学术投稿

人类蜕膜基质细胞的体外培养

张曙萱;王海琦;欧宁;杨小冬

关键词:蜕膜基质细胞, 体外培养, 免疫组织化学, 胰蛋白酶
摘要:目的建立良好的人类蜕膜细胞培养方法.方法选用早孕人工流产蜕膜组织进行体外培养,采用胰蛋白酶和EDTA消化,进行全组分蜕膜细胞培养,利用传3代的方法对蜕膜基质细胞进行分离提纯.制作细胞爬片,用泌乳素(prolactin,PRL)免疫组化试剂盒检测培养细胞成分.结果免疫组化显示体外培养传代后97%蜕膜细胞为蜕膜基质细胞.结论实验方法经济实用、简单,简化了蜕膜细胞的提纯程序,获得的蜕膜基质细胞纯度高.
徐州医科大学学报杂志相关文献
  • 内皮素-1在兔骨髓间质干细胞体外诱导为心肌样细胞中的作用

    目的探讨外源性内皮素-1(ET-1)在5-氮胞苷(5-aza)诱导兔骨髓间质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞转化过程中的生物学作用.方法获取日本大耳白兔股骨干BMSCs进行培养及传代.实验分组:①对照组;②ET-1组(ET-1,30 nmol/L);③5-aza诱导组(5-aza,10μmol/L);④5-aza+ET-1联合诱导组(5-aza 10μmol/L+ET-1 30 nmol/L).诱导期间,观察BMSCs生长状态,诱导4周后,计算心肌样细胞转化率;心肌特异性肌钙蛋白-Ⅰ免疫细胞化学染色,测定心肌样细胞直径;透射电镜观察心肌样细胞形态学特征.结果 5-aza+ET-1联合诱导组分化细胞的体积明显增大,细胞直径显著大于5-aza诱导组(P<0.001),诱导4周后,心肌样细胞出现自发收缩,肌钙蛋白-Ⅰ免疫细胞化学染色阳性,对照组及ET-1组极少见染色阳性细胞.5-aza诱导组与5-aza+ET-1联合诱导组的心肌样细胞转化率无显著差别(P>0.05).超微结构观察显示,5-aza+ET-1联合诱导组心肌样细胞原始肌节形成明显增多.结论在诱导兔BMSCs向心肌样细胞分化的过程中,ET-1发挥了促心肌样细胞肥大及成熟的生物学效应.

    作者:董红燕;周中新;于红丽;徐夏红;张中明 刊期: 2004年第03期

  • 5-羟色胺2A受体在自杀死亡者海马中的表达

    目的探寻自杀行为的生物学标记,为早期识别和干预自杀行为提供客观依据.方法通过观察自杀死者与非自杀对照之间脑海马5-羟色胺2A受体(5-HT2AR)的表达情况,评价5-HT2AR表达变化与自杀行为的关系.选取10例自杀死亡者及10例非自杀死亡者脑标本,进行抗人5-HT2AR免疫组化染色及苏木素-伊红染色观察,并在Leica Q Win图像处理与分析系统中进行电子计算机辅助灰度图像分析,得到反映组织5-HT2AR表达强度的半定量资料,采用SPSS10.0软件进行统计分析.结果经海马免疫组织化学染色和苏木素-伊红染色观察,自杀死亡组与非自杀对照组之间海马的一般组织学特征无差异.5-HT2AR表达的计算机灰度分析显示:自杀死亡组海马CA1区、CA2区、CA3区及CA4区的受体表达均明显强于非自杀对照组的相应区域(P<0.01),2组齿状回(DG)5-HT2AR的表达无差异(P>0.05).结论自杀死亡者海马各区5-HT2AR表达明显增高,海马5-HT2AR表达的增高可能是自杀行为的生物学标记.

    作者:程言博;蔡红星;耿德勤;杨永平 刊期: 2004年第03期

  • 甲巯咪唑治疗甲状腺功能亢进致低血糖1例

    1 病例资料患者男性,20岁,因心悸、消瘦、消躁1个月,于2002年8月4日首次入院.

    作者:张琳;张庆涛 刊期: 2004年第03期

  • Ki-67和凋亡细胞在肝癌中的表达及其临床意义

    目的探讨细胞增殖和凋亡在原发性肝癌中的表达及其临床意义.方法检测57例肝癌病理标本凋亡细胞指数(AI)、Ki-67增殖指数(KI)和AI/KI比率,分析其与临床病理、术后复发、预后的关系.结果细胞凋亡和增殖指数在肝癌组织中高于癌旁组织,在低分化肝癌中高于高分化肝癌.AI/KI值随着术后复发时间和生存时间的延长而逐渐升高(P<0.01).结论细胞增殖和凋亡共同参与肝癌的发生和进展,但细胞凋亡相对不足.AI/KI值对肝癌的预后判断有一定意义.

    作者:符炜;穆毅;路逵阳 刊期: 2004年第03期

  • 止痛痔疮栓抗炎、抑菌和止痛作用的实验研究

    目的观察止痛痔疮栓的抗炎、抑菌及止痛作用.方法以小鼠耳肿胀和大鼠肉芽肿实验,观察止痛痔疮栓抗炎作用;应用热板法考察其镇痛作用;采用纸片扩散法检测其抑菌作用.结果止痛痔疮栓有明显的抑制小鼠耳肿胀和大鼠肉芽肿作用;热板法验证止痛痔疮栓能明显提高痛阈;止痛痔疮栓对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌和伤寒杆菌的抑菌圈直径均大于15.00mm.结论止痛痔疮栓具有明显的抑菌、抗炎和止痛作用.

    作者:夏安周;刘子亮;吴浩 刊期: 2004年第03期

  • nm23和mdm2基因在小儿胚胎性恶性肿瘤中的表达及意义

    目的探讨nm23和mdm2基因在小儿胚胎性恶性肿瘤的表达及其与分化及转移的关系,为此类肿瘤的预后判断提供依据.方法应用免疫组织化学技术检测50例小儿胚胎性恶性肿瘤的nm23和mdm2表达情况.结果在50例小儿胚胎性恶性肿瘤标本中,nm23的阳性表达率为50%,mdm2的阳性表达率为64%,显示nm23、mdm2阳性表达率与肿瘤分化及淋巴结转移均有相关性(P<0.05).结论同时检测胚胎性恶性肿瘤中nm23和mdm2基因表达水平,对评价肿瘤生物学行为,预测肿瘤进展有重要意义.

    作者:魏华;孔燕;靳振怀;陈淑敏;丁勇 刊期: 2004年第03期

  • 家族性高胆固醇血症患者载脂蛋白E基因多态性及其对血脂的可能影响

    目的分析我国部分地区家族性高胆固醇血症(FH)患者载脂蛋白E(ApoE)基因型分布情况及其对FH血脂变化水平的可能影响.方法采用PCR-RFLP法检测载脂蛋白E基因型,比较其与普通高胆固醇血症患者的基因型分布情况.提取外周血基因组DNA,PCR扩增包含2个等位基因决定位点的DNA片段,PCR扩增产物经HhaⅠ酶切后进行聚丙烯酰胺电泳,银染后分析ApoE基因型.检测FH患者血脂变化.结果 FH患者和普通高胆固醇血症患者ApoE表型频率:E3/2分别为3.3%、11.0%,E3/3为56.7%、63.0%,E4/2为10.0%、15.1%,E4/3为30%、9.6%;ApoE等位基因频率:ε2分别为6.7%、14.4%,ε3为73.3%、73.3%,ε4为20.0%、12.4%.ApoE基因型对FH患者血脂变化的影响不显著.结论在所调查的FH患者中,ApoEε4等位基因有增高的趋势,但对血脂变化影响不明显.

    作者:庞庆丰;王影 刊期: 2004年第03期

  • 同种异体原位心脏移植供心的切除与保护

    目的探讨心脏移植过程中供心切取要领与供心心肌保护的相关问题.方法供心切除时采用4℃改良St.Thomas停博液灌注,保留足够的血管长度,冷储藏保存.结果主动脉开放后各项血流动力学指标在正常范围内,未见缺血损害.长期随访心功能Ⅰ级.结论此方法可以获得良好的供心保护.

    作者:王伟;张中明;孙全胜;钱伟民;周晓彤;王国祥;桂鑫;胡波 刊期: 2004年第03期

  • 三氧化二砷诱导人胆管癌细胞系HCCC-9810凋亡的初步研究

    目的研究三氧化二砷(As2O3)对胆管癌细胞的抑制作用及其机制.方法用不同浓度的As2O3处理胆管癌细胞株HCCC-9810,应用倒置显微镜、MTT法、流式细胞仪观察胆管癌细胞的变化.结果 As2O3在0.75、1.5、3.0、6.0 μmol/L的浓度对胆管癌细胞作用不同时间,作用72 h时生长抑制率分别为22.34%、43.25%、59.68%、69.95%.结论适合浓度的As2O3在体外可诱导胆管癌细胞凋亡,有较明显的时间和剂量依赖性,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关.

    作者:高家森;刘斌 刊期: 2004年第03期

  • 局部应用地塞米松对脊髓损伤后大鼠的干预作用

    目的探讨地塞米松(dexamethasone,DXM)局部应用对实验性脊髓损伤后大鼠早期继发性的干预作用.方法采用雄性SD大鼠81只,按改良Allen's法制造不完全性脊髓损伤(SCI)模型.随机分成4组:正常对照组、损伤对照组、标准用药组和损伤脊髓局部给药组.进行各组动物不同时点行为学评分,对损伤脊髓组织的水含量、自由基进行测定,并进行组织病理学检查.结果局部应用DXM对SCI后动物行为有一定改善作用,抑制脊髓组织过氧化反应,改善脊髓继发性水肿,改善继发性病理变化,与标准用药组同时点比较有显著性差异(P<0.05).结论 DXM局部应用于SCI大鼠能显著抑制脊髓组织水含量的增加,对其他脊髓继发性变化也有一定抑制作用,可以作为SCI后的辅助治疗手段.

    作者:唐先业;郭开今;王若义;郭含军;周冰 刊期: 2004年第03期

  • 中西医结合治疗慢性鼻窦炎48例

    目的评价中西医结合疗法治疗慢性鼻窦炎的疗效.方法治疗组48例采用鼻窦炎口服液配合1%麻黄素可的松滴鼻液治疗慢性鼻窦炎,并以单纯西医治疗45例作对照.结果治疗组显效28例,有效18例,无效2例,总有效率95.8%;对照组显效17例,有效20例,无效8例,总有效率为82.2%.2组总有效率差异有显著性(P<0.05).结论中西医结合疗法治疗慢性鼻窦炎疗效显著,值得临床应用.

    作者:刘奕 刊期: 2004年第03期

  • 丙型肝炎病毒2a型E2区基因cDNA的变异分析

    目的了解丙型肝炎病毒2a型基因组E2区序列的一级结构及变异特征,为进一步研究HCV包膜蛋白的生物学功能打下基础.方法用逆转录套式多聚酶链反应(RT-nPCR)法从1例NANB型肝炎患者血清中扩增出一条约1100bp的片段,以限制性内切酶EcoRI、HindⅢ双酶切后连入pUC19载体中,转化感受态细胞,经限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和PCR法证实为阳性克隆后,用全自动序列分析仪测序.结果测得约1100bp的核苷酸序列,其核苷酸序列及其编码的氨基酸序列分别与HCV-1、HC-C2、HCV-BK、HC-J6、HC-J8相应序列作比较,显示分离株HCV在核苷酸水平上与以上分离株的同源性分别为63.1%、64.2%、64.1%、86.9%、69.3%,在氨基酸水平上的同源性分别为69.6%、70.7%、69.6%、86.2%、83.1%.结论分离株(HCV-JF)与HC-J6同属2a型.

    作者:封波;魏来;陈明;韩方正 刊期: 2004年第03期

  • 增智气血方对认知功能障碍小鼠学习记忆能力的影响

    目的研究增智气血方对大脑认知功能障碍的改善作用,为治疗老年性痴呆提供依据.方法建立东莨菪碱造成的小鼠学习、记忆障碍模型,分为药物大、小剂量组,脑复康组及模型组,连续灌胃给药10天后,以上各组均一次性腹腔注射东莨菪碱2 ms/kg,另外加一空白对照组,进行小鼠的跳台测试和大脑海马病理切片观察.结果 增智气血方可减少小鼠跳台回避反应的错误次数,缩短反应时间,较模型组有极显著性差异(P<0.01);该方大剂量组海马锥体细胞的肿胀程度较模型组轻.结论增智气血方能够提高小鼠的学习、记忆功能.

    作者:刘耀武;侯建平 刊期: 2004年第03期

  • 心律失常型癫痫5例临床分析

    目的探讨心律失常型癫痫临床特征.方法对5例心律失常型癫痫临床表现及脑电图改变进行分析.结果本组患者的主要临床表现为反复发作性室上性心动过速及心绞痛样发作,历时1~3 min,常规脑电图检查基本正常,蝶骨电极脑电图描记异常.结论心律失常型癫痫极易误诊,单用抗癫痫药物治疗有效.排除器质性疾患引起的心动过速及心绞痛,高度怀疑病例时,可试行抗癫痫治疗.

    作者:范浙兰 刊期: 2004年第03期

  • 三维CT血管造影在颅内动脉瘤栓塞治疗中的指导意义及其局限性

    目的评价三维CT血管造影(3D-CTA)在颅内动脉瘤栓塞治疗中的指导意义及其局限性.方法本组所有患者均进行DSA造影检查和3D-CTA检查.3D-CTA图像重建时分别采用大强度投照(MIP)、表面成像(SSD)以及模拟内窥镜(flying through)等3种成像方法分别重建颅内血管三维图像.脑血管造影常规进行双侧颈内动脉及左侧椎动脉造影,必要时进行右侧椎动脉造影.结果本组11例患者,DSA造影检查和3D-CTA检查各发现动脉瘤11个,各漏诊动脉瘤1个.DSA造影检查动脉瘤大直径平均4.3 mm;3D-CTA检查MIP法测得动脉瘤大直径平均4.5 mm,SSD法动脉瘤大直径平均5.7 mm.结论 3D-CTA能够避免常规DSA造影检查时产生的影像重叠,但是三维重建后的影像受到多种因素的影响,制定合理的检查方案可有效提高诊断符合率.

    作者:李国均;祖茂衡;徐浩;张庆桥;魏宁;许伟;徐凯;程广军;荣玉涛;李江山 刊期: 2004年第03期

  • 医学名词术语使用规范

    作者: 刊期: 2004年第03期

  • 三氧化二砷抑制小鼠S180肉瘤细胞生长的实验研究

    目的观察三氧化二砷(As2O3)对S180肉瘤细胞生长的作用并探讨其作用机制.方法对小鼠S180肉瘤细胞进行细胞培养,并建立S180移植瘤动物模型,体内体外观察As2O3对S1so肉瘤的作用,同时检测细胞及肿瘤组织内超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的改变.结果体内体外实验结果显示As2O3可以抑制小鼠S180肉瘤细胞生长并具有浓度依赖性,在一定浓度下其作用强于化疗药物阿霉素(ADM);肿瘤细胞内及肿瘤组织内的SOD含量下降,LDH含量上升.结论 As2O3作用后引起的SOD下降在促进肿瘤细胞坏死和诱导肿瘤细胞凋亡过程中具有一定的作用.

    作者:刘莹;柳红 刊期: 2004年第03期

  • 影像检查在妇科疾病诊断中的应用

    影像诊断包括单纯超声波、CT、MRI诊断或他们的联合使用.超声波因其简便性被较多应用于妇科日常诊断中.三维超声及彩色多普勒、脉冲频谱多普勒的联合使用,提高了不孕症治疗的成功率和良恶性肿瘤鉴别诊断的精确性.CT、MRI继超声波之后亦被用于确认病灶的详细情况、有无多脏器的浸润或转移.近正电子发射体层成像(positron emissiontomography,PET)因可判断有无淋巴结的转移而在影像诊断中引人注目.本文亦对PET在妇科领域的应用价值及前景进行综述.

    作者:汪秀玲;王绪 刊期: 2004年第03期

  • 喉气囊肿1例并文献复习

    目的了解喉气囊肿的诊断和治疗.方法对1例典型的喉气囊肿进行回顾性分析和文献复习.结果患者手术后疗效满意,痊愈出院.结论术前对喉气囊肿的明确诊断和对分型的了解,对于喉气囊肿的手术治疗和成功具有重要意义.

    作者:李红权;李培华 刊期: 2004年第03期

  • 脑外科急诊瞳孔散大固定患者的预后分析

    目的提高急诊瞳孔散大患者的诊治效果并进行预后分析.方法将90例发生瞳孔散大固定的患者根据病因分成2组:49例外伤患者,41例高血压脑出血患者.治疗结果以Glasgow评分归类.对其进行临床调查和预后分析.结果总死亡率66.7%,24.4%Glasgow评分2~3分,8.9%Glasgow评分4~5分,脑外伤和脑出血组间没有统计学差别.单侧瞳孔散大患者生存率(53.1%)比双侧(22.4%)者高(P<0.01).年龄和生存率无相关,但是年轻存活者功能恢复更好.治疗是否迅速、及时与预后关系密切.治疗后瞳孔散大未改善者预后极差.治疗后双侧瞳孔均恢复,生存率为64%.结论治疗后瞳孔的恢复情况与存活率关系密切.治疗及时、单侧瞳孔散大、年纪轻的患者生存和康复的机会更大.

    作者:冯力;于如同 刊期: 2004年第03期

徐州医科大学学报杂志

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