学术投稿

乙肝患者外周血单个核细胞FOXP3 mRNA表达检测方法的建立及应用

郭凯;黄长形

关键词:乙肝, FOXP3, 调节性T细胞
摘要:目的:比较乙肝患者与健康人外周血单个核细胞(PBMC)中 FOXP3 mRNA表达水平差异. 方法:利用实时荧光定量RT-PCR的方法检测25例慢性乙肝患者以及11名健康人PBMC中FOXP3 mRNA的水平. 结果:乙肝患者PBMC中FOXP3 mRNA的表达水平高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),且与血清中的病毒含量呈正相关(r=0.70,P<0.01),而与谷丙转氨酶(ALT)水平无关(r=0.06,P>0.05). 结论:慢性乙肝患者FOXP3表达水平可能是HBV感染持续的一个因素.
医学研究生学报杂志相关文献
  • 多囊卵巢综合征性激素变化与认知功能的临床观察

    目的:研究多囊卵巢综合征(PCOS)患者认知功能的变化,并探讨其与雄激素的关系. 方法:选择PCOS患者(PCOS组)及健康自愿者(对照组)各25例,放射免疫测定其血浆睾酮(T)、硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、性激素结合蛋白(SHBG)、雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH). 认知功能测定包括词语学习及延迟回忆、言语流畅性、符号数字替代模式、连线测验A、数字广度和积木测验. 结果:PCOS组患者血中T、 LH、 SHBG 与对照组比较差异有显著性统计学意义(P<0.01);其动物言语流畅性测验和连线测验A较对照组显著性下降(P<0.05). 结论:PCOS患者存在认知功能损害,这可能与其血中雄激素增高有关.

    作者:刘锦霞;段立晖;吴静静;于淼;吴元赭;吴效科 刊期: 2008年第11期

  • 高血压合并糖尿病大鼠心肌细胞结构及心功能的观察

    目的:观察高血压合并糖尿病对心肌细胞结构及心功能的影响. 方法:实验动物随机分为4组:对照组、自发性高血压(SH)组、糖尿病(DM)组和自发性高血压合并糖尿病(SHDM)组,每组各6只.SD大鼠和SH大鼠腹腔分别注射链脲佐菌素(STZ),结合高热量饲料喂养,复制DM和SHDM模型.16周后进行有创心功能检测及心肌细胞病理学检查. 结果:SHDM组大鼠心肌细胞排列紊乱,细胞间隙减少,部分细胞变性坏死,并且有较多损伤的线粒体.SH组、DM组和SHDM组左心室舒张末压(LVEDP)较对照组显著增高(P<0.01),DM组和SHDM组左心室压力上升和下降大速率(+dp/dtMax 、 -dp/dtMax)与对照组和SH组比较显著降低(P<0.01),而且SHDM组+dp/dtMax 和-dp/dtMax显著低于DM组(P<0.01). 结论:高血压合并糖尿病对心肌细胞结构与心脏功能有严重的损害,且远大于单一疾病.

    作者:王燕燕;程训民;周航波 刊期: 2008年第11期

  • 高血糖对急性心肌梗死患者预后的影响

    目的:探讨入院血糖水平对无糖尿病病史的急性心肌梗死(AMI)患者预后的影响. 方法:选择737例无糖尿病病史的急性心肌梗死患者,根据其入院后血糖水平分为3组,第1组为357例血糖水平<6.1mmol/L者;第2组为228例血糖水平在6.1~7.8mmol/L者;第3组为152例血糖水平>7.8mmol/L者.对3组患者的一般临床情况、梗死部位、主要并发症发生率和病死率进行比较. 结果:第2、3组女性患者所占比例较高,平均年龄相对较高、梗死前心绞痛症状较少、心率较快、血压较低.组间梗死部位比较的差异无统计学意义(P>0.05).第2组患者住院期间在心力衰竭、严重心律失常、心源性休克的发生率和病死率方面显著高于第1组患者(P<0.05);第3组主要并发症的发生率和病死率较第1、2组均显著增高,差异有统计学意义(P<0.05). 结论:无糖尿病病史AMI患者中,血糖水平较高者的住院期间主要并发症发生率和病死率显著增加,预后较差.

    作者:张金;刘挺松;陈锐华;江时森;宫剑滨;张启高;王立军;彭永平;程训民 刊期: 2008年第11期

  • Flt3的原核表达、纯化及多克隆抗体制备

    Flt3(fms-like receptor tyrosine kinases)又称FLK-2(foetal liver kinase2)、STK-1(stem cell tyrosine kinase 1),为Ⅲ型受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTK)成员之一,在血细胞中表达仅限于造血干/祖细胞表面,与其配体在正常造血及免疫系统发育中起重要的调节作用.

    作者:陈晓;欧阳建;温艳婷;周锦勇;耿东进 刊期: 2008年第11期

  • 冠心病患者血浆内皮素水平与心脏收缩功能的研究

    目的:观察冠心病(CHD)患者血浆内皮素(ET)水平的动态变化,并探讨其与心脏收缩功能的关系. 方法:对62例CHD患者应用免疫放射分析方法(IRMA)测定发病后12、24、48、96 h和7 d的血浆ET水平.应用心脏超声测定其左心室射血分数(LVEF);并按纽约心脏协会(NYHA)分级标准进行临床心功能评定. 结果:CHD患者血浆ET水平显著高于正常对照组(P<0.05),发病12 h即达到峰值,急性心肌梗死(AMI)组和心绞痛(AP)组分别为(127.9±24.1)和(84.1±20.3)ng/L.心功能不全患者ET水平高于心功能正常者,心功能Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ级患者的ET分别为(79.8±16.3)、(86.9±18.2)、(121.2±24.6)和(192.1±22.2)ng/L.进一步相关分析显示,血浆ET水平与LVEF值呈显著负相关(r=-0.26,P<0.05). 结论:CHD患者血浆ET水平在发病后12 h达到峰值,其升高程度不仅与心功能分级有相关性,而且可反映心脏收缩功能的受损程度.

    作者:肖继明;徐军;陈锐华 刊期: 2008年第11期

  • 肥胖对多囊卵巢综合征患者生殖内分泌功能的影响

    多囊卵巢综合征(PCOS)引起的无排卵是导致不孕的原因之一,大多数PCOS患者受到肥胖、胰岛素抵抗和代谢综合征等代谢变化的影响,PCOS肥胖患者的病理生理和临床表现都有很大的改变.肥胖对PCOS女性生殖功能有很大的影响,尤其是腹部肥胖的患者,表现为雄激素过多,较体形正常的患者更易发生PCOS、高胰岛素血症和胰岛素抵抗.肥胖在PCOS的发病机制中起重要的作用,肥胖状态下代谢的改变会对患者健康产生长期的影响.

    作者:胡敏;李威;吴效科 刊期: 2008年第11期

  • 乳腺癌骨转移动物模型的构建

    目的:建立乳腺癌骨转移动物模型. 方法:40只4周~6周龄雌性裸鼠随机分为5组,每组8只,用浓度分别为1×105/ml、1×106/ml、5×106/ml、1×107/ml、5×107/ml的MDA-MB-231细胞悬液0.1ml行左心室注射.观察裸鼠左心室注射致死情况及存活裸鼠49d后骨转移发生情况. 结果:左心室穿刺注射总致死率为32.50%(13/40);各组左心室穿刺注射致死率分别为1/8、1/8、1/8、3/8、7/8,组间比较差异有统计学意义(P=0.004).全组骨转移发生率为48.15%(13/27);各组骨转移发生率分别为0/7、3/7、5/7、4/5、1/1,各组骨转移发生情况差异有统计学意义(P=0.014). 结论:经裸鼠左心室穿刺注射肿瘤细胞成功建立了乳腺癌骨转移动物模型,肿瘤细胞浓度为5×106/ml时是经裸鼠左心室注射建立乳腺癌骨转移动物模型的适宜浓度.

    作者:张帆;姜军;杨新华;陈庆秋;唐鹏 刊期: 2008年第11期

  • 双源CT在颈部血管成像中的应用

    目的:探讨双源CT(DSCT)在颈部血管成像中的应用价值和潜在缺陷. 方法:回顾性分析我院2007年2月至2008年1月经DSCT检查的477例疑有颈动脉粥样硬化患者的CT血管成像(CTA),对图像的质量和颈动脉粥样硬化的CTA进行评估.颈部CTA质量分为3级:优秀(血管显示清晰,无任何运动伪影,能很好地用于诊断)、良好(血管显示较好,有较少运动伪影,可用于诊断)、差(血管显示不清楚,有伪影,病变处显示不清楚,不能达到诊断要求). 结果:CTA优秀者420例(88.1%)、良好44例(9.2%)和差13例(2.7%);其中134例CTA正常,占28.1%,34例颈动脉解剖结构异常,占7.1%.295例患者为颈动脉粥样硬化斑块,占61.8%,颈动脉支架置入11例(2例为双侧),占2.3%,颈内动脉闭塞1例,颈总动脉闭塞1例,颈部占位3例. 结论:双源CT是一种创伤较小、快速、有效的检查技术,可对颈动脉器质性病变和颈动脉狭窄进行评估.

    作者:李峰;朱宗明;张宗军 刊期: 2008年第11期

  • 人细小病毒B19 XA株VP1蛋白原核表达及初步鉴定

    目的:通过DNA 重组技术,构建B19 病毒XA株VP1全长基因表达载体, 诱导重组VP1融合蛋白表达. 方法:自B19病毒感染患者血清中提取病毒DNA为模板,用PCR法扩增编码VP1蛋白的全长基因片段,以pET28(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET28(a)-VP1,转化E. coli. BL21(DE3),获得重组工程菌株.经IPTG诱导培养获得高效表达的VP1融合蛋白,SDS-PAGE、免疫印迹鉴定表达产物;并以该重组融合蛋白为抗原,免疫家兔,ELISA法检测所获抗体效价. 结果:①获得了含重组表达质粒pET28(a)-VP1的正相阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1融合蛋白.②经ELISA法检测抗VP1多克隆抗体效价为1: 12 800. 结论:重组工程菌可表达VP1融合蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,对诊断试剂制备及疫苗研制具有重要意义.

    作者:李小青;张国成;许东亮;李志宏 刊期: 2008年第11期

  • 本刊创刊20周年会讯1

    作者: 刊期: 2008年第11期

  • 慢性阻塞性肺疾病气道重构的研究进展

    慢性阻塞性肺疾病是老年人常见的呼吸系疾病,病死率极高,成为死亡的主要原因之一.而气道重构是COPD主要病理特点之一.文中对COPD气道重构的病理、影像学评估、与微生物的关系、发病机制、治疗等方面的研究进展进行综述.

    作者:文文;赖国祥 刊期: 2008年第11期

  • 原发性中枢神经系统淋巴瘤预后分析

    目的:从临床及组织病理学角度探讨原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)的预后因素. 方法:复习47例PCNSL患者的临床资料,应用CD3和CD20进行免疫组化染色,观察其组织病理学特点,对临床资料、肿瘤坏死及血管周围反应性T淋巴细胞浸润(RPVI)情况与预后的关系进行分析. 结果:47例PCNSL患者中,25例(53.2%)有RPVI,13例(27.7%)有肿瘤坏死.单因素及多因素统计学分析均显示,年龄<60岁和RPVI阳性的患者与预后好相关(P<0.05). 结论:RPVI和年龄是影响中枢神经系统淋巴瘤的有效预后因子.RPVI指标简单易得,有潜在的治疗指导价值,值得进一步的生物学研究.

    作者:程静;张正祥;石群立;赵有财;涂频;周晓军;王修来 刊期: 2008年第11期

  • 大鼠PTHrP亚基因的克隆及其真核反应质粒的构建

    目的:克隆甲状旁腺相关肽(PTHrP)亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建四环素反应性元件调控的反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为调控PTHrP亚克隆在软骨前体细胞中的表达打下基础. 方法:提取骨骺干细胞的总RNA,以RT-PCR方法获得带有酶切位点的PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)基因片段,扩增的DNA片段分别与含潮霉素筛选标记的四环素反应性元件载体pTRE-2Hyg双酶切后连接,转化扩增后对重组质粒进行提取和酶切、测序鉴定. 结果:经酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已经插入重组质粒. 结论:成功克隆出PTHrP亚克隆基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)并构建了反应质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139),为进一步精确调控PTHrP亚基因的表达奠定了基础.

    作者:张树威;陈安民;郭风劲;谢柏臻;祁军;王江;易磊;李昆朋 刊期: 2008年第11期

  • 18氟去氧葡萄糖PET/CT显像对胃癌的应用价值

    目的:探讨18氟去氧葡萄糖(18FDG)PET/CT对胃癌的应用价值. 方法:对临床怀疑胃癌的32例患者(男25例,女7例,年龄31~82岁)行18FDG PET/CT显像,显像前饮水600ml扩张胃腔,PET图像对目测阳性病灶勾画感兴趣区(ROI),并测量大标准摄取值(SUVmax),CT图像测量胃壁增厚的大厚度,所有患者均通过手术或胃镜取得病理结果. 结果:经18FDG PET/CT检查的32例患者中,发现胃癌24例.18FDG PET/CT对胃癌诊断的阳性预测值、阴性预测值和准确性分别为92.3%、100%和93.8%.胃癌患者的SUVmax与胃壁厚度呈正相关,有无淋巴结转移与SUVmax及胃壁厚度的差异均无显著性统计学意义;根据PET/CT检查结果对24例胃癌患者进行临床分期:Ⅰ期9例,Ⅰ~Ⅱ期1例,Ⅱ期3例,Ⅲ期1例,Ⅳ期10例. 结论:18FDG PET/CT显像对胃癌的诊断、生物学行为评价及临床治疗策略的选择有重要价值.

    作者:吴江;朱虹;王中秋;童金龙;常林凤;胡裕效;王新刚;黄红丽 刊期: 2008年第11期

  • 瘦素与儿童肥胖研究进展

    瘦素(leptin)是一种主要由脂肪组织产生的蛋白激素,直接作用于下丘脑,参与能量平衡的调节,在机体肥胖的产生过程中起着重要作用.体内存在多种瘦素蛋白受体亚型,其中可溶性的瘦素受体(sOb-R)可调节瘦素水平,具有很高的检测价值.相关研究显示,瘦素很有可能成为判断儿童肥胖风险的标记物,瘦素水平还可被用来评估肥胖儿童对运动干预的应答性.

    作者:孟扬;汪俊军 刊期: 2008年第11期

  • 左心室内推注藜芦定建立犬Bezold-Jarisch反射模型

    目的:观察左心室内推注藜芦定诱发的Bezold-Jarisch反射(BJR),并建立犬BJR模型. 方法:7只杂种犬麻醉后经左颈动脉插入心导管至左心室,先后经心导管弹丸式推注藜芦定5、10、15和20μg/kg,记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)推药前的基础值、推药后的低值及大下降值ΔHR、ΔMAP.待前一剂量藜芦定推注后HR及MAP恢复至推药前的基础值水平并稳定15min以上后再推注后一剂量.观察藜芦定剂量与ΔHR、ΔMAP所占基础值百分比之间的关系,以两者百分比均>50%作为犬BJR模型的标准. 结果:7只犬左心室内推注4个不同剂量藜芦定后均诱发出BJR,表现为HR及MAP的一过性下降,两者的低值均明显低于基础值(P<0.01).推药后HR的低值随推药剂量增大而减少,ΔHR百分比随推药剂量增大而增大,相邻2个剂量之间的HR低值及ΔHR百分比相比,差异均有统计学意义(P<0.05).推药后MAP的低值随推药剂量增大而减小,但相邻2个剂量之间的MAP低值相比,仅10与5μg/kg之间差异有统计学意义(P<0.05);ΔMAP百分比随推药剂量增大而增大,10与5μg/kg之间、15与10μg/kg之间ΔMAP百分比相比差异均有统计学意义(P<0.05).15和20μg/kg藜芦定推注后ΔHR及ΔMAP百分比平均值均>50%. 结论:左心室内弹丸式推注15和20μg/kg藜芦定能成功建立犬BJR模型,该方法操作简便、可靠性高.

    作者:夏阳;廖德宁;杨志健;赵伟;赵亮;张家友 刊期: 2008年第11期

  • 45,X,der (Y) t (Y;13)不育男性患者的临床细胞和分子遗传学研究

    目的:了解核型为45, X, der (Y) t (Y; 13)(q11.1; q12), -13伴无精子症、双侧乳腺轻微发育和多发性皮下结节男性患者的分子遗传学特点. 方法:进行常规染色体核型分析,用荧光原位杂交(FISH)进一步确定患者核型.用PCR-STSs以确定Yq上的断裂点.用DNA多态性方法检测位于13q12 上的BRCA 2基因拷贝数.对患者的睾丸和皮下结节进行活检. 结果:细胞遗传学和FISH证实患者SRY基因和Y染色体着丝粒位于13号染色体上.因此,患者核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13.ish der(Y)(SRY+, DYZ3+, wcp13+).Y染色体长臂上的AZFa,b,和C区域全部丢失,断裂点位于sY82以下.BRCA 2基因的多态性检测无拷贝数的丢失.睾丸活检结果为唯支持细胞综合征.皮下结节病理检查为血管脂肪瘤. 结论:患者的男性表型是由于基因组中存在SRY基因.无精子症、睾丸体积小与病理结果一致,是由于Y染色体Yq11.1 → Yqter 片段丢失所致.但血管脂肪瘤的分子机制仍然不清楚.

    作者:崔英霞;夏欣一;卢洪涌;潘连军;邵永;姚兵;戈一峰;王国洪;李晓军;黄宇烽 刊期: 2008年第11期

  • 重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk的构建及在细胞内的热诱导表达

    目的:构建用于靶向基因治疗的重组真核表达质粒pHsp70-hsv-tk(pHT),体外转染SMMC-7721肝癌细胞,观察热诱导基因表达情况. 方法:设计1对引物,以pHSV-106质粒为模板进行PCR扩增,将扩增产物纯化所得目的基因片段与pD3SX载体连接,转化大肠杆菌E.coli DH5α,克隆PCR法筛选菌落,测序鉴定后大量抽提质粒.磁性转染法将pHT导入SMMC-7721,加热处理后,用RT-PCR法检测tk基因的整合. 结果:获得重组的hsv-tk基因条带. 结论:成功构建了pHT质粒,可用于进行靶向性基因治疗研究.

    作者:唐秋莎;陈道桢;张东生 刊期: 2008年第11期

  • 听神经病的诊断及病变部位探讨

    听神经病(auditory neuropathy,AN)被Starr[1]命名已12年,已成耳科学研究探讨的热点之一.近年我国学者[2,3]回顾国内有关AN的文章和研究现状,提出其中符合AN诊断标准的仅480/1146耳(42%),表明目前对AN的诊断标准认识并不一致,对其命名及病变部位亦观点不一,亟待加深认识,以统一标准.

    作者:王锦玲 刊期: 2008年第11期

  • 肾集合小管癌伴持续高热1例并文献复习

    肾集合小管癌(collecting duct carcinoma,CDC)是一种罕见的肾细胞癌,占所有肾细胞癌的1%~2%[1].常见的首发症状是血尿、腰痛、体质量减轻和肾区肿块[2].我科收治1例集合小管癌患者,以不规则持续高热入院.现报道如下.

    作者:赵旭东;魏武;程文;高建平 刊期: 2008年第11期

医学研究生学报杂志

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主管:南京军区联勤部卫生部

主办:南京军区南京总医院