学术投稿

恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)重组蛋白的免疫效应检测

张忠广;赵恒梅;宫玉香;曾宪忠;常志尚

关键词:恶性疟原虫, 顶端膜抗原, 疟疾疫苗, 免疫性
摘要:目的探讨恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)重组蛋白的免疫活性.方法利用毕赤酵母高效表达系统分泌表达AMA-1(Ⅲ),表达产物用纯化后免疫新西兰兔,检测其血清中IgG滴度的变化,观察重组AMA-1(Ⅲ)免疫效应.结果重组AMA-1(Ⅲ)免疫后,ELISA检测新西兰兔血清中IgG滴度发现在3次免疫后OD490值明显高于佐剂免疫对照组(P<0.01).结论AMA-1(Ⅲ)重组蛋白具有较好的免疫原性.
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  • 云南大理大绒鼠体表寄生恙螨群落结构的研究

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    作者:牛爱琴;郭宪国;门兴元;董文鸽;包怀恩 刊期: 2006年第02期

  • 弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠诱导的肠IEL持续性免疫应答

    目的采用可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)和霍乱毒素(cholera toxin,CT)佐剂制备弓形虫复合黏膜疫苗,观察经滴鼻免疫BALB/c小鼠后诱导的肠上皮内淋巴细胞(intraepithelial lymphocytes,IEL)免疫应答及持续时间,探讨其抗弓形虫感染的作用机制.方法BALB/c小鼠96只随机分为实验组和对照组,实验组以免疫原性好的STAg(20 μg/只)为抗原和CT(1μg/只)为佐剂滴鼻免疫,对照组以PBS滴鼻.滴鼻2次(间隔2周)后分别于第1、2、3、4、6、8、10、12周处死小鼠.制备肠IEL细胞悬液,计数并涂片;免疫细胞化学法(immunocytochemistry,ICC)检测CD4+T、CD8+T细胞亚群水平.结果免疫后肠IEL显著增生,第2周达高峰,第1周至第4周(P<0.01)高于对照组.其中以CD8+T细胞增生为主,CD8+T细胞水平第2周达高峰,第1周至第6周增高显著(P<0.01),CD4+T细胞也略有增生,第2、3周(P<0.05)有显著性,CD4+/CD8+比值倒置,第1、2周明显低于对照组(P<0.05).结论弓形虫复合黏膜疫苗滴鼻免疫BALB/c小鼠可有效诱导肠IEL免疫应答,且可持续较长时间,在预防弓形虫感染中起重要作用.

    作者:殷国荣;孟晓丽;王海龙;石蓉;刘娟娟;管志玉 刊期: 2006年第02期

  • 中山市健康人群麻疹抗体水平监测分析

    目的了解中山市健康人群麻疹免疫状况.方法对242人(其中常住人群155人,外来流动人群87人,按防疫人群监测共分三组(2~4岁、6~8岁、13~15岁),采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测麻疹IgG抗体滴度.结果中山市健康人群麻疹抗体总阳性率为92.1%,其中中山市常住人群麻疹抗体阳性率为98.1%,外来流动人群阳性率为81.6%,麻疹抗体阳性率相差有极显著性意义(χ2=31.00,P<0.001).本地常住人群和外来流动人群麻疹抗体免疫水平抗体滴度分别为1181.1、270.2,相差也有极显著性意义(t=5.54,P<0.01).结论中山市健康常住人群麻疹抗体阳性率和免疫水平均处于较理想状态,已形成较牢固的免疫屏障,而外来流动人群情况较差,应加强外来流动人群规范管理,及时按计划接种疫苗,防止麻疹的暴发流行.

    作者:高赛珍;罗小铭;赵婉莹;周海;吕海英 刊期: 2006年第02期

  • 食品过敏原指纹图谱快速检测研究(二)--河虾总蛋白2-DE指纹图谱重现性分析

    目的建立一种简捷、准确、快速检测食品过敏原的方法.分析河虾总蛋白2-DE(2-Dimension Electrophoresis)指纹图谱的重现性,确定食品过敏原指纹图谱快速检测的可行性.方法新鲜河虾,去头和虾皮,搅碎后丙酮去脂,PBS抽提总蛋白,冻干后为初提样品,试剂盒精提,双向电泳IEF选择11cm和13cm两种不同厂家、规格的非线性胶条(pH=3~10)溶胀上样,平衡后转移胶条在不同厂家、型号的电泳槽中进行第二向SDS-PAGE垂直电泳(10%),银染和考染后扫描图像进行计算机分析处理.结果2-DE谱图显示河虾总蛋白分布较广,其高丰度蛋白主要是一些大分子量酸性蛋白.不同电泳系统,选用不同规格的IPG胶条所得河虾总蛋白2-DE指纹谱图具有良好的重现性.银染灵敏度较高,更适合食品过敏原指纹图谱的快速检测.结论食品过敏原总蛋白2-DE指纹图谱具有良好的重现性和稳定性,可以用于食品过敏原的快速检测.

    作者:吴海强;余晓;刘志刚 刊期: 2006年第02期

  • 猪蛔虫的生活史及体外培养研究进展

    猪蛔虫病对养猪业的危害严重.蛔虫体外培养技术即是人工模拟宿主体内环境条件,从而使蛔虫在离开宿主状态下完成生活史中的部分或全部的发育阶段.通过该技术可对其生活史、不同发育阶段的形态变化、感染机制及基因功能等方面进行深入研究,对寄生虫学发展意义重大.本文主要阐述不同学者对蛔虫生活史的看法及培养过程中培养条件变化,如pH、气相、培养基化学成分的变化,对虫体生长发育的影响.但目前对蛔虫体外培养的研究,还处于探索阶段,适培养基、气相及pH值的筛选还有待进一步的研究.

    作者:陈宁;黄翠琴;朱兴全 刊期: 2006年第02期

  • 白喉杆菌异染颗粒Neisser法染色的新探讨

    目的提高教学质量,探讨如何增强异染颗粒染色,提高标本的清晰度.方法按常规接种白喉杆菌于甘油鸡蛋或吕氏培养基上.用传统的奈瑟法(Neisser)及改进法(吕氏美兰+俾褐麦斯),染色步骤、时间按常规.用普通显微镜观察两种方法每张标本的染色情况及异染颗粒.用德国KONTRON IBAS 2.0全自动图像分析仪随机抽查两种方法染色标本的异染颗粒数目.结果传统奈瑟法的异染颗粒数目相对少些,着色浅.改进法染色的标本涂片均可见明显异染颗粒,数目相对比传统奈瑟法多,着色深.结论用改进的奈瑟(Neisser)染色法染色白喉棒状杆菌,异染颗粒数量多,染色效果优于传统奈瑟法.

    作者:刘长秀;罗海华;周红;江丽芳;李彩霞;郑树森 刊期: 2006年第02期

  • 开平市2~12岁儿童蛲虫感染的调查

    目的了解开平市2~12岁儿童蛲虫感染状况,提供防治对策.方法依地理环境和城乡区别分层整群随机抽样抽取具代表性的龙胜、苍城、三埠三镇及城区祥龙、长沙社区适龄儿童,用肛周拭擦法每天上午8时~10时采样镜检.结果共检查5 866人,检出有蛲虫卵1 225人,平均感染率20.9%,其中龙胜、苍城、三埠及城区的感染率分别为36.4%、31.3%、22.2%及6.3%,四者之间具显著性差异(χ2=7.2980,25.4970,477.4448,P<0.05).男女性感染率分别为20.8%(621/2986)和21.0%(604/2880),无显著性差异(χ2=0.0272,P>0.05).2~12岁年龄组感染率介于14.7%~29.2%,以7岁年龄组高(29.2%).结论学前儿童是蛲虫感染防治的重点对象.采取加强健康教育,环境清洁消毒和药物防治等综合措施,可有效降低儿童蛲虫感染.

    作者:吴松润;司徒荣阮 刊期: 2006年第02期

  • 黑胸大蠊若虫免疫兔血清对美洲大蠊若虫cDNA表达文库的筛选及克隆分析

    目的从美洲大蠊若虫cDNA文库中筛选黑胸大蠊抗原相关基因,以期获得黑胸大蠊有潜在药用价值的蛋白质、多肽成分.方法用黑胸大蠊若虫免疫兔血清筛选美洲大蠊若虫cDNA文库,对阳性克隆进行PCR鉴定和序列测定,通过国际互联网进行核苷酸序列的同源性分析及编码蛋白质的结构分析和功能预测.结果经三轮复筛,从多个持续阳性克隆中挑选出3个进行测序、分析,其中N1克隆为新基因,Score<50,命名为Parcxpwnx01,GenBank登录号为AY838802.该基因编码231个氨基酸,初步预测该蛋白可能为一具信号转导功能的跨膜蛋白.N2克隆与美洲大蠊核蛋白体16S RNA基因高度同源,N3与黑胸大蠊线粒体DNA高度同源.结论免疫筛选获得与黑胸大蠊若虫抗原相关的基因克隆,其编码的蛋白结构和功能有待进一步研究.

    作者:吴仕筠;汪世平;徐绍锐;钟飞;余俊龙;李文凯;曾少华;肖小芹;罗臣 刊期: 2006年第02期

  • 布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因的克隆、表达和免疫学特性的初步研究

    目的研究布鲁氏菌外膜蛋白OMP31的克隆、测序和表达,并对其进行初步的血清学鉴定.方法从布鲁氏菌基因组中获得OMP31基因连接入PMD-18T克隆质粒并测序,克隆入融合表达载体PGEX-4T-1,构建重组质粒PGEX-4T-1/OMP31,在大肠杆菌中将该蛋白表达.用Western-b1ot分析重组表达的GST-OMP31的免疫学特性.结果成功构建了PGEX-4T-1/OMP31原核表达载体并在大肠杆菌中表达了OMP31基因,布鲁氏菌免疫动物血清能特异性识别所表达的蛋白.结论成功表达了布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因,它可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应,为之后的抗原性以及免疫原性研究打下良好的基础.

    作者:陈瑶;骆利敏;李明 刊期: 2006年第02期

  • 泌尿生殖系感染与支原体相关性的分析

    目的通过对单纯性支原体感染患者的结果分析,了解非淋菌性尿道(宫颈)炎(NGU)患者与支原体感染的相互关系.方法男性标本取尿道拭子、女性标本取宫颈拭子,采用液体培养法和固体培养法进行支原体的分型鉴定.结果支原体阳性322例女性者中,NGU组解尿支原体(Uu)阳性率50.9%,非NGU组Uu阳性率46.3%,两者比较无显著性差异(P>0.05);NGU组和非NGU组人型支原体(Mh)阳性率分别为7.5%和6.2%,两者比较差异无显著性(P>0.05).81例男性支原体阳性者中,NGU组Uu阳性率45.7%,非NGU组Uu阳性率51.9%,两者比较无差异(P>0.05);NGU组和非NGU组Mh阳性率分别为6.2%和8.6%,两者比较无差异(P>0.05).结论解尿支原体和人型支原体与非淋菌性尿道(宫颈)炎没有相关性.

    作者:黄进梅;郑和平;潘慧清;曾维英;吴兴中;李美玲;薛耀华 刊期: 2006年第02期

  • 多宿主多虫种的并殖吸虫疫源地在福建省三元区发现

    目的通过对福建省三明市三元区并殖吸虫虫种和各阶段宿主及其感染率、感染度研究,调查三元区并殖吸虫疫源地.方法捕捉螺蛳、溪蟹和野猫粪标本,按常规方法进行并殖吸虫囊蚴、尾蚴和虫卵的检查、留置观察和感染动物试验.根据病人线索进行人群感染率的调查,并了解当地地理、环境、气候.结果检查放逸短沟蜷654只、洱海螺新种846只、拟钉螺(待定种)135只和235只沼螺,只在1只洱海螺中检出并殖吸虫尾蚴,检出阳性率为0.12%.充当第二中间宿主的福建华溪蟹和华南三角肢溪蟹新种携带有卫氏并殖吸虫二、三倍体型,斯氏狸殖、泡囊狸殖、三平正并殖吸虫囊蚴,蟹的感染率为44.28%,平均每只蟹和每克蟹组织携带囊蚴分别为24.90和2.47;人群皮试阳性率为8.64%(21/243),皮试阳性者作血清抗体检测,阳性率为23.81%(5/21);3份野猫粪标本有2份检出并殖吸虫虫卵和孟氏裂头绦虫虫卵、缩小膜壳绦虫虫卵及一种棘口吸虫虫卵.结论三元区为以斯氏狸殖吸虫为主的肺吸虫病高度疫源地,同时也是孟氏裂头绦虫、缩小膜壳绦虫及一种棘口吸虫的自然疫源地.

    作者:姜闽;李友松;林陈鑫;林集焕;张世阳;许龙善;程由注;夏同莲;李莉莎 刊期: 2006年第02期

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    目的制备编码人Vasostatin-1基因片段,利用大肠杆菌表达重组Vasostatin-1蛋白.方法根据人Vasostatin-1基因序列,设计、合成3对PCR引物,利用PCR合成法制备编码Vasostatin-1的DNA.将Vasostatin-1基因定向插入原核表达载体pGEX-4T-1,行酶切和DNA测序鉴定,并将构建的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).用IPTG诱导BL21(DE3)中导入的Vasostatin-1基因的表达,行SDS-PAGE分析.用GSTrap亲合柱纯化重组Vasostatin-1蛋白.结果用PCR合成法制备了228 bp的Vasostatin-1基因片段,并成功构建了重组质粒pGEX-4T-Vasostatin-1,DNA测序显示Vasostatin-1 DNA序列和插入位点正确.经IPTG诱导,特异表达出以包涵体形式存在36 kDa的重组Vasostatin-1蛋白.结论制备、克隆了人Vasostatin-1基因片段,并在大肠杆菌中表达出重组Vasostatin-1蛋白.

    作者:符永恒;单志新;余细勇;林秋雄;邓春玉;郑猛 刊期: 2006年第02期

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    目的探讨恶性疟原虫AMA-1(Ⅲ)重组蛋白的免疫活性.方法利用毕赤酵母高效表达系统分泌表达AMA-1(Ⅲ),表达产物用纯化后免疫新西兰兔,检测其血清中IgG滴度的变化,观察重组AMA-1(Ⅲ)免疫效应.结果重组AMA-1(Ⅲ)免疫后,ELISA检测新西兰兔血清中IgG滴度发现在3次免疫后OD490值明显高于佐剂免疫对照组(P<0.01).结论AMA-1(Ⅲ)重组蛋白具有较好的免疫原性.

    作者:张忠广;赵恒梅;宫玉香;曾宪忠;常志尚 刊期: 2006年第02期

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