学术投稿

体外培养bFGF,PDGF,TGF-β对兔MSC的ALP活性和增殖的影响

刘丹平;宋耀滨;关振家;胡蕴玉

关键词:碱性成纤维细胞生长因子, 血小板原性生长因子, 转化生长因子β, 新西兰白兔, 骨髓基质细胞, 碱性磷酸酶活性, 增殖
摘要:目的在正常生理与病理状态下成纤维细胞生长因子(FGF)、血小板源性生长因子(PDGF),转化生长因子β(TGF-β)三种生长因子调节骨的生长发育,影响骨折的愈合过程,本研究探索在体外培养条件下该三种因子对新西兰白兔骨髓基质细胞增殖与分化的影响,为下一步观察这些因子与其它因子联合应用提供基础研究资料.方法抽取新西兰白兔股骨上穿刺点骨髓进行体外原代培养,分离骨髓基质细胞(Marrow stromalcells,MSC),于第12d行传代培养,以2×103个细胞/孔,定量接种于96孔板中,同时按照不同剂量加入上述三种因子,分别在培养第10d时用酶动力法检测碱性磷酸酶活性,在培养第5d细胞近于汇合时用MTT法检测细胞的增殖情况.结果①随着bFGF剂量增加,MSC ALP活性呈下降趋势,当bFGF浓度超过100ng/ml后OD值波动在0.020~0.005之间,仅是对照组的1/3弱(P<0.01),表明MSC ALP活性受到了明显的抑制.MTT结果显示,OD值随着bFGF的剂量增加而明显上升,高值(浓度为600ng/ml时)比对照组高出近一倍,表明bFGF明显促进MSC增殖,有剂量依赖性(dose-dependent)但当浓度高于800ng/ml时,OD值不高于对照组,甚至低于对照组,表明较高浓度的bFGF抑制MSC增殖;②与对照组比较随PDGF应用剂量增加,各组MSCALP活性值及增殖略有上升,但无显著性差异,表明PDGF对MSCALP活性及其增殖影响不大;③TGF-β对MSC ALP活性和其增殖均有一定的促进作用,但在提高MSC ALP活性方面,它不及srhBMP2m(另行发表);在促进MSC增殖方面,它又没有bFGF的作用强.结论由于三种因子对MSC成骨活性的双向性作用,我们不主张单独使用它们刺激MSC,使之成为骨组织工程的工程细胞.
锦州医科大学学报杂志相关文献
  • 体外培养bFGF,PDGF,TGF-β对兔MSC的ALP活性和增殖的影响

    目的在正常生理与病理状态下成纤维细胞生长因子(FGF)、血小板源性生长因子(PDGF),转化生长因子β(TGF-β)三种生长因子调节骨的生长发育,影响骨折的愈合过程,本研究探索在体外培养条件下该三种因子对新西兰白兔骨髓基质细胞增殖与分化的影响,为下一步观察这些因子与其它因子联合应用提供基础研究资料.方法抽取新西兰白兔股骨上穿刺点骨髓进行体外原代培养,分离骨髓基质细胞(Marrow stromalcells,MSC),于第12d行传代培养,以2×103个细胞/孔,定量接种于96孔板中,同时按照不同剂量加入上述三种因子,分别在培养第10d时用酶动力法检测碱性磷酸酶活性,在培养第5d细胞近于汇合时用MTT法检测细胞的增殖情况.结果①随着bFGF剂量增加,MSC ALP活性呈下降趋势,当bFGF浓度超过100ng/ml后OD值波动在0.020~0.005之间,仅是对照组的1/3弱(P<0.01),表明MSC ALP活性受到了明显的抑制.MTT结果显示,OD值随着bFGF的剂量增加而明显上升,高值(浓度为600ng/ml时)比对照组高出近一倍,表明bFGF明显促进MSC增殖,有剂量依赖性(dose-dependent)但当浓度高于800ng/ml时,OD值不高于对照组,甚至低于对照组,表明较高浓度的bFGF抑制MSC增殖;②与对照组比较随PDGF应用剂量增加,各组MSCALP活性值及增殖略有上升,但无显著性差异,表明PDGF对MSCALP活性及其增殖影响不大;③TGF-β对MSC ALP活性和其增殖均有一定的促进作用,但在提高MSC ALP活性方面,它不及srhBMP2m(另行发表);在促进MSC增殖方面,它又没有bFGF的作用强.结论由于三种因子对MSC成骨活性的双向性作用,我们不主张单独使用它们刺激MSC,使之成为骨组织工程的工程细胞.

    作者:刘丹平;宋耀滨;关振家;胡蕴玉 刊期: 2003年第01期

  • 丹参注射液拮抗庆大霉素耳蜗毒性的实验研究

    目的探讨丹参注射液对庆大霉素(GM)耳蜗毒性的防护作用.方法选择白色豚鼠40只,随机分成4组(n=10):正常对照组、GM组、GM+丹参组和丹参组.GM组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg/kg/d,丹参组腹腔注射丹参注射液6g/kg/d,GM+丹参组同时注射硫酸庆大霉素和丹参注射液,正常对照组注射等量生理盐水.连续用药10d后观察耳蜗的功能与形态.结果GM+丹参组豚鼠听功能受损明显轻于GM组,听脑干反应ABR阈值两组比较有显著性差异(P<0.01),且形态学改变与听阈变化相一致.结论丹参注射液可有效拮抗GM对豚鼠的耳蜗毒性,这种拮抗作用可能是通过对耳蜗血管纹边缘细胞和毛细胞内线体的保护来实现的.

    作者:王爱梅;汤浩;姜恩魁;高东明;焦金菊;周丰 刊期: 2003年第01期

  • 大肠埃希氏菌超广谱β-内酰胺酶监测及耐药性分析

    2000年12月~2001年10月期间对128例感染大肠埃希氏菌超广谱β-内酰胺酶进行了监测,报告如下.

    作者:张成吉;牛科;徐波 刊期: 2003年第01期

  • 电凝疗法治疗下肢静脉曲张70例体会

    我院自2000年6月~2002年8月,采用电凝术治疗下肢静脉曲张70例,效果显著,现报告如下.

    作者:刘凤山;白景阳 刊期: 2003年第01期

  • 不同途径注射链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型的研究

    目的探讨不同给药途径致大鼠糖尿病成模状况的差异.方法本实验通过不同的途径给药(腹腔非空腹给药、腹腔空腹给药、尾静脉给药)以建立大鼠糖尿病模型.给药后48h检测血糖、尿糖,同时观察糖尿病大鼠的胰腺变化.结果尾静脉给药成模率高.胰腺形态学检查病程3、6月胰岛萎缩,β细胞减少.结论尾静脉给药是注射链脲佐菌素致大鼠糖尿病模型的佳途径.

    作者:黄波;刘学政;庞东渤 刊期: 2003年第01期

  • 以正交设计法检测甲硝唑葡萄糖注射液的生产工艺

    在甲硝唑葡萄糖注射液[1]配制过程中,发现甲硝唑原料中的杂质对灯检率影响较大.由于杂质的溶解度接近甲硝唑的溶解度,所以活性炭对杂质的影响较弱,而且活性炭的量偏大,会对pH值有影响,因此,在此实验中没有将其考虑进去.

    作者:孙海光 刊期: 2003年第01期

  • 山莨菪碱保护钙超载损伤心肌细胞的图象分析研究

    目的采用噻唑蓝(MTT)染色法在图像分析系统下观察KCL致心肌细胞钙超载损伤情况及山莨菪碱对其的保护作用.方法用新生2~3d SD大鼠的乳鼠进行心肌细胞原代培养,待贴壁并稳定搏动后,进行分组给药.KCL致钙超载损模型组(KCL 200mM,2%聚乙二醇-400),Anisodamine预保护组(Anisodamine0.3mM,0.6mM,0.8mM),继续培养48h.用MTT法染色后在CASI-1000图象分析仪下测定单位视野内(n=25)存活心肌细胞数量和细胞染色的灰度值.结果用图象分析仪进行形态学观察发现,山莨菪碱保护的KCL致钙超载损伤心肌细胞存活数及存活细胞形成Formazan的灰度值较损伤模型组明显降低.结论山莨菪碱对KCL致钙超载损伤的心肌细胞有保护作用,能够降低线粒体酶系统的损伤程度.

    作者:王天楠;张玉洁;刘义 刊期: 2003年第01期

  • 高效液相色谱法测定氨苄西林片剂的含量

    氨苄西林为β-内酰胺类抗生素,临床上主要用于治疗流感杆菌,痢疾杆菌,大肠杆菌,伤寒杆菌,变形杆菌等引起的泌尿系统、呼吸系统、胆道等的感染.

    作者:卢静华;崔升佐;李红梅 刊期: 2003年第01期

  • 透射电镜视网膜标本的制备方法

    视网膜很薄,其透射电镜样品的制备与一般的组织有些差异.从取材到切片每一环节都必须更加认真、仔细.总结近两年的工作经验,归纳出下列实验方法.

    作者:刘玉玲;李艳琴 刊期: 2003年第01期

  • 心肌肥厚信号转导的研究进展

    心肌肥厚指心肌细胞增大而无细胞分裂.从分子水平上,心肌肥厚分三个环节:胞外肥大刺激信号、胞内信号转导及核内基因转录活化,终诱发细胞发生肥大表型变化[1].

    作者:王桂君;王洪新 刊期: 2003年第01期

  • 盆腔瘀血综合征误诊13例临床分析

    葫芦岛市中心医院自1999年3月~2000年9月,收治慢性腹痛病人82例,其中盆腔瘀血综合征15例,误诊13例,误诊率为(86.7%)现报道如下.

    作者:刘昕 刊期: 2003年第01期

  • 锦州市大中专院校卫生院(所)消毒情况调查与分析

    学校卫生院(所)注射室与处置室的消毒效果直接影响师生们的身体健康.为加强对学校卫生院(所)的卫生监督,我们于1998~1999年对锦州市16所大中专院校卫生院(所)注射室与处置室消毒情况进行了调查.

    作者:徐枫 刊期: 2003年第01期

  • 乳酸镁对心肌再灌注损伤时血小板聚集的影响

    目的观察乳酸镁对心肌缺血-再灌注损伤过程中血小板聚集的影响,探讨乳酸镁心肌保护作用的机理.方法利用整体大鼠急性心肌缺血再灌注模型,结扎冠脉左室支40min后,再灌注40min,取血测定血小板聚集率,计算聚集抑制率.结果再灌注前给乳酸镁对缺血再灌注时的血小板聚集有抑制作用,110mg/kg组较150mg/kg组抑制血小板聚集作用更明显.结论乳酸镁对心肌再灌注损伤的保护作用与其防止血小板聚集有关.

    作者:任婕;齐志敏;王化洲;高东明 刊期: 2003年第01期

  • 胰腺损伤12例诊断与治疗体会

    胰腺是腹膜后器官,其受前面的腹腔脏器以及后面的脊柱周围肌肉的保护,故较少受到损伤.本文将1999~2000年我院收治胰腺损伤12例报告如下.

    作者:张海明 刊期: 2003年第01期

  • 脉冲Nd:YAG激光切除增生牙龈的初步观察

    目的观察Nd:YAG激光切除正畸增生牙龈伤口愈合情况.方法选择我科固定正畸患者牙龈增生严重者32人,其中随机选择18位局麻下Nd:YAG激光术除增生牙龈,术后不做特殊处理.其余作为对照.结果脉冲Nd:YAG激光切龈术后第2d,伤口覆盖有表浅灰黄色假膜,术后第7d伤口表面有部分坏死组织残留,牙龈未全愈合,14d后,新生牙龈完全覆盖,牙龈形态良好.与手术切龈在疗效上无显著性差异.结论Nd:YAG激光术中良好的止血效果,术野干净清楚,切割精确,不需要缝合,术后不需要特别护理等优点,对于小范围的牙龈切除或牙龈成形很有意义.

    作者:刘筱琳;李芳 刊期: 2003年第01期

  • 肝癌及肾结石术中超声诊断的应用价值

    目的探讨术中超声在肝癌及肾结石手术治疗中的应用价值.方法对13例肝癌及21例肾结石患者的术中超声与术前超声检查的诊断结果进行对比分析.结果13例肝癌共有病灶27个,术中超声对直径<2cm的病灶检出率93%(12/13)明显高于术前超声的检出率62%(8/13)(P<0.05,但对直径2~4cm的病灶检出率二者无统计学差异(P>0.05).21例肾结石患者术前超声诊断率97%与术中超声100%无统计学差异(P>0.05),但对结石的术中定位具有重要意义.结论术中超声对肝癌尤其是小肝癌的检出、定位及肾结石的术中定位具有重要的应用价值.

    作者:曲虹;臧福波;闻月异;沈静 刊期: 2003年第01期

  • 用铸造核桩冠修复老年人残根残冠的体会

    铸造核桩冠作为一种修复体,在口腔临床修复中已被广泛应用,选择性的保留残根、残冠,经过完善的根管治疗后,再做核桩冠或冠桥修复.

    作者:汤立群 刊期: 2003年第01期

  • 急性心肌梗塞再灌注心律失常10例分析

    再灌注心律失常(RA)是指心肌缺血以后冠状动脉再通恢复血流灌注后所致的心律失常.1943年Hanis首先提出再灌注心律失常这一命名[1].

    作者:张丽华 刊期: 2003年第01期

  • ODQ对清醒大鼠纹状体细胞外基础cGMP水平的影响

    目的应用清醒大鼠脑微透析技术研究可溶性鸟苷酸环化酶抑制剂1H-[1,2,4]恶二唑[4,3-a]喹喔啉-1-酮(ODQ)对大鼠纹状体细胞外cGMP水平的影响.方法在大鼠纹状体透析探头,待大鼠清醒后24h用人造脑脊液进行透析灌流实验.灌流速度为5μl@min-1,每20min收集1次透析液,用放免药盒测定cGMP含量.结果纹状体内局部灌流ODQ10,50,100μmol@L-1,5μl@min-1可剂量依赖性降低细胞外基础cGMP水平,ODQ100μmol-1作用强、大,可使细胞外基础cGMP水平降低约50%.结论本研究实验结果表明在基础状态下纹状体的cGMP约50%来源于可溶性鸟苷酸环化酶的激活.

    作者:金英;张宝云;于杨;赵艳杰;刘婉珠;刘凤珍 刊期: 2003年第01期

  • CT引导经皮肺活检37例临床分析

    纤维支气管镜的应用和X线引导下经皮肺活检的普及大大提高了肺部疾病的病理诊断率,但两种方法均有其无法弥补的不足.

    作者:戴丽;李可峰 刊期: 2003年第01期

锦州医科大学学报杂志

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