、L5-6 椎间盘的纤维环, 深度控制在5 mm.于术前及术后4、8、12 周对造模后的椎间盘及对照组的椎间盘(以L1-2、 L2-3、L6-7为对照) 行计算机X线摄影(computed radiography,CR)、MRI 检查, 并进行组织学观察.结果 从手术后第4～12周,造模后的椎间盘高度指数(disc height index,DHI)呈递减趋势,MRI T2WI 信号呈现持续减弱趋势(P<0.01);组织学观察发现4、8周造模组髓核细胞逐渐减少,12周组髓核细胞几乎被纤维软骨组织替代,纤维环排列不整齐,与髓核界限不清.结论 纤维环穿刺法可以诱导兔椎间盘的缓慢退变, 为临床深入研究椎间盘的退行性变提供了切实可行的动物模型.
作者：杨效宁；孙天威；王启明；孙一公；曹雷 刊期： 2010年第05期
目的 探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)干预对快速右房起搏诱发的慢性心房纤颤(atrial fibrillation,AF)猪心房组织中去乙酰化酶(SIRT)1表达的影响.方法 18头小家猪(雌雄不拘)随机分为3组(n=6):起搏组(ATP组)、假手术组(sham组)和白藜芦醇干预组(RES组).采用Seldinger血管穿刺技术穿刺右或左侧颈内静脉送入双极电极至右心房并连接至实验用起搏器(AOO),快速起搏心房(500次/min)2周(假手术组猪不起搏)制备慢性AF实验模型.RES组猪于起搏前1周开始服用RES(2.5 mg·kg-1·d-1).RT-PCR分析SIRT1 mRNA 表达情况,Western blot法检测SIRT1蛋白表达水平的变化.结果 RES组SIRT1 mRNA和蛋白的表达较ATP组和sham组均明显增加(P<0.05),ATP组稍高于sham组但差异无统计学意义(P>0.05).结论 RES干预可以明显增强快速起搏右房诱发的慢性AF猪心房组织中SIRT1的表达.
作者：周晓峰；王志荣；张卓琦；张超群；徐晤 刊期： 2010年第05期
镇痛、催眠作用是吸入麻醉药基本、重要的作用,其作用机制较为复杂,可能与NMDA、GABA、甘氨酸受体,α-氨基羟甲基噁唑丙酸(AMPA)、神经元烟碱受体及γ-羟基丁酸(GHB)受体等有关,此外还可能涉及其他机制,现就吸入麻醉药镇痛、催眠作用与上述受体的关系作一综述.
作者：周美艳；戴体俊 刊期： 2010年第05期
徐州医科大学学报杂志
主管:江苏省教育厅
主办：徐州医科大学
