学术投稿

组织工程化颌下腺细胞与支架材料复合培养佳细胞浓度的实验研究

谭学新;宫相芹;王玉新;周青;邓春富;王绪凯

关键词:颌下腺细胞, 胶原海绵, 组织工程
摘要:目的:研究颌下腺细胞与支架材料体外复合培养中,细胞接种浓度对复合培养物的影响.方法:体外原代培养SD鼠颌下腺细胞,并传代至第2代,细胞计数,按细胞浓度为10,20,30,40,50,60,70×106/ml接种于5 mm×5 mm×2 mm胶原海绵表面,并置于24孔培养板内,形成颌下腺细胞-胶原海绵复合物.继续培养,于接种细胞后1, 3, 5,7 d取材;HE染色、免疫组化、扫描电镜观察及细胞计数检测等,评价颌下腺细胞-胶原海绵复合物形成的佳细胞接种浓度.结果:50,60,70×106/ml细胞浓度的复合物中颌下腺细胞在支架材料上黏附、伸展及生长良好.10,20,30,40×106/ml细胞浓度的复合物中颌下腺细胞在支架材料上增殖分化及生长较差.细胞计数显示接种7 d时,各组材料细胞数均只有104/ml数量级,50,60,70×106/ml接种浓度时,细胞粘附数量是10,20,30,40×106/ml的2倍.结论:颌下腺细胞与胶原海绵复合培养佳接种细胞浓度为50×106/ml.与其它组织细胞复合培养的佳接种浓度相似.
中国医科大学学报杂志相关文献
  • 正常肥胖、单纯高脂血症及2型糖尿病病人血浆中胰岛素抵抗素水平的研究

    目的: 研究胰岛素抵抗素在正常肥胖人、单纯高脂血症及II型糖尿病病人血浆中的平均水平,探讨肥胖与高脂血症,2型糖尿病之间的联系.方法: 采用竞争性ELISA方法.结果:各组与正常平均值之间的差异显著(P<0.001),正常肥胖组分别与单纯高脂血症组、2型糖尿病组之间的差异显著(P<0.001),单纯高脂血症组与2型糖尿病组之间的差异没有统计学意义(P>0.05).结论: 胰岛素抵抗素在正常肥胖组、单纯高脂血症组、2型糖尿病组的水平有递增的趋势,说明胰岛素抵抗素所致的胰岛素抵抗可能是将肥胖与高脂血症及2型糖尿病连接在一起的纽带.

    作者:程云慧;魏茗 刊期: 2003年第05期

  • 高龄白内障患者的护理干预

    高龄老年人常伴有全身性疾病,对这些需要进行超声乳化及人工晶体植入术的患者,我们采取了有针对性的术前和术后护理,保证了手术的顺利开展.

    作者:张亚君 刊期: 2003年第05期

  • 蛋白激酶CK2-β在SACC-83及SACC-LM细胞中的活性变化

    目的:探讨蛋白激酶CK2-β在涎腺腺样囊性癌(SACC)及肺转移涎腺腺样囊性癌(SACC-LM)中的活性变化.方法:利用激酶活性测定方法进行活性测定分析. 结果:与未转移SACC(SACC-83)细胞相比,SACC-LM细胞中蛋白激酶CK2-β具有较高的活性;在两种细胞中,细胞核中的活性都高于在细胞质中的活性.结论:蛋白激酶CK2-β的活性与SACC的肺转移呈正相关.

    作者:郭澍;王玉新;孙长伏;宗志宏;刘芙蓉;于秉治 刊期: 2003年第05期

  • 前列腺素E1治疗慢性间质性肾炎患者血中AngⅡ,6-K-PGF1α/TXB2的变化及意义

    研究慢性间质性肾炎患者应用前列腺素E1(PGE1)治疗前后血中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),6-K-PGF1α/ TXB2的变化及其临床意义.经30例慢性间质性肾炎的患者临床治疗结果表明,PGE1能够下调慢性间质性肾炎患者的血中AngⅡ值,改善6-k-PGF1α/ TXB2比值,进而改善肾脏血液供应,对于延缓肾功恶化具有一定的临床意义.

    作者:孙立;冯江敏;马健飞;王力宁 刊期: 2003年第05期

  • 大鼠肝微粒体细胞色素b5对细胞色素P450在体温调节中作用影响的探讨

    目的:通过观察发热、降温和解热时大鼠肝微粒体细胞色素b5(CYb5)含量的变化,探讨CYb5对细胞色素P 450(CYP 450)在体温调节中的作用.方法:连续监测大鼠体温,并用改进的木村和佐藤方法测量第1次注射不同制剂后24 h肝微粒体CYb5含量.结果:腹腔注射脂多糖后大鼠体温升高(P<0.05),注射后24 h CYb5含量下降(P<0.05);注射丁香酚后大鼠体温下降(P<0.05),注射后24 h CYb5含量增加(P<0.05);腹腔注射脂多糖后3 h再腹腔注射丁香酚大鼠体温先升高然后恢复,注射后24 h CYb5含量与对照组相比无统计学意义.结论:随着注射不同试剂大鼠体温变化的同时,CYb5含量变化方向与CYP 450含量方向相同,表明CYb5可能影响CYP 450在体温调节中的作用.

    作者:狄军艳;冯甲棣;张玉霞;王常慧 刊期: 2003年第05期

  • 青黛颗粒抗炎、镇痛作用的实验研究

    目的: 通过对青黛颗粒抗炎、镇痛作用的实验研究,探讨该药治疗溃疡性结肠炎的作用机理. 方法:采用小鼠醋酸扭体法、大鼠棉球肉芽肿法和角叉菜胶所致大鼠足肿胀方法. 结果:青黛颗粒给药高、中、低剂量组和阳性对照药组均明显降低小鼠扭体次数(P<0.05~P<0.01).对大鼠棉球肉芽肿和大鼠足肿胀有显著的抑制作用(P <0.01~P<0.001). 结论:青黛颗粒分别对大鼠具有抗炎、对小鼠具有镇痛作用.且镇痛作用呈量效关系.

    作者:杜立阳;刘悦;宗士群;李东安;赵金明;张艳玲 刊期: 2003年第05期

  • 前列腺素E1对慢性间质性肾疾病治疗的临床观察

    通过血肌酐、血压、血TGF-β、尿TGF-β,观察用前列腺素E1,对慢性间质性肾疾病的临床治疗效果.

    作者:王欣;马健飞;冯江敏;王力宁 刊期: 2003年第05期

  • 蛋白激酶C同工酶在初发糖尿病大鼠肾小球中的细胞定位及表达

    目的:探讨蛋白激酶C(PKC)同工酶α,βⅠ,βⅡ,ε在正常及初发糖尿病(DM)大鼠肾小球中的细胞定位及表达变化与糖尿病肾病(DN)发生、发展的关系.方法:腹腔注射链脲菌素(STZ)制成DM大鼠模型,采用免疫组化S-P方法检测PKC同工酶的表达.结果:PKCα在正常大鼠肾小球系膜细胞、上皮细胞、内皮细胞中均有表达; PKCβⅠ,βⅡ在系膜细胞中表达; PKCε在系膜细胞及内皮细胞中表达.初发DM状态下,PKCα在系膜细胞和内皮细胞中表达上升;PKCβⅠ,βⅡ在系膜细胞中表达明显下降;PKCε在系膜细胞及内皮细胞中表达升高不显著.结论:PKC各同工酶在正常大鼠肾小球内的细胞定位不同.高血糖对PKC各同工酶在肾小球内的细胞表达有着不同的调控效应.PKC各同工酶在初发DM大鼠肾脏病变中发挥不同作用.

    作者:姚丽;王力宁;周华;范秋灵;马健飞;冯江敏 刊期: 2003年第05期

  • K-ras基因转染鼠肺纤维细胞粘附分子的表达及临床意义

    目的:探讨细胞粘附分子在肿瘤细胞浸润转移中的意义.方法:利用免疫荧光标记及聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot观察K-ras基因转染的鼠肺(KTRL)纤维细胞及正常鼠肺(NRL)纤维细胞钙粘素-链蛋白复合体分子的表达.结果: KTRL纤维细胞粘附分子表达明显异常,肌蛋白分布方式发生改变,粘附能力明显下降.结论:KTRL纤维细胞作为肿瘤细胞的早期阶段,其粘附能力的改变,可能是后期形成肿瘤细胞后发生浸润转移的主要原因.

    作者:张其刚;宿杰;尚文军;关永信 刊期: 2003年第05期

  • 主观用力呼吸困难与限制慢性阻塞性肺疾病患者运动的标准的关系

    目的: 探讨主观用力呼吸困难不宜作为限制慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者运动的标准.方法:选择稳定期COPD患者26例,进行症状限制性心肺运动负荷试验.运动终止后立即用血气分析仪监测此状态下的动脉血氧分压(PaO2max).Borg Scale(BS)被用于判定患者运动时主观出现用力呼吸困难的程度.结果:BS与PaO2max负相关(r=-0.673,P<0.01),15例患者因感到呼吸困难而终止试验,其中9例发生血氧分压下降,但只有4例PaO2max<60mmHg.2、BS与ΔPaO2负相关(r=-0.44,P<0.05),即BS与患者运动时发生的氧分压降成正相关.结论:单凭主观出现用力呼吸困难不宜限制患者进行运动.

    作者:温华;康健;刘刚;宋玉;侯显明;于润江 刊期: 2003年第05期

  • 机械和化学刺激对大鼠内脏神经敏感性的影响

    目的:通过对成年大鼠给予机械和化学伤害性刺激,探讨内脏痛觉过敏产生的机制.方法:对成年SD大鼠分别行结肠气囊扩张和经肛门灌注芥末油给予机械和化学刺激,在结肠气囊产生不同压力的情况下观察大鼠的行为反射、血压及心率的变化.结果:实验组和正常对照组之间存在着明显的差别.结论:机械和化学因素对内脏的刺激可降低传入神经对肠道伤害性刺激反应的阈值,同时也可以对自律神经产生影响,从而影响血压和心率的变化.

    作者:姜敏;徐秀英;傅宝玉;姜若兰 刊期: 2003年第05期

  • 组织工程化颌下腺细胞与支架材料复合培养佳细胞浓度的实验研究

    目的:研究颌下腺细胞与支架材料体外复合培养中,细胞接种浓度对复合培养物的影响.方法:体外原代培养SD鼠颌下腺细胞,并传代至第2代,细胞计数,按细胞浓度为10,20,30,40,50,60,70×106/ml接种于5 mm×5 mm×2 mm胶原海绵表面,并置于24孔培养板内,形成颌下腺细胞-胶原海绵复合物.继续培养,于接种细胞后1, 3, 5,7 d取材;HE染色、免疫组化、扫描电镜观察及细胞计数检测等,评价颌下腺细胞-胶原海绵复合物形成的佳细胞接种浓度.结果:50,60,70×106/ml细胞浓度的复合物中颌下腺细胞在支架材料上黏附、伸展及生长良好.10,20,30,40×106/ml细胞浓度的复合物中颌下腺细胞在支架材料上增殖分化及生长较差.细胞计数显示接种7 d时,各组材料细胞数均只有104/ml数量级,50,60,70×106/ml接种浓度时,细胞粘附数量是10,20,30,40×106/ml的2倍.结论:颌下腺细胞与胶原海绵复合培养佳接种细胞浓度为50×106/ml.与其它组织细胞复合培养的佳接种浓度相似.

    作者:谭学新;宫相芹;王玉新;周青;邓春富;王绪凯 刊期: 2003年第05期

  • 胆囊内胆汁粘度及胆汁成分对胆石形成影响的临床和动物实验研究

    目的:探讨胆囊内胆汁粘度(BV)和胆汁成分(BI)对胆石形成的影响.方法:对正常人,胆囊炎、胆石症病人以及正常兔、高胆固醇成石兔、成石+中药兔BV的测定,探讨胆囊内BV对胆石形成的影响.结果:同一切变率下,胆石症组BV高,与其他两组比较差异显著(P<0.05);高胆固醇成石兔成石率达90%,加中药组则降为11%,对照组为零;成石兔胆汁酸、磷脂减少,胆固醇增高,而中药组胆汁酸、磷脂增加,胆固醇降低,两组相比有显著差异(P< 0.01);成石兔BV显著高于其他两组(P< 0.01).结论:胆石形成与胆囊内BV增高有关;中药在降低BV的同时起到了调整BI比例的作用,中药可能降低胆囊内BV,减少胆石症的发生率.

    作者:侯淑英;张海鹏;初航;刘守兰 刊期: 2003年第05期

  • 改良经鼻腔进路泪囊鼻腔造孔术的探讨

    利用STORZ公司的鼻内窥镜系统对21例慢性泪囊炎患者行改良的经鼻腔进路的泪囊鼻腔造孔术,并进行系统化的围手术期的处理及随访.按疗效判定标准,18例治愈,3例好转,总有效率为100%.此手术具有操作相对简单,术后并发症少,出血量极小,术腔内不用任何填塞,面部不留瘢痕,治愈率高,预后良好等优点.

    作者:于湛;李惠萍 刊期: 2003年第05期

  • β-catenin在早期胃癌中的表达

    目的:探讨β-catenin在早期胃癌中的表达及其意义.方法:用免疫组织化学方法检测39例早期胃癌患者胃癌组织中β-catenin的表达情况.结果:39例早期胃癌中有20例存在β-catenin的异常表达,表现为细胞膜的表达缺失及细胞质和细胞核中表达增强.早期胃癌中β-catenin表达阳性率为51.28%. 结论:在早期胃癌中存在β-catenin的异常表达,β-catenin的异常表达可能在早期胃癌的发生、发展中发挥重要的作用,可能是胃癌发生的一个早期事件.

    作者:王轶淳;李异玲;傅宝玉;今谷晃 刊期: 2003年第05期

  • 佐剂关节炎大鼠滑膜组织中核因子κB表达的研究

    目的:研究核因子kappa B(NF-κB)在佐剂关节炎(AA)大鼠滑膜组织中的表达,探讨类风湿关节炎(RA)的发病机制. 方法:分别用免疫组织化学法及原位杂交法检测AA大鼠滑膜组织中NF-κ B蛋白及NF-κ B m RNA的表达.用显微图像分析系统对结果进行定量分析.结果:AA大鼠滑膜中NF-κ B的蛋白及mRNA水平均较正常组明显升高(P<0.01, P<0.01), NF-κB蛋白主要分布于滑膜衬里细胞、巨噬细胞、成纤维细胞及淋巴细胞中.胞浆及胞核内均有染色,但胞核染色较深,多呈团块状分布,而胞浆染色较浅.NF-κ B mRNA阳性细胞与蛋白阳性的细胞种类相同,主要分布于胞浆中.结论:滑膜组织的 NF-κB可能参与RA的病理过程.

    作者:沈晖;方秀斌;刘有世 刊期: 2003年第05期

  • 前列腺素E1加用皮质激素治疗慢性间质性肾炎的疗效观察

    为观察前列腺素E1(PGE1)、强地松,对慢性间质性肾炎(CIN)的治疗作用,我们选择50例(CIN)患者,分别给予强的松、PGE1、强的松+PGE1,凯时,凯时+强的松治疗,检测用药前后的血肌酐、血色素水平,结果多数治疗组血肌酐明显下降,血色素明显上升,提示外源性PGE1和皮质激素可以延缓CIN进入终末期肾衰,保护残余肾功能.

    作者:冯江敏;孙立;马健飞;栗霄力;王禹;王力宁 刊期: 2003年第05期

  • Genistein抑制兔晶体上皮细胞膜酪氨酸蛋白激酶及蛋白激酶C磷酸化的研究

    目的:研究genistein对兔晶体上皮细胞增殖及胞膜酪氨酸蛋白激酶(TPK)、蛋白激酶C(PKC)活性的影响,探索使用genistein防治后发性白内障.方法:兔晶体上皮细胞培养,应用Casnetllie改良法检测不同浓度genistein及bFGF作用后,兔晶体上皮细胞膜TPK活性的变化;同位素掺入法检测genistein及bFGF作用后,兔晶体上皮细胞胞膜及胞浆PKC活性的变化.结果:不同浓度genistein作用后兔晶体上皮细胞TPK活性均较对照组明显下降,genistein可抑制bFGF诱导的TPK活性升高,genistein对PKC活性无明显抑制作用,但可抑制bFGF诱导的PKC活性升高.结论:genistein在体外可通过抑制生长因子激活的蛋白激酶活性升高而抑制兔晶体上皮细胞增殖.

    作者:孔珺;张劲松 刊期: 2003年第05期

  • 抗NI-35重组单链抗体表达载体的构建与融合表达

    目的:重新设计并人工合成抗NI-35重组单链抗体(anti-NI-35-scFv)的cDNA克隆,构建其表达载体,在原核系统中实现初步表达.方法:根据抗NI-35抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的基因片段,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到克隆载体pUC-18中,经全自动序列分析仪测序证实,再亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导表达.结果:合成的基因序列与设计的仅差一个碱基,目的基因连接方向及阅读框架正确;SDS-PAGE检测显示,表达出相对分子量31kDa的融合蛋白,并得到了良好的生物活性.结论:抗NI-35重组单链抗体基因表达载体的构建和表达,为深入研究其应用于神经系统的损伤和修复奠定了基础.

    作者:孙涛;王勇;王运杰;吴安华;公茂青 刊期: 2003年第05期

  • 妊高征患者母血及胎盘组织中卵泡休止素水平变化的研究

    目的: 研究妊高征患者母血及胎盘组织中卵泡休止素(FS)水平变化的临床意义.方法: 采用固相双夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定妊高征组(轻度4例、中度4例、重度12例)及正常妊娠组(34例)孕妇血清以及胎盘组织(两组各10例)FS含量. 结果: 妊高征组血清FS水平低于正常妊娠组(P<0.001);重度妊高征组血清FS水平低于轻中度妊高征组(P<0.05);妊高征组胎盘组织FS含量低于正常妊娠组(P<0.001);两组血清FS水平与胎盘组织FS含量呈显著的直线相关关系(P<0.05). 结论: FS下降可能参与妊高征的发生、发展.血清FS值可与其它指标相结合用于胎盘功能的评价.

    作者:李园美;尚涛;王雁 刊期: 2003年第05期

中国医科大学学报杂志

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