苏念军;李冰;王芳;全松;杨翠莲;单冬红;邢福祺
目的 观察芍药苷(peoniflorin,PF)注射液对脑缺血损伤的保护作用及其对脑血管通透性的影响.方法 采用线栓法闭塞大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),各组分别进行行为学评分,脑组织含水量和脑梗塞面积测定及免疫组化检测脑组织中水通道蛋白-4(AQP4)的表达.此外,检测PF对脑缺血再灌注损伤小鼠脑血管通透性的影响.结果 PF注射给药可显著改善脑缺血的神经损伤症状,降低脑组织的含水量,缩小脑梗死面积,降低脑血管通透性,减少AQP4阳性细胞的表达.结论 芍药苷注射液对脑缺血有明显的保护作用,该作用可通过调节AQP4的表达而降低脑血管通透性来完成.
作者:林桂平;向秋玲;陈健文;马仁强;谭敏谊;谢岱希 刊期: 2009年第02期
目的 探讨噬菌体生物扩增技术(PhaB)在结核分枝杆菌(MTB)耐药研究中的应用价值.方法 应用PhaB法同时测定233株结核分枝杆菌分离株对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、利福平(RFP)及左旋氧氟沙星(LEV)的耐药性,并用改良岁氏培养法(LJ)做对照,比较两种方法的检测结果.结果 PhaB法检测INH、SM、RFP、LEV的药敏结果与改良罗氏培养法药敏结果相比符合率分别为97.4%、96.6%、95.3%、96.9%.同时检出耐多药菌株26株,占11.1%.结论 PhaB法能快速进行结核分枝杆菌的药敏检测并与金标法LJ符合率高,可作为基层结防单位MTB耐药性的快速筛选方法.
作者:黄文焰;郑军;李静宇;曾绍艺;谢育琴;伦秀红 刊期: 2009年第02期
目的 探讨消毒剂及紫外线对L型菌的诱导及杀灭情况,为指导现场消毒杀菌工作提供实验依据.方法 分别采用常用消毒剂与紫外线作用于金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌或枯草杆菌,观察L型菌的诱导及杀灭情况.结果 采用常用消毒剂消毒,发现仅75%乙醇作用1 min内可诱导金黄色葡萄球菌形成L型,L型菌仍具有DNA酶活性、溶血作用,凝同酶仍为阳性;在紫外线消毒中,在不干燥的条件下,即使杀灭照射剂量足够,仍不能达到完全杀灭细菌的目的.结论 采用乙醇消毒,应严格保证有效作用浓度和足够的消毒时间;采用紫外线消毒,应严格控制空气及物体表面的湿度,从而达到完全杀灭细菌的目的.
作者:莫浩联;肖骞;李波;张勇;侯红斌 刊期: 2009年第02期
目的 分析2007年广州市流行性感冒的流行特征.方法 监测来自广州市3家监测医院的流感样病例的漱口液或咽拭子标本,采用MDCK细胞进行病毒分离.通过红细胞凝集实验和红细胞凝集抑制实验进行鉴定;按0~、5~、15~、25~、60~以上5个年龄组分层随机抽取健康人群的血清标本,采用红细胞凝集抑制实验检测血清中的各型流感抗体.结果 全年共对1068份流感样病例标本进行了病毒分离,共分离出46株流感病毒,分离率为4.3%,其中H3N2型15株(32.6%),B(Yamagata)型27株(58.7%),B(Victoria)型4株(8.7%),未分离出H1N1型流感病毒株.60~组人群的病毒分离率高,为7.7%;健康人群血清中流感抗体的阳性率不高,高为10月份H3N2的抗体阳性率,为44%,低为3月份B(Yamagata)的抗体阳性率,仅为6.7%.结论 2007年广州市流感病毒的流行时间有明显的季节性,流感病毒的活动相对平缓,B(Yamagata)型流感病毒是2007年的优势株,主要是在夏季和25~岁组的人群中流行.流感对老年人的威胁大,有必要针对老年人加强流感的预防工作.
作者:陈艺韵;吴新伟;鲁恩洁;何丽娟;谢华萍;吴继彬;狄飚 刊期: 2009年第02期
目的 探索不同级别小鼠来源的骨髓细胞对体外制备优势DC2细胞的影响.方法 取SPF级和健康普通级C57BL/6小鼠股、胫骨骨髓细胞及脾细胞,设细胞因子诱导的实验组、低浓度GM-CSF对照组、无外源细胞因子对照组及脾细胞组.骨髓细胞采用GM-CSF,IL-4,Flt3L和SCF的不同细胞因子浓度和组合体外培养诱导.脾细胞培养2 d去除大部分淋巴细胞,第3天采用流式细胞术4色荧光标记法分析细胞表型,骨髓细胞诱导的各组同样于第3天采用流式细胞术分析细胞表型,比较不同级别小鼠骨髓细胞所诱导的DC2细胞的表型和比例.结果 SPF来源的小鼠骨髓细胞诱导的各组第3 d在CD11c+的DC细胞群中CD8α+DC2所占比例及不成熟DC2的比例均高于普通级小鼠,显示普通鼠来源的骨髓细胞更倾向于产生成熟的DC,不易诱导产生高比例的不成熟的DC2.对两种动物脾细胞DC2的分析结果表明.普通鼠脾脏中CD8α-MHC Ⅱ+的成熟DC1比例为75.58%,远远超过SPF鼠的30.60%.结论 小鼠的微生物级别可影响耐受性DC的诱导效果,采用SPF级小鼠来源的骨髓细胞体外制备优势DC2细胞效果优于普通级鼠,原因可能与普通鼠接触微生物较多,免疫系统更易于产生免疫应答而非免疫耐受有关.
作者:邓玉兰;彭延文;徐霖;阮奕满;曹开源;袁广卿;项鹏;李树浓 刊期: 2009年第02期
目的 构建pcDNA3.1(-)/NNMT(尼克酰胺-N-甲基化酶)真核表达载体并将其稳定转染到肝癌细胞系SMMC7721中.方法 采用PCR法从PGEX4T-1/NNMT重组质粒中克隆得到NNMT cDNA全长序列,并将扩增的cDNA片段与pMD19-T载体连接后亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(-)中.重组子经酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术将其导入到人肝癌细胞系SMMC7721,经G418筛选并建立稳定的转染细胞株,应用RT-PCR检测转染前后该细胞株NNMT基因的mRNA表达水平.结果 真核表达载体构建成功,经RT-PCR检测,重组质粒转染株的NNMT基因mRNA表达水平高于对照组,证实NNMT基因已经稳定转染到SMMC7721细胞中并得到表达.结论 成功建立了人基因NNMT的稳定转染细胞株,为进一步研究NNMT的功能奠定了基础.
作者:牟霞;陈瑶;王穗海;黄湘;赵玉梅;李明 刊期: 2009年第02期
目的 扩增编码Ⅳ型菌毛蛋白的嗜肺军团菌pilE基因,构建重组质粒pET32a(+)-pilE并在原核系统中表达,纯化Ⅳ型菌毛蛋白PILE,为进一步探讨Ⅳ型菌毛蛋白的作用及其作为军团病的诊断抗原提供实验基础.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)从嗜肺军团菌扩增得到pilE基因,构建重组质粒pET32a(+)-pilE,转化大肠杆菌BL21(DE3)并用聚合酶链式反应、限制性酶切分析、序列分析鉴定后,IPTG诱导表达PILE蛋白,用硫酸十二烷酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western印迹鉴定.使朋HisTrapTM HP亲和层析柱纯化Ⅳ型菌毛蛋白PILE.结果 扩增出430bp的pilE基因;构建了重组质粒pET32a(+)-pilE;表达并纯化出35700Mr的目标蛋白.结论 成功构建了嗜肺军团菌pilE基因的原核重组质粒,并在原核系统中得到了高效表达.成功纯化Ⅳ型菌毛蛋门PILE.
作者:徐佳楠;陈建平 刊期: 2009年第02期
目的 调查分析社区糖尿病病人血糖控制及慢性并发症的情况,为糖尿病的社区防治和慢性病管理提供依据.方法 以随机方式调查六家社区卫生服务中心2007年11月至2007年12月在社区门诊随诊的糖尿病病人共194人,检测其空腹血糖和餐后2 h血糖,并调查糖化血红蛋白(HbA,c)的检测情况和慢性并发症的发生情况.结果 随机抽查的194个病人中,血糖控制达到良好的只占24%;只有23%的病人在半年内检测过糖化血红蛋白(HbA1c),糖化血红蛋白(HbA1c)达到良好的病人不足30%;在社区诊治的糖尿病病人的慢性并发症患病率较低,只有5.7%~22.7%.结论 社区糖尿病病人血糖控制不理想,需要加强社区卫生服务中心对糖尿病病人的科学管理和治疗.有效控制血糖和加强慢性并发症的筛查是今后社区糖尿病病人管理的重点.
作者:钟庆文;吴俊伟;吴海云;王少辉;何如英;廖志红 刊期: 2009年第02期
目的 构建O139群霍乱弧菌TLC、CTX、RTX基冈簇缺失株.方法 PCR扩增TLC上游片段(TLC up)、RTX下游片段(RTX down),克隆入pu18中,再在两者间插入氯霉素抗性(Cm)基因,获得重组质粒pUC18-TLC up-Cm-RTX down.酶切回收TLC up-Cm-RTX down片段,克隆入自杀质粒pDS132,构建重组自杀质粒pDS132-TLC up-Cm-RTX down.通过接合将重组自杀质粒转入O139群霍乱弧菌ZJ199693,20%蔗糖选择培养基(Cm抗性)筛选TLC、CTX、RTX基凶缺失株.结果 PCR、酶切证明重组自杀质粒pDS132-TLC up-Cm-RTXdown构建正确.PCR证实0139群霍乱弧菌ZJ199693 TLC、CTX、RTX毒力基因簇成功缺失.结论 成功缺失O139群霍乱弧菌ZJ199693TLC、CTX、RTX基因簇,为进一步研究其功能和疫苗构建打下基础.
作者:周妍妍;王凤平;于礼;阚飙;芮勇宇 刊期: 2009年第02期
目的 了解广东省各级疾病预防控制中心(CDC)和医疗机构二级生物安全实验室现状,为进一步加强和规范广东省生物安全实验室管理提供依据.方法 设计<生物安全实验室状况调查表>,对来自全省74家疾病预防控制中心和183家医疗机构的生物安全实验室管理和技术人员进行调查,并对调杳结果进行统计分析.结果 广东省大多数二级实验室在管理制度、硬件设备、人员安全意识等方面与生物安全管理的要求尚有一定差距:疾病预防控制中心的二级生物安全实验室整体状况优于医疗机构.结论 广东省医疗机构和疾病预防控制中心的二级生物安全实验室现状总体需要改善.今后应尽快制订适合我省实际情况的管理办法和管理准则,使医疗卫生机构普遍树立实验室生物安全的主动防护意识,完善实验室基础建设,加强监督力度,建立健全实验室生物安全的管理体系.
作者:宋烨;赵卫;黄毓文;吴声穗;申健;王锡玲;周奕佚;区思玲;邹勇;邹梦晨;徐庆锋 刊期: 2009年第02期
目的 探讨阿胶对诱导排卵助孕周期子宫内膜容受性的作用.方法 将56例68周期在诱导排卵周期中接受夫精人工授精(AIH)或指导同房助孕治疗的患者随机分为A、B两组,A组为对照组,B组自月经周期第7天开始给予阿胶口服治疗.每天用生胶量30g,至下次月经或证实临床妊娠为止.结果 月经周期第7天至排卵日的子宫内膜厚度增长值A组为(3.10±1.32)mm,B组为(3.88±1.54)mm,两组之间差异有统计学意义(P<0.05).两组子宫内膜厚度每日增加数分别为(0.49±0.23)mm和(0.62±0.26)mm,差异有统计学意义(P<0.05).阴道彩色B超监测排卵日的子宫动脉血流阻力指数和搏动指数B组较A组明显下降(P<0.05).结论 阿胶能增加诱导排卵助孕周期子宫内膜的厚度,加速子宫内膜的增长并改善子宫动脉血供.
作者:苏念军;李冰;王芳;全松;杨翠莲;单冬红;邢福祺 刊期: 2009年第02期
目的 研究湖南省长沙及湘两泡状带绦虫分离株线粒体细胞色素c氧化酶第I亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)的遗传变异情况,并用pcox1序列重构泡状带绦虫与其他带科绦虫的种群遗传关系.方法 应用聚合酶链反应(PCR)扩增泡状带绦虫虫株的pcox1,应用ClustalX1.81程序对序列进行比对,然后用Phylip3.67程序MP法和Mage4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建大似然树;同时利用DNAstar5.0中的Megalign程序进行同源性分析.并与GenBankTM中已知泡状带绦虫相应基因序列进行比较分析.结果 所获得的pcox1序列长度一致,均为343 bp,与GenBankTM公布的带科绦虫序列进行比较分析表明,湖南长沙分离株1和湘两分离株5与已知泡状带绦虫相应基因的相似性分别为99.4%和99.7%,与其它带科绦虫的相似性均小于90.0%;湖南长沙1和湘西分离株5与已知泡状带绦虫相应基因遗传距离分别为0.006和0.003,与其他带科绦虫的遗传距离均大于0.100.种系发育树表明,2个分离株与已知泡状带绦虫位于同一分枝,Bootstrap值在97%以上.结论 由于泡状带绦虫pcox1序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记,研究结果为进一步研究泡状带绦虫的群体遗传结构奠定了基础.
作者:刘国华;戴荣四;赵光辉;林瑞庆;刘伟;刘毅;朱兴全 刊期: 2009年第02期
目的 探究mCD99L2基阂沉默对小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞生物学特性的影响.方法 采用MTT法和流式细胞仪检测mCD99L2基凶沉默前后干扰组A20-LV-mCD99L2和未十扰组A20细胞的增殖率和细胞周期;Transwell法测定两组细胞的体外侵袭能力;采用裸鼠与BALB/c鼠皮下成瘤实验观察比较两组细胞在体内的成瘤时间和成瘤率.结果 MTT法显示干扰组A20-LV-mCD99L2增殖率为(0.61±0.12),低于未干扰组增殖率(0.75±0.20),差异有统计学意义(P=0.000);干扰组A20-LV-mCD99L2处于G2期的细胞比例为(10.58±4.97),高于未干扰组(3.33±1.31),差异有统计学意义(P=0.009);Transwell法显示干扰组A20-LV-mCD99L2运动能力较未干扰组下降.裸鼠皮下成瘤时间干扰组(13.33±4.63)d长于未干扰组(9.50±2.90)d,成瘤率均为100%;BALB/c鼠皮下成瘤时间干扰组(10 d)长于未干扰组(7.0±0.82)d,成瘤率干扰组为14.3%,显著低于未干扰组(100%).差异有统计学意义(P=0.000).结论 mCD99L2基因沉默可抑制小鼠B淋巴瘤细胞系A20细胞的生物学行为,降低其在体外的增殖能力和运动能力,显著降低其在BALB/c鼠体内的成瘤率.
作者:陈小艳;刘芳;沈丽佳;李慧灵;张弓;黄作平;王辛;赵彤 刊期: 2009年第02期
目的 采用标准近交系小鼠C57BL建立麻痹性贝类毒素(PSP)检测方法.为贝类食品中该毒素的检测提供可使用的实验动物品系资料.方法 对近5年广州及深圳发生疑似PSP中毒的样品同时采用C57BL小鼠单位法和免疫学试剂盒法进行检测,分析二者结果的一致性.结果 C57BL小鼠单位法与免疫学试剂盒检测法这一欧盟的标准的检测方法相比,结果具有明显的关联性,关联系数r=0.86.结论 C57BL小鼠单位法可用于确定贝类食品是否污染PSP的检测.
作者:周颖;朱伟;张全新 刊期: 2009年第02期
目的 筛选SARS病毒S蛋白的B细胞表位.方法 使用SARS-CoV S DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,获得SARS病毒S蛋白的免疫血清.人工合成包含169条部分氨基酸序列重叠的SARS-CoV S蛋白的多肽库.将多肽片段包被ELISA板,利用免疫小鼠血清,通过抗体结合试验来筛选SARS病毒S蛋白的线性B细胞表位.并将筛选结果与使用B细胞表位分析软件预测的结果进行比较.结果 使用重叠肽合成法筛选到SARS-CoV蛋白两条多肽片段S335-352和S442-458,能与免疫动物血清特异性结合,与使用Bcipep数据库预测B细胞表位的结果相一致.结论 鉴定了两个新的SARS病毒S蛋白B细胞表位.
作者:黄俊;吴长有 刊期: 2009年第02期
目的 探讨小儿急性轮状病毒肠炎的脱水程度、电解质、渗透压和阴离子间隙(AG)的变化情况以及相互间的关系.方法 150例患儿均在治疗前作血气分析,并作血清Na+、K+、Cl-、HCO3-和渗透压的测定,AG按Na+-(Cl-+HCO3-)计算,所有患儿均采用ELISA方法检测大便轮状病毒抗原.结果 脱水程度以轻中度为主,占89.3%,代谢性酸中毒、高氯血症和低钾血症分别为76.7%、14.6%和28%.酸中毒随脱水而加重(χ2=34.2,P<0.01).渗透压以等渗为多(69.3%),低渗次之(25.3)%,高渗仅5.4%,渗透压与血Na+浓度呈正相关(χ2=297,P<0.01).正常AG型代谢性酸中毒占60.8%.AG与血Na+呈正相关,AG水平随脱水程度的加重而升高(χ2=9.828,P<0.01).结论 轮状病毒肠炎易导致轻至中度脱水、低钾血症和代谢性酸中毒:以等渗性脱水和正常AG型代酸为主.及时纠正脱水能避免代谢性酸中毒加重以及有效减少高AG型代酸的发生.
作者:朱卫东;朱翠平 刊期: 2009年第02期
目的 构建人PLUNC(palate,lung and nasal epithelium clone)基因启动子区C-1888T SNP位点不同单倍型荧光素酶报告基因表达载体.方法 利用PCR技术得到1888位点不同基因型的PLUNC基因启动子区目的片段,将其分别插入到pMD18-T载体和pGL3-enhancer荧光素酶报告基因载体中并测序.结果 成功构建了人类PLUNC基因C-1888T SNP位点上的2种不同纯合子基因型(CC型和TT型)的荧光素酶报告载体(pGL3-enhancer-T型和pGL3-enhancer-C型),且测序得以证实.结论 成功构建出的荧光素酶报告载体,为研究PLUNC基因不同的1888SNP位点能否调控不同的PLUNC基因表达提供了基本实验条件.
作者:刘贝娜;何英;王爽 刊期: 2009年第02期
目的 探讨8号染色体短臂(8p22)的杂合性缺失(LOH)在慢性粒细胞白血病(CML)发生和演变中的作用.方法 采用多聚酶链反应(PCR)扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色技术,检测8p22上D8S511和D8S258位点的LOH.结果 22例慢性期和8例加速期CML病人在8p22 D8S511和D8S258位点均未发生LOH.4例急变期CML病人在D8S51 1位点上均未检出LOH,仅1例在D8S258位点发生LOH.5例正常对照组均未发生LOH.结论 8p22上D8S511位点的LOH与CML各期的发生和演变无关;D8S258位点的LOH与CML慢性期和加速期的发生和演变无关,但可能与CML急变有关.
作者:王忠英;邓小燕;吴晓蔓;郑小玲;赖毅妍 刊期: 2009年第02期
受地理环境、气候条件、经济水平和卫生习俗的影响,热带地区的骨科疾病谱有其独特性.由各种病原生物引起的感染性骨性关节病的患病率较高;因工伤及交通事故高发,多发骨折后的延迟愈合、不愈合或骨髓炎亦十分常见.本文对热带地区常见的骨科疾病进行了综述.
作者:郭祁 刊期: 2009年第02期
本文通过对恶性疟原虫变异抗原基因var基因家族的相关变异机制,在7号染色体var基因区域(pfemp1)和抗药基因pfcrt的特定区域的相关研究报道,以及变异var基因与妊娠感染疟疾的相关致病机制进行综述.
作者:李节;何永蜀;杨照青 刊期: 2009年第02期