王广发；熊莺；刘伟忠
目的制备编码人Vasostatin-1基因片段,利用大肠杆菌表达重组Vasostatin-1蛋白.方法根据人Vasostatin-1基因序列,设计、合成3对PCR引物,利用PCR合成法制备编码Vasostatin-1的DNA.将Vasostatin-1基因定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,行酶切和DNA测序鉴定,并将构建的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).用IPTG诱导BL21(DE3)中导入的Vasostatin-1基因的表达,行SDS-PAGE分析.用GSTrap亲合柱纯化重组Vasostatin-1蛋白.结果用PCR合成法制备了228 bp的Vasostatin-1基因片段,并成功构建了重组质粒pGEX-4T-Vasostatin-1,DNA测序显示Vasostatin-1 DNA序列和插入位点正确.经IPTG诱导,特异表达出以包涵体形式存在36 kDa的重组Vasostatin-1蛋白.结论制备、克隆了人Vasostatin-1基因片段,并在大肠杆菌中表达出重组Vasostatin-1蛋白.
作者：符永恒；单志新；余细勇；林秋雄；邓春玉；郑猛 刊期： 2006年第02期
目的获得具有生物学活性的SARS N蛋白的模拟肽.方法以抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体作为固相筛选分子,免疫筛选噬菌体随机十二肽库,并采用夹心ELISA、竞争抑制试验鉴定阳性克隆.结果经噬菌体富集后,从随机筛选的各46个克隆中得到N蛋白的2个不同表位,即由ELISA鉴定出单克隆抗体C008 35个阳性克隆,确定氨基酸序列GXLXTPXXXXGT为SARS N蛋白的一个表位;单克隆抗体C039 41个阳性克隆,确定氨基酸序列TTLPXXXXAXXX为SARS病毒N蛋白的另一个表位.结论用噬菌体随机12肽库成功筛选得到SARS N蛋白的2个不同模拟表位,为用SARS表位去探索其病毒的结构及疫苗的研制创造了条件.
作者：杨海燕；李妍；宁云山；董文其；李明 刊期： 2006年第02期
目的调查广州地区鼠、蚤分布情况及其感染自然疫源性疾病状况.方法夜笼法.对捕获鼠类及蚤类进行分类鉴定,采用鼠疫IHA法检测鼠疫F1抗体,用直接免疫荧光法(IFAT)检测HFRS抗原,用间接免疫荧光法检测HFRS抗体,用显微凝集试验检测钩端螺旋体抗体.结果广州地区鼠类优势种是褐家鼠,占70.97%,其次是黄胸鼠.鼠类染蚤率为12.45%,鼠体表寄生蚤优势种为印鼠客蚤,占98.20%,主要宿主是黄胸鼠.未查出鼠疫F1抗体;鼠类HV带毒率为5.4%,褐家鼠带毒率较高,为6.1%;鼠血清钩端螺旋体抗体阳性率为0.97%.结论广州未发现鼠间鼠疫,但自然疫源性疾病的流行因素仍广泛存在.应加强监测,灭鼠灭蚤,防止自然疫源性疾病流行.
作者：潘志明；周端华；陈小霜；罗雷；郭荣同；高雨藩；唐锡美；刘小宁 刊期： 2006年第02期
目的优化人芽囊原虫(Blastocystis hominis)在RPMI1640培养基中的培养条件.方法将B.hominis接种至RPMI1640培养基中,观察酸碱度、接种量、血清种类、浓度、温度、空气中氧与粪便标本的选择对B.hominis生长的影响.结果在RPMI1640培养基中,pH7.5、接种量200 000细胞/管、20%小牛血清,37℃,加入青霉素、链霉素为佳培养条件.结论在RPMI1640中,接种以B.hominis阳性(颗粒型为主)的血粘液便,加入20%小牛血清,青霉素、链霉素,在pH7.5于37℃条件下厌氧培养,每6 d转种一次,可达到长期培养B.hominis的目的.
作者：答嵘；乔继英；王伟；成少利；卢朝辉；张旭 刊期： 2006年第02期
目的了解中山市健康人群麻疹免疫状况.方法对242人(其中常住人群155人,外来流动人群87人,按防疫人群监测共分三组(2～4岁、6～8岁、13～15岁),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测麻疹IgG抗体滴度.结果中山市健康人群麻疹抗体总阳性率为92.1%,其中中山市常住人群麻疹抗体阳性率为98.1%,外来流动人群阳性率为81.6%,麻疹抗体阳性率相差有极显著性意义(χ2=31.00,P＜0.001).本地常住人群和外来流动人群麻疹抗体免疫水平抗体滴度分别为1181.1、270.2,相差也有极显著性意义(t=5.54,P＜0.01).结论中山市健康常住人群麻疹抗体阳性率和免疫水平均处于较理想状态,已形成较牢固的免疫屏障,而外来流动人群情况较差,应加强外来流动人群规范管理,及时按计划接种疫苗,防止麻疹的暴发流行.
作者：高赛珍；罗小铭；赵婉莹；周海；吕海英 刊期： 2006年第02期
目的通过对福建省三明市三元区并殖吸虫虫种和各阶段宿主及其感染率、感染度研究,调查三元区并殖吸虫疫源地.方法捕捉螺蛳、溪蟹和野猫粪标本,按常规方法进行并殖吸虫囊蚴、尾蚴和虫卵的检查、留置观察和感染动物试验.根据病人线索进行人群感染率的调查,并了解当地地理、环境、气候.结果检查放逸短沟蜷654只、洱海螺新种846只、拟钉螺(待定种)135只和235只沼螺,只在1只洱海螺中检出并殖吸虫尾蚴,检出阳性率为0.12%.充当第二中间宿主的福建华溪蟹和华南三角肢溪蟹新种携带有卫氏并殖吸虫二、三倍体型,斯氏狸殖、泡囊狸殖、三平正并殖吸虫囊蚴,蟹的感染率为44.28%,平均每只蟹和每克蟹组织携带囊蚴分别为24.90和2.47;人群皮试阳性率为8.64%(21/243),皮试阳性者作血清抗体检测,阳性率为23.81%(5/21);3份野猫粪标本有2份检出并殖吸虫虫卵和孟氏裂头绦虫虫卵、缩小膜壳绦虫虫卵及一种棘口吸虫虫卵.结论三元区为以斯氏狸殖吸虫为主的肺吸虫病高度疫源地,同时也是孟氏裂头绦虫、缩小膜壳绦虫及一种棘口吸虫的自然疫源地.
作者：姜闽；李友松；林陈鑫；林集焕；张世阳；许龙善；程由注；夏同莲；李莉莎 刊期： 2006年第02期
猪蛔虫病对养猪业的危害严重.蛔虫体外培养技术即是人工模拟宿主体内环境条件,从而使蛔虫在离开宿主状态下完成生活史中的部分或全部的发育阶段.通过该技术可对其生活史、不同发育阶段的形态变化、感染机制及基因功能等方面进行深入研究,对寄生虫学发展意义重大.本文主要阐述不同学者对蛔虫生活史的看法及培养过程中培养条件变化,如pH、气相、培养基化学成分的变化,对虫体生长发育的影响.但目前对蛔虫体外培养的研究,还处于探索阶段,适培养基、气相及pH值的筛选还有待进一步的研究.
作者：陈宁；黄翠琴；朱兴全 刊期： 2006年第02期
目的了解开平市2～12岁儿童蛲虫感染状况,提供防治对策.方法依地理环境和城乡区别分层整群随机抽样抽取具代表性的龙胜、苍城、三埠三镇及城区祥龙、长沙社区适龄儿童,用肛周拭擦法每天上午8时～10时采样镜检.结果共检查5 866人,检出有蛲虫卵1 225人,平均感染率20.9%,其中龙胜、苍城、三埠及城区的感染率分别为36.4%、31.3%、22.2%及6.3%,四者之间具显著性差异(χ2=7.2980,25.4970,477.4448,P＜0.05).男女性感染率分别为20.8%(621/2986)和21.0%(604/2880),无显著性差异(χ2=0.0272,P＞0.05).2～12岁年龄组感染率介于14.7%～29.2%,以7岁年龄组高(29.2%).结论学前儿童是蛲虫感染防治的重点对象.采取加强健康教育,环境清洁消毒和药物防治等综合措施,可有效降低儿童蛲虫感染.
作者：吴松润；司徒荣阮 刊期： 2006年第02期
目的探讨紫杉醇(paclitaxel)+顺铂(cisplatin,DDP;TP方案)与5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)+DDP(DF方案)治疗晚期鼻咽癌肝、肺转移的客观疗效及毒副作用.方法对56例共211个疗程TP(30例)或DF(26例)方案化疗的鼻咽癌肝、肺转移病例的临床疗效及其副作用进行了回顾性分析比较.同一化疗方案的病例列为一组,即分为TP组(30例)和DF组(26例).两组均以3周为1个疗程,至少接受2个疗程化疗.分别总结两组的有效率,中位生存期和白细胞数、血小板计数,恶心、呕吐、腹泻、口腔炎、脱发等副反应的发生构成比,并进行统计、分析.结果TP方案组的总有效率为73.33%,明显高于DF方案组的46.15%(P＜0.05);TP组和DF组中位生存期分别为11.8个月和9.8个月,但经Logrank检验无明显差异性(P＞0.05).治疗毒副反应,TP组以脱发(100%)、白血球下降(83.33%)和血小板下降(50%)为主.而DF组则以恶心、呕吐(76.92%)、腹泻(73.07%)、口腔炎(46.15%)等消化道反应明显.结论TP方案治疗晚期鼻咽癌肝、肺转移疗效明显优于DF方案,中位生存期TP组也高于DF组.毒副反应各自有别,但均以Ⅰ、Ⅱ度反应明显,患者均可接受.
作者：蔡悦成；叶金辉；何宝贞 刊期： 2006年第02期
目的了解支原体引起的泌尿生殖道感染的状况以及对药物的敏感性.方法采用支原体培养鉴定和药敏试剂盒,对3 750例泌尿生殖系感染患者进行支原体培养鉴定以及体外药物敏感性试验.结果支原体阳性的有2 868例(76.48%),其中解脲支原体阳性1 866例(49.8%).1 935例支原体对交沙霉素敏感,敏感率为99.1%;克林霉素敏感性差,其敏感率为10.8%.结论支原体为非淋菌性尿道炎的主要病原体,对多种抗生素产生耐药性,临床治疗应尽可能地进行支原体培养及药敏试验.
作者：邹明荣；陈育贤；林常瑜 刊期： 2006年第02期
疟原虫的转染过程是将克隆有外源基因序列的质粒导入疟原虫细胞中,转化入细胞中的质粒或以游离体的形式存在,或插入到疟原虫的染色体中.随着转基因技术的逐渐成熟,近10年来,已经在恶性疟原虫[1](Plasmodium falciparum,P.f)、伯氏疟原虫[2](Plamodium berghei,P.b)、偌氏疟原虫[3](Plasmodium knowlesi,P.k)等疟原虫中实现了外源基因的转染.本文就疟原虫转染的载体以及转基因疟原虫的应用两方面作简要综述.
作者：郝文波；李明 刊期： 2006年第02期
目的探讨乳糜尿的发病及泛影葡胺低压肾盂灌注治疗乳糜尿的机理.方法通过对乳糜尿患者和无乳糜尿患者行膀胱镜逆行插管灌注,观察两者肾脏淋巴管返流情况,研究乳糜尿与淋巴管的关系.结果60例(95.2%)有不同程度造影剂返流,显出肾内淋巴管的破裂口.灌注1次乳糜试验转阴48例(76.2%);2次转阴12例(19.0%);余3例经2次灌注后无效改用其它方法治疗.对照组36例未见复方泛影葡胺返流.结论乳糜尿的发病与肾内淋巴管的破裂有关,可通过逆行插管泛影葡胺低压肾盂灌注治疗.
作者：王忠；赖玉连 刊期： 2006年第02期
目的从美洲大蠊若虫cDNA文库中筛选黑胸大蠊抗原相关基因,以期获得黑胸大蠊有潜在药用价值的蛋白质、多肽成分.方法用黑胸大蠊若虫免疫兔血清筛选美洲大蠊若虫cDNA文库,对阳性克隆进行PCR鉴定和序列测定,通过国际互联网进行核苷酸序列的同源性分析及编码蛋白质的结构分析和功能预测.结果经三轮复筛,从多个持续阳性克隆中挑选出3个进行测序、分析,其中N1克隆为新基因,Score＜50,命名为Parcxpwnx01,GenBank登录号为AY838802.该基因编码231个氨基酸,初步预测该蛋白可能为一具信号转导功能的跨膜蛋白.N2克隆与美洲大蠊核蛋白体16S RNA基因高度同源,N3与黑胸大蠊线粒体DNA高度同源.结论免疫筛选获得与黑胸大蠊若虫抗原相关的基因克隆,其编码的蛋白结构和功能有待进一步研究.
作者：吴仕筠；汪世平；徐绍锐；钟飞；余俊龙；李文凯；曾少华；肖小芹；罗臣 刊期： 2006年第02期
蚕分桑蚕(家蚕)和山蚕(野蚕)两大类,两种蚕及其所产生的蚕丝都能引起过敏反应.除蚕丝外,桑蚕在整个生活周期产生的物质,如蚕尿、蚕蛹、蚕蛾鳞屑等也可诱发过敏反应.蚕丝是动物蛋白,主要由丝素(Fibroin)和丝胶(Sericin)组成.前者约占70%,亦有抗原性,但后者是蚕丝的主要变应原成分,引起由IgE作用机制介导的过敏反应.蛹(蚕茧)是幼虫(蚕)和成虫(蚕蛾)的中间阶段,我国养蚕地区有食用蚕蛹的习惯,蚕蛹食入过敏可能为我国特有的情况.蛹变应原主要为82 kDa,79 kDa及30 kDa的蛋白质,其中分子量30 kDa是蚕蛹的主要变应原.
作者：练玉银；刘志刚 刊期： 2006年第02期
目的了解B型钠尿肽(BNP)在慢性充血性心力衰竭(CHF)诊断和治疗中的初步应用.方法用ADVIA-Centaur化学发光法测定25例健康体检者和183例慢性充血性心力衰竭患者的血清BNP浓度.结果CHF组血清BNP值(405.6±126.9)明显高于对照组(28.6±9.7,P＜0.001).若以100pg/ml作为阈值,则BNP测定的临床符合率为90.4%(188/208),诊断灵敏度为89.6%(164/183),诊断特异性为96.0%(24/25).NYHA Ⅰ患者(146.4±27.9)与对照组相比以及NYHA各级之间也存在显著性差异(P＜0.001).结论BNP的测定对CHF诊断具有较高的灵敏度和特异性,BNP与CHF分级之间具有良好的相关性.
作者：江洁华；廖伟娇；高启键；欧阳立杰；区碧茹 刊期： 2006年第02期
目的探讨乏氧组织显像剂99Tcm-4,9-二氮-2,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟(HL91)SPECT/CT脑显像检测高血压脑出血出血灶周围乏氧组织的应用价值.方法22例高血压脑出血患者,和6例正常人均进行99Tcm-HL91 SPECT脑显像,所有研究对象同时进行同机CT扫描.结果22例患者中18例阳性,阳性率为77.78%.4例阴性者分别是3例出血量＜15 ml的小量脑出血和1例出血量为23.5 ml,起病43 d行乏氧检查者.对照组6例均为阴性.乏氧区位于出血区周围,少量出现在血肿内,乏氧体积大小与出血量有正相关关系.结论99Tcm-HL91 SPECT显像可较好地显示高血压脑出血病病灶周围的乏氧组织,乏氧体积与出血量有密切关系,可应用于指导临床治疗.
作者：黎冠东；黄斌豪；李冰华；黄焕章；钟建新；唐开雄；陈学中；赖穗翩 刊期： 2006年第02期
目的提高教学质量,探讨如何增强异染颗粒染色,提高标本的清晰度.方法按常规接种白喉杆菌于甘油鸡蛋或吕氏培养基上.用传统的奈瑟法(Neisser)及改进法(吕氏美兰+俾褐麦斯),染色步骤、时间按常规.用普通显微镜观察两种方法每张标本的染色情况及异染颗粒.用德国KONTRON IBAS 2.0全自动图像分析仪随机抽查两种方法染色标本的异染颗粒数目.结果传统奈瑟法的异染颗粒数目相对少些,着色浅.改进法染色的标本涂片均可见明显异染颗粒,数目相对比传统奈瑟法多,着色深.结论用改进的奈瑟(Neisser)染色法染色白喉棒状杆菌,异染颗粒数量多,染色效果优于传统奈瑟法.
作者：刘长秀；罗海华；周红；江丽芳；李彩霞；郑树森 刊期： 2006年第02期
目的高效液相色谱法(HPLC)和荧光偏振免疫法(FPIA)测定血清中卡马西平体积百分比的比较研究.方法收集广州市精神病医院服用CBZ的21例癫痫患者血样.用本实验室已经建立的HPLC法和FPIA法分别检测卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比,采用配对t检验考察两种方法分别测定卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比有无显著性差异.结果HPLC法与FPIA法检测卡马西平对照品甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清中卡马西平体积百分比无显著性差异(t值分别为-1.009、0.767,P值分别为0.325、0.452);检测患者血清中卡马西平血药体积百分比有显著性差异(t=4.919,P＜0.05),FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比较HPLC法偏高.结论FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比过程中,CBZ的活性代谢产物环氧化卡马西平(carbamazepine-10,11-epoxide,CBZ-E)可能对FPIA法测定CBZ有干扰,导致结果偏高.
作者：王广发；熊莺；刘伟忠 刊期： 2006年第02期
目的研究布鲁氏菌外膜蛋白OMP31的克隆、测序和表达,并对其进行初步的血清学鉴定.方法从布鲁氏菌基因组中获得OMP31基因连接入PMD-18T克隆质粒并测序,克隆入融合表达载体PGEX-4T-1,构建重组质粒PGEX-4T-1/OMP31,在大肠杆菌中将该蛋白表达.用Western-b1ot分析重组表达的GST-OMP31的免疫学特性.结果成功构建了PGEX-4T-1/OMP31原核表达载体并在大肠杆菌中表达了OMP31基因,布鲁氏菌免疫动物血清能特异性识别所表达的蛋白.结论成功表达了布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因,它可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应,为之后的抗原性以及免疫原性研究打下良好的基础.
作者：陈瑶；骆利敏；李明 刊期： 2006年第02期
目的探讨本地区表达细胞毒素相关蛋白A(CagA)的幽门螺杆菌(HP)与胃十二指肠疾病的关系.方法将127例消化系统疾病患者分为四组.采用金标免疫斑点法检测各组患者血清中HP抗体,采用间接ELISA法测定各组CagA-IgG,并作组间的比较.结果慢性胃炎(CG),十二指肠溃疡(DU),胃溃疡(GU),胃癌(GC)患者及无症状组(AG)血清中HP抗体的检出率分别为74.2%,85.7%,81.5%,77.8%,61.6%,CagA-IgG的检出率分别为61.3%,66.7%,63.0%,70.4%,34.0%.经χ2检验显示,在DU与GU组,HP及CagA+HP感染率均明显高于AC组(P＜0.05、P＜0.01),而CG及GC组与AC组比较,HP感染率无显著性差异(P＞0.05),而CagA+HP感染率仍有显著性差异(P＜0.01).各胃肠疾病组间的HP及CagA+HP感染率均无显著性差异(P＞0.05).结论在广州地区,仅DU与GU组的HP感染率高于AC组,而CagA+HP感染率在CG、DU、GU与GC组,均高于AC组,可见CagA-IgG的表达情况,可为胃十二指肠疾病的致病因素与诊疗、防治提供依据,但不能作为区分CagA+HP感染所致胃十二指肠疾病的单一指标.
作者：陈小辉；雷秀霞；徐邦牢 刊期： 2006年第02期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
