王慧芬；李强；兰培
目的 探讨谷氨酰胺(Gln)对急性肝衰竭(AHF)大鼠肠道细菌移位防治作用及机制.方法 SD大鼠随机分成4组,对照组(A组),防治组(B组),治疗组(C组),模型组(D组).B组、C组、D组腹腔注射D-氨基半乳糖(GalN)建立急性肝功能不全大鼠模型.A组及D组予生理盐水灌胃.B组造模前两天予Gln灌胃防治,C组造模后一天Gln灌胃治疗.4 d后处死动物,进行肝脏病理评分;观察肠系膜淋巴结细菌移位及平均组织含菌量、肠组织学改变;测量回肠绒毛高度和隐窝深度;检测血浆二胺氧化酶含量.结果 B组和C组肝脏病理评分明显低于D组.B组肠系膜淋巴结细菌移位率低于D组,有显著性差异.B组、C组的血浆二胺氧化酶含量低于D组.B组显著低于C组.B组及C组的回肠绒毛高度和隐窝深度明显高于D组.B组明显高于C组,差异显著.结论 谷氨酰胺可改善AHF大鼠的肠道黏膜屏障功能,减少AHF大鼠的肠道细菌移位的发生.
作者：刘寿荣；娄国强；黄文豹 刊期： 2007年第02期
目的 研究慢性乙型肝炎患者血清HBV复制水平和肝纤维化血清学标志物的关系.方法 入选临床确诊为慢性乙型肝炎的157例患者,其中49例为早期肝硬化,采用荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,放射免疫法和酶免疫法检测肝纤维化血清标志物:透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽和Ⅳ型胶原,对血清HBV DNA水平和肝纤维化标志物的关系进行研究分析,并对49例早期肝硬化患者和108例无肝硬化患者的血清HBV DNA及肝纤维化血清标志物水平进行比较.结果 慢性乙型肝炎患者的血清HBV DNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性(P＞0.05),早期肝硬化患者的血清肝纤维化标志物水平显著高于无肝硬化的患者,而HBV DNA水平却低于无肝硬化的患者(P＜0.05).结论 慢性乙型肝炎患者的血清HBV DNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性.
作者：董忠；沈洪；张福奎 刊期： 2007年第02期
目的 应用两种评分方法对409例肝硬化及重型肝炎患者进行评估比较,分析血清肌酐、血清胆红素及凝血酶原时间国际标准化比值(INR)对MELD评分结果的影响程度.方法 统计409例肝硬化及重型肝炎患者的相关资料,应用Child和MELD评分法分别计算后应用Chiss软件进行统计学分析.结果 随着A、B、C、D各个级别的病情的加重,MELD评分明显升高.各个级别的血清胆红素、INR之间存在明显差异;各个级别的血清肌酐之间无明显差异.结论 血清胆红素及凝血酶原时间国际标准化比值(INR)的变化及不同能够明显影响到评分结果,而血清肌酐的结果对评分结果的影响不显著.MELD应与多因素分析及临床经验有机结合,才是符合临床实际的判断严重肝病预后的较科学手段.
作者：宋春辉；陈黎明；张玲霞 刊期： 2007年第02期
目的 研究乙脑病毒持续感染株在不同条件下病毒量的变化及探讨影响病毒增殖的因素.方法 乙脑病毒野生株JaGAr-01株和Nakayama株分别感染人肝癌细胞株KN73,建立乙脑病毒持续感染模型.采用空泡斑点实验进行病毒滴度测定.用持续感染病毒感染人神经纤维母细胞瘤细胞株IMR-32,在30℃和37℃下检测病毒的温度感受性;分别将两种野生株感染持续感染了病毒的KN73细胞,进行病毒重复感染实验;为探讨持续感染病毒的增殖性,将其感染KN73细胞和IMR-32细胞.结果 两种持续感染病毒的增殖量均无温度差异性.重复感染实验结果:JaGAr-01株的病毒量是对照的1.3%和8.8%;Nakayama株的病毒量是对照的80.0%和1.7%.两种野生株及其持续感染株分别感染KN73和IMR-32细胞,前者中两种持续感染株的增殖性比野生株明显低下,而在后者中两株的增殖性与其野生株相近.结论 两种持续感染的乙脑病毒均无温度变异株;乙脑病毒的持续感染系中可能存在含有DI粒子的变异病毒;在不同细胞中宿主因子对阻碍持续感染株的增殖存在差异.
作者：徐可树；李琪；周霞 刊期： 2007年第02期
目的 建立一种HBV cccDNA定量检测方法,并定量检测慢性乙型肝炎患者肝组织内的cccDNA.方法 分析A-G亚型HBV DNA序列,根据其结构特点,于DNA缺口两侧高度保守区域设计引物和探针,并摸索该方法佳反应条件,以期实现不同亚型HBV cccDNA的特异性扩增.对该方法进行特异性、敏感性及重复性检测.将扩增产物进行测序以检测方法的特异性.用102～1010拷贝/ml的标准质粒检测方法的敏感度.106拷贝/ml标准质粒30复管,以检测其重复性.取32例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后的肝穿组织,提取DNA,用该方法进行cccDNA定量,观察抗病毒治疗前后cccDNA的变化及与总HBV DNA的关系.结果 测序结果显示扩增产物为目的片段;该定量方法的敏感度为103～1010拷贝/ml;标准质粒30复管后其Ct值为29.69±0.31,变异系数为1.04%.肝内cccDNA占肝内总HBV DNA的47%～98%,平均81.5%.结论 本方法操作简便,特异性高,定量线形范围宽及重复性好,可用于科研中cccDNA的定量检测.
作者：庄立伟；陆海英；于岩岩；斯崇文；于敏；张乃临；公维波 刊期： 2007年第02期
目的 建立人禽流感H5抗体的酶联免疫检测方法(ELISA).方法 用ELISA法检测疑似高致病性禽流感患者及正常人群血清标本中H5 IgG抗体.结果 23例疑似高致病性禽流感患者血清样品中有4例H5 IgG抗体阳性,阳性率为17.40%,与血凝抑制试验(HI)和微量中和试验(NI)相比较,三者符和率为100%.234例正常人群血清H5 IgG抗体检测均为阴性.结论 建立的ELISA方法可用于高致病性人禽流感的血清样品初步筛查.
作者：鲁健；郭瑜；李梓；曹玉玺；王琦；王秀平；黄晶晶；王敏；毕胜利；舒跃龙 刊期： 2007年第02期
目的 观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对宿主细胞DNA合成及细胞周期蛋白(Cyclins)表达的影响.方法 用HCMV感染同步化于G0/G1期的人胚肺成纤维细胞(HEL),分别于感染后0、3、6、12、24、48、72、96 h终止培养.用流式细胞术测定HCMV感染后细胞周期进程及DNA含量.用免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测CyclinE、CyclinA、CyclinD1蛋白的表达.结果 HCMV感染细胞后24h～96h,S期细胞明显增多,G2/M期细胞减少,至感染后96 h,未发现有G2/M期细胞.感染后24 h细胞保持2N DNA含量,全部感染细胞DNA含量在48 h内开始升高,感染后72h多数细胞的DNA含量大于2N DNA含量.在正常对照细胞DNA含量没有增加.HCMV+PAA组没有检测到DNA含量增加.HCMV感染接触抑制细胞12 h时CyclinE蛋白被诱导,感染后24 h出现CyclinE峰值;HCMV不能诱导CyclinA蛋白表达;CyclinD1在感染后24 h开始下降.结论 HCMV感染同步化于G0/G1期的细胞后,诱导CyclinE蛋白明显升高,激活CyclinE/Cdk2激酶,使细胞周期越过G1/S限制点,将细胞周期阻止于晚G1期.病毒感染未能激活细胞DNA合成,病毒感染后总DNA的增加由病毒DNA复制造成.
作者：刘楠；余艳红；钟梅；闻良珍 刊期： 2007年第02期
目的 进行NucliSens HIV-1 QT和Amplicor HIV-1 monitor 1.5检测相同临床样品HIV-1病毒载量值之问的比较研究.方法 收集临床样本82份,使用两种方法测定病毒载量,对病毒载量值进行统计分析.结果 未测到核酸的和两种方法病毒载量对数值之差小于0.5的占88.9%;用△log10 VL＜0.5的56份样本统计两种方法的相关性,相关系数为0.956.结论 NucliSens HIV-1 QT和Amplicor HIV-1 monitor 1.5两种方法测定的HIV病毒载量值有很好的相关性.
作者：潘品良；许文燕；姚均；陶晓霞；裴丽健；蒋岩 刊期： 2007年第02期
DNA疫苗能够诱导广谱免疫反应,已被广泛应用于预防性疫苗和针对各种感染性疾病、肿瘤、自身免疫性疾病和过敏性疾病的免疫治疗的临床试验.
作者：郇丽芳；舒跃龙；张智清 刊期： 2007年第02期
目的 调查乙肝病毒B基因亚型在我国的分布情况.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法并结合测序法,对来自全国7个中心的共511份B基因型感染血清样本进行了检测.结果 511份B基因型样本经亚型分析,确定全部为Ba亚型,未发现Bj亚型的存在.结论 流行于我国南方及北方地区的乙肝病毒B基因型毒株绝大部分为Ba亚型,Bj亚型非常罕见.
作者：黄月华；周彬；王战会；马世武；梁敏锋；侯金林 刊期： 2007年第02期
目的 调查高危型人乳头瘤病毒(HPV)在不孕患者宫颈细胞中的感染情况,探讨HPV病毒型别及其载量(viral load)对不孕发生的影响.方法 对临床130份不孕患者的宫颈脱落细胞标本和在门诊体检的150份对照组的宫颈脱落细胞标本采用多通道实时荧光定量PCR仪进行八种高危HPV DNA分型及定量检测,该八种高危HPV型别为主要高危型:HPV16,18,45,31和次要高危型HPV33,52,58,67.结果 不孕组阳性率为25.38%(33/130),对照组的阳性率为11.33%(17/150),两组间的阳性率差异有统计学意义.不孕组的33份阳性标本中病毒载量≥106为24例,病毒载量＜106为9例;对照组的17份阳性标本中,病毒载量≥106为4份,病毒载量＜106为13份,两组间的病毒载量有显著性差异.结论 不孕组高危型HPV感染率比正常人群(对照组)高.对不孕组病毒载量的分析表明:不孕组人群中其病毒载量明显高于正常人群.此外,本研究还为分泌物核酸检测的定量设置了内标(β-球蛋白),提出可供临床使用的分泌物取样的核酸定量检测方法.
作者：张立冬；张慧敏；裴静；何桂蓉；孙筱放；李冰 刊期： 2007年第02期
目的 构建人乳头瘤病毒11型L2E7原核表达系统pET9aHPV11L2E7,并纯化蛋白进行小鼠免疫效果研究.方法 从尖锐湿疣组织中扩增人乳头瘤病毒11型L2、E7基因片段,构建pET9aHPV11L2E7原核表达重组质粒并测序,在大肠埃希菌宿主菌BL21(DE3+)中经IPTG诱导表达融合蛋白L2E7(553个氨基酸),经SDS-PAGE电泳和Western Blot进行鉴定.CM离子交换介质纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,进行细胞免疫水平和体液免疫水平的检测.结果 成功构建了pET9aHPV11L2E7原核表达系统,纯化获得的HPV11 L2E7蛋白免疫BALB/c小鼠后能检测到针对HPV11E7特异性的细胞免疫,血清中能检测到高效价抗HPV11 L2E7抗体.结论 纯化的HPV11L2E7融合蛋白能够引发特异性细胞和体液免疫反应,能作为尖锐湿疣免疫治疗候选疫苗.
作者：张卉；赵莉；任皎；高见；边涛；范江涛；阮力；陈心秋；田厚文 刊期： 2007年第02期
目的 探讨抗HBcAg IgM阳性慢性阳性肝炎患者的临床特性及其与HBV病毒学和血清学的关系.方法 收集河北省张家口市传染病医院和北京地坛医院2004-2006年经Abbott EIA检测试剂证实的所有抗HBcAg IgM阳性和同期随机抽样的抗HBcAg IgM阴性患者的临床资料,包括生化指标、血清HBV DNA载量和血清学指标,分析抗HBcAg IgM阳性和阴性患者的疾病程度和临床转归之间的差异及抗HBcAg IgM状态与HBV DNA载量和HBeAg状态的关系.结果 收集了200例慢性乙型肝炎患者,其中抗HBc IgM阳性70例,阴性130例,轻、中和重度肝脏疾病患者分别为71、83、46例.抗HBc IgM阳性患者的年龄和发病年数高于抗HBc IgM阴性患者,抗HBc IgM阳性的轻度肝脏疾病患者百分比为45.71%,中重度患者为54.29%,低于抗HBc IgM阴性患者(30.00%和70.00%),差异有统计学意义(x2=4.907,P=0.027).抗HBc IgM阳性患者和阴性患者的HBV DNA载量,血清HBeAg/抗Hbe状态、住院天数和转归差异无统计学意义.结论 慢性乙型肝炎患者抗HBcAg IgM的状态与肝脏疾病的程度相关,但与HBV DNA载量和HBeAg/抗Hbe状态无相关性.
作者：张春泽；田志新；石栓柱；李明慧；谢尧 刊期： 2007年第02期
目的 探讨腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)为载体的含有HBV-S、C或X基因的重组病毒(rAAV-HBV-S,C,X)感染正常人树突状细胞的效率.方法 分别构建含有HBV-S、C和X基因的AAV质粒,在293细胞中包装成重组病毒,测定病毒滴度.从正常人外周血中分离出单核细胞进行体外培养,在培养的第1天分别用rAAV-HBV-S、C、X和作为对照的293细胞裂解液感染刺激单核细胞,感染后的单核细胞在GM-CSF、IL-4和TNF-α作用下继续培养7 d获得成熟的树突状细胞.用RT-PCR及流式细胞仪细胞内染色检测HBV基因的RNA和蛋白的表达.结果 重组rAAV-HBV-S、C、X的病毒滴度可以达到107拷贝/ml,用重组病毒分别感染树突状细胞.与对照组相比,感染的树突状细胞可表达相应的HBV基因RNA,流式细胞仪检测显示约90%的树突状细胞有相应HBV蛋白的表达.结论 rAAV-HBV可有效感染树突状细胞,提示可以通过该途径刺激树突状细胞提呈抗原.
作者：尤红；丛敏；王萍；阎钟钰；徐雍；卢炎；王宝恩；贾继东 刊期： 2007年第02期
目的 分析2002-2006年广州市1342例登革热(dengue fever,DF)患者病例特征,以期更好地做好DF的防治工作.方法 对我院2002-2006年收治的1342例DF患者的资料进行回顾性分析,用C6/36细胞分离血液登革病毒(dengue virus,DV),逆转录聚合酶链反应与基因测序法鉴定病毒.结果 1342例患者平均年龄为34.4岁,分布无明显性别差异.大多数患者有明显的病毒血症,主要临床表现为发热(100%)、头痛(85.9%)、肌肉酸痛(64.5%)、骨痛(46.6%)和皮疹(65.9%)等.实验室检查外周血白细胞及血小板减少者分别占66.0%和61.3%,丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)升高分别占69.0%和85.7%,部分患者(28.4%)出现血钾降低,除2例诊断为登革出血热外,均诊断为典型登革热.病原学检查血清登革病毒抗体IgM(DF-IgM)阳性率为90%,其中病程5天内累积阳性率为31.3%,8天内为86.4%,经病毒分离与鉴定证实均为DV-Ⅰ型感染.结论 广州市2002-2006年流行的DF均为DV-Ⅰ型所致,绝大多数病例符合DF的典型临床表现,肝损害为常见的并发症,登革出血热极少见.
作者：应若素；唐小平；张复春；蔡卫平；陈燕清；王建；洪文昕；龙英姿 刊期： 2007年第02期
登革热是由4型登革病毒引起的一种争性传染病,主要通过埃及伊蚊和白疑义伊蚊叮咬传播,是《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病.
作者：王世文；李德新 刊期： 2007年第02期
聚乙二醇α-2a干扰素作为抗病毒的主要药物之一,具有清除和抑制乙型肝炎病毒(HBV)、减轻肝脏炎症、阻止肝纤维化的发生与发展、预防肝细胞癌的发生,我科于2004年8月至2006年2月使用聚乙二醇干扰素α-2a治疗CHB25例,观察其疗效及不良反应,现报道如下.
作者：袁海宁；邓一鸣；罗光汉；黄利 刊期： 2007年第02期
目的 观察恩替卡韦治疗拉米夫定失效慢性乙型肝炎24周时对HBV的抑制程度,与治疗48周疗效之问的关系,探讨临床实用的疗效预测指标.方法 拉米夫定治疗失效慢性乙型肝炎患者33名,采用恩替卡韦每日1.0 mg治疗.根据治疗24周时血清HBV DNA的水平,将患者分为4组:PCR低于检测下限(QL)组(＜300拷贝/ml)、QL～＜103拷贝/ml组、103拷贝/ml～＜104拷贝/ml组和≥104拷贝/ml组,比较各组治疗48周时HBV DNA低于检测下限、ALT复常、HBeAg血清转换及发生病毒学反弹的比率.结果 治疗48周时,血清HBV DNA自基线下降4.91 log10,HBV DNA低于检测下限的比例为33.3%.24周时HBV DNA水平越低,在48周HBV DNA达到PCR检测不到的水平和ALT复常的比率越高,发生病毒学反弹的比率越低.结论 恩替卡韦治疗拉米夫定失效慢性乙型肝炎治疗24周时,PCR检测不到HBV DNA,提示在48周可达到较佳疗效,24周对HBY DNA的抑制程度可作为48周疗效的预测指标.
作者：马红；任江波；李红艺；王宇；王瑞丽；梁丽；孙淑杰；贾继东 刊期： 2007年第02期
本研究选用人神经胶质瘤细胞U251细胞株作为研究的靶细胞,以细胞形态学改变、细胞超微结构改变以及HCMV-LA的表达为指标,研究人类巨细胞病毒(HCMV)是否感染U251细胞,为进一步探讨HCMV致畸机制奠定基础.
作者：戴橄；陈利玉；李太存；邬国军；马琼山 刊期： 2007年第02期
目的 探讨甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在肝细胞癌诊断中的意义.方法 应用预装有耦联小扁豆凝集素(LCA)的琼脂糖微量离心柱分离AFP-L3,采用双抗体夹心、化学发光法检测AFP和AFP-L3,并计算AFP-L3值,以AFP＞20 μg/L,AFP-L3＞10%作为阳性判断标准.结果 肝细胞癌患者血清中AFP、AFP-L3水平明显高于其他肝病患者,P值均＜0.001,肝癌患者以AFP、AFP-L3作为诊断指标的敏感度分别是85.1%、72.3%,特异度分别是55.4%、97.2%;8例肝病患者AFP-L3＞10%,影像诊断未发现肝癌,至少三个月以后确诊肝癌.结论 甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在肝细胞癌诊断及与良性肝病的鉴别诊断中具有重要价值.
作者：王永忠；罗立波；吴国祥；陈敏；阮丽花；濮翔科；杭双荣 刊期： 2007年第02期
中华实验和临床病毒学杂志
主管:实验和临床病毒学杂志
主办：中国科学技术协会
