蔡悦成；叶金辉；何宝贞
目的从美洲大蠊若虫cDNA文库中筛选黑胸大蠊抗原相关基因,以期获得黑胸大蠊有潜在药用价值的蛋白质、多肽成分.方法用黑胸大蠊若虫免疫兔血清筛选美洲大蠊若虫cDNA文库,对阳性克隆进行PCR鉴定和序列测定,通过国际互联网进行核苷酸序列的同源性分析及编码蛋白质的结构分析和功能预测.结果经三轮复筛,从多个持续阳性克隆中挑选出3个进行测序、分析,其中N1克隆为新基因,Score＜50,命名为Parcxpwnx01,GenBank登录号为AY838802.该基因编码231个氨基酸,初步预测该蛋白可能为一具信号转导功能的跨膜蛋白.N2克隆与美洲大蠊核蛋白体16S RNA基因高度同源,N3与黑胸大蠊线粒体DNA高度同源.结论免疫筛选获得与黑胸大蠊若虫抗原相关的基因克隆,其编码的蛋白结构和功能有待进一步研究.
作者：吴仕筠；汪世平；徐绍锐；钟飞；余俊龙；李文凯；曾少华；肖小芹；罗臣 刊期： 2006年第02期
目的研究布鲁氏菌外膜蛋白OMP31的克隆、测序和表达,并对其进行初步的血清学鉴定.方法从布鲁氏菌基因组中获得OMP31基因连接入PMD-18T克隆质粒并测序,克隆入融合表达载体PGEX-4T-1,构建重组质粒PGEX-4T-1/OMP31,在大肠杆菌中将该蛋白表达.用Western-b1ot分析重组表达的GST-OMP31的免疫学特性.结果成功构建了PGEX-4T-1/OMP31原核表达载体并在大肠杆菌中表达了OMP31基因,布鲁氏菌免疫动物血清能特异性识别所表达的蛋白.结论成功表达了布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因,它可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应,为之后的抗原性以及免疫原性研究打下良好的基础.
作者：陈瑶；骆利敏；李明 刊期： 2006年第02期
目的探讨乏氧组织显像剂99Tcm-4,9-二氮-2,3,10,10-四甲基十二烷-2,11-二酮肟(HL91)SPECT/CT脑显像检测高血压脑出血出血灶周围乏氧组织的应用价值.方法22例高血压脑出血患者,和6例正常人均进行99Tcm-HL91 SPECT脑显像,所有研究对象同时进行同机CT扫描.结果22例患者中18例阳性,阳性率为77.78%.4例阴性者分别是3例出血量＜15 ml的小量脑出血和1例出血量为23.5 ml,起病43 d行乏氧检查者.对照组6例均为阴性.乏氧区位于出血区周围,少量出现在血肿内,乏氧体积大小与出血量有正相关关系.结论99Tcm-HL91 SPECT显像可较好地显示高血压脑出血病病灶周围的乏氧组织,乏氧体积与出血量有密切关系,可应用于指导临床治疗.
作者：黎冠东；黄斌豪；李冰华；黄焕章；钟建新；唐开雄；陈学中；赖穗翩 刊期： 2006年第02期
目的了解中山市健康人群麻疹免疫状况.方法对242人(其中常住人群155人,外来流动人群87人,按防疫人群监测共分三组(2～4岁、6～8岁、13～15岁),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测麻疹IgG抗体滴度.结果中山市健康人群麻疹抗体总阳性率为92.1%,其中中山市常住人群麻疹抗体阳性率为98.1%,外来流动人群阳性率为81.6%,麻疹抗体阳性率相差有极显著性意义(χ2=31.00,P＜0.001).本地常住人群和外来流动人群麻疹抗体免疫水平抗体滴度分别为1181.1、270.2,相差也有极显著性意义(t=5.54,P＜0.01).结论中山市健康常住人群麻疹抗体阳性率和免疫水平均处于较理想状态,已形成较牢固的免疫屏障,而外来流动人群情况较差,应加强外来流动人群规范管理,及时按计划接种疫苗,防止麻疹的暴发流行.
作者：高赛珍；罗小铭；赵婉莹；周海；吕海英 刊期： 2006年第02期
目的制备编码人Vasostatin-1基因片段,利用大肠杆菌表达重组Vasostatin-1蛋白.方法根据人Vasostatin-1基因序列,设计、合成3对PCR引物,利用PCR合成法制备编码Vasostatin-1的DNA.将Vasostatin-1基因定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,行酶切和DNA测序鉴定,并将构建的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).用IPTG诱导BL21(DE3)中导入的Vasostatin-1基因的表达,行SDS-PAGE分析.用GSTrap亲合柱纯化重组Vasostatin-1蛋白.结果用PCR合成法制备了228 bp的Vasostatin-1基因片段,并成功构建了重组质粒pGEX-4T-Vasostatin-1,DNA测序显示Vasostatin-1 DNA序列和插入位点正确.经IPTG诱导,特异表达出以包涵体形式存在36 kDa的重组Vasostatin-1蛋白.结论制备、克隆了人Vasostatin-1基因片段,并在大肠杆菌中表达出重组Vasostatin-1蛋白.
作者：符永恒；单志新；余细勇；林秋雄；邓春玉；郑猛 刊期： 2006年第02期
目的高效液相色谱法(HPLC)和荧光偏振免疫法(FPIA)测定血清中卡马西平体积百分比的比较研究.方法收集广州市精神病医院服用CBZ的21例癫痫患者血样.用本实验室已经建立的HPLC法和FPIA法分别检测卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比,采用配对t检验考察两种方法分别测定卡马西平对照品的甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清、患者血清中卡马西平体积百分比有无显著性差异.结果HPLC法与FPIA法检测卡马西平对照品甲醇溶液、卡马西平对照品标准血清中卡马西平体积百分比无显著性差异(t值分别为-1.009、0.767,P值分别为0.325、0.452);检测患者血清中卡马西平血药体积百分比有显著性差异(t=4.919,P＜0.05),FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比较HPLC法偏高.结论FPIA法检测患者血清中卡马西平血药体积百分比过程中,CBZ的活性代谢产物环氧化卡马西平(carbamazepine-10,11-epoxide,CBZ-E)可能对FPIA法测定CBZ有干扰,导致结果偏高.
作者：王广发；熊莺；刘伟忠 刊期： 2006年第02期
目的通过对福建省三明市三元区并殖吸虫虫种和各阶段宿主及其感染率、感染度研究,调查三元区并殖吸虫疫源地.方法捕捉螺蛳、溪蟹和野猫粪标本,按常规方法进行并殖吸虫囊蚴、尾蚴和虫卵的检查、留置观察和感染动物试验.根据病人线索进行人群感染率的调查,并了解当地地理、环境、气候.结果检查放逸短沟蜷654只、洱海螺新种846只、拟钉螺(待定种)135只和235只沼螺,只在1只洱海螺中检出并殖吸虫尾蚴,检出阳性率为0.12%.充当第二中间宿主的福建华溪蟹和华南三角肢溪蟹新种携带有卫氏并殖吸虫二、三倍体型,斯氏狸殖、泡囊狸殖、三平正并殖吸虫囊蚴,蟹的感染率为44.28%,平均每只蟹和每克蟹组织携带囊蚴分别为24.90和2.47;人群皮试阳性率为8.64%(21/243),皮试阳性者作血清抗体检测,阳性率为23.81%(5/21);3份野猫粪标本有2份检出并殖吸虫虫卵和孟氏裂头绦虫虫卵、缩小膜壳绦虫虫卵及一种棘口吸虫虫卵.结论三元区为以斯氏狸殖吸虫为主的肺吸虫病高度疫源地,同时也是孟氏裂头绦虫、缩小膜壳绦虫及一种棘口吸虫的自然疫源地.
作者：姜闽；李友松；林陈鑫；林集焕；张世阳；许龙善；程由注；夏同莲；李莉莎 刊期： 2006年第02期
目的扩增日本血吸虫(Sj)p50亲免素(IP)基因全长cDNA和DNA序列,进行原核克隆和研究其免疫学特性.方法从Sj成虫RNA中RT-PCR扩增Sjp50亲免素基因完整的编码阅读框,从Sj成虫基因组中扩增其DNA序列,对其cDNA序列和DNA序列进行比较分析,寻找内含子.将其cDNA序列克隆入pET30a(+)体中,原核表达并纯化表达产物,Western-blot比较重组蛋白与Sj体内相应天然蛋白的免疫原性和免疫反应性,间接免疫荧光法对p50亲免素进行组织定位.结果Sjp50IP基因DNA序列与cDNA相比,有6个内含子;重组p50IP与Sj体内的天然蛋白具有相同的免疫学特性,该蛋白位于Sj成虫的被膜上.结论成功扩增得到了Sjp50IP基因的全长编码区的cDNA序列和DNA序列,其DNA序列中有6个内含子;重组Sjp50IP的免疫学特性支持将该基因作为疫苗进行进一步的研究.
作者：李孜；余新炳；吴忠道；徐劲；胡旭初 刊期： 2006年第02期
目的探讨培哚普利、伊贝沙坦、两者联合用药对原发性高血压(EH)患者左室肥厚(LVH)的干预作用.方法EH伴有LVH患者112例随机分成A组(培哚普利4 mg/d 37例)、B组(伊贝沙坦150 mg/d,38例)和C组(培哚普利4 mg/d 37例,加伊贝沙坦150 mg/d).治疗3周时若血压≥160/95 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),则培哚普利和伊贝沙坦剂量分别增加至8 mg/d和300 mg/d.总疗程共6个月,治疗前后彩色超声多普勒检测左室相关数据,计算左室重量指数(LVMI)和行24 h动态血压监测.结果①3组治疗前后比较均能显著降低LVMI(P＜0.01).其中A组和B组LVMI的降低差异无显著意义(P＞0.05),但C组LVMI降低较A组、B组两组更为显著,差异具有显著性意义(P＜0.01).②分别比较3组治疗前24 h平均收缩压、平均舒张压差异无显著性意义(P＞0.05),治疗后24 h平均收缩压、平均舒张压均分别较治疗前显著降低(P＜0.01),但治疗后3组间比较均无明显差别(P＞0.05).结论培哚普利、伊贝沙坦均能逆转EH患者LVH,培哚普利和伊贝沙坦联合用药疗效更为显著,这种协同作用与降压效应无关.
作者：黄仕洲；刘明 刊期： 2006年第02期
目的构建含完整人抗-D抗体重、轻链基因的表达载体,为体外表达完整的抗-D抗体分子打下基础.方法从1株分泌IgM抗-D的细胞株提取总RNA,以随机引物逆转录成cDNA,用所设计的抗体前导区引物进行扩增,克隆、测序后将抗-D抗体重、轻链可变区基因分别和带有人IgG1恒定区和K轻链恒定区的表达载体连接,转化大肠杆菌后提取质粒DNA,用PCR和酶切进行鉴定.结果序列分析发现所扩增的基因符合人Ig的特征,除引导序列外,其余序列和我们以前所发表的Fab段序列一致,PCR和酶切鉴定抗体重、轻可变区基因克隆成功.结论成功地扩增了带引导序列的抗-D抗体可变区基因,并构建了完整人抗-D抗体分子表达载体.
作者：付涌水；江朝富；曹开源；李树浓 刊期： 2006年第02期
目的提高教学质量,探讨如何增强异染颗粒染色,提高标本的清晰度.方法按常规接种白喉杆菌于甘油鸡蛋或吕氏培养基上.用传统的奈瑟法(Neisser)及改进法(吕氏美兰+俾褐麦斯),染色步骤、时间按常规.用普通显微镜观察两种方法每张标本的染色情况及异染颗粒.用德国KONTRON IBAS 2.0全自动图像分析仪随机抽查两种方法染色标本的异染颗粒数目.结果传统奈瑟法的异染颗粒数目相对少些,着色浅.改进法染色的标本涂片均可见明显异染颗粒,数目相对比传统奈瑟法多,着色深.结论用改进的奈瑟(Neisser)染色法染色白喉棒状杆菌,异染颗粒数量多,染色效果优于传统奈瑟法.
作者：刘长秀；罗海华；周红；江丽芳；李彩霞；郑树森 刊期： 2006年第02期
目的对深圳东部地区本地居民、外来人群进行地中海贫血的调查研究.方法采用日本Sysmex SE-9000全自动血细胞分析仪,运用红细胞脆性一管定量法和血红蛋白电泳初筛法,对可疑阳性标本进行α-地中海贫血基因分析和β-地中海贫血基因分析.结果本地居民350人,异常基因携带者36例,其中β-地中海贫血异常基因12例,α-地中海贫血异常基因23例,双重杂合者1例,发病率10.28%.外来人群349人,异常基因携带者4例,β-地中海贫血异常基因1例,α-地中海贫血异常基因3例,发病率1.14%.结论本地居民发病率比外来人群发病率高9倍.
作者：张松；邹汉良；谭萍；李芳芳；甘志彪 刊期： 2006年第02期
目的了解小儿呼吸道感染常见病毒性病因及其与患儿体液免疫功能的关系.方法用酶联免疫吸附试验对144例呼吸道感染患儿进行6种呼吸道病毒IgM抗体检测,对各组进行统计分析.其中72例病毒IgM抗体阳性血清并作非特异性免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的检测.结果6种病毒IgM抗体总的阳性率为62.5%.流感病毒A型IgM抗体阳性率为52.78%,居病毒感染种类的首位.两种或以上病毒混合感染占41.11%.各年龄组病毒感染总阳性率无显著性差别.上呼吸道感染、支气管炎和肺炎3种疾病的病毒IgM总阳性率未见有显著差别.非特异性免疫球蛋白:1～3岁的患儿的IgG低于参考范围,1～12岁的患儿IgM均高于参考范围.结论小儿呼吸道感染以呼吸道病毒为主,其中以流感病毒A型为常见,病毒混合感染亦占有相当比例:病毒检出与呼吸道疾病种类、患儿年龄无关.病毒感染所致机体免疫功能改变未明.
作者：黄海樱；徐建英；陈波 刊期： 2006年第02期
猪蛔虫病对养猪业的危害严重.蛔虫体外培养技术即是人工模拟宿主体内环境条件,从而使蛔虫在离开宿主状态下完成生活史中的部分或全部的发育阶段.通过该技术可对其生活史、不同发育阶段的形态变化、感染机制及基因功能等方面进行深入研究,对寄生虫学发展意义重大.本文主要阐述不同学者对蛔虫生活史的看法及培养过程中培养条件变化,如pH、气相、培养基化学成分的变化,对虫体生长发育的影响.但目前对蛔虫体外培养的研究,还处于探索阶段,适培养基、气相及pH值的筛选还有待进一步的研究.
作者：陈宁；黄翠琴；朱兴全 刊期： 2006年第02期
目的了解B型钠尿肽(BNP)在慢性充血性心力衰竭(CHF)诊断和治疗中的初步应用.方法用ADVIA-Centaur化学发光法测定25例健康体检者和183例慢性充血性心力衰竭患者的血清BNP浓度.结果CHF组血清BNP值(405.6±126.9)明显高于对照组(28.6±9.7,P＜0.001).若以100pg/ml作为阈值,则BNP测定的临床符合率为90.4%(188/208),诊断灵敏度为89.6%(164/183),诊断特异性为96.0%(24/25).NYHA Ⅰ患者(146.4±27.9)与对照组相比以及NYHA各级之间也存在显著性差异(P＜0.001).结论BNP的测定对CHF诊断具有较高的灵敏度和特异性,BNP与CHF分级之间具有良好的相关性.
作者：江洁华；廖伟娇；高启键；欧阳立杰；区碧茹 刊期： 2006年第02期
目的掌握广州市人间布鲁氏菌病流行规律及分布状况,为今后制定防治策略提供科学依据.方法1992～1994年采用试管凝集试验(SAT),每年监测一次,以后每2～3年覆盖一次.1997年开始采用虎红凝集试验作为筛选,阳性者血清送广东省疾病预防控制中心做进一步诊断.结果1992～2004年血清学共检测19 619,阳性14人,阳性率为0.07%;感染病例主要分布于番禺区;男女均可感染;以兽医、饲养员等职业较多;感染年龄在20～50岁.结论经过多年努力,广州市布鲁氏菌病达到稳定控制标准,其综合防治策略取得显著效果,但仍要坚持长期的人畜布病监测.
作者：冯月菊；刘小宁；潘志明；任文锋；高雨藩；郭荣同 刊期： 2006年第02期
目的探讨乳糜尿的发病及泛影葡胺低压肾盂灌注治疗乳糜尿的机理.方法通过对乳糜尿患者和无乳糜尿患者行膀胱镜逆行插管灌注,观察两者肾脏淋巴管返流情况,研究乳糜尿与淋巴管的关系.结果60例(95.2%)有不同程度造影剂返流,显出肾内淋巴管的破裂口.灌注1次乳糜试验转阴48例(76.2%);2次转阴12例(19.0%);余3例经2次灌注后无效改用其它方法治疗.对照组36例未见复方泛影葡胺返流.结论乳糜尿的发病与肾内淋巴管的破裂有关,可通过逆行插管泛影葡胺低压肾盂灌注治疗.
作者：王忠；赖玉连 刊期： 2006年第02期
目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析河虾总蛋白2-DE(2-Dimension Electrophoresis)指纹图谱的重现性,确定食品过敏原指纹图谱快速检测的可行性.方法新鲜河虾,去头和虾皮,搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干后为初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm和13cm两种不同厂家、规格的非线性胶条(pH=3～10)溶胀上样,平衡后转移胶条在不同厂家、型号的电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),银染和考染后扫描图像进行计算机分析处理.结果2-DE谱图显示河虾总蛋白分布较广,其高丰度蛋白主要是一些大分子量酸性蛋白.不同电泳系统,选用不同规格的IPG胶条所得河虾总蛋白2-DE指纹谱图具有良好的重现性.银染灵敏度较高,更适合食品过敏原指纹图谱的快速检测.结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱具有良好的重现性和稳定性,可以用于食品过敏原的快速检测.
作者：吴海强；余晓；刘志刚 刊期： 2006年第02期
目的采用可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂制备弓形虫复合黏膜疫苗,观察经滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的肠上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IEL)免疫应答及持续时间,探讨其抗弓形虫感染的作用机制.方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以免疫原性好的STAg(20 μg/只)为抗原和CT(1μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻.滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死小鼠.制备肠IEL细胞悬液,计数并涂片;免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测CD4+T、CD8+T细胞亚群水平.结果免疫后肠IEL显著增生,第2周达高峰,第1周至第4周(P＜0.01)高于对照组.其中以CD8+T细胞增生为主,CD8+T细胞水平第2周达高峰,第1周至第6周增高显著(P＜0.01),CD4+T细胞也略有增生,第2、3周(P＜0.05)有显著性,CD4+/CD8+比值倒置,第1、2周明显低于对照组(P＜0.05).结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导肠IEL免疫应答,且可持续较长时间,在预防弓形虫感染中起重要作用.
作者：殷国荣；孟晓丽；王海龙；石蓉；刘娟娟；管志玉 刊期： 2006年第02期
目的探讨恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)重组蛋白的免疫活性.方法利用毕赤酵母高效表达系统分泌表达AMA-1(Ⅲ),表达产物用纯化后免疫新西兰兔,检测其血清中IgG滴度的变化,观察重组AMA-1(Ⅲ)免疫效应.结果重组AMA-1(Ⅲ)免疫后,ELISA检测新西兰兔血清中IgG滴度发现在3次免疫后OD490值明显高于佐剂免疫对照组(P＜0.01).结论AMA-1(Ⅲ)重组蛋白具有较好的免疫原性.
作者：张忠广；赵恒梅；宫玉香；曾宪忠；常志尚 刊期： 2006年第02期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
