学术投稿

腺病毒荧光定量PCR快速检测方法建立

茅海燕;卢亦愚;陈寅;李榛;徐昌平;张严峻;严菊英

关键词:腺病毒, 双链嵌合荧光染色(SYBR Green), 荧光定量PCR
摘要:目的 建立腺病毒双链嵌合荧光染色(SYBR Green)实时定量PCR快速检测方法,用于腺病毒感染的早期诊断及病毒核酸定量分析.方法 建立并优化SYBR Green荧光定量PCR反应体系和反应条件,评价该方法的特异性、灵敏度和重复性,同时进行熔解益线分析,构建定量分析模型,并对84份临床样本进行检测.结果 该方法与其他呼吸道病毒无交叉反应,检测灵敏度10~2拷贝/μL,熔解曲线显示单一的峰,熔解温度为(84.9±0.1)℃,临床样本检测阳性率达30.95%.结论 建立了快速、敏感、特异的腺病毒SYSR Green荧光定量PCR检测方法,适用于腺病毒的早期快速诊断.
中国公共卫生杂志相关文献
  • 慢性病社区管理患者相关知识、态度、行为调查

    目的 了解四川省成都市社区卫生服务中高血压糠尿病患者的知识、态度和行为情况.方法 运用简单随机抽样方法进行调查,采用描述性方法、X~2检验对高血压、糖尿病患者相应防治知识的知晓率、依从率、行为改变率进行分析.结果 成都市社区卫生服务中高血压患者对血压正常值的正确知晓率为48.9%,规律吃药的依从率为90.9%;行为改变率高的是生活规律,为93.0%;糖尿病患者血糖正常值的正确知晓率为35.4%,规律吃药的依从率为94.2%,行为改变率高的是运动量增加62.4%.待业下岗、个体经营的高血压糖尿病患者依从率较低(X~2=66.615,P<0.01;X~2=18.076,P<0.01).结论 高血压患者血压正常值的正确知晓率及行为改变率高于糖尿病患者;糖尿病患者在运动量的增加方面改善明显.

    作者:柴云;汪文新;徐汉成;杨德华;许静;秦伟;卢祖洵 刊期: 2010年第01期

  • 汉坦病毒融合作用研究进展

    汉坦病毒(hantavirus,HV)属布尼亚病毒科汉坦病毒属,是肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)和汉坦病毒肺综合征(hantavirus pulmonary syndrome,HPS)的病原体.

    作者:郑晓民;王志玉 刊期: 2010年第01期

  • 大鼠卡氏肺孢子虫肺炎黄芩苷治疗效果评价

    目的 研究黄芩苷治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的疗效.方法 以每周2次连续6周皮下注射地塞米松3.5 mg/只,建立清洁级SD大鼠PCP动物模型,用黄芩苷100,200和400 mg/kg灌胃,连续2周治疗实验大鼠.同时设复方新诺明治疗对照组、PCP模型对照组和正常对照组;通过各组大鼠肺重、肺重/体重比、包囊计数和肺组织病理学变化等指标评价疗效.结果 黄芩苷低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组大鼠肺重分别为(2.26±0.14),(1.79±0.11),(1.57±0.14)g,低于PCP模型对照组的(2.70±0.15)g(P<0.01);肺重/体重比分别为(1.32±0.22)%,(1.04±0.13)%,(0.59±0.11)%,低于PCP模型对照组的(1.98±0.18)%(P<0.01);包囊均数分别为(42,86±5.01),(41.86±6.64),(30.29±4.72),低于PCP模型对照组的(56.29±5.82)(P<0.01);肺组织炎症明显减轻,黄芩苷高剂量组与复方新诺明治疗对照组效果接近.结论 黄芩苷对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎有明显的治疗作用,治疗效果接近复方新诺明.

    作者:周必英;周泠 刊期: 2010年第01期

  • 枸杞多糖对染铅小鼠学习记忆及海马区PKC影响

    目的 探讨枸杞多糖对染铅小鼠学习记忆功能和海马区蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)的影响.方法 将实验小鼠随机分为5组,即空白对照组、染铅模型组、枸杞多糖高、中、低3个剂量组,枸杞多糖各剂量组于染铅后第2 d灌胃给药,每天1次,于第2,4周测小鼠到达迷宫避难台所需要的时间,第4周测血铅浓度和海马区PKC含量.结果 枸杞多糖各剂量组与染铅模型组比较,血铅浓度[枸杞多糖各剂量组(0.65±0.28)~(0.11±0.13)mg/L,模型组(1.68±0.19)mg/L]明显降低,到达避难台的时间也明显减少;而海马区PKC含量[枸杞多糖各剂量组(73.23±6.52)~(96.33±8.03)mmol/L,模型组(62.26±7.21)mmol/L]明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 枸杞多糖可促进小鼠体内铅的排出,改善染铅小鼠的学习记忆功能,抑制海马区PKC含量降低.

    作者:蔡天革;蔡宇;余绍蕾 刊期: 2010年第01期

  • 单纯性肥胖儿童脂肪肝影响因素分析

    目的 探讨单纯性肥胖儿童脂肪肝的影响因素,为预防和治疗儿童脂肪肝提供参考依据.方法 采用多级整群分层抽样,对江苏省徐州市10所学校中121名8~13岁单纯性肥胖儿童进行问卷调查、体格检查、B超检查及血脂检测.结果 单纯性肥胖儿童脂肪肝的检出率为71.9%;脂肪肝组体质指数(BMI)、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯(TG)分别为29.36,3.30,2.45 mmol/L,明显高于非脂肪肝组,差异有统计学意义(P<0.01);多因素非条件Logistic逐步回归结果显示,腰围、每次食用煎炸食品量多、体质指数、不吃早餐和LDL、TG为单纯性肥胖儿童脂肪肝危险因素;不吃零食、喜欢运动为保护因素.结论 单纯性肥胖儿童脂肪肝与肥胖程度和血脂密切相关.

    作者:吴秀娟;王健;董华;耿跃春;张训保;孙桂香;邵继红 刊期: 2010年第01期

  • 机动车尾气暴露与儿童神经行为功能关系

    目的 探讨机动车尾气暴露及相关因素对儿童神经行为功能的影响,并寻找神经行为功能受点人群.方法 在福建省泉州市某区选择机动车尾气污染水平不同的2所小学,整群选取二、三年级学生进行问卷调查和神经行为功能测试,终选择861名研究对象进行分析;采用卡方自动交互检测法(CHAID)分析儿童神经行为功能的主要影响因素及各因素之间可能存在的交互作用.结果 二年级有被动吸烟的女童和二年级有被动吸烟且生活在污染区的男童神经行为功能受影响率高,分别为72.55%和67.24%;机动车尾气暴露是影响三年级儿童神经行为功能的首要因素.结论 机动车尾气及被动吸烟暴露的儿童应该被视为重点关注和保护人群;避免在居室内吸烟、减少机动车尾气污染等措施有利于儿童神经行为功能发育.

    作者:王舜钦;张金良;曾晓东;曾奕民;陈淑云;王圣淳;赵秀阁 刊期: 2010年第01期

  • 水黄皮根总黄酮抗大鼠幽门结扎型胃溃疡作用

    目的 研究水黄皮根总黄酮(PRF)对大鼠幽门结扎型胃溃疡的作用机制.方法 采用大鼠幽门结扎模型观察PRF对胃溃疡的保护作用;幽门结扎收集胃液观察PRF对大鼠胃液分泌和黏液分泌的影响;采用免疫组化染色法观察PRF对幽门结扎大鼠胃黏膜表皮生长因子(EGF)表达的影响;采用放射免疫方法观察PEF对幽门结扎大鼠血清胃泌素的影响.结果 与模型对照组的溃疡指数(4.37±0.69)比较,PRF中、高剂量组分别为(2.62±0.69),(2.12±0.92),对大鼠幽门结扎型胃溃疡有明显的保护作用(P<0.01);与模型对照组的积分吸光度(0.67±0.24)比较,PRF低、中、高剂量组分别为(0.93±0.41),(1.36±0.59),(1.54±0.68),差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型对照组比较,PRF各剂量组可明显降低胃液量(P<0.05,P<0.01);PRF中、高剂量能明显降低大鼠游离酸度、总酸度以及总酸排出量(P<0.01).结论 水黄皮根总黄酮对大鼠幽门结扎型胃溃疡具有明显保护作用,可能与通过抑制胃泌素分泌、促进EGF分泌、促进胃黏液分泌有关.

    作者:刘可云;朱毅 刊期: 2010年第01期

  • 植物黄酮对白血病细胞HL-60氧化-还原电位影响

    目的 观察植物黄酮3',4',5',7'-四羟黄酮(1uteolin)和3'-甲氧基,3,7,4'-三羟黄酮(geraldol)对白血病细胞HL-60氧化-还原电位的影响.方法 四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力变化;邻苯二醛(POT)比色法测定胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,计算GSH/GSSG及氧化-还原电位.结果 10μmol/L的luteolin或Geraldol作用0 h时细胞氧化-还原电位为-(295.5 ±31.2)mV,随后逐渐升高,分别作用4和2 h后达到-(278.6 ±28.7)和-(279.6±26.3)mV,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);10μmol/LNAC干预能够降低luteolin和geraldol对HL-60细胞的增殖抑制效应,干预后其24 h增殖抑制率分别由(25.4±1.8)%,(21.8±1.5)%降低至(16.8±1.1)%,(12.1±1.0)%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 luteolin和ger-aldol能够明显升高HL-60细胞的氧化-还原电位,降低其GSH水平,可能在其抗肿瘤机制中发挥作用.

    作者:常徽;糜漫天;顾艳艳;袁家林;凌文华;林辉 刊期: 2010年第01期

  • 微囊藻毒素遗传毒性检测方法研究进展

    近年来,由于生活污染和工农业污染的加剧,大量氮、磷排入水中,导致水体富营养化程度加剧,引起藻类大量繁殖,藻类生长代谢或藻体死亡破裂后向水体中释放出藻毒素,其中危害大的是微囊藻毒素(Microcystin,MC),严重威胁人类健康~([1-3]).

    作者:王伟琴;庞晓露;金永堂 刊期: 2010年第01期

  • 出生缺陷与原生环境关系研究进展

    在过去的半个多世纪中,随着人口增长和疾病模式的转变,出生缺陷问题日益突出,已成为世界婴儿死亡、儿童和成人残疾的主要原因之一.

    作者:曲红梅;于国伟 刊期: 2010年第01期

  • 江西省2005-2007年血防改厕效益评价

    血吸虫病是严重危害人民身体健康、阻碍社会经济发展的重大传染病.近年来,我国血吸虫病疫情有所回升,对人体健康、经济发展和社会进步构成威胁.

    作者:李秋娟;史丽娟;徐岷;彭国华;范元新;敖水华 刊期: 2010年第01期

  • 深圳市新生儿听力筛查情况及影响因素分析

    目的 了解深圳市新生儿听力筛查情况及先天性听力障碍发病情况.方法 2004-2008年,用耳声发射(OAE)与快速听性脑干反应(AABR)技术对深圳市出生的13 652名新生儿进行听力筛查.对其中4 732名新生儿进行先天性听力障碍危险因素调查.结果 新生儿听力筛查初筛通过率为87.7%,复筛率为59.6%,复筛通过率为83.6%;生后3 d筛查组(A组)仞筛的通过率为82%,低于生后30 d组(B组)的94%,生后30 d组复筛通过率为63%,低于生后3 d组的85%(P<0.001);高胆红素血症、先天性耳廓及外耳道畸形、先兆流产史是先天性听力障碍的危险因素.结论 对新生儿应常规进行听力筛查,将有高危因素的患儿列为重点筛查对象,作到早发现、早治疗.

    作者:刘一心;邬沃乔;刘世新;李海飞;邓文娇;林艳 刊期: 2010年第01期

  • 公共场所空调风险识别及评价

    近年来,研究资料表明,空调系统污染已成为室内空气污染的主要来源之一;空调系统污染所造成人体健康危害和疾病种类几十种~[1].因此,调节场所内小气候和保障空气质量的空调系统卫生状况尤为重要.

    作者:沈凡;张屹;刘玉敏;赵锐;邵开建 刊期: 2010年第01期

  • 食管癌中CTGF,Cyr61表达与相关因素分析

    目的 探讨人食管癌组织中结缔组织生长因子(CTGF),富含酪氨酸61(Cyr61)表达及其与相关因素的关系.方法 采用实时荧光定量PCR和免疫组化染色法对186例食管癌患者的食管癌组织和癌旁正常食管组织中CTGF,Cyr61表达水平进行检测,并进行Logistic回归分析.结果 与正常食管组织比较,食管癌组织中CTGF,Cyr61mRNA(5.29±5.12,7.13±4.26)均表达上调(P=0.000),蛋白均高表达(20.83±8.20,16.79±6.81)(P=0.000);多因素Logistic回归分析显示:吸烟,浸润深度是CTGF mRNA表达的危险因素(P<0.01);吸烟、淋巴结转移、家族史、肿瘤大小、病理分级是CTGF蛋白表达的危险因素(P<0.05);淋巴结转移、肿瘤大小、浸润深度是Cyr61 mRNA表达的危险因素(P<0.05);淋巴结转移、病理分级、浸润深度是Cyr61蛋白表达的危险因素(P=0.001).结论 CT-GF、Cyr61在食管癌发展过程中起重要作用,其可能成为基因治疗的重要靶点.

    作者:陈萍萍;张静;王旗;陈幕华;崔玲玲;吕全军;谢东 刊期: 2010年第01期

  • 重庆市2008年中小学生龋齿患病现状分析

    龋齿是中小学生常见病之一,流行面广、发病率高~[1].龋病严重影响学生身体健康与生长发育,尤其是恒牙龋病引起的危害更大.

    作者:曹型厚;窦义蓉;蒲克勇;张亚妮 刊期: 2010年第01期

  • 亚砷酸钠对G361细胞ROS水平及TYR影响

    目的 研究亚砷酸钠(NaAsO_2)对人类黑色素瘤G361细胞活性氧自由基(ROS)水平及酪氨酸酶(TYR)活力的影响.方法 将体外培养的人类黑色素瘤G361细胞分别暴露于NaAsO_2浓度为0.1,0.5及5.0 μmol/L2及6 h后,测定细胞内ROS水平及TYR活力.结果 NaAsO_25 μmol/L 2及6 h[(130.12±3.07)%][(139.55±11.02)%]染毒组ROS水平明显高于各相应染毒时段对照组水平;染毒2及6 h各剂量组TYR活力分别为(99.31±0.81)%,(99.85±1.34)%,(99.52±1.43)%和(99.50±1.88)%,(100.35±1.95)%,(101.68±1.66)%,与各自对照组比较,差异无统计学意义.结论 NaAsO_2作用下,随着染毒剂量增高,G361细胞内ROS的生成水平增多,呈剂量-效应关系.

    作者:李昕;李冰;侯萍;张新玉;朱博;张森佳;孙贵范 刊期: 2010年第01期

  • 二氧化钛纳米材料对家兔血液相容性影响

    目的 探讨纳米二氧化钛(TiO_2)对家兔凝血系统、血浆蛋白及血细胞的影响,初步研究其血液相容性.方法 将24只家兔随机分为4组,在给药的0,1,2,4,8,24,48 h检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(AFIT)和血浆纤维蛋白原(FIB)含量;血浆血小板第4因子(PF-4)含量;红细胞(RBC)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)计数;并在0和48 h时于光镜下观察血细胞形态.结果 TiO_2纳米粒对家兔的PT、APTT、FIB、PF-4、RBC、WBC、PLT均无明显影响(P>0.05);且同组中不同时间点,检测指标差异无统计学意义(P>0.05);0,48 h时各种血细胞形态均未见明显变化.结论 TiO_2纳米粒对家兔凝血功能、血浆蛋白及血细胞的数量和形态均无影响,是一种具有良好血液相容性的生物材料.

    作者:梅恒;胡豫;张治华;王华芳;郭涛;魏文宁 刊期: 2010年第01期

  • 江西省儿童锐器伤分布特征调查

    目的 分析江西省儿童锐器伤的分布特征,为制定儿童锐器伤伤害干预策略提供参考依据.方法 于2005年9-11月采用3阶段、分层、整群、与规模大小成比例的概率抽样方法,对98 335名0~17岁儿童1年内发生锐器伤的情况进行问卷调查.结果 儿童锐器伤发生率为0.40%,位居儿童伤害第4位,构成比为6.99%;男性发生率为0.50%,女性发生率为0.26%,差异有统计学意义(P<0.05);各年龄组中以10~14岁发生率高,为0.46%,其次是5~9岁,发生率为0.41%;造成儿童锐器伤的锐器32.13%是废弃物、23.65%是家用品;发生的地点主要为家中和学校,分别占46.27%,13.62%;69.41%的锐器能够轻易被儿童接触到.结论 5~14岁是儿童锐器伤发生的高发年龄,预防和控制锐器伤的措施是消除隐患,强化安全意识,提高防范能力.

    作者:赵军;李艾;朱丽萍;金锦扬;李秋娟;张伟;徐菲;余平;吉路;胡洁;陈轶英 刊期: 2010年第01期

  • 留守初中生心理健康状况调查

    目的 了解留守初中生心理健康状况,为采取干预措施提供科学依据.方法 选取江西省3所乡中学775名初中生为研究对象,进行心理健康诊断测验(MHT).结果 留守初中生心理问题≥1项的阳性检出率为72.4%,但与非留守及曾留守学生比较差异无统计学意义(P>0.05);留守初中生恐怖倾向阳性检出率为16.5%,非留守初中生为9.7%,二者比较差异有统计学意义(X~2=7.15,P<0.01);初二年级留守学生冲动倾向得分为(4.49±2.25),明显高于非留守学生(2.64 4-2.08)及曾留守学生(3.91 4-2.41)(P<0.05);非留守男生自责倾向得分为(5.34±2.39)明显高于留守男生(4.69±2.54)及曾留守男生(5.02 ±2.41)(P<0.05);初三年级非留守学生自责倾向和过敏倾向得分为(5.85 ±2.21),(5.84 ±2.10),明显高于留守学生(4.86 ±2.31),(4.78±2.22)和曾留守学生(4.42±2.71),(5.50±2.84)(P<0.05).结论 与非留守初中生比较,留守初中生心理问题表现不明显,但阳性检出率有明显增长趋势.

    作者:曾红;曾煜 刊期: 2010年第01期

  • 腺病毒荧光定量PCR快速检测方法建立

    目的 建立腺病毒双链嵌合荧光染色(SYBR Green)实时定量PCR快速检测方法,用于腺病毒感染的早期诊断及病毒核酸定量分析.方法 建立并优化SYBR Green荧光定量PCR反应体系和反应条件,评价该方法的特异性、灵敏度和重复性,同时进行熔解益线分析,构建定量分析模型,并对84份临床样本进行检测.结果 该方法与其他呼吸道病毒无交叉反应,检测灵敏度10~2拷贝/μL,熔解曲线显示单一的峰,熔解温度为(84.9±0.1)℃,临床样本检测阳性率达30.95%.结论 建立了快速、敏感、特异的腺病毒SYSR Green荧光定量PCR检测方法,适用于腺病毒的早期快速诊断.

    作者:茅海燕;卢亦愚;陈寅;李榛;徐昌平;张严峻;严菊英 刊期: 2010年第01期

中国公共卫生杂志

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主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会