盛飞凤；任贤；戴幸平；徐潇静；董敏；裴奇；屈健；周智广；周宏灏；刘昭前
目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对心肌细胞凋亡的抑制作用及其潜在的机制.方法:异丙肾上腺素(10-5 mol/L)孵育48 h以诱导体外培养的大鼠心肌细胞凋亡,不同浓度的CGRP(10ˉ8或10-7mol/L)在异丙肾上腺素孵育前1h给药.药物处理结束后,检测心肌细胞凋亡率和细胞内活性氧的水平以及microRNA-1和microRNA-133a表达的变化.结果:异丙肾上腺素能显著增加心肌细胞的凋亡和细胞内活性氧的产生,同时伴随着microRNA-1表达的上调和microRNA-133a表达的下调,预先给予CGRP可显著抑制异丙肾上腺素的上述效应,但CGRP的有益效应可被CGRP受体拮抗剂所取消.结论:CGRP可抑制异丙肾上腺素诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与抑制活性氧的产生进而调节microRNA-1和microRNA-133a的表达有关.
作者：李健哲；彭军；王晨静；邓汉武；李元建 刊期： 2011年第10期
目的:探讨人源抗肝癌单链抗体SA3与增强型绿色荧光蛋白(EGFP-SA3)的融合表达、纯化、复性及其体内靶向性.方法:将SA3,EGFP基因,插入pET-25b(+),构建EGFP-SA3/pET-25b(+)原核表达载体,测序鉴定后转化大肠杆菌BL21 (DF3)；IPTG诱导融合蛋白EGFP-SA3的表达,复性、纯化后经SDS-PAGE鉴定；EGFP-SA3与HepG2细胞经体外孵育后在荧光显微镜下观察单链抗体SA3与肝癌细胞的结合作用；然后通过尾静脉将其注射入荷肝癌裸鼠体内观察EGFP-SA3的体内靶向作用.结果:SA3,EGFP基因分别插入载体pET-25b(+)后,重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)分别行NcoI-Xho I和Nco I-Eco RI双酶切,结果发现在750 bp左右出现一条带,与EGFP基因大小一致,在1.5 kb左右处出现一条带,与EGFP和SA3两个基因片段的总大小一致,DNA测序结果证实融合表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)构建成功；重组表达载体EGFP-SA3/pET-25b(+)经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示融合蛋白EGFP-SA3分子质量为58 kD,主要以包涵体的形式存在；纯化、复性后,免疫荧光检测结果显示SA3与HepG2细胞能特异性地靶向结合；注射了EGFP-SA3的荷肝癌小鼠的肿瘤部位有绿色荧光发出,显示EGFP-SA3具有良好的肿瘤特异性.结论:融合蛋白EGFP-SA3与HepG2细胞有较强的结合能力,单链抗体SA3有望用于肝癌的分子诊断和靶向治疗.
作者：黄建；李跃辉；郭锋杰；童永清；王甲甲；胡锦跃；李官成 刊期： 2011年第10期
心脏成纤维细胞在心脏重构中起重要作用.在各种促纤维化因素(如前炎症因子、缺氧-复氧、压力超负荷、衰老)刺激下,心脏成纤维细胞增殖、迁移、激活,导致细胞基质成分的积聚、心脏肥厚和僵硬.过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPAR-γ)的配体,特别是噻唑烷二酮类胰岛素增敏药,在病理条件下可调节心脏成纤维细胞的功能以及心脏重构的发展,然而未发现噻唑烷二酮类胰岛素增敏药对心脏衰竭的有益作用.噻唑烷二酮类胰岛素增敏药调节心脏成纤维细胞功能和心脏重构的确切信号通路未完全阐明,现有证据提示涉及氧化应激及相关信号途径.此外,PPAR-γ和植物凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)在其中起重要作用.
作者：陈家伟；胡长平；Jawahar L. Mehta 刊期： 2011年第10期
目的:研究缺血预适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用是否由toll样受体4(TLR4)/NF-kB途径所介导,以及是否与促进降钙素基因相关肽(CGRP)释放有关.方法:结扎Sprague-Dawley大鼠左冠状动脉前降支60 min,复灌3h造成心肌缺血再灌注损伤.缺血预适应为结扎大鼠左冠状动脉前降支5 min,复灌5min,共4个周期.RT-PCR分析心肌TLR4 mRNA表达.免疫组织化学法分析心肌TLR4和NF-κB蛋白表达.同时,测定心肌梗死面积、血浆CGRP浓度和血清肌酸激酶活性.结果:缺血预适应显著减少心肌梗死面积,降低肌酸激酶活性,增高血浆CGRP水平.心肌缺血再灌注可显著上调TLR4和NF-κB表达,缺血预适应可抑制其作用.结论:缺血预适应通过抑制TLR4/NF-κB信号通路保护大鼠心肌缺血再灌注损伤,其作用与促进CGRP释放有关.
作者：杨晶；李元建；胡长平 刊期： 2011年第10期
目的:研究视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4,RPB4)基因rs3758539G-803A和rs10882283 T-179G多态性对中国人群2型糖尿病患者使用罗格列酮疗效的影响.方法:使用PCR-RFLP方法对472名2型糖尿病患者和198名健康对照者进行RPB4基因G-803A和T-179G多态性位点的基因分型.随机选择42名携带不同RBP4基因型的2型糖尿病患者给予12周每天4mg的罗格列酮口服治疗.检测用药前后空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后血糖(postprandial plasma glucose,PPG)、空腹胰岛素(fasting serum insulin,FINS)、餐后胰岛素(postprandial serum insulin,PINS)、糖化血红蛋白(glycated hemoglobin,HbAlc)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein -cholesterol,LDL-c))和高度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol,HDL-c)等指标.结果:携带RBP4 G-803A GG基因型的患者其TG和LCL-c水平显著低于GA+ AA基因型患者.携带T-179G TT基因型的患者其腰臀比、FPG和FINS值显著低于TG +GG基因型患者.携带RBP4 G-803A GG基因型的患者服用罗格列酮后FPG和FINS下降值优于GA+AA基因型患者.携带T-179G TG+ GG基因型的患者服用罗格列酮后的HbAlc下降值优于TT基因型患者.结论:RBP4 G-803A和T-179G基因多态性与2型糖尿病相关且影响罗格列酮的疗效.
作者：周芳；黄琼；戴幸平；尹继业；吴静；周宏灏；龚志成；刘昭前 刊期： 2011年第10期
目的:通过研究正常大鼠和慢性脑缺血大鼠海马蛋白质表达的差异,探讨慢性脑缺血后脑损伤的发病机制.方法:采用双侧颈总动脉结扎的方法建立慢性脑缺血模型,20只大鼠随机分为模型组(n=10)和假手术组(n=10),4周后对各组大鼠海马进行双向凝胶电泳分析,并通过质谱技术鉴定差异蛋白质.结果:模型组与假手术组相比共有4种蛋白质上调,2种蛋白质下调,经质谱鉴定得到6种蛋白质的具体信息,包括泛素羧基末端水解酶L1；动力蛋白1；雄激素受体辅助活化因子；ATP合酶；rCG50513,isoform CRA_a和expressed sequence AU016693,isoform CRA_b.结论:建立了分辨率较高且重复性较好的慢性脑缺血双向电泳图谱,并发现了6种可能与脑缺血后神经损伤相关的蛋白质.
作者：张岗；王发渭；耿淼；陈利平 刊期： 2011年第10期
目的:在细胞水平研究烟酰胺单核苷酸(nicotinamide mononucleotide,NMN)对胰岛素分泌的调节作用及其对与胰岛素分泌相关的重要转录因子胰十二指肠同源盒基因(pancreatic and duodenal homeobox-1,PDX-1)和分叉头框家族转录因子l(forkhead box-containing protein O-1,FoxO1)基因表达的影响.方法:采用大鼠胰岛素ELISA试剂盒检测RIN-m5f细胞胰岛素分泌水平.用Real-time PCR检测RIN-m5f 细胞PDX-1和FoxO1的mRNA表达水平.用Western印迹检测RIN-m5f细胞PDX-1蛋白表达水平.结果:用瑞格列奈10 nmol/L+ NMN 100 μmol/L处理RIN-m5f细胞48 h,与空白对照及DMSO对照组相比,胰岛素分泌量均显著增高(P＜0.05)；与NMN 50 μmol/L组比较,胰岛素分泌量的增高也有统计学意义(P＜0.05).10,50和100 μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36 h,PDX-1的mRNA表达量均上调(依次为P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).100 μmol/L剂量组与10 μmol/L和50 μmol/L剂量组比较差异也有统计学意义(P ＜0.001).50,100和200 μmol/L的NMN作用RIN-m5f细胞36或48h,PDX-1的蛋白表达量与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:NMN可以调控RIN-m5f细胞中胰岛素的分泌及PDX-1的mRNA表达水平.
作者：盛飞凤；任贤；戴幸平；徐潇静；董敏；裴奇；屈健；周智广；周宏灏；刘昭前 刊期： 2011年第10期
葡萄糖依赖性促胰岛素释放肽(glucose-dependent insulinotropic peptide,GIP)是十二指肠及空肠上段合成、分泌的一种肠促胰岛素.长期高脂饮食可以刺激GIP的大量分泌,引起脂质在胰岛细胞和外周组织中沉积,导致胰岛素抵抗和分泌功能受损；抑制GIP可以明显改善2型糖尿病.胃肠转流手术通过对近端小肠的旷置,从而减少GIP的分泌可能是其能够治疗2型糖尿病的重要原因.
作者：李鹏洲；朱晒红；张大伟；刘岩；王国慧；朱利勇；叶飞 刊期： 2011年第10期
ABCC亚家族属于ABC转运体超家族,ABCC1是ABCC亚家族第一个被发现的成员.它分布于体内几乎所有组织,可以转运多种不同底物,包括药物、重金属离子、机体代谢毒物、谷胱甘肽、葡糖醛酸和硫结合物.随着测序技术的发展,近年来发现很多ABCC1基因多态.越来越多的证据表明一些多态与药物耐药和疾病易感性密切相关.同时,一些体外重构突变的方法也揭示了部分多态的作用机制.总结ABCC1基因多态的新研究进展(包括ABCC1多态与药物耐药,药物毒性,疾病易感性和严重性,疾病预后的关系,它们的作用机制及如何选择和预测功能性多态)具有重要的意义.
作者：尹继业；张建亭 刊期： 2011年第10期
目的:观察2种不同低氧模式对血压的影响并探讨其作用机制.方法:18只雄性SD大鼠随机分为间断低氧组(intermittent hypoxia group,IH组)、持续低氧组(continuous hypoxia group,CH组)及正常对照组(normal control group,NC组),分别给予7 h/d间断低氧、7 h/d持续低氧干预及常规饲养,共实验42d.实验前、实验3周、6周末检测3组大鼠尾动脉收缩压(arteria caudilis systolic pressure,ACSP).6周末检测血清去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、抑制羟自由基能力及血浆神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)的变化.结果:实验3周末,IH组大鼠ACSP高于实验前,差异有统计学意义(P＜0.05).6周末IH组大鼠ACSP,NE,MDA,NPY浓度均明显高于CH组及对照组,而抑制羟自由基能力明显降低(均P＜0.01).CH组与实验前及对照组比较,以上指标差异均无统计学意义(均P＞0.05).NE,NPY,MDA均与ACSP呈正相关(r =0.873,P＜0.01；r =0.671,P＜0.01；r=0.582,P＜0.05),抑制羟自由基能力与ACSP呈负相关(r=-0.790,P＜0.01).MDA与NE和NPY呈正相关(r=0.843,0.777,P＜0.01).抑制羟自由基能力与NE及NPY呈负相关(r=-0.864,-0.717,P＜0.01).结论:间断低氧可以诱发大鼠血压升高,这可能与交感神经活性增强及氧化应激损伤有关.
作者：贺若曦；苏晓丽；向永红；胡成平；罗荧荃 刊期： 2011年第10期
有机阳离子转运系统初是在进行肾清除研究时被认知的.许多对机体有害的内源性和外源性物质通过肾小球滤过和/或肾小管分泌从肾清除.这些有害物质中的极性有机阳离子需要通过一个转运体介导的过程才能穿过细胞膜,并终排泄到尿液中.对肾有机阳离子转运体的研究已有数十年.随着对肾有机阳离子转运体的深入研究,人们在其他组织中也发现了它的存在.特别是,肝和肠组织中的有机阳离子转运体被认为是决定药物吸收和分布的因素.在过去的数十年中,人们利用在体模型,离体器官灌注,或从体外组织和细胞水平对有机阳离子转运的机制进行了广泛的研究.特别是,对其分子克隆和特性的研究,使人们对这一重要的溶质转运蛋白超家族的认识得以深入.本文将对有机阳离子转运体的分子克隆和特性、转运机制、组织分布和定位、与有机阳离子的相互作用、调节机制、基因动物模型进行综述,并对人类有机阳离子转运体基因的遗传变异和临床应用前景进行总结.
作者：舒焱 刊期： 2011年第10期
目的:建立氨基甙类抗生素(aminoglycoside antibiotics,AmAn)致聋动物模型,观察内耳跨膜丝氨酸蛋白酶3(transmembrane protease,serine 3,TMPRSS3)的表达变化,探讨其在AmAn致聋中的作用机制.方法:选取健康SD大鼠40只,随机分为4组:对照组、硫酸卡那霉素3日组、硫酸卡那霉素7日组、硫酸卡那霉素14日组(n=10).建立AmAn致聋动物模型,以听觉脑干反应(ABR)阈值作为评价听功能指标,采用免疫组织化学、Western印迹分析AmAn致聋后耳蜗TMPRSS3蛋白表达的变化.结果:成功建立了AmAn致聋动物模型,随着卡那霉素注射时间延长,大鼠ABR阈值逐渐升高,耳蜗TMPRSS3蛋白表达水平逐渐降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:蛋白酶TMPRSS3对于正常听觉功能维护起重要作用,它参与了AmAn致聋过程,其表达水平下调可能是AmAn耳毒性发生机制中的一个重要环节.
作者：彭安全；葛圣雷；汪芹；谢鼎华；伍伟景；肖自安 刊期： 2011年第10期
目的:观察低氧诱导因子-1α( hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)RNA干扰对低氧条件下永生化角质形成细胞株HaCaT细胞HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的影响.方法:将HaCaT细胞分为4组:常氧对照组(无干预因素)、低氧组(低氧培养24h)、脂质体对照组(转染空载脂质体后低氧培养24h)、RNA干扰组(转染脂质体介导的RNA干扰序列后低氧培养24h).荧光实时定量PCR法检测各组HaCaT细胞的HIF-1α和iNOS mRNA表达水平,Western印迹检测各组HaCaT细胞HIF-1α和iNOS蛋白表达水平.结果:低氧组和常氧对照组HIF-1α mRNA的表达无明显差异(P＞0.05),而低氧组iNOS mRNA和蛋白及HIF-1α蛋白的表达均较常氧对照组明显增高(P＜0.05)；RNA干扰组HIF-1α和iNOS mRNA及蛋白的表达均较脂质体对照组显著降低(P＜0.05).结论:低氧条件下可以使HaCaT细胞HIF-1α和iNOS的表达增加,而抑制HIF-1α的表达可以使低氧条件下HaCaT细胞iNOS的表达减少.
作者：李勇坚；祖旭宇；张桂英；肖嵘；文海泉 刊期： 2011年第10期
目前抄袭、剽窃、伪造或者篡改实验数据等学术不端行为层出不穷.之所以出现上述现象,是社会环境外部因素、高校研究生培养体制内部因素和研究生自身道德因素相互作用的结果.因此,高校应注重营造健康诚信的校园环境和宽容失败的学术氛围,充分运用现代高科技手段的辅助作用,健全学术诚信,完善监督和评价机制,加大惩戒力度,加强导师的育人和表率作用,培养出具有尊重科学、实事求是和品学兼优的创新型人才.
作者：毕晓艳；唐小亚；范学工 刊期： 2011年第10期
目的:研究腺苷A1受体激动剂2-氯环戊腺苷(2-chloro-N6-cyclopentyladenosine,CCPA)预处理延迟相缺血再灌注心肌保护的蛋白质表达谱的变化.方法:8只新西兰大白兔随机分为CCPA预处理组(CCPA组)和生理盐水预处理组(NS组).CCPA组用100 μg/kg CCPA预处理大白兔,NS组用生理盐水预处理.24h后冠状动脉左前降支行30 min缺血/2h再灌注,然后取左心室缺血区心肌组织进行蛋白质组学研究.另取12只新西兰大白兔随机分为假手术组(Sham组)、生理盐水预处理组(NS组)和CCPA预处理组(CCPA组),每组4只,用Western印迹验证差异蛋白αB-晶状体蛋白的表达.结果:双向凝胶电泳分析发现2组表达明显差异的蛋白点有55个.其中17个差异蛋白质点用基质辅助激光解吸-电离飞行时间质谱技术以及Mascot和Expasy软件分析,初步鉴定出17个蛋白质.这些蛋白质包括应激反应蛋白、代谢相关蛋白、信号调节蛋白、离子通道蛋白、免疫相关蛋白等.Western印迹证实αB-晶状体蛋白在CCPA组中的表达明显上调.结论:CCPA预处理延迟相缺血再灌注心肌组织的蛋白质表达谱发生改变,这些蛋白质可能与腺苷A1受体激动剂预处理延迟相缺血再灌注心肌保护作用有关.
作者：周建美；邹定全；冉珂；常业恬 刊期： 2011年第10期
目的:揭示尿视黄醇结合蛋白(RBP)含量与肾小管间质受损的关系及其临床意义.方法:选择1 353例健康人群及186例经肾活检确诊的各种肾脏病患者为研究对象,均进行肌酐清除率(Ccr)、肌酐(Cr)、RBP、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、尿比重(SG)、尿渗透压等项目的测定,并进行比较；同时将所有肾小管功能检测项目与肾小管间质受损评分进行Spearman等级相关分析,计算RBP含量与肾间质受损及受损程度的相关性和敏感性与特异性.结果:肾小管间质受损与尿RBP,β2-MG,NAG呈正相关(分别r=0.863,P＜0.001;r=0.777,P＜0.001；r=0.374,P=0.002)；与渗透压,SG呈负相关(分别r=-0.519,P＜0.001；r=-0.624,P＜0.001)；尿RBP含量对肾间质受损的特异性和敏感性为91.03％和72.06％.结论:尿RBP是反映近端肾小管功能的特异性标志物,可能对诊断、鉴别诊断各种肾脏疾病小管间质病理受损及受损程度具有重要临床意义.
作者：夏运成；彭灿辉；屈申；刘伏友；彭佑铭 刊期： 2011年第10期
中南大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：中南大学
