田胜兰；谭伟；冯丹；吕扬；徐清榜；张小铭
目的：观察经皮椎间孔镜下髓核摘除术治疗腰椎间盘突出症的临床应用及总结临床经验。方法2013年9月～2014年7月应用经皮椎间孔镜TESSYS技术治疗腰椎间盘突出症患者58例，应用疼痛视觉模拟评分（VAS评分）、Oswestry功能障碍指数（Oswestry disability index ，ODI）和改良MacNab标准评价临床疗效。结果患者术后随访3个月，术后各时间点腰腿痛VAS评分、ODI较术前均明显降低（均 P＜0.01）；改良MacNab标准评价疗效优良率为89.66％（52／58）。结论经皮椎间孔镜髓核摘除术治疗腰椎椎间盘突出症创伤小，并发症少，术后恢复快，近期疗效可靠。
作者：田胜兰；谭伟；冯丹；吕扬；徐清榜；张小铭 刊期： 2015年第04期
目的：研究自制的可注射骨修复材料植入兔股骨缺损区后的骨组织反应特点。方法选用25只新西兰大白兔，在其双侧股骨内髁制作标准骨缺损区模型，分别注射不饱和聚磷酸酯／β‐磷酸三钙复合物（UPPE／β‐TCP）和添加1％四环素的UPPE／β‐TCP复合物（UPPE／β‐TCP／TTC），按2、4、8、12、24周的植入期分为5组，对骨组织样本进行组织病理学和形态学观察，并比较各期植入体的吸收率。结果在各植入期内，UPPE／β‐TCP和UPPE／β‐TCP／TTC两种复合物的骨组织反应基本一致。植入2周时，所有材料和周围骨组织均未发生明显的吸收或改建，植入体未引起周围骨组织的炎性反应和坏死；4周时植入体与骨缺损区结合良好，无纤维结缔组织囊形成，在材料发生吸收而改建的区域，可见成骨细胞、新生血管和活跃的新骨形成；8周时大部分植入体仍存在于骨缺损区内，部分植入体成为“独岛”被完全整合进入新生的骨组织中；12周时骨组织有广泛的重建；24周时植入体主体部分消失，骨组织内的生长和改建更加活跃，新生骨和骨髓样组织中可见大量材料碎片，并可见成骨样细胞。2种复合物植入骨缺损区后的吸收率均随植入时间的延长而逐渐增加，在8周以前其吸收率相似（P＞0.05），而12周时UPPE／β‐TCP／TTC复合物组的吸收率高于UPPE／β‐TCP复合物（P＜0.05），24周时2种复合物的吸收率均在60％以上。结论可注射骨修复材料UPPE／β‐TCP复合物在动物体内具有良好的骨组织生物相容性、生物可降解性和体内骨引导性，可作为修复骨缺损的新型复合材料。
作者：张智星；冯祥礼；毛靖；肖建中；邱进俊；刘承美 刊期： 2015年第04期
目的：比较上方入路法与经典中间入路法在腹腔镜根治性右半结肠癌切除术中的优缺点。方法将武汉中心医院在2013年1月至2014年1月期间收治的56例结肠癌患者随机分成上方入路组与经典中间入路组，分别比较两组在一般资料、手术时间、术中失血量、中转开腹率、淋巴结清扫个数、术后并发症、肛门排气时间、住院时间等方面的差别。结果上方入路组在手术时间上显著短于经典中间入路组[（128. 24±21. 14）minvs. （166. 45±30. 23）min，P＜0. 01]、中转开腹率显著低于经典中间入路组（0％vs. 7. 14％，P＝0. 035）、术中失血量显著少于经典中间入路组[（45. 67±10. 66）mLvs. （78. 45±40. 28）mL，P＜0. 01]，在一般资料、淋巴结清扫个数、术后并发症、肛门排气时间、住院时间上相比差异均无统计学意义（均P＞0. 05）。结论腹腔镜根治性右半结肠癌切除术采用上方入路法具有视“开阔、层次清晰、安全有效、失血量少的优点，值得在临床推广。
作者：韩亮；刘磊；王辉 刊期： 2015年第04期
目的：通过研究匹罗卡品致癫痫大鼠海马组织中P2X2受体（嘌呤受体）的表达变化，探讨其在颞叶癫痫发病中的作用机制。方法应用氯化锂‐匹罗卡品腹腔注射建立大鼠颞叶癫痫模型，并予以 P2X2受体拮抗剂亮蓝G （Bril‐liant Blue G ，BBG）腹腔注射，应用Western blot及Real‐time PCR技术检测大鼠海马组织P2X2受体的表达，免疫组化技术检测各组大鼠海马组织中谷氨酸（glutamate ，GLU ）表达水平。结果 Western blot及Real‐time PCR结果显示：慢性自发性癫痫发作组中P2X2表达明显增高（P＜0.05），BBG干预组表达减低 P＜0.05）。免疫组化检测显示：GLU 在BBG干预组较慢性自发性发作组中释放减少（ P＜0.05 ），且与BBG剂量呈负相关性。结论 P2X2受体通路可能参与颞叶癫痫的发病过程，并有望成为新一代治疗颞叶癫痫的药物靶点。
作者：刘艳；宋鹏辉；李钢琴；黄昭昭；关秀军；胡敬；邓学军 刊期： 2015年第04期
目的：研究胆管癌患者外周血中CD14＋CD11b＋ HLA‐DR－髓源性抑制细胞（MDSC）的表达及其与临床分期和术后病理检测的关系，并对其形成机制和功能进行初步研究。方法采用流式细胞术检测了25例胆管癌、10例胰腺癌、9例胆囊癌患者和25例同龄的健康对照者外周血中CD14＋CD11b＋ HLA‐DR－髓源性抑制细胞的比例并进行统计学分析。结果健康成人对照组外周血中CD14＋CD11b＋ HLA‐DR－MDSC的比例为（0.65±0.25）％，胆管癌组患者比例显著增高为（2.14±1.38）％，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。同时，在胰腺癌组和胆囊癌组患者中MDSC的表达水平亦升高。MDSC的表达水平与胆管癌的临床分期相关，其中Ⅳ期胆管癌患者的MDSC水平高。胆管癌患者术后的MDSC水平较术前显著降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。但是，MDSC的表达水平与胆管癌患者术后的病理分期无关。两种胆管癌细胞系（QBC939、TFK‐1）体外均能诱导PBMC向MDSC的转化，且随着肿瘤负荷的增加而增加。和健康对照组比，胆管癌患者外周血中发挥抑制功能的精氨酸酶活性增加，两组比较差异有统计学意义（ P＜0.05）。结论胆管癌患者外周血中CD14＋CD11b＋ HLA‐DR－MDSC的比例显著升高，且与肿瘤的临床分期呈正相关，可作为胆管癌患者早期诊断的重要标记物。
作者：徐晓东；王敏；田锐；李旭；郭兴军；彭丰；胡均；秦仁义 刊期： 2015年第04期
目的：探讨宫颈鳞状细胞癌（CSCC）组织中 Twist、E‐cadherin和KAI1蛋白的表达及其临床意义。方法通过免疫组织化学ElivisionTM plus方法检测130例CSCC组织、40例宫颈高级别上皮内瘤变（CIN）和40例正常宫颈组织中Twist、E‐cadherin和KAI1蛋白的表达。结果在正常宫颈组织中 Twist、E‐cadherin和KAI1蛋白的阳性表达率分别为5.0％、95.0％和97.5％；在 CIN 组中 Twist、E‐cadherin 和 KAI1蛋白的阳性表达率分别为42.5％、62.5％和65.0％；在CSCC组织中，Twist、E‐cadherin和KAI1蛋白的阳性表达率分别为69.2％、40.8％和43.1％。Twist、E‐cad‐herin和KAI1蛋白的表达水平在不同两组之间，差异均有统计学意义（均 P＜0.05）。Twist蛋白表达水平在CSCC组织中不同分化程度、淋巴结转移与否及浸润深度之间差异均有统计学意义（均 P＜0.05）；E‐cadherin和K A I1蛋白的表达水平在CSCC组织中的不同分化程度、淋巴结转移与否、浸润深度及FIGO分期之间差异均有统计学意义（均 P＜0.05）。Twist蛋白的表达与E‐cadherin和KAI1蛋白的表达呈负相关关系（均 P＜0.01）；E‐cadherin蛋白的表达与KAI1蛋白的表达呈正相关关系（P＜0.01）。生存分析表明 Twist蛋白阳性表达组患者的生存时间明显短于阴性组患者；E‐cad‐herin和KAI1蛋白阳性表达组患者的生存时间明显长于阴性组患者。多因素分析发现E‐cadherin和KAI1蛋白的阳性表达是影响CSCC患者预后的独立因素。结论 Twist、E‐cadherin和KAI1蛋白的异常表达可能参与了CSCC的发生、发展及转移过程；在CSCC组织中检测Twist、E‐cadherin和KAI1表达情况可能对CSCC的预后判断有价值。
作者：郭苏阳；李胜泽；郭伟；承泽农 刊期： 2015年第04期
目的：通过M eta分析的方法对国内应用尘螨变应原免疫治疗变应性鼻炎的临床疗效及安全性进行评价。方法计算机检索维普中文科技期刊全文数据库（1989～2015年）、中国万方数据库（1999～2015年）、中国知网数据库（1994～2015年）、学术期刊网络出版总库中关于尘螨变应原免疫治疗变应性鼻炎的临床随机对照试验（RC T ），对符合要求的RC T进行M eta分析。结果终纳入16篇RC T ，共有2018例患者符合纳入标准。M eta分析结果显示，与对照组相比，尘螨变应原免疫治疗组临床疗效显著提高[总效应Z＝6.67，OR ＝2.92，95％ CI（2.13，4.00），P＜0.01]，临床症状显著改善[总效应 Z＝4.66，SMD＝－1.82，95％ CI（－2.58，－1.05），P＜0.01]及不良反应无增加[总效应 Z＝1.99，OR＝0.62，95％ CI（0.39，0.99），P＝0.05]。结论尘螨变应原免疫治疗可明显改善变应性鼻炎的临床症状，其临床疗效确切，且其不增加不良反应的发生，安全性可靠。
作者：吴婷婷；孙开宇；张岑；彭涛；黄铄 刊期： 2015年第04期
目的：观察利多卡因对自发性及催产素诱发人子宫平滑肌收缩的影响并探讨其相关机制。方法子宫平滑肌取自择期行剖宫产术患者子宫。使用体外肌肉等长张力测定试验测定不同浓度利多卡因（10－5，5×10－5，10－4，5×10－4 mol／L ）对自发性及催产素诱发人子宫平滑肌收缩的影响。使用钙离子荧光指示剂Fluo‐3孵育子宫平滑肌以检测细胞内钙离子浓度。使用Western blot法检测子宫平滑肌催产素受体及磷酸化PKC表达水平。结果与对照组比较，10－4及5×10－4 mol／L利多卡因可导致自发性收缩和催产素处理的子宫平滑肌收缩幅度和收缩频率减少（均 P＜0.05）。同时，10－4及5×10－4 mol／L利多卡因可导致自发性收缩和催产素处理的子宫平滑肌细胞内钙离子浓度减少（均 P＜0.05）。Western blot检测结果显示，10－4及5×10－4 mol／L利多卡因可导致自发性收缩和催产素处理的子宫平滑肌细胞内磷酸化PKC表达水平降低（均 P＜0.05）。结论利多卡因可通过降低细胞内钙离子浓度导致自发性及催产素诱发人子宫平滑肌收缩功能减弱。
作者：黄晓雷；李元涛；李泳；齐晓非；亚杰；吴铭广 刊期： 2015年第04期
目的：建立稳定的家兔颈静脉导管相关血栓模型，并探讨低分子肝素与地塞米松对其形成的影响。方法将60只日本大耳白兔分为对照组、低分子肝素组、地塞米松组和合用组。将中心静脉导管（CVC ）插入右侧颈静脉制造导管相关血栓动物模型。术后分别给予低分子肝素钠／地塞米松。术后第7天观察颈静脉导管相关血栓形成情况及血浆内D‐D二聚体水平。结果成功建立简便有效的日本大耳白兔导管相关血栓模型。低分子肝素组及合用组实验兔导管相关血栓形成较对照组显著降低，D‐D二聚体水平明显下降（ P＜0.01）。结论应用低分子肝素能有效预防导管相关血栓。糖皮质激素抗炎治疗可能对预防导管相关血栓形成有一定作用。
作者：艾熙；陈劲；冯丽娟；官艳；范亚维；阳军；张志伟 刊期： 2015年第04期
目的：研究免疫佐剂CpG ODN对小鼠脾细胞中 Treg细胞、Th17细胞分化的影响，为进一步的临床免疫治疗应用奠定基础。方法体外分离小鼠脾细胞后，加入抗CD3单抗及抗CD28单抗培养，并相应加入诱导 T reg细胞分化的细胞因子TGF‐β、IL‐2或诱导Th17细胞分化的细胞因子TGF‐β、IL‐6、IL‐23，培养24 h后加入CpG1982、CpG1826继续培养48 h ，培养结束后收集细胞进行细胞内染色流式细胞术检测Treg／Th17细胞，利用实时定量PCR检测Foxp3、RORγt、IL‐10、IL‐17 mRNA的水平，Western blot检测Foxp3、RORγt蛋白表达，ELISA检测脾细胞培养上清IL‐10、IL‐17水平。结果在细胞因子TGF‐β、IL‐2的诱导下，CD4＋ Foxp3＋ Treg 细胞数量明显增多，核转录因子 Foxp3 mRNA和蛋白水平均增高，且细胞培养上清中IL‐10的水平也升高，在细胞因子诱导的同时加入CpG1826培养后CD4＋ Foxp3＋Treg细胞数量明显减少，Foxp3水平降低，培养上清中IL‐10的水平降低，差异具有统计学意义（均 P＜0.05）；单独加入CpG1826以及在培养液中加入细胞因子TGF‐β、IL‐6、IL‐23后，Th17细胞数量均明显增加，核转录因子RORγt水平升高，细胞培养上清中IL‐17水平增加，与对照组相比差异均有统计学意义（均 P＜0.05），CpG1826联合细胞因子组则对Th17细胞分化具有更加明显的刺激效应（P＜0.05）。结论免疫佐剂CpG1826具有抑制小鼠脾细胞中 Treg细胞分化、促进T h17细胞分化的作用，从而发挥对T reg／T h17系统的调节功能。
作者：李洁琼；纪玉强；杨威；姚英民；刘青光；郭成 刊期： 2015年第04期
目的：观察自发性脑出血患者保守治疗与微创锥颅血肿引流术治疗后磁共振波谱的变化，从影像学上探讨微创锥颅血肿引流术在脑出血治疗中的应用价值。方法37例自发性脑出血患者，20例接受微创锥颅血肿引流术，17例采用内科保守治疗，所有患者均进行血肿量和水肿量的计算，比较7 d血肿／水肿清除率，所有患者均于发病后10～14 d行常规磁共振（MRI）及磁共振波谱成像（MRS）检查。结果微创锥颅血肿引流术组的7 d血肿清除率为87.5％，治疗前后水肿体积改变不明显，对照组7 d血肿清除率为37.0％，水肿量明显高于治疗前。对M RS结果进行分析，锥颅微创组血肿侧区域NAA／Cr为（1.269±0.458），与对照组NAA／Cr值（0.958±0.356）比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论微创锥颅血肿引流术血肿清除率高，可明显减轻脑水肿发生。M RS数据客观地评价了疾病转归与预后，证实微创锥颅血肿引流术可明显减轻脑出血后患者继发性脑损伤的发生。
作者：姚国杰；陈琼；濮捷；李成才；韦可；肖炳祥；龚杰；徐国政 刊期： 2015年第04期
目的：探讨Ad‐PT EN‐EGFP对裸鼠肺癌种植瘤的体内杀伤作用及机制。方法构建裸鼠肺癌种植瘤模型，将Ad‐PT EN‐EGFP注射裸鼠体内，观察肿瘤体积变化，进行肿瘤组织的常规病理检查、原位凋亡染色及免疫组化染色，检查治疗后各组裸鼠肿瘤组织中有关基因的表达情况。结果与对照组相比，治疗组肿瘤组织生长速度明显减慢，肿瘤组织体积较对照组明显缩小（P＜0.05），且随腺病毒治疗剂量的升高而更为明显；原位凋亡染色法检测肿瘤组织，发现治疗组凋亡细胞明显增多（P＜0.05），且随腺病毒治疗剂量的升高而更为明显（P＜0.05）。此外还发现，治疗后肿瘤组织或血清中的Survivin、NF‐κB和PI3K表达水平明显下降（均 P＜0.05），呈负相关性，且随腺病毒治疗剂量的升高而更为明显（P＜0.05）。结论 Ad‐PTEN‐EGFP能明显抑制肿瘤组织的生长，其作用机制与促进肿瘤细胞凋亡，调节相关基因表达水平有一定联系。
作者：陈志雄；黄琼；陶琳；马红梅 刊期： 2015年第04期
目的：探讨肝脏血管平滑肌脂肪瘤（HAML）的临床病理学特点、诊断及鉴别诊断。方法对15例肝脏血管平滑肌脂肪瘤的临床及病理学资料进行回顾性临床病理分析。结果15例HAML中女性13例，男性2例，男女比例1∶6. 5，年龄19～59岁（平均42. 2岁，中位年龄45岁）。6例患者有间断性腹部胀痛、恶心、反酸等不同的临床症状；1例合并慢性乙型病毒性肝炎，9例无明显症状。影像学检查均表现为肝脏内孤立性占位，其中6例考虑为血管瘤，6例为错构瘤，3例为肝癌。15例均行肿块切除术，12例行术中冰冻切片诊断，与石蜡切片诊断符合率97. 5％。肿瘤位于肝右叶11例（其中1例合并肾AML并肝脏复发，2例合并肝海绵状血管瘤，1例合并胃低分化腺癌），左叶2例，肝左右叶多发2例（其中1例合并肾AML，1例首发于右叶，2年后左叶发生并合并肝海绵状血管瘤）。肿瘤组织内可见不同比例的平滑肌、脂肪组织和血管成分，并可见多灶性髓外造血，瘤周肝组织无肝硬化改变。15例中经典型1例，血管瘤样型1例，脂肪瘤样型3例，平滑肌瘤样型10例（上皮样细胞型9例、梭形细胞型1例），其中上皮样平滑肌细胞可表现为多种形态：透明细胞型4例，嗜酸细胞型4例，多形细胞型1例。均有核异型性（15／15）：中度13例，重度2例；细胞密度：低密度3例，中密度7例，高密度5例。恶性HAML3例，其肿瘤组织与周围肝组织部分分界不清，呈浸润性生长。免疫组化标记HMB45、Melan‐A和SMA阳性，S‐100阴性。结论肝脏血管平滑肌脂肪瘤诊断困难，确诊主要依靠病理组织学改变及免疫组化染色；患者预后大多良好，术后需长期随访。
作者：阿迪拉·斯依提；岳娜；陈海霞；陈定宝 刊期： 2015年第04期
目的：研究7.5％氯化钠／6％右旋糖苷‐70（HSD）的复方高渗盐溶液对脓毒症大鼠血浆免疫因子水平及生存率的影响，以及对脓毒症并发急性肺损伤（ALI）的治疗作用。方法雄性Wistar大鼠133只，分为假手术组、盲肠结扎穿孔术（CLP）组、CLP＋生理盐水（NS）组、CLP＋ HSD组等4组。采用CLP方法制备脓毒症大鼠模型，假手术组除不结扎和穿刺盲肠外，其余手术步骤相同。4组大鼠术毕均皮下注射NS ，30 mL／kg ；CLP＋NS组、CLP＋ HSD组分别于术后3 h自颈静脉内输注NS（或HSD），5 mL／kg[0.4 mL／（kg · min）]。各组于手术后0、9、18 h采集动脉血标本用于检测血浆肿瘤坏死因子α（T N F‐α）、白细胞介素1β（IL‐1β），并进行血气分析。各组术后9、18 h统计大鼠生存率。术后18 h检测大鼠肺组织支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞比例、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、计算肺组织湿干重比值，并观察肺组织病理切片改变。结果与CLP组及CLP＋NS组相比，CLP＋ HSD组术后9、18 h血浆TNF‐α、IL‐1β水平明显降低（均 P＜0.05）。术后18 h CLP＋ HSD组大鼠动脉血pH值、PaO2、PaCO2比CLP组及CLP＋NS组大鼠有所改善。CLP＋ HSD组大鼠9、18 h生存率分别为85.7％、64.3％，比CLP组及CLP＋ NS组有明显改善（均 P＜0.05）。CLP＋ HSD组BALF中性粒细胞比例、肺组织MPO活性及肺湿干重比均比CLP组及CLP＋NS组有明显降低（均 P＜0.05）。CLP组及CLP＋ NS组肺组织表现为淤血、水肿，浸润性炎性改变，CLP＋ HSD组肺组织炎性改变比CLP组及CLP＋NS组有明显改善。结论复方高渗盐溶液对脓毒症大鼠的急性肺损伤有治疗作用，并提高了脓毒症大鼠生存率。
作者：董芳；徐亮；王华兵；徐玲文；揭凤英 刊期： 2015年第04期
目的：探讨巨噬细胞与老年钙化性主动脉瓣狭窄（calcific aortic valve stenosis ，CAVS）程度的关系。方法收集2012年9月至2014年3月在海南省人民医院心脏外科因CAVS行手术切除的严重钙化主动脉瓣标本80例[男40例，女40例，年龄（58±6）岁]，另外取因夹层动脉瘤行手术切除正常主动脉瓣标本7例[男4例，女3例，年龄（41±8）岁]，选择80例健康成人作为对照组，收集患者的临床基本资料，苏木精‐伊红（HE）染色观察CAVS瓣膜病理组织学改变；免疫组织化学（IHC）染色观察巨噬细胞的表达特点；IPP（Image‐Pro Plus）软件测量巨噬细胞密度，Pearson相关分析探索巨噬细胞密度与瓣膜狭窄程度的相关性。结果与对照组比较，CAVS患者血清胆固醇和C反应蛋白水平升高，差异有统计学意义，HE染色可见CAVS瓣膜损伤部位有炎性细胞浸润、新生毛细血管和钙化灶形成。IHC染色观察，巨噬细胞标志CD68在正常主动脉瓣膜无阳性表达，而在CAVS瓣膜中呈阳性表达，分布在钙化灶以及骨样组织周围；相关分析表明巨噬细胞大密度值与瓣口压力阶差峰值（ r＝0.75，P＜0.05）、平均压力阶差（ r＝0.75，P＜0.05）、主动脉瓣口流速峰值（r＝0.72，P＜0.05）呈正相关，而与瓣口面积呈负相关（r＝－0.71，P＜0.05）。结论与对照组比较，CAVS患者血清胆固醇和C反应蛋白浓度升高；与正常瓣膜比较，CAVS瓣膜中巨噬细胞浸润，巨噬细胞密度与钙化性主动脉狭窄程度呈正相关。
作者：刘聪；谢霆 刊期： 2015年第04期
目的：从噬菌体重组抗体库中筛选获得靶向血管细胞黏附分子‐1（Vcam‐1）的单链抗体，纯化浓缩后进行亲和性鉴定，并与单克隆抗体效价进行比较。方法扩增Vcam‐1基因克隆质粒并转入真核细胞中表达获得Vcam‐1抗原蛋白，纯化后包被免疫管，通过4轮压力逐渐增大的“吸附‐洗脱‐扩增”过程筛选获得阳性克隆。对阳性克隆进行ELISA检测，选取效价高的克隆送予测序并转入大肠埃希菌进行表达，认定高表达的样品为终的阳性克隆。将该阳性克隆转染入感受态细胞表达单链抗体，纯化后经ELISA检测并评价其抗原亲和性。结果真核细胞表达的Vcam‐1抗原蛋白的分子量为85～90 kD。以Vcam‐1抗原蛋白为免疫原筛选4轮所得的阳性克隆进行单噬菌体ELISA检测，从检测结果中选取9个效价高的克隆经基因测序共获得3个序列，其中1个序列对应的克隆高表达。表达的单链抗体分子量约30 kD ，ELISA检测其对Vcam‐1抗原蛋白有较高亲和性，效价较单克隆抗体低。结论利用噬菌体展示技术获得了靶向Vcam‐1的单链抗体，为随后的诊断和治疗应用奠定了基础。
作者：刘纯宝；宋夷龄；张永学 刊期： 2015年第04期
横纹肌肉瘤是来源于将要分化为横纹肌的未成熟的间叶细胞，并由不同分化程度的横纹肌细胞组成的恶性肿瘤。这种细胞分布在全身，所以任何部位都可能发病，既可发生在横纹肌所在的部位，也可发生在无横纹肌的部位。发病率在软组织肉瘤中居第3位，男性多于女性，小儿多于成年人［1］。
作者：张秋艳；张艳容 刊期： 2015年第04期
目的：构建高效表达结核分枝杆菌抗原肝素结合血凝素（HBHA）的重组耻垢分枝杆菌。方法针对结核分枝杆菌H37Rv株 HBHA的编码基因Rv0475设计特异引物，利用 PCR技术从细菌基因组中获取目的基因，并克隆入pET‐30b（＋）载体构建重组原核表达质粒pETHBHA ，经IPTG诱导pETHBHA 转化的重组 E.coli BL21（DE3）细菌， Ni柱纯化携带C‐端 His标签的HBHA蛋白，并制备鼠源多克隆抗体。PCR扩增含自身启动子和调节序列的Rv0475基因并克隆入大肠埃希菌‐分枝杆菌穿梭载体pMV261，构建重组分枝杆菌表达质粒pMVHBHA ，并经酶切鉴定证实后，电转化入耻垢分枝杆菌，涂布含卡那霉素的7H11平板，挑选抗性克隆并扩大培养，15％ SDS‐PAGE和Western blot鉴定重组耻垢分枝杆菌的表达。结果分别成功构建重组原核表达质粒 pETHBHA 和重组分枝杆菌表达质粒pMVHB‐HA ；重组蛋白 HBHA在大肠埃希菌中成功表达并纯化后，BCA蛋白浓度测定试剂盒测定浓度为1.9125μg／μL ，用其制备鼠源多抗；证实HBHA利用其自身的启动子和调节序列在重组耻垢分枝杆菌中表达。结论成功构建过表达HB‐HA的重组耻垢分枝杆菌，为研究该蛋白参与结核病的致病机制和研发新型疫苗和诊断试剂奠定了基础。
作者：余菲；寻阳；田茂鹏；李华秀；朱可橙；袁野；滕新栋；范雄林 刊期： 2015年第04期
目的：研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义。方法收集武汉大学人民医院病理科2006～2009年有完整临床和病理资料的膀胱尿路上皮癌存档蜡块50例和5例癌旁组织，采用免疫组织化学SP法检测50例膀胱尿路上皮癌和5例癌旁组织中 PPARγ的表达水平。采用 HPIAS‐1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统，对PPARγ的表达进行定量分析，并用SPSS 13.0软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均吸光度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK（q）检验。结果1）PPARγ的表达在膀胱尿路上皮癌中呈高表达，癌旁组织中呈低表达。膀胱尿路上皮癌与癌旁组织相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；2）膀胱尿路上皮癌组织中PPARγ的表达与临床病理特征间的关系：①PPARγ蛋白在原发肿瘤直径≥3 cm组阳性率是72.4％，显著高于直径＜3 cm组33.3％，差异有统计学意义（P＜0.05）。②PPARγ蛋白在有淋巴结转移组阳性率72.7％，显著高于无淋巴结转移组阳性率46.4％，差异有统计学意义（P＜0.05）。③PPARγ蛋白在临床分期T3～4期组阳性率75.0％，显著高于 T1、T2期组41.9％、45.5％，差异有统计学意义（均 P＜0.05）。④PPARγ蛋白在低分化组阳性率为68.2％，显著高于高、中分化组（42.9％），差异有统计学意义（P＜0.05）。结论①PPARγ在膀胱尿路上皮癌的发病和进展中起着重要的调节作用；②PPARγ蛋白表达水平与膀胱尿路上皮癌肿瘤分化程度及病理类型、原发肿瘤直径、淋巴结转移、临床分期均相关，提示PPARγ在膀胱尿路上皮癌的增殖、转移中发挥重要作用。
作者：陕光；钱辉军；夏樾 刊期： 2015年第04期
目的：观察骨关节炎（OA）大鼠软骨自噬基因（Atg5、Atg7、Atg12）以及自噬相关蛋白mTOR、Beclin‐1、PI3K、Akt、LC3‐Ⅱ的表达，并分析其与IL‐4、IL‐10、IL‐1β、TNF‐α的相关性。方法20只大鼠随机分为正常组和模型组，每组各10只。模型组大鼠采用关节腔注射木瓜蛋白酶（Papain）和 L‐半胱氨酸（L‐cystine）方法制成骨关节炎大鼠模型。以光镜对大鼠软骨进行Mankin标准评分，以电镜观察OA大鼠软骨中自噬小体的形态及数目；采用荧光定量PCR检测软骨Atg5、Atg7、Atg12的表达，采用免疫印迹法（Western blot）检测软骨mTOR、Beclin‐1、PI3K、Akt、LC3‐Ⅱ的表达，采用ELISA法检测血清细胞因子IL‐4、IL‐10、IL‐1β、TNF‐α水平。结果与正常组大鼠比较，OA大鼠关节软骨Mankin评分明显升高（P＜0.01）；Atg5在软骨中降低（P＜0.01），并与IL‐4、IL‐10呈正相关（均 P＜0.01），与IL‐1β、TNF‐α呈负相关（P＜0.05或 P＜0.01）；Atg7在软骨中降低（P＜0.01）；mTOR在软骨中升高（P＜0.05），PI3K、Akt在软骨中均升高（均 P＜0.01），并与IL‐4、IL‐10呈负相关（ P＜0.05或 P＜0.01），与IL‐1β、T N F‐α呈正相关（ P＜0.05或 P＜0.01）；LC3‐Ⅱ、Beclin‐1在软骨中降低，与IL‐4、IL‐10呈正相关（ P＜0.05或 P＜0.01），与IL‐1β、T N F‐α呈负相关（ P＜0.05或P＜0.01）。结论 OA大鼠软骨在Mankin评分升高的同时，出现Atg5及Atg7表达的降低，PI3K／Akt‐mTOR通路上调，Beclin‐1下调，自噬受抑制，此过程可能参与OA软骨病变。
作者：阮丽萍；刘健；葛瑶；万磊；王亚黎；叶文芳 刊期： 2015年第04期
华中科技大学学报（医学版）杂志
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