学术投稿

IL-35在免疫相关疾病中的研究进展

王志会

关键词:白细胞介素-35, 自身免疫疾病, 肿瘤
摘要:白细胞介素-35(IL-35)是白细胞介素-12(IL-12)家族的新成员,由Collison等[1]在2007年先发现并确认.IL-12家族共有4个成员,分别为:IL-12、IL-23、IL-27、IL-35.这4种细胞因子均为异质二聚体,每1个异质二聚体细胞因子均由1个折叠螺旋束样细胞因子(four helix bundle cytokines)亚单位(IL-12 p35、IL-23 p19、IL-27 p28、IL-35 p35)和1个可溶型细胞因子受体样亚单位(p40和EBl3)组成(图1)[2].
华中科技大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 胸腔镜下肺段切除术与肺叶切除术治疗肺癌的近期疗效评估

    目的 评估和分析胸腔镜下肺段切除术与肺叶切除术治疗肺癌的术后近期疗效.方法 122例患者于2013年1月至2013年11月分别行胸腔镜下肺段切除术(n=56)和胸腔镜下肺叶切除术(n=66).选取用力肺活量(FVC),第1秒用力呼气量(FEV1)作为肺功能的评估指标,比较手术前和术后1个月肺功能的变化;分析两组手术时间、术中出血量、术后感染发生率、术后胸腔引流管留置时间、术后第1天胸液引流量、术后胸液总引流量和术后住院时间.结果 胸腔镜下肺段切除组与肺叶切除组术中出血量、术后感染发生率、术后胸腔引流管留置时间、术后第1天胸液引流量和术后住院时间差异均无统计学意义(均P>0.05);与肺叶切除组比较,肺段切除组的手术时间较长,而术后胸液总引流量较少,差异均有统计学意义(P<0.05);比较术后FVC、FEV1,结果表明肺段切除组较肺叶切除组肺功能损失更小,差异有统计学意义(均P<0.05);两组患者术后6个月随访均无复发及死亡.结论 胸腔镜下肺段切除术与肺叶切除术术后近期内均安全有效,但胸腔镜下肺段切除术更有利于保护患者肺功能.

    作者:赵纯;曹隆想;张翀;汪路明;胡坚 刊期: 2015年第02期

  • 外源性H2O2对大鼠纯化视网膜神经节细胞存活及轴突生长的影响

    目的 研究外源性H2O2对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和轴突生长状况的影响及其与神经微丝蛋白NF-H表达变化的关系,探讨H2O2的氧化应激引起RGCs损伤的机制.方法 纯化培养SD乳鼠RGCs,应用不同浓度H2O2(250、500 μmol/L)分别作用4、8、24、32 h后测定存活、有突起的视网膜神经节细胞数及其长突起长度.采用免疫组织化学染色加图像分析系统检测H2O2对RGCs表达神经微丝蛋白NF-H的影响.结果 纯化培养的SD大鼠RGCs纯度可达96.24%.H2O2以浓度和时间依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活数,500 μmol/L的H2O2在32h可以导致RGCs存活数下降约50%.同时,500 μmol/L H2O2孵育后RGCs细胞轴突长度与对照组比较明显减短,差异有统计学意义(P<0.01),且减短程度随时间延长而增大;NF-H表达差异也有统计学意义(P<0.01),且NF-H在RGCs中分布紊乱.结论 H2O2的氧化应激损伤能够以时间和浓度依赖的方式影响纯化培养的RGCs存活,可影响RGCs轴突生长,这可能与其下调RGCs中神经微丝蛋白的表达有关.

    作者:钟杰;贾君;杨万举 刊期: 2015年第02期

  • 瑞舒伐他汀通过NO/eNOS信号通路改善慢性心力衰竭大鼠的心功能

    目的 探讨瑞舒伐他汀(ROS)通过一氧化氮(NO)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路对慢性心力衰竭大鼠心功能的保护作用及其机制.方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠,皮下注射异丙肾上腺素[ISO,5 mg/(kg·d)]连续给药7d诱发大鼠慢性心力衰竭,瑞舒伐他汀组[ROS,5 mg/(kg· d)]于第1天皮下注射ISO开始同时予以灌胃给药至第7天,停止ISO皮下注射,第8天继续给予ROS灌胃至第14天.检测血流动力学参数和心肌NO含量并观察心肌组织病理变化,采用Western blot法检测心肌eNOS的蛋白表达.结果 ①瑞舒伐他汀显著改善ISO诱导的慢性心力衰竭大鼠心脏血流动力学参数,与ISO组比较,瑞舒伐他汀组显著升高左心室收缩压(LVSP)和左心室大上升速率(±LVdP/dtmax)(P<0.01),显著降低左心室大下降速率(-LV dP/dtmin)(P<0.01).②瑞舒伐他汀可改善ISO诱导的慢性心力衰竭大鼠心肌组织病理损害,与ISO组比较,瑞舒伐他汀的治疗可缩小心肌纤维化面积,减轻炎性细胞浸润及心肌细胞水肿,减轻毛细血管扩张.③在慢性心力衰竭大鼠心肌组织中,瑞舒伐他汀显著升高ISO诱导减低的NO含量(P<0.01).④瑞舒伐他汀组与ISO组比较,增加ISO诱导降低的心肌组织eNOS蛋白的表达(P<0.01).结论 瑞舒伐他汀可改善ISO诱导慢性心力衰竭大鼠的心功能,其机制可能与NO/eNOS信号转导通路有关.

    作者:徐清斌;熊爱琴;徐烨华;王洋;马萍 刊期: 2015年第02期

  • 不同机械力作用下兔前颌缝和颧颌缝改建的组织形态学研究

    目的 探讨不同大小交互偶联的机械力作用兔前颌缝和颧颌缝改建的组织形态学变化.方法 2.5月龄体重2.0~2.5 kg雄性日本大白兔,通过在双侧前颌缝近远中两侧的上颌骨与前颌骨中分别植入微种植钉,镍钛拉簧双侧对称性即刻加载不同力值(50、100、150、200、250、300 g/侧)7d,使左右的前颌缝受到来自拉簧的压缩应力;相对处于上颌骨远中的颧颌缝受到牵张应力,来观察在这种交互偶联力作用下,兔前颌缝和颧颌缝改建的形态学和组织学改变.结果 实验期间,随着力值增加实验兔覆盖减小,覆(牙合)改变不显著.苏木精-伊红染色组织学观察可见,各实验小组从50g/侧到250 g/侧,随着力值增加前颌缝和颧颌缝分别发生破骨和成骨的改建,改建基本都处于生理范围,到250 g/侧时两条骨缝的改建活跃.当加力为300 g/侧时,骨缝结构基本消失,该力值已超出兔骨缝改建所能承受的生理范围.结论 在生理范围内,不同机械力值作用兔骨缝引起的骨改建,在250 g/侧时处于活跃状态.

    作者:邓婕;张晓蓉 刊期: 2015年第02期

  • OPN和NF-κB在过敏性紫癜患者血清中表达水平的变化及意义

    目的 探讨骨桥蛋白(OPN)及核转录因子(NF-κB)在血清中的变化及在过敏性紫癜(HSP)发病机制和疾病进程中的作用.方法 收集湖北医药学院附属随州医院及武汉协和医院皮肤科2012年11月至2013年4月36例经确诊的过敏性紫癜患者血清为实验组,收集40例同龄正常人血清为对照组,通过ELISA技术检测各样本血清中OPN及NF-κB水平.结果 OPN和NF-κB在过敏性紫癜患者外周血中的表达均显著高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05),且两者呈正相关(r=0.59,P<0.05).过敏性紫癜肾炎组OPN和NF-κB在患者血清中表达水平均显著高于无肾脏损害过敏性紫癜组(P<0.05).OPN与24 h尿蛋白定量变化呈显著正相关(r=0.402,P<0.05),NF-κB与24 h尿蛋白定量变化无相关性(r=0.185,P>0.05).结论 OPN和NF-κB可能参与了过敏性紫癜的发病过程,OPN可能参与过敏性紫癜患者肾脏的损伤.

    作者:金汶;吴成 刊期: 2015年第02期

  • 基于支持向量机的左心室短轴缩短率参考值与地理环境的关系研究

    目的 观察地理环境与左心室短轴缩短率参考值的关系及其影响机制,为制定该参考值的统一标准提供更全面的科学依据.方法 收集全国49个市县的2 252例健康中老年人左心室短轴缩短率的参考值,运用全局空间自相关的Moran's Ⅰ指数探索该医学指标与空间位置之间的关系,再利用相关分析方法,探寻该医学指标与9项地理因素的关系,进一步构建回归模型,分别构建基于遗传算法和网格搜索法的支持向量回归机.结果 研究结果表明,中国中老年人左心室短轴缩短率参考值在空间上呈正的自相关性,并与其中5项地理指标具有显著的相关关系.经过比较分析,基于遗传算法的支持向量回归模型在预测精度上优于基于网格搜索法的模型.结论 若已知某一地区有关地理要素的值,则可通过建立支持向量回归模型得出该区的中老年人左心室短轴缩短率的参考值.

    作者:岑敏仪;葛淼;路春爱;何进伟;杨绍芳;姜吉琳;许金辉;张雯;刘新蕾 刊期: 2015年第02期

  • 噻托溴铵对老年慢性阻塞性肺病合并Ⅱ型呼吸衰竭的临床干预

    目的 研究噻托溴铵在老年慢性阻塞性肺病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭治疗中的临床疗效.方法 90例COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭且需要行无创呼吸机辅助呼吸的老年患者随机分为3组,A组为对照组,B组加用噻托溴铵,C组加用呼吸兴奋剂,观察治疗前后的动脉血气分析,心率(HR),呼吸频率(RR)等指标.结果 加用噻托溴铵后PaCO2、PaO2、pH、SaO2值及RR、HR均有明显改善,无创呼吸机通气时间减少.结论 噻托溴铵对COPD合并Ⅱ型呼吸衰竭有明显疗效.

    作者:朱珊;赵苏;陶兆武;胡轶 刊期: 2015年第02期

  • CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC组织中的表达及意义

    目的 检测细胞角蛋白5/6 (cytokeratin5/6,CK5/6)、P63蛋白、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)和细胞角蛋白8/18 (cytokeratin8/18,CK8/18)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,研究其表达对于肺鳞癌和肺腺癌的诊断和鉴别诊断价值,探讨其临床意义.方法 采用免疫组化(EnVision 法)检测CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在1 067例病理确诊的NSCLC中的表达情况,分析其表达与NSCLC临床及病理资料的相关性.结果 CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC中的阳性表达率分别为50.2% (227/452)、59.6%(164/275)、61.6%(257/417)和94.3%(116/123).CK5/6诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为96.1%和89.8%,准确度为92.9%.P63诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为97.0%和73.9%,准确度为86.1%.TTF-1诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为88.1%和91.7%,准确度为89.2%.CK8/18诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为100.0%和13.5%,准确度为70.9%.CK5/6和P63共同表达阳性诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度为84.1%和94.5%,准确度为89.0%.TTF-1和CK8/18共同表达阳性诊断肺腺癌的灵敏度和特异度为86.5%和100.0%,准确度为90.7%.CK5/6、P63主要表达在肺鳞癌,在男性、吸烟患者中升高明显(P<0.05);TTF-1、CK8/18主要表达在肺腺癌,TTF-1在女性、不吸烟患者中升高明显(P<0.01).NCSLC患者T分期越晚,其CK5/6、P63、TTF-1的阳性表达率越高(P<0.01).NSCLC患者淋巴结转移N分期越早,其CK5/6、P63的阳性表达率越高(P<0.01).P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关(P<0.05).结论 单个指标中CK5/6、TTF-1的阳性表达对于肺鳞癌、肺腺癌的鉴别诊断具有较高价值.CK5/6和P63,TTF-1和CK8/18联合诊断有利于提高诊断的特异性.NSCLC中CK5/6、P63和TTF-1的表达与肿瘤生长浸润程度呈正相关,CK5/6、P63的阳性表达程度与淋巴结转移分期呈负相关,P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关.

    作者:段楚骁;付圣灵;付向宁 刊期: 2015年第02期

  • 大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体的构建与包装

    目的 构建大鼠少突胶质细胞转录因子1(Olig1)的慢病毒表达载体,并进行鉴定和包装.方法 采用聚合酶链反应(PCR),分别以大鼠pEGFP-N3-Olig1表达质粒和pDsRed-monomer-N1为模板,扩增获得大鼠Olig1片段和红色荧光蛋白(RFP)片段.将两者进行PCR拼接获得Olig1-RFP片段,并与pLenti6.3-MCS-DEST载体连接,构建获得pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体,并进行酶切鉴定、测序.然后,将其与包装质粒混合后共转染HEK293T细胞进行包装获得慢病毒颗粒.结果 通过酶切鉴定、测序,证明pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达载体构建成功,且能够被高效地包装为病毒颗粒.结论 成功建立大鼠pLenti6.3-Olig1-RFP慢病毒表达系统,为进一步研究Olig1的生物学作用提供了实验基础.

    作者:席进;陈月娟;张楠;张敬星;胡建国;吕合作 刊期: 2015年第02期

  • 层层自组装血管内皮生长因子/磺化壳聚糖改性钛表面的研究

    目的 利用层层自组装技术,在钛金属表面构建血管内皮生长因子/磺化壳聚糖(VEGF/SCS)多层膜,评价其体外血液相容性,并探讨其在医用金属表面改性方面的应用前景.方法 采用化学合成制备磺化壳聚糖(sulfated chitosan,SCS)并对其表征进行分析;利用层层自组装技术在钛表面构建VEGF/SCS多层膜;对钛表面涂层进行表征分析并评价其体外血液相容性.结果 钛-VEGF/SCS自组装多层膜表面光整,该涂层体外溶血率为0.567%,可延长部分活化凝血酶原时间(APTT)至(49.29±1.05)s,减少血小板粘附和激活.结论 VEGF/SCS层层自组装形成的多层膜可以提高钛合金的体外血液相容性,显示其在医用金属表面改性方面的应用前景.

    作者:汪洋;刘小斌;叶巍;梅黎;魏战杰;张凯伦 刊期: 2015年第02期

  • 旋股外侧动脉降支血流桥接皮瓣重建手掌毁损伤创面

    目的 探讨股前外侧动脉穿支皮瓣以“血流桥接”术式移植修复手掌毁损伤创面的临床效果.方法 2011年7月至2012年5月,对7例手掌毁损伤创面,采用旋股外侧动脉降支血流桥接皮瓣移植,修复创面并桥接手指血运.术后问卷调查患者对皮瓣外形满意度,评测皮瓣痛触觉、温度觉、两点辨别觉(mm),检测患者关节活动度TAM值及与健侧的比值.结果 7例手掌皮瓣均存活,远端断指恢复良好血运;4例术后6个月行二期皮瓣修整手术;7例获得有效随访,随访时间超过12个月,供区伤口均一期愈合,患者对后期皮瓣外形满意度高(7/7,100%),术后6个月皮瓣恢复两点辨别觉,12个月平均值为(10.75±2.10)mm,皮瓣感觉评级为S3+级,患指关节总TAM值与健侧的比值为(0.82±0.16).结论 以旋股外侧动脉降支为蒂的血流桥接皮瓣可以避免损伤主干血管,是桥接手掌毁损剖面的一种安全、有效的术式.

    作者:李涛;陈振兵;丛晓斌;艾方兴;周攀;洪光祥 刊期: 2015年第02期

  • IL-34和CSF-1在狼疮肾炎小鼠肾脏的表达及意义

    目的 探讨巨噬细胞活化因子白细胞介素-34(IL-34)和集落刺激因子-1(CSF-1)在狼疮肾炎小鼠肾脏的表达及意义.方法 以自发性狼疮肾炎小鼠MRL-Faslpr和TgZ-MRL-Faslpr小鼠为模型,于6周、3月、5月末处死动物,检测尿蛋白和血肌酐的变化;PAS染色观察肾脏病理改变;实时定量PCR和ELISA法检测肾组织IL-34和CSF-1的表达;免疫组化和免疫荧光法检测肾组织F4/80+巨噬细胞数量、雪莲花凝集素(LTL)和双花扁豆凝集素(DBA)的分布;原位杂交检测肾脏IL-34的分布;X-gal染色检测肾组织CSF-1的分布.结果 ①随着鼠龄增加MRL-Faslpr小鼠肾脏IL-34和CSF-1 mRNA和蛋白表达均显著增加(均P<0.01),增加的IL-34和CSF-1主要分布在皮髓交界处的肾小管中,部分分布于皮质肾小管.②肾脏IL-34和CSF-1表达增加与肾脏病理分级和肾间质巨噬细胞浸润呈量效关系.③尿蛋白定量与肾脏IL-34的表达密切相关.相关分析显示,尿IL-34含量与尿白蛋白排泌呈正相关(r=0.915 4,P<0.01),明显优于CSF-1(r=0.150 6,P=0.07).结论 与CSF-1相比,肾脏IL-34的表达和分泌与尿蛋白定量密切相关,尿IL-34含量能够反映狼疮肾炎的活动程度.

    作者:廖文慧;杜艳军;曾锐 刊期: 2015年第02期

  • 活动期幼年特发性关节炎Th17细胞及细胞因子水平的临床价值

    幼年特发性关节炎(juvenile idiopathic arthritis,JIA)是儿童期以关节炎为主要特点,伴有关节、皮肤、肌肉组织等全身多系统受累的自身免疫疾病.目前该病的病因和发病机制不明.以往对于JIA病因的认识主要来自遗传、环境和感染等方面.随着分子生物学和现代免疫学迅猛发展,人们对JIA的认识不断增加,有关JIA发病机制的研究也更新了一些观点,其中免疫细胞及其细胞因子在炎症反应中的平衡是非常重要的,是当前关于发病机制的研究热点之一.尤其是CD4+T细胞及其亚群比率改变在免疫调节中起核心作用[1].

    作者:胡玲娟;刘燕婕 刊期: 2015年第02期

  • 腔隙性脑梗死与轻度帕金森样体征、血管性帕金森综合征的相关性分析

    目的 研究腔隙性脑梗死(lacunar infarcts,LI)和轻度帕金森样体征(mild parkinsonian signs,MPS)及血管性帕金森综合征(vascular parkinsonism,VP)的相关性.方法 前瞻性纳入在襄阳市中心医院神经内科就诊的LI患者264例,行颅脑MRI平扫确定颅内LI的数量和位置,采用帕金森病评定量表(UPDRS)对所有纳入研究的受试者进行运动症状的评分,进行调整年龄、性别后的Logistic回归分析判断LI与MPS及V的关系.结果 颅脑MRI平扫≥3个LI与MPS、VP相关(MPS∶OR=2.4,95 %CI 1.4~3.8,P<0.01;VP:OR=1.9,95%CI 1.2~3.0,P<0.05);LI与MPS和VP的运动迟缓症状独立相关(<3个LI:OR=1.7,95%CI 1.1~3.6,P<0.05;≥3个LI:OR=2.8,95%CI 1.6~4.2,P<0.01).丘脑区域的LI患MPS和VP的风险较高(MPS∶OR=2.2,95%CI 1.4~3.6,P<0.01;VP∶OR=1.5,95%CI 0.7~2.5,P<0.05);而额叶区域的LI与MPS有关(OR=1.8,95%CI 0.8~3.2,P<0.05).结论 研究表明LI,尤其是特定部位和一定数量的LI,与MPS、VP症状密切相关.

    作者:何小明;吴靖;常丽英;张允建 刊期: 2015年第02期

  • COX-2在VEGF-C介导的人宫颈癌细胞生物学行为中的作用研究

    目的 检测血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和环氧合酶-2(COX-2)在人宫颈癌细胞系中表达,探讨二者之间的关系及COX-2在VEGF-C介导的人宫颈癌细胞生物学行为中的作用.方法 用Western blot方法检测VEGF-C和COX-2在HeLa、Siha、C33a和Caski等4株宫颈癌细胞中的表达;用特定浓度的COX-2特异性抑制剂NS398处理HeLa细胞,评估其对HeLa细胞的增殖、转移产生的影响.结果 VEGF-C和COX-2蛋白在4株宫颈癌细胞中均有表达,且在不同细胞株中二者表达强弱一致.用NS398处理HeLa细胞后,其VEGF-C蛋白表达明显降低,且细胞凋亡率增加.NS398可诱导HeLa细胞增殖活性降低(P<0.05),且呈剂量依赖模式.Transwell实验结果显示NS398处理组细胞侵袭力为(25.45±3.67)%,较对照组(40.38±0.72)%明显减弱(P<0.05).结论 VEGF-C和COX-2均在人宫颈癌细胞中表达,且COX-2与VEGF-C表达之间有一定的相关性.COX-2可能是宫颈癌细胞中VEGF-C表达的一个调节者,其抑制剂NS398对于VEGF-C介导的肿瘤生长和转移有一定抑制作用.

    作者:石小燕;毛晓露;彭彩霞;谭露;张亚东 刊期: 2015年第02期

  • IL-35在免疫相关疾病中的研究进展

    白细胞介素-35(IL-35)是白细胞介素-12(IL-12)家族的新成员,由Collison等[1]在2007年先发现并确认.IL-12家族共有4个成员,分别为:IL-12、IL-23、IL-27、IL-35.这4种细胞因子均为异质二聚体,每1个异质二聚体细胞因子均由1个折叠螺旋束样细胞因子(four helix bundle cytokines)亚单位(IL-12 p35、IL-23 p19、IL-27 p28、IL-35 p35)和1个可溶型细胞因子受体样亚单位(p40和EBl3)组成(图1)[2].

    作者:王志会 刊期: 2015年第02期

  • Ki-67阴性结直肠癌细胞的增殖和自我更新能力的研究

    目的 观察结直肠癌中Ki-67阴性(Ki-67-/low)细胞在肿瘤增殖及自我更新(self-renew)中的作用,探讨将Ki-67-/low作为分离肿瘤干细胞标记物的应用.方法 通过将人结直肠癌标本消化成为单细胞,感染Ki-67启动子驱动GFP表达(pKi-67-GFP)的慢病毒后,注射至NOD/SCID小鼠背部建立pKi-67-GFP结直肠癌移植瘤模型;用流式细胞仪从移植瘤内分离出GFP+ EpCAM+细胞(Ki-67+癌上皮细胞)和GFP-/low EpCAM+细胞(Ki-67-/low癌上皮细胞),并采用免疫印迹验证Ki-67的表达;用流式细胞仪检测Ki-67-/low的细胞周期;采用PKH26标记细胞后,根据滞留细胞分析其在体内的增殖能力;采用荧光定量PCR(qPCR)研究Ki-67细胞中CD133、CD44和Lgr5等肿瘤干细胞相关基因的表达水平,并用成球实验研究Ki-67-/low结直肠癌细胞的自我更新能力.结果 从新鲜人结直肠癌移植瘤中分离出GFP+ EpCAM+细胞和GFP-/lowEpCAM+细胞,Western blot检测显示GFP+ EpCAM+细胞高表达Ki-67,GFP-/lowEpCAM+细胞不表达Ki-67;细胞周期检测显示,(82.25±3.16)%的Ki-67-/low细胞在G0/G1期,(51.67±4.11)%的Ki-67+细胞在G0/G1期,体内PKH26标记滞留实验显示Ki-67-/low和Ki-67+细胞分别含(81.53±5.85)%和(4.57±1.05)% PKH26阳性细胞,差异有统计学意义(P<0.01),提示Ki-67-/1ow细胞主要是G0/G1期细胞,在体内处于慢增殖状态;荧光定量PCR证明Ki-67-/low细胞CD133、CD44和Lgr5的mRNA水平为Ki-67+细胞的(3.47±0.79)、(6.18±1.65)和(4.67±1.15)倍,差异有统计学意义(P<0.05),体外成球实验,Ki-67-/low及Ki-67+细胞的成球数量分别为(83.00±9.54)和(8.00±2.66) (P<0.01),提示Ki-67-/low细胞高表达CD133、CD44和Lgr5等肿瘤干细胞相关标记物,并具有显著的自我更新能力,富集肿瘤干细胞.结论 Ki-67阴性的结直肠癌细胞具有慢增殖的特点,较Ki-67阳性结直肠癌细胞具有更强的成球能力,在结直肠癌的自我更新中起重要作用,并有可能作为肿瘤干细胞的标记物.

    作者:颜畅;胡艺冰;穆磊;黄开禹;覃吉超 刊期: 2015年第02期

  • 多色流式细胞术对正常人外周血中TCRVα24+NKT细胞与传统T细胞间的相关性研究

    目的 探讨正常人外周血中TCRVα24+ NKT细胞与传统CD3+T细胞在含量和亚群上的关系.方法 采用五色荧光染色和流式细胞术检测TCRVα24+ NKT细胞与传统CD3+T细胞在30例正常人外周血中所占比例,两群细胞中各亚群(CD4亚群、CD8亚群、双阴性亚群及CD45RA初始细胞亚群)在各自细胞群体中所占比例,统计软件分析两群细胞间各指标的差异及相关性.结果 NKT细胞在正常人外周血中所占比例为0.35% (0.10%~1.50%),CD3+T细胞比例为58.4%(43.2%~72.5%);在Va24+ NKT细胞中CD4亚群所占比例为69.1%(21.3%~90.9%)、CD8亚群为15.0%(4.5%~76.2%)、双阴性亚群为9.5%(0.7%~69.4%)、CD45RA初始细胞亚群为32.4%(6.8%~54.0%),在CD3+T细胞中CD4亚群所占比例为54.7%(27.0%~74.7%)、CD8亚群为33.7%(19.9%~48.2%)、双阴性亚群为10.2%(1.9%~24.4%)、CD45RA初始细胞亚群为39.8%(10.3%~63.0%).两群细胞间除CD4亚群和CD45RA亚群具有显著相关性(r=0.435 5,P<0.05;r=0.829 5,P<0.01),其余各指标均无相关性.CD4+ NKT细胞含量与总NKT细胞含量呈显著负相关,而CD8+ NKT与总NKT细胞呈显著正相关(r=一0.680 2,P<0.01;r=0.401 7,P<0.05).结论 正常人外周血中TCRVα24+ NKT细胞与传统T细胞间除在CD4亚群和CD45RA初始细胞亚群间有显著相关外,其余各亚群相关较少.

    作者:姚春艳;姜丽娜;汪洪涛;金齐力;李柏青 刊期: 2015年第02期

  • 辐射诱发基因组不稳定性肝细胞Ran基因过表达和RNAi模型的构建

    目的 构建基因组不稳定细胞Ran基因过表达和RNAi模型,为进一步研究该基因在辐射诱发基因组不稳定的功能提供研究工具.方法 根据Ran基因信息,以慢病毒载体GV218设计合成2种重组质粒,分别包含Ran基因全长序列以及阴性对照序列;以慢病毒载体GV248设计合成2重组质粒,分别包含Ran基因的小干扰序列以及用于干扰对照的阴性序列.利用Western blot和qPCR进行过表达和RNAi重组质粒表达的检测;通过转染293T细胞进行慢病毒的包装;利用qPCR和荧光法分别进行滴度的检测;再用包装好的慢病毒感染辐射诱导基因组不稳定性HL-7702肝细胞,利用qPCR检测Ran基因表达量.结果 测序结果表明重组质粒构建成功,并能够有效转染293T.过表达病毒滴度为2.0×108 TU/mL;RNAi病毒滴度为3.0×108 TU/mL.过表达慢病毒能有效地上调Ran基因的表达,过表达效率为85%.RNAi干扰慢病毒能够有效抑制Ran基因的表达,抑制效率为73%.结论 成功构建基因组不稳定肝细胞Ran基因过表达和RNAi模型,为进一步研究Ran基因在辐射诱发基因组不稳定细胞中的功能提供了有效的研究工具.

    作者:原雅艺;党旭红;刘红艳;刘建功;左雅慧 刊期: 2015年第02期

  • 热激对人精液参数、附睾及附属性腺功能的影响

    目的 研究热激对人精液参数、附睾及附属性腺功能的影响.方法 采用自身前后对照的方法,对10名受试者于温浴开始前分别取2次精液(2次间隔在2~4周),用其参数平均值作为对照.后连续温浴10 d,从温浴第1天开始计,每间隔2周取1次精液,即分别于第2、4、6、8、10、12、14、16周共取精8次,测定精液常规(精子浓度、活力、存活率),生化法测定精浆中中性α-葡萄糖苷酶的活性、果糖及锌的含量.结果 精液常规分析:精子浓度、活力、存活率都从第2周开始下降,且精子浓度于第4、6、8、10周显著低于温浴前(均P<0.05),第8周时浓度低,随后逐渐恢复,至第14周时恢复至正常水平;精子活力于第4、6周显著低于温浴前(均P<0.05);精子存活率于第4、6、8周显著低于温浴前(均P<0.05),精子活力、存活率都于第6周时低,随后逐渐恢复,至第10周恢复至正常水平.各检测时间段精浆中性α-葡萄糖苷酶的活性、果糖及锌的含量与温浴前差异无统计学意义(均P>0.05),但都呈现出上升的趋势.结论 热激可逆性影响精液质量,对人附睾及附属性腺功能可能没有显著影响,但是精浆中性α-葡萄糖苷酶活性、果糖及锌的含量在温浴之后的恢复期大体都呈现出上升趋势,后续需要进一步研究证实.

    作者:赵小玲;饶猛;夏伟;杨静;胡世福;朱长虹 刊期: 2015年第02期

华中科技大学学报(医学版)杂志

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