学术投稿

食品过敏原指纹图谱快速检测研究(二)--河虾总蛋白2-DE指纹图谱重现性分析

吴海强;余晓;刘志刚

关键词:食品过敏原, 指纹图谱, 2-DE, 快速检测, 重现性
摘要:目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析河虾总蛋白2-DE(2-Dimension Electrophoresis)指纹图谱的重现性,确定食品过敏原指纹图谱快速检测的可行性.方法新鲜河虾,去头和虾皮,搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干后为初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm和13cm两种不同厂家、规格的非线性胶条(pH=3~10)溶胀上样,平衡后转移胶条在不同厂家、型号的电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),银染和考染后扫描图像进行计算机分析处理.结果2-DE谱图显示河虾总蛋白分布较广,其高丰度蛋白主要是一些大分子量酸性蛋白.不同电泳系统,选用不同规格的IPG胶条所得河虾总蛋白2-DE指纹谱图具有良好的重现性.银染灵敏度较高,更适合食品过敏原指纹图谱的快速检测.结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱具有良好的重现性和稳定性,可以用于食品过敏原的快速检测.
热带医学杂志相关文献
  • 妇科门诊泌尿生殖系统支原体培养及药敏试验3750例结果分析

    目的了解支原体引起的泌尿生殖道感染的状况以及对药物的敏感性.方法采用支原体培养鉴定和药敏试剂盒,对3 750例泌尿生殖系感染患者进行支原体培养鉴定以及体外药物敏感性试验.结果支原体阳性的有2 868例(76.48%),其中解脲支原体阳性1 866例(49.8%).1 935例支原体对交沙霉素敏感,敏感率为99.1%;克林霉素敏感性差,其敏感率为10.8%.结论支原体为非淋菌性尿道炎的主要病原体,对多种抗生素产生耐药性,临床治疗应尽可能地进行支原体培养及药敏试验.

    作者:邹明荣;陈育贤;林常瑜 刊期: 2006年第02期

  • 纪念血吸虫病在中国被发现100周年--解放前中国血吸虫病研究简况

    1905年Logan[1]从1例湖南常德一痢疾患者的粪便里检出了血吸虫虫卵,确诊了我国第1例血吸虫病人.1924年,Faust等[2]在浙江省苏州、嘉兴进行日本血吸虫病人群感染率调查,并出版了专著.

    作者:吴忠道;吕志跃;张双民;王丽;胡斐;Florian Rubelt 刊期: 2006年第02期

  • 泛影葡胺肾盂灌注研究乳糜尿的发病机理及治疗

    目的探讨乳糜尿的发病及泛影葡胺低压肾盂灌注治疗乳糜尿的机理.方法通过对乳糜尿患者和无乳糜尿患者行膀胱镜逆行插管灌注,观察两者肾脏淋巴管返流情况,研究乳糜尿与淋巴管的关系.结果60例(95.2%)有不同程度造影剂返流,显出肾内淋巴管的破裂口.灌注1次乳糜试验转阴48例(76.2%);2次转阴12例(19.0%);余3例经2次灌注后无效改用其它方法治疗.对照组36例未见复方泛影葡胺返流.结论乳糜尿的发病与肾内淋巴管的破裂有关,可通过逆行插管泛影葡胺低压肾盂灌注治疗.

    作者:王忠;赖玉连 刊期: 2006年第02期

  • 白喉杆菌异染颗粒Neisser法染色的新探讨

    目的提高教学质量,探讨如何增强异染颗粒染色,提高标本的清晰度.方法按常规接种白喉杆菌于甘油鸡蛋或吕氏培养基上.用传统的奈瑟法(Neisser)及改进法(吕氏美兰+俾褐麦斯),染色步骤、时间按常规.用普通显微镜观察两种方法每张标本的染色情况及异染颗粒.用德国KONTRON IBAS 2.0全自动图像分析仪随机抽查两种方法染色标本的异染颗粒数目.结果传统奈瑟法的异染颗粒数目相对少些,着色浅.改进法染色的标本涂片均可见明显异染颗粒,数目相对比传统奈瑟法多,着色深.结论用改进的奈瑟(Neisser)染色法染色白喉棒状杆菌,异染颗粒数量多,染色效果优于传统奈瑟法.

    作者:刘长秀;罗海华;周红;江丽芳;李彩霞;郑树森 刊期: 2006年第02期

  • 99Tcm-HL91 SPECT/CT显像检测高血压脑出血乏氧组织的初步观察

    目的探讨乏氧组织显像剂99Tcm-4,9-二氮-2,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟(HL91)SPECT/CT脑显像检测高血压脑出血出血灶周围乏氧组织的应用价值.方法22例高血压脑出血患者,和6例正常人均进行99Tcm-HL91 SPECT脑显像,所有研究对象同时进行同机CT扫描.结果22例患者中18例阳性,阳性率为77.78%.4例阴性者分别是3例出血量<15 ml的小量脑出血和1例出血量为23.5 ml,起病43 d行乏氧检查者.对照组6例均为阴性.乏氧区位于出血区周围,少量出现在血肿内,乏氧体积大小与出血量有正相关关系.结论99Tcm-HL91 SPECT显像可较好地显示高血压脑出血病病灶周围的乏氧组织,乏氧体积与出血量有密切关系,可应用于指导临床治疗.

    作者:黎冠东;黄斌豪;李冰华;黄焕章;钟建新;唐开雄;陈学中;赖穗翩 刊期: 2006年第02期

  • 多宿主多虫种的并殖吸虫疫源地在福建省三元区发现

    目的通过对福建省三明市三元区并殖吸虫虫种和各阶段宿主及其感染率、感染度研究,调查三元区并殖吸虫疫源地.方法捕捉螺蛳、溪蟹和野猫粪标本,按常规方法进行并殖吸虫囊蚴、尾蚴和虫卵的检查、留置观察和感染动物试验.根据病人线索进行人群感染率的调查,并了解当地地理、环境、气候.结果检查放逸短沟蜷654只、洱海螺新种846只、拟钉螺(待定种)135只和235只沼螺,只在1只洱海螺中检出并殖吸虫尾蚴,检出阳性率为0.12%.充当第二中间宿主的福建华溪蟹和华南三角肢溪蟹新种携带有卫氏并殖吸虫二、三倍体型,斯氏狸殖、泡囊狸殖、三平正并殖吸虫囊蚴,蟹的感染率为44.28%,平均每只蟹和每克蟹组织携带囊蚴分别为24.90和2.47;人群皮试阳性率为8.64%(21/243),皮试阳性者作血清抗体检测,阳性率为23.81%(5/21);3份野猫粪标本有2份检出并殖吸虫虫卵和孟氏裂头绦虫虫卵、缩小膜壳绦虫虫卵及一种棘口吸虫虫卵.结论三元区为以斯氏狸殖吸虫为主的肺吸虫病高度疫源地,同时也是孟氏裂头绦虫、缩小膜壳绦虫及一种棘口吸虫的自然疫源地.

    作者:姜闽;李友松;林陈鑫;林集焕;张世阳;许龙善;程由注;夏同莲;李莉莎 刊期: 2006年第02期

  • 清远市HIV/AIDS哨点监测及吸毒人员高危行为调查分析

    目的了解清远市哨点监测人群HIV/AIDS流行现状及吸毒人员的高危行为特征,为今后预防和控制艾滋病流行提供可靠科学依据.方法从2000年开始对艾滋病高危的性病人群和吸毒人群进行监测,对吸毒人员进行流行病学调查,将哨点监测和流行病学调查资料进行统计分析.结果我市目前哨点监测人群HIV/AIDS尚处于低度流行期,但感染HIV人数逐年呈倍数增加;吸毒人员的高危行为普遍,存在引起HIV流行的高危行为.结论应及早对性病人群和吸毒人群开展健康宣传教育和减少危害的行为干预等综合性防制措施,以有效阻止高危人群向一般人群传播HIV.

    作者:李昌海;朱旭豪 刊期: 2006年第02期

  • 黑胸大蠊若虫免疫兔血清对美洲大蠊若虫cDNA表达文库的筛选及克隆分析

    目的从美洲大蠊若虫cDNA文库中筛选黑胸大蠊抗原相关基因,以期获得黑胸大蠊有潜在药用价值的蛋白质、多肽成分.方法用黑胸大蠊若虫免疫兔血清筛选美洲大蠊若虫cDNA文库,对阳性克隆进行PCR鉴定和序列测定,通过国际互联网进行核苷酸序列的同源性分析及编码蛋白质的结构分析和功能预测.结果经三轮复筛,从多个持续阳性克隆中挑选出3个进行测序、分析,其中N1克隆为新基因,Score<50,命名为Parcxpwnx01,GenBank登录号为AY838802.该基因编码231个氨基酸,初步预测该蛋白可能为一具信号转导功能的跨膜蛋白.N2克隆与美洲大蠊核蛋白体16S RNA基因高度同源,N3与黑胸大蠊线粒体DNA高度同源.结论免疫筛选获得与黑胸大蠊若虫抗原相关的基因克隆,其编码的蛋白结构和功能有待进一步研究.

    作者:吴仕筠;汪世平;徐绍锐;钟飞;余俊龙;李文凯;曾少华;肖小芹;罗臣 刊期: 2006年第02期

  • 转基因疟原虫的研究进展

    疟原虫的转染过程是将克隆有外源基因序列的质粒导入疟原虫细胞中,转化入细胞中的质粒或以游离体的形式存在,或插入到疟原虫的染色体中.随着转基因技术的逐渐成熟,近10年来,已经在恶性疟原虫[1](Plasmodium falciparum,P.f)、伯氏疟原虫[2](Plamodium berghei,P.b)、偌氏疟原虫[3](Plasmodium knowlesi,P.k)等疟原虫中实现了外源基因的转染.本文就疟原虫转染的载体以及转基因疟原虫的应用两方面作简要综述.

    作者:郝文波;李明 刊期: 2006年第02期

  • 猪蛔虫的生活史及体外培养研究进展

    猪蛔虫病对养猪业的危害严重.蛔虫体外培养技术即是人工模拟宿主体内环境条件,从而使蛔虫在离开宿主状态下完成生活史中的部分或全部的发育阶段.通过该技术可对其生活史、不同发育阶段的形态变化、感染机制及基因功能等方面进行深入研究,对寄生虫学发展意义重大.本文主要阐述不同学者对蛔虫生活史的看法及培养过程中培养条件变化,如pH、气相、培养基化学成分的变化,对虫体生长发育的影响.但目前对蛔虫体外培养的研究,还处于探索阶段,适培养基、气相及pH值的筛选还有待进一步的研究.

    作者:陈宁;黄翠琴;朱兴全 刊期: 2006年第02期

  • 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的肠IEL持续性免疫应答

    目的采用可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂制备弓形虫复合黏膜疫苗,观察经滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的肠上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IEL)免疫应答及持续时间,探讨其抗弓形虫感染的作用机制.方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以免疫原性好的STAg(20 μg/只)为抗原和CT(1μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻.滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死小鼠.制备肠IEL细胞悬液,计数并涂片;免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测CD4+T、CD8+T细胞亚群水平.结果免疫后肠IEL显著增生,第2周达高峰,第1周至第4周(P<0.01)高于对照组.其中以CD8+T细胞增生为主,CD8+T细胞水平第2周达高峰,第1周至第6周增高显著(P<0.01),CD4+T细胞也略有增生,第2、3周(P<0.05)有显著性,CD4+/CD8+比值倒置,第1、2周明显低于对照组(P<0.05).结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导肠IEL免疫应答,且可持续较长时间,在预防弓形虫感染中起重要作用.

    作者:殷国荣;孟晓丽;王海龙;石蓉;刘娟娟;管志玉 刊期: 2006年第02期

  • 培哚普利及伊贝沙坦联合治疗对原发性高血压左室肥厚的逆转作用

    目的探讨培哚普利、伊贝沙坦、两者联合用药对原发性高血压(EH)患者左室肥厚(LVH)的干预作用.方法EH伴有LVH患者112例随机分成A组(培哚普利4 mg/d 37例)、B组(伊贝沙坦150 mg/d,38例)和C组(培哚普利4 mg/d 37例,加伊贝沙坦150 mg/d).治疗3周时若血压≥160/95 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),则培哚普利和伊贝沙坦剂量分别增加至8 mg/d和300 mg/d.总疗程共6个月,治疗前后彩色超声多普勒检测左室相关数据,计算左室重量指数(LVMI)和行24 h动态血压监测.结果①3组治疗前后比较均能显著降低LVMI(P<0.01).其中A组和B组LVMI的降低差异无显著意义(P>0.05),但C组LVMI降低较A组、B组两组更为显著,差异具有显著性意义(P<0.01).②分别比较3组治疗前24 h平均收缩压、平均舒张压差异无显著性意义(P>0.05),治疗后24 h平均收缩压、平均舒张压均分别较治疗前显著降低(P<0.01),但治疗后3组间比较均无明显差别(P>0.05).结论培哚普利、伊贝沙坦均能逆转EH患者LVH,培哚普利和伊贝沙坦联合用药疗效更为显著,这种协同作用与降压效应无关.

    作者:黄仕洲;刘明 刊期: 2006年第02期

  • HPLC法和FPIA法检测卡马西平血药体积百分比的比较研究

    目的高效液相色谱法(HPLC)和荧光偏振免疫法(FPIA)测定血清中卡马西平体积百分比的比较研究.方法收集广州市精神病医院服用CBZ的21例癫痫患者血样.用本实验室已经建立的HPLC法和FPIA法分别检测卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比,采用配对t检验考察两种方法分别测定卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比有无显著性差异.结果HPLC法与FPIA法检测卡马西平对照品甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清中卡马西平体积百分比无显著性差异(t值分别为-1.009、0.767,P值分别为0.325、0.452);检测患者血清中卡马西平血药体积百分比有显著性差异(t=4.919,P<0.05),FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比较HPLC法偏高.结论FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比过程中,CBZ的活性代谢产物环氧化卡马西平(carbamazepine-10,11-epoxide,CBZ-E)可能对FPIA法测定CBZ有干扰,导致结果偏高.

    作者:王广发;熊莺;刘伟忠 刊期: 2006年第02期

  • 蚕、蛹过敏性疾病及其变应原研究进展

    蚕分桑蚕(家蚕)和山蚕(野蚕)两大类,两种蚕及其所产生的蚕丝都能引起过敏反应.除蚕丝外,桑蚕在整个生活周期产生的物质,如蚕尿、蚕蛹、蚕蛾鳞屑等也可诱发过敏反应.蚕丝是动物蛋白,主要由丝素(Fibroin)和丝胶(Sericin)组成.前者约占70%,亦有抗原性,但后者是蚕丝的主要变应原成分,引起由IgE作用机制介导的过敏反应.蛹(蚕茧)是幼虫(蚕)和成虫(蚕蛾)的中间阶段,我国养蚕地区有食用蚕蛹的习惯,蚕蛹食入过敏可能为我国特有的情况.蛹变应原主要为82 kDa,79 kDa及30 kDa的蛋白质,其中分子量30 kDa是蚕蛹的主要变应原.

    作者:练玉银;刘志刚 刊期: 2006年第02期

  • SARS危机一年后对不同人群心理影响的研究

    目的了解广州地区SARS危机1年后对不同人群心理的影响.方法采用一般情况调查表、IES-R、SAS、SDS和CSQ对18名患SARS康复医护人员(A组),31名SARS医护人员非SARS患者(B组),40名社区人群(C组)进行调查.结果I、A、H因子值方面,A、C组均小于B组(P<0.01),男性低于女性(P<0.05);A组SDS得分高于B、C组(P<0.05),SAS得分低于B、C组(P<0.01);A组CSQ的合理化因子分量表大于B、C组,A、C组自责因子分量表大于B组.结论SARS患者比其他人群有更严重的抑郁症状,SARS一线医护人员和社区人群有更严重的焦虑;在应付方式上,A组表示出一种矛盾的心态和两面性的人格特点;SARS一线医护人员和女性受到SARS的影响程度更为严重.

    作者:杨翠华;王艳芳;潘集阳;温盛霖 刊期: 2006年第02期

  • 深圳东部地区地中海贫血发病率的调查研究

    目的对深圳东部地区本地居民、外来人群进行地中海贫血的调查研究.方法采用日本Sysmex SE-9000全自动血细胞分析仪,运用红细胞脆性一管定量法和血红蛋白电泳初筛法,对可疑阳性标本进行α-地中海贫血基因分析和β-地中海贫血基因分析.结果本地居民350人,异常基因携带者36例,其中β-地中海贫血异常基因12例,α-地中海贫血异常基因23例,双重杂合者1例,发病率10.28%.外来人群349人,异常基因携带者4例,β-地中海贫血异常基因1例,α-地中海贫血异常基因3例,发病率1.14%.结论本地居民发病率比外来人群发病率高9倍.

    作者:张松;邹汉良;谭萍;李芳芳;甘志彪 刊期: 2006年第02期

  • 幽门螺杆菌CagA抗体与胃十二指肠疾病的相关性探讨

    目的探讨本地区表达细胞毒素相关蛋白A(CagA)的幽门螺杆菌(HP)与胃十二指肠疾病的关系.方法将127例消化系统疾病患者分为四组.采用金标免疫斑点法检测各组患者血清中HP抗体,采用间接ELISA法测定各组CagA-IgG,并作组间的比较.结果慢性胃炎(CG),十二指肠溃疡(DU),胃溃疡(GU),胃癌(GC)患者及无症状组(AG)血清中HP抗体的检出率分别为74.2%,85.7%,81.5%,77.8%,61.6%,CagA-IgG的检出率分别为61.3%,66.7%,63.0%,70.4%,34.0%.经χ2检验显示,在DU与GU组,HP及CagA+HP感染率均明显高于AC组(P<0.05、P<0.01),而CG及GC组与AC组比较,HP感染率无显著性差异(P>0.05),而CagA+HP感染率仍有显著性差异(P<0.01).各胃肠疾病组间的HP及CagA+HP感染率均无显著性差异(P>0.05).结论在广州地区,仅DU与GU组的HP感染率高于AC组,而CagA+HP感染率在CG、DU、GU与GC组,均高于AC组,可见CagA-IgG的表达情况,可为胃十二指肠疾病的致病因素与诊疗、防治提供依据,但不能作为区分CagA+HP感染所致胃十二指肠疾病的单一指标.

    作者:陈小辉;雷秀霞;徐邦牢 刊期: 2006年第02期

  • 广州市1992~2004年人间布鲁氏菌病监测分析

    目的掌握广州市人间布鲁氏菌病流行规律及分布状况,为今后制定防治策略提供科学依据.方法1992~1994年采用试管凝集试验(SAT),每年监测一次,以后每2~3年覆盖一次.1997年开始采用虎红凝集试验作为筛选,阳性者血清送广东省疾病预防控制中心做进一步诊断.结果1992~2004年血清学共检测19 619,阳性14人,阳性率为0.07%;感染病例主要分布于番禺区;男女均可感染;以兽医、饲养员等职业较多;感染年龄在20~50岁.结论经过多年努力,广州市布鲁氏菌病达到稳定控制标准,其综合防治策略取得显著效果,但仍要坚持长期的人畜布病监测.

    作者:冯月菊;刘小宁;潘志明;任文锋;高雨藩;郭荣同 刊期: 2006年第02期

  • 从噬菌体随机肽库中筛选SARS病毒N蛋白表位模拟肽的研究

    目的获得具有生物学活性的SARS N蛋白的模拟肽.方法以抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体作为固相筛选分子,免疫筛选噬菌体随机十二肽库,并采用夹心ELISA、竞争抑制试验鉴定阳性克隆.结果经噬菌体富集后,从随机筛选的各46个克隆中得到N蛋白的2个不同表位,即由ELISA鉴定出单克隆抗体C008 35个阳性克隆,确定氨基酸序列GXLXTPXXXXGT为SARS N蛋白的一个表位;单克隆抗体C039 41个阳性克隆,确定氨基酸序列TTLPXXXXAXXX为SARS病毒N蛋白的另一个表位.结论用噬菌体随机12肽库成功筛选得到SARS N蛋白的2个不同模拟表位,为用SARS表位去探索其病毒的结构及疫苗的研制创造了条件.

    作者:杨海燕;李妍;宁云山;董文其;李明 刊期: 2006年第02期

  • 东莞市厚街镇2003年法定报告传染病疫情分析

    目的为进一步了解东莞市厚街镇法定报告传染病流行情况,为传染病预防、控制策略和措施提供科学依据.方法对2003年厚街镇法定报告传染病发病情况进行统计分析.结果2003年厚街镇共报告法定报告甲、乙类传染病2 303例,报告病例数较2002年增加22.5%,年报告发病率为635.18/10万,流动人口报告发病率明显高于本地人口.呼吸道传染病报告发病数居首位,其次是血源及性传播传染病,肠道传染病居第三;发病顺位居前6位的传染病分别是肺结核、淋病、病毒性乙型肝炎、细菌性痢疾、麻疹、梅毒,但本地人口与流动人口中报告发病率居前6位传染病病种相同但发病顺位有所不同,流动人口肺结核、淋病、细菌性痢疾、麻疹、梅毒等病种发病率显著高于本地人口.结论应将呼吸道传染病肺结核、麻疹,血源及性传播传染病中的病毒性乙型肝炎、淋病、梅毒,肠道传染病细菌性痢疾列为防制重点,针对不同人群采取综合预防控制措施,降低传染病发病率.

    作者:黄兴民;陈金燕;罗文勇 刊期: 2006年第02期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会