学术投稿

TTV DNA实时荧光定量PCR参照品的构建

杨建荣;陈晓东;陶志华

关键词:TTV, 聚合酶链反应, 克隆
摘要:目的构建适用于TTV DNA实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的参照品.方法采用经典的A-T克隆法,将TTV基因序列非转录区(ORF2)中的一段保守序列经PCR扩增后将特异性产物片段连接于PUCm-T载体,形成重组质粒.并对所制备的质粒参照品在普通冷冻条件下的稳定性等指标进行分析;并通过测序验证重组序列的特异性.结果所制备的质粒标准品敏感度高,所采用的扩增子与各TTV亚型同源性在96%-100%;且在普通实验室条件下的稳定好,-20℃保存在20天内无显著变化;线性范围宽,当稀释度在10~109copies/ml之间时相关系数r=-0.97.结论该重组质粒参照品适用于TTV DNA实时荧光定量PCR分析.
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    本文对我院2003~2004年应用高频超声检查,后经手术及病理证实的205例阑尾炎进行回顾性分析.对象与方法1对象205例均为门诊患者,男98例,女107例;年龄3~65岁,平均37岁;病史3h-8d.所有病例均有右下腹疼痛史,白细胞计数均有不同程度的升高.

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    我市为疟疾老疫区,经反复治疗,从1984年起我市连续6年发病率控制在1/万以下,1989年发病率为0.062/万,同年达到基本消灭.以后转入监测和巩固阶段,至今15年未发现本地原发病例.现将1989~2004年的监测结果报告如下.

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  • 东南亚人禽流感15例临床分析

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    作者:刘加良 刊期: 2006年第04期

  • 杭州市江干区2002~2004年碘缺乏病监测

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    作者:蒋雪凤;周燕 刊期: 2006年第04期

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