学术投稿

湖北产耳叶牛皮消药材的质量评价研究

雷永芳;汪建平;蔡亚玲;阮金兰

关键词:耳叶牛皮消, 白首乌二苯酮, 质量标准
摘要:目的 通过对湖北产耳叶牛皮消的品质评价,初步建立该药材的质量标准.方法 采用高效液相色谱法定量分析白首乌二苯酮(耳叶牛皮消的特征化学成分之一).结果 白首乌二苯酮含量不低于0.58%.结论 实验结果为建立湖北产耳叶牛皮消药材的质量标准提供了依据.
华中科技大学学报(医学版)杂志相关文献
  • 一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶与二硫化碳所致视网膜功能损害的相关性

    目的 探讨一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与二硫化碳(CS2)所致视网膜功能损害的关系.方法 将48只SD雄性大鼠随机分为对照组,低剂量CSz染毒组和高剂量CSz染毒组.染毒结束后观察大鼠视网膜电图(ERG)b波振幅的变化}分光光度法测定NO含量;免疫组织化学法检测诱导型iNOS的表达.结果 染毒组ERG的b波振幅均下降,视网膜iNOS表达增加,与对照组相比差异均有统计学意义,高剂量染毒组与低剂量染毒组之间差异亦有统计学意义.染毒组NO、iNOS分别与ERG的b波振幅呈负相关.结论 NO及iNOS与CS2所致视网膜功能损害有关.

    作者:王军明;张虹;李贵刚 刊期: 2009年第04期

  • 四逆汤对多器官功能障碍综合征大鼠炎症介质和氧化应激的影响

    目的 建立大鼠多器官功能障碍综合征(MODS)模型,观察四逆汤(SND)对MODS大鼠炎症介质和氧化应激的影响.探讨SND对MODS器官损伤的保护作用.方法 通过可逆性失血性休克以及静脉注射脂多糖两次打击以建立大鼠MODS模型,将大鼠随机分为空白对照组、MODS模型组和SND治疗组.采用常规病理检查,快速抽取主动脉血作血气分析和心、肝、肾功能有关酶学指标的检测,测定血清SOD、NO含量,以及ELISA法测定血清TNF-α和IL-6的含量.结果 病理检查显示模型组大鼠造模1 d后各重要脏器都有全身炎症反应综合征表现,3 d后更明显,而SND治疗组病变明显减轻;心、肝、肾功能生化指标在模型组明显升高(P<0.01),而治疗组较模型组有显著改善(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比较,模型组大鼠血清SOD水平显著下降而NO水平显著升高,而治疗组除灌胃1 d后血清NO水平仍显著高于空白对照组(P<0.05)外,血清SOD和NO水平与对照组相比无显著差异;模型组和治疗组大鼠血清TNF-α和IL-6含量与空白对照组比较显著升高(P<0.05或P<0.01),且治疗组大鼠治疗3 d后血清TNF-α含量显著低于相应时间的模型组(P<0.05),治疗组大鼠治疗1 d后血清IL-6含量亦显著低于模型组(P<0.05).结论 四逆汤能有效防治MODS的发生和发展,其机制可能与其下调过度的炎症反应、提高机体的抗氧化能力以及减轻自由基损伤有关.

    作者:刘筱蔼;曾萍;吴伟康;胡景鑫;曾其毅;杨镒宇;刘奕生 刊期: 2009年第04期

  • 肌母细胞MSTN基因沉默后的细胞形态学观察

    目的 观察肌母细胞MSTN基因沉默后的细胞形态及超微结构,探讨沉默MSTN基因治疗肌肉萎缩的可行性.方法 构建可沉默MSTN基因的小干扰RNA表达载体,通过转染导入肌母细胞并进行培养,计数培养肌母细胞.并观察肌母细胞的形态及超微结构.结果 肌母细胞MSTN基因沉默后细胞数增加,增殖能力增强,细胞形态无明显改变,透射和扫描电镜观察显示MSTN基因沉默后肌母细胞表面出现大量微绒毛.结论 MSTN基因沉默后肌母细胞的增殖能力增强,细胞形态正常,因此沉默MSTN基因可能成为治疗肌肉萎缩的一种新途径.

    作者:彭运生;孙顺昌;贺敬波 刊期: 2009年第04期

  • 博莱霉素致肺纤维化大鼠模型的纤溶变化及低分子肝素的作用

    目的 探讨博莱霉素诱导大鼠肺纤维化过程中纤溶变化与肺纤维化的关系,观察低分子肝素的作用并探讨其机制.方法 75只Wistar大鼠分为低分子肝素(LMWH)组、强的松组、低分子肝素和强的松联合用药组、模型组、对照组.应用气管内灌注博莱霉素A5制备大鼠肺纤维化模型,于第15天开始每天给药(低分子肝索或强的松或联合给药),第28、42、56天取肺组织行苏木精-伊红和Masson染色以观察其病理变化,免疫组织化学方法测定纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的表达,加钙法测定优球蛋白溶解时间(ELT).结果 模型组PAI-1表达明显升高、ELT延长(均P<0.05),肺纤维化严重,但PAI-1表达与时间无相关性;LMWH组PAI-1表达持续降低,较强的松组显著.ELT明显缩短(均P<0.05),肺纤维化程度减轻;联合用药组肺纤维化程度减轻、PAI-1表达降低、ELT明显缩短(均P<0.05).结论 大鼠肺纤维化出现PAI-1高表达、ELT延长,纤溶活性下降.而LMWH能减轻大鼠肺纤维化,与强的松联合应用效果更明显,可能与抑制PAI-1表达、缩短ELT,提高纤溶活性有关.

    作者:艾进颖;王红阳;付爱双;刘信荣;喻昌利 刊期: 2009年第04期

  • 肋间神经转位脊髓桥接恢复大鼠脊髓损伤的功能

    目的 研究肋间神经转位脊髓桥接恢复大鼠脊髓损伤的功能.方法 50只大鼠分成3组,桥接组(脊髓半切加肋间神经转位桥接脊髓)、单纯脊髓半切组和正常组.于术后第4周和第8周进行BBB运动功能评分,体感诱发电位(SEP)和运动诱发电位(MEP)检测,然后分别部分处死动物,行组织学及免疫组织化学检查,检测轴突再生和瘢痕的情况.结果 术后4周和8周的BBB评分结果显示,桥接组的得分明显高于单纯半切组的得分,差异有统计学意义(P<0.05);诱发电位检测术后4周和8周SEP检测结果桥接组和单纯半切组比较差异无统计学意义,而MEP检测结果2组比较差异有统计学意义(P<0.05);术后8周组织学检查结果显示桥接组有部分轴突长入脊髓和瘢痕增生.结论 肋问神经转位脊髓桥接能促进脊髓损伤大鼠功能的部分恢复.

    作者:黄自锋;杨述华;郭小东;唐硕;刘凯 刊期: 2009年第04期

  • 生活方式与绝经后骨质疏松症发病风险的关系

    目的 探讨生活方式(包括体力活动、饮食习惯等)与绝经后骨质疏松症(PMOP)发病风险的关系.方法 根据纳入和排除标准,经双能X线吸收法(DXEA)测定腰椎骨密度并确诊后,对220名绝经后妇女进行危险因素的回顾性调查.基于单因素分析结果并结合专业依据确定了27个因素进行非条件Logistic逐步回归分析,以OR值与95%CI反映与疾病危险性的关联程度.结果 对照组在经常喝豆浆、日照时间、参加体育锻炼,肉蛋类膳食为主方面的情况明显多于病例组(均P<0.05).锻炼方式中,步行、力量练习、太极拳、健身舞蹈、爬楼梯这几种运动方式在两组之间差异有统计学意义(均P<0.05).经混杂因素校正后,总体力活动和交通行程性体力活动水平得到活跃、跳健身舞蹈、青少年时期爱好体育运动、经常喝豆浆、肉蛋类膳食为主对PMOP发病风险的影响仍然存在,是PMOP的保护因素.结论 生活方式与PMOP发病风险有关.总体力活动和交通行程性体力活动水平活跃、跳健身舞蹈、经常喝豆浆、肉蛋类膳食为主、青少年时期爱好体育运动均可降低PMOP发病风险.

    作者:邓士琳;李爱民 刊期: 2009年第04期

  • 帕金森病脑铁沉积的定量研究

    目的 探讨定量研究脑铁沉积的磁共振检查方法;研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)的发病和进展与脑铁沉积的关系.方法 PD患者30名作为研究组,男22名,女8名,平均年龄57.7岁(38~74岁),按Hoehn-Yahr分级量表将双侧症状患者20名作为PD组1,单侧症状PD患者10名作为PD组2.选取年龄和性别匹配的健康志愿者30名作为对照组.所有对象均进行常规MR头部平扫和SWI检查,经后处理在相位校正图上分别测量双侧黑质、红核、苍白球、壳核、尾状核和丘脑的相位校正值(CP),并将所获得数据进行统计分析.结果 CP值与铁含量呈负线性相关(r=-2.81,P<0.05).PD组1、PD组2与对照组在以下核团(黑质、红核、苍白球和壳核)的CP值差异有统计学意义(P<0.05),但是在丘脑和尾状核差异无统计学意义.PD组1和PD组2各兴趣区CP值之间差异无统计学意义.PD组2的症状同侧和对侧之间CP值无明显差异.结论 ①CP值与脑铁含量呈负线性相关联;②局部铁含量的增加与PD的发病有关,但与病情的严重程度无关;③在PD的亚临床期就有铁异常沉积;④PD铁异常沉积的部位包括黑质、红核、苍白球和壳核,与丘脑和尾状核无关.

    作者:舒红格;漆剑频;朱文珍;王承缘;胡军武;冯定义 刊期: 2009年第04期

  • 实验性矽肺大鼠发病过程中肺组织FIZZ1蛋白和mRNA表达的动态变化

    目的 观察大鼠矽肺形成过程中肺组织FIZZ1的动态变化及其与矽肺形成的关系.方法 SD大鼠36只,随机分为2组,气管内注入二氧化硅混悬液复制实验性大鼠矽肺模型,采用苏木精-伊红染色、羟脯氨酸含量测定、免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR等方法,观察实验性大鼠矽肺的发病过程及其肺组织中FIZZ1蛋白、mRNA表达水平的动态变化.结果 FIZZ1蛋白在正常肺组织为弱表达,实验性矽肺大鼠第7天时表达明显增强,30 d时较7 d时有所减弱,60 d时明显减弱,但仍强于对照组.FIZZ1 mRNA表达也显示出同样的结果.结论 FIZZ1蛋白和mRNA在实验性大鼠矽肺发病过程中呈现明显的动态变化,矽肺早期表达显著,在矽肺发生发展中可能起重要作用.

    作者:何家富;辛建保;彭清 刊期: 2009年第04期

  • 蛇莓乙醇提取物的体外抗炎机制研究

    目的 研究蛇莓乙醇提取物在体外的抗炎作用,初步探讨其抗炎机制.方法 通过脂多糖(LPS)干预RAW264.7巨噬细胞系建立炎症细胞模型,ELISA法检测上清液中TNF-α、NO的分泌量,实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、iNOS、血红素氧合酶1(HO-1)的基因表达,Western blot法测定HO-1的蛋白表达量,免疫细胞化学法检验核因子-κB(NF-κB)的表达及分布变化.结果 蛇莓提取物干预后细胞所分泌的炎症介质(TNF-α和NO)与炎症模型组相比均显著降低(均P<0.01),并存在剂量依赖关系;实时荧光定量RT-PCR结果显示蛇莓提取物干预后细胞TNF-α、iN-OS的mRNA表达水平显著降低,HO-1的mRNA表达水平明显升高,差异均有统计学意义,也存在剂量依赖关系;Western blot结果显示药物干预后HO-1的蛋白表达水平明显升高(P<0.01);免疫细胞化学法结果显示仅有LPS干预时,NF-κB表达增强且集中分布在细胞核,而药物干预时,NF-κB多分布在胞质.结论 蛇莓提取物通过抑制NF-κB的激活,下调巨噬细胞表达炎症介质,同时促进HO-1的释放而发挥一定的抗炎作用.

    作者:庞然;张淑玲;赵雷;刘双林;董继华;叶翩 刊期: 2009年第04期

  • 磷脂酰肌醇-3-激酶调节亚基N末端24个氨基酸对肝癌细胞增殖的抑制

    目的 观察磷脂酰肌醇-3-激酶(P13K)的调节亚单位--p55PIKN端24个氨基酸抑制肝癌细胞增殖的作用.方法 以含有p55PIK-N端24个氨基酸(N24)的腺病毒载体Ad-N24一GFP及对照病毒Ad-GFP,感染肝癌HepG2细胞,流式细胞仪检测细胞周期进程,应用BrdU掺人的方法检测其对细胞DNA合成的影响,Western blot分析细胞内高表达N24多肽后相关蛋白的表达水平.结果 N24能有效阻滞HepG2细胞周期进程于G0/G1期,S期和G2/M期细胞减少,Ad-N24-GFP组各期细胞分布为:G0/G1期(56.3±3.0)%,S期(30.1±2.9)%,G2/M期(13.6±4.1)%.而对照组腺病毒各期细胞分布为:G0/G1期(40.6±2.1)%,S期(42.7±3.3)%,G2/M期(16.7±2.8)%;BrdU阳性细胞比例显示:Ad-N24一GFP组R2为(31.8±5.2)%,Ad-GFP组R2为(48.5±3.7)%,提示N24能有效抑制HepG2细胞的DNA合成;Western blot检测显示高表达N24对细胞内的AKT磷酸化水平没有显著影响.结论 在HepG2细胞中过表达N24能有效阻滞肝癌细胞周期进程,抑制细胞DNA合成.p55PIK为肿瘤的基因治疗提供了一个新的分子靶点.

    作者:孙黎;袁响林;王桂华;罗学来;李小兰;胡俊波 刊期: 2009年第04期

  • 丹参酮对高盐诱导心肌肥厚的作用

    目的 研究高盐饮食对大鼠心脏局部肾素血管紧张素醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS)和心脏结构的影响,以及丹参酮干预后相关指标的改变.探讨丹参酮抗心室重构可能的机制.方法 将实验大鼠分成正常对照组、高盐组和丹参酮组,分别测量各组动物收缩压(SBP)、左心室重量指数(left ventricular weight index,LVWI)、心脏醛固酮含量以及心肌组织中醛固酮合成相关基因CYP11B2和血管紧张素1型受体(angiotensin type 1 re-ceptor,AT1R)的mRNA表达水平.结果 各组间SBP差异无显著性意义,但是高盐组大鼠的LVWI和心脏局部醛固酮都明显高于正常对照组(均P<0.05),丹参酮干预后使两项指标显著下降(均P(0.05).高盐组大鼠血浆中的肾素和醛固酮浓度反而较正常对照组降低(均P<0.05).高盐组大鼠心肌中CYP11B2以及AT1R的表达都较正常对照组明显升高(均P<0.05),丹参酮则抑制了肥厚心肌中的CYP11B2 mRNA和AT1R mRNA的高表达.结论 丹参酮可以通过抑制心脏局部的醛固酮合成和AT1R表达,达到抗高盐所致心肌肥厚的效果.

    作者:王照华;梁黔生;郑智 刊期: 2009年第04期

  • 联合应用粒细胞集落刺激因子和干细胞因子促进骨髓单个核细胞增殖和动员的实验研究

    目的 探讨联合应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和干细胞因子(SCF)对小鼠骨髓单个核细胞(BM-MNCs)增殖和动员的影响.方法 将昆明种小鼠随机分为4组(n=10):①G-CSF组,皮下注射重组鼠粒细胞集落刺激因子(rmG-CSF)100 μg/(kg·d),连续使用5 d;②SCF组,皮下注射重组鼠干细胞因子(rmSCF)25 μg/(kg·d),连续使用5d;③G-CSF/SCF组,皮下注射rmCrCSF 100μg/(kg·d)和rmSCF 25 μg/(kg·d),连续使用5 d;④空白对照组,皮下注射等剂量的生理盐水.于后一次注射后6 h取小鼠骨髓,分离培养MNCs,在倒置相差显微镜下观察MNCs的生长情况,用苏木精-伊红常规染色和细胞荧光免疫化学法染色观察MNCs形态.计数成纤维样细胞集落形成单位(CFU-F)的个数;应用流式细胞仪检测MNCs细胞周期及表面抗原特征.结果 G-CSF/SCF组和G-CSF组,CFU-F形成能力显著增强(均P<0.05);并且G-CSF/SCF组的CFU-F计数大于G-CSF组(P<0.05).而SCF组CFU-F计数并没有显著地增加(P0.05).MNCs培养形成的CFU-F,其细胞表面抗原呈CD13+、CD29+、CD90+、CD105+,而不表达CD44.G-CSF/SCF组的MNCs,其G0/G1期细胞百分率较对照组低(P<0.05),而细胞增殖指数(PI)增高(P<0.05),SCF组对MNCs细胞周期的作用与对照组相比差异没有统计学意义(P0.05).结论 G-CSF/SCF可有效地诱导BM-MNCs增殖和动员,且其作用强于单独应用G-CSF.而单独应用小剂量SCF对促进BM-MNCs增殖和动员的作用不明显.

    作者:蒋松;杨操;杨述华;吴星火 刊期: 2009年第04期

  • 南宁市机动车驾驶员酒后驾驶现状调查

    目的 通过对机动车驾驶员呼气乙醇含量(BAC)的检测,调查和了解南宁市机动车驾驶员违法酒后驾驶的现状、特点及规律,为干预、控制和减少酒后驾驶行为提供科学依据.方法 根据机动车流量,市民出行特点选定的调查点,由执勤交警负责随机拦截机动车,用呼出乙醇检测仪对机动车驾驶员BAC进行测定,并进行相应的问卷调查.结果 对随机调查的7100位驾驶员中的4251位进行了BAC检测.涉酒驾驶(BAC0 mg%)的占6.58%,违法酒后驾驶(BAC≥20 mg%)的占4.49%;晚间19:00~24:00时间段内涉酒驾驶占该时间段调查人数的10.30%,违法酒后驾驶的占7.30%.结论 南宁市机动车驾驶员酒后驾驶的现状不容乐观,特别是晚间酒后违法驾驶的比例较高,需加强执法力度,加强宣传教育,以减少酒后驾驶的违法行为和降低由其导致的道路交通事故.

    作者:杜岩;黎美清;肖煌;苏红帆;苏旭 刊期: 2009年第04期

  • 脑出血后人颅内血肿中HO-1、UCB和Fe的含量及其与迟发性脑水肿的关系

    目的 研究高血压脑出血后人颅内血肿中的血红素加氧酶-1(HO-1)和血红蛋白代谢产物--非结合胆红素(UCB)和铁(Fe)的含量变化,及其与脑出血后迟发性脑水肿的相关性,初步探讨脑出血后迟发性脑水肿形成的病理生理机制.方法 用酶联免疫吸附试验(ELISA)、钒酸盐氧化法和化学酶法试剂检测高血压脑出血患者颅内血肿微创术后第1、3、6天颅内血肿引流物中的HO-1、UCB和Fe的含量,并应用多田公式计算术后第3天和第6天血肿周围脑水肿的体积,分析它们之间的相关性.结果 颅内血肿中的HO-1、UCB和Fe的含量在脑出血后第3天明显增高,并达到高峰,第6天有所下降,与第1天比较差异均有显著性意义(均P<0.01).而第6天HO-1、UCB和Fe的含量与第6天血肿周围脑水肿的体积均呈正相关(r分别为0.453、0.525、0.691,均P<0.05).结论 HO-1和血红蛋白代谢产物UCB及Fe在脑出血后迟发性脑水肿的形成中起着重要作用.

    作者:李莉;李波;张书琼;李正莉 刊期: 2009年第04期

  • 城市流动人口生殖健康服务质量评价指标的权重确定方法

    目的 确立科学的流动人口生殖健康服务质量评价体系指标权重,为提高评估结果信度和效度提供技术支持.方法 采用层次分析法、熵值法、优组合赋权法分别对流动人口生殖健康服务质量评价体系的47个3级指标进行赋权.结果 构建了47个3级指标的主客观集成权重值.结论 采用层次分析法和熵值法所获得的权重值具有较大的差异性和互补性,为了使综合评价的结果更科学,该研究利用优组合赋权法建立数学模型对城市流动人口生殖健康服务质量进行综合评价,使得评价结果既能体现主观信息又能体现客观信息.

    作者:李孜;彭佳林;刘智勇;段建华;郭艳平;高峰;黄锦辉;高平 刊期: 2009年第04期

  • 丁酸钠对胃癌细胞株SGC-7901体外生长分化的影响

    目的 研究丁酸钠对人胃癌细胞系生长抑制及诱导分化的抗肿瘤作用.方法 以不同浓度的丁酸钠作用体外培养的人胃癌细胞株SGC-7901,应用MTT法检测对细胞生长的抑制情况;应用分光光度法检测分化标志酶活力;应用流式细胞技术检测细胞周期分布.结果 丁酸钠可以使SGC-7901细胞发生形态学改变;可抑制细胞生长,2.5mmol/L和5.0 mmol/L两种浓度丁酸钠在24、48、72 h对细胞生长的抑制率分别为27.72%、39.25%、85.02%和39.05%、60.76%、93.63%,具有时间剂量依赖性(P<0.01);可使细胞分化标志酶乳酸脱氢酶(LDH)和碱性磷酸酶(ALP)活力降低;可使G0/G1期细胞大量增多,S期、G2/M期细胞相应减少,出现G0/G1期停滞.结论 丁酸钠可诱导SGC-7901细胞分化并抑制其恶性生长.

    作者:杨平湖;黄文广 刊期: 2009年第04期

  • 彩色多普勒感兴趣区定量技术评价糖尿病患者肾脏末梢血流

    目的 应用彩色多普勒感兴趣区定量技术评价糖尿病患者早期肾脏末梢血流灌注,探讨其临床意义.方法 以正常对照组(30例)、单纯糖尿病组(DM组,20例)及糖尿病合并高血压组(DM+EH组,16例)为研究对象,检测叶间及小叶间动脉收缩期峰值流速(PSV)、舒张期末流速(EDV)和阻力指数(RI),应用彩色多普勒感兴趣区定量技术对右肾包膜下皮质区血流进行分析,获得血管指数(Ⅵ)、血流指数(FI)和血管血流指数(VFI),3组间进行比较.结果 DM组小叶间动脉、DM+EH组叶间动脉及小叶间动脉EDV均低于对照组,RI均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);DM组及DM+EH组Ⅵ、VFI均低于对照组,两者的达峰时间大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);DM组及DM+EH组FI与对照组比较差异无显著性意义(均P0.05),而其达峰时间较对照组延长(P<0.05或P<0.01).结论 糖尿病患者在出现实验室检查肾功能异常之前,已出现肾脏末梢血管床减少,血流灌注量减低及血流灌注时间延长.彩色多普勒感兴趣区定量技术能够准确评价糖尿病早期肾脏末梢血流灌注.

    作者:项飞翔;刘莹莹;吕清;严天慰;谢明星;张艳容;陈玉媛;李薇玢;王新房 刊期: 2009年第04期

  • 胸锁乳突肌肌电图在炎性肌病中的诊断价值

    目的 探讨胸锁乳突肌肌电图检测在炎性肌病诊断中的价值.方法 对97例炎性肌病患者进行常规肢体近端肌肉肌电图检测.部分患者合并检测胸锁乳突肌以及胸段脊旁肌.比较肢体近端肌肉与胸锁乳突肌之间肌电图检测结果的差异.结果 肢体近端肌肉肌电图总阳性率为64.9%,增加胸锁乳突肌检测后阳性率增加至84.5%(P<0.01).胸锁乳突肌的时限以及多相波改变程度明显高于肢体近端肌肉(P<0.01),波幅减低的程度与肢体近端肌肉无明显差异(P0.05).胸段脊旁肌自发电位阳性率61.5%,增加胸段脊旁肌检测后将白发电位的总阳性率由48.5%提高为62.9%(P<0.05).结论 有必要增加胸锁乳突肌电生理检测以提高炎性肌病电生理诊断阳性率,而脊旁肌白发电位的检测可以作为一个有效的补允.

    作者:李志军;胡晓晴;唐娜 刊期: 2009年第04期

  • Livin shRNA表达载体的构建及其稳定转染宫颈癌siha细胞系的建立

    目的 构建Livin shRNA真核表达载体,获得干扰质粒稳定转染的宫颈癌siha细胞系.方法 合成Livin基因干扰序列并定向插入到RNA干扰(RNAi)真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定.干扰质粒经脂质体Lipofectamine 2000介导转染siha细胞.经G418持续压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系.RT-PCR检测所筛选克隆Livin mRNA的转录水平.结果 测序证明Livin干扰序列及读码框完全止确,干扰质粒稳定转染的siha细胞在倒置荧光显微镜下呈明亮绿色荧光.RT-PCR结果显示Livin shRNA序列对Livin mRNA有较好的抑制效果.结论 成功构建了Livin shRNA真核表达载体,Livin shRNA质粒稳定转染的siha细胞系的建芷为进一步研究Livin在官颈癌细胞中的作用奠定了基础.

    作者:于利利;王泽华 刊期: 2009年第04期

  • Ag43/FGFR1嵌合蛋白疫苗诱导小鼠产生特异性抗体的研究

    目的 了解Antigen43/成纤维细胞生长因子1型受体(Ag43/FGFR1)重组嵌合蛋白作为疫苗能否诱导小鼠产生抗自身FGFR1抗体.方法 利用重组的Ag43/FGFR1嵌合蛋白作为疫苗免疫BALB/c小鼠,分别用Westernblot、酶联免疫吸附实验(ELISA)和酶联免疫斑点实验(ELISPOT)方法检测小鼠血清中产生的抗体及其亚型和脾脏中分泌抗FGFR1抗体的特异B淋巴细胞情况.结果 Western blot和ELISA检测发现,Ag43/FGFR1蛋白免疫组可以有效诱导产生抗自身FGFR1抗体,而小鼠FGFR1自身蛋白对照组、Ag43蛋白对照组、生理盐水对照组均未发现抗自身FGFR1抗体.ELISPOT检测发现,与各对照组相比,Ag43/FGFR1蛋白免疫组分泌抗自身FGFR1抗体的B淋巴细胞数目明显增多(均P<0.01).ELISA检测发现主要抗体亚型IgG1和IgG2b明显升高.结论 Ag43/FGFR1重组嵌合蛋白质疫苗免疫小鼠能够诱导产生抗小鼠FGFR1的自身抗体,可以考虑应用于抗肿瘤血管生成研究.

    作者:陈少兴;郑少萍;郭峻莉;王才春;黄风迎;郑少江 刊期: 2009年第04期

华中科技大学学报(医学版)杂志

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主管:中华人民共和国教育部

主办:华中科技大学