杨光；程庆砾；李春霖；杨勇；贾雅丽；王静雪；岳文；裴雪涛；刘洋
目的：探讨Narcotrend麻醉深度监测下右美托咪定复合丙泊酚在无痛结肠镜结肠息肉切除术中对患者生命体征及麻醉深度的影响。方法选择无痛结肠镜患者90例随机分成Dex组（D）组和对照组（C）组各45例，入室开放上肢静脉，吸氧，监测血压、心率、脉氧饱和度和麻醉深度指数（NTI）。D组缓慢静脉泵注（10 min）右美托咪定0.3μg/kg，然后注射丙泊酚1 mg/kg；C组单独静脉注射丙泊酚2 mg/kg。检查中如有体动反应，追加丙泊酚0.2~0.5 mg/kg。观察丙泊酚用量、可唤醒时间及体动、循环、呼吸抑制等不良反应。结果丙泊酚总用药量和呼吸抑制例数D组明显低于C组（P<0.05）；体动发生例数D组明显低于C组（P<0.05）；循环抑制例数两组无明显差异（P>0.05）；麻醉深度指数（NTI）C组明显低于D组（P<0.05）。结论 Narcotrend麻醉深度监测下右美托咪定复合丙泊酚同单独使用丙泊酚相比能达到更合理的麻醉深度以减少不良反应，并能提供更佳的镇痛效果且大大降低丙泊酚用量。
作者：吉锦泉；王刚；孙柯；周国斌；王志鹏；王妍 刊期： 2015年第02期
目的：研究MSX2基因在胰腺癌PANC-1细胞的上皮-间充质转化（EMT）/间充质-上皮转化（MET）转变中的作用。方法通过脂质体2000将含有MSX2干扰序列的质粒（共3种，分别命名为shMSX2-1、shMSX2-2和shMSX2-3，转染空质粒的阴性对照组NC）转染PANC-1细胞，利用Real-time RT-PCR、Western blot等技术检测MSX2在基因和蛋白水平的表达，检测干扰效率，并选取干扰效率高的一组用于后续试验；进而检测EMT相关上皮标志分子E-cadherin、间质标志分子Vimentin在基因和蛋白水平的表达变化；采用CCK-8法检测干扰前后细胞的增殖能力变化，Transwell和划痕试验比较细胞的侵袭转移能力变化。结果3组干扰质粒中shMSX2-1的干扰效率高，CCK-8试验结果显示敲低MSX2可明显抑制PANC-1细胞增殖能力，与对照组相比差异有显著性（P<0.05）；敲低MSX2可明显抑制PANC-1细胞的侵袭转移，差异有统计学意义（P<0.05）；EMT相关分子E-cadherin表达升高，而Vimentin表达降低，且与对照组相比均有统计学意义（P<0.05）；倒置显微镜下观察敲低MSX2后细胞形态由松散的长梭形变成紧密连接的椭圆形。RT-PCR发现敲低MSX2后转录因子twist和snail表达降低（P<0.05），而slug和zeb1表达变化无差异（P>0.05）。结论敲低MSX2可抑制胰腺癌PANC1细胞的增殖、侵袭转移能力，并且上皮标志分子E-cadherin表达升高，间质标志分子Vimentin表达降低，有发生MET的趋势，MSX2可能通过twist、snail发挥其抑制作用。
作者：张登勇；马翔；吴斌全；崔培元；刘会春；鲁正 刊期： 2015年第02期
目的：探讨金腰带和甲基强的松龙联合应用对脊髓损伤（SCI）大鼠的疗效及其对脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响，为临床治疗脊髓损伤提供理论依据。方法将雌性SD大鼠30只随机分为：（1）假手术组；（2）脊髓挫伤组；（3）甲基强的松龙治疗组（术后8 h内肌注50 mg/kg，此后每天甲基强的松龙肌注量减少10 mg/kg）；（4）金腰带治疗组（50 mg/kg，每日1次灌胃）；（5）金腰带和甲基强的松龙联合治疗组（两种药物及给药方法相加）。采用BBB评分系统对后肢运动功能进行评分。对大鼠脊髓损伤术后4周的脊髓切片进行BDNF免疫组化染色，观察阳性细胞定位、分布以及数量变化。用方差分析进行多个样本间比较。结果 BDNF免疫反应阳性产物主要分布于脊髓灰质腹角和背角神经元。联合治疗组BDNF阳性神经元数量以及BBB评分分值较假手术组、脊髓挫伤组、甲基强的松龙治疗组和金腰带治疗组均显著增高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论甲基强的松龙和金腰带联合治疗脊髓损伤的疗效优于单纯甲基强的松龙治疗组和金腰带治疗组，其发挥疗效可能与上调BDNF表达有关。
作者：李翠英；许争光；王廷华 刊期： 2015年第02期
目的：精神分裂症是一种多基因遗传性重型精神病。我们前期工作已经发现γ-氨基丁酸（GABA）A型受体β2亚基基因（GABRB2）内含子8和9内多个单核苷酸多态性（SNPs）与精神分裂症相关。本项研究探GABRB2基因启动子区的多态性与精神分裂症的相关性。方法采用特异性PCR引物扩增GABRB2基因启动子区（包含多个SNPs），并采用Sanger DNA测法对扩增的PCR产物进行序列测定，以获得待检SNPs的基因型；采用SHEsis软件进行Hardy-Weinberg平衡分析和SPSS软件进行SNPs基因型和等位基因频率在对照组和疾病组之间的差异分析。结果对172例精神分裂症患者和167例正常人对照分析结果发现rs3811996与疾病显著相关：其杂合基因型（A/G）频率在疾病组显著低于对照组；在男性样本中，其A/G基因型和次要等位基因G频率均显著低于对照组。结论本项研究表明GABRB2基因启动子区SNP rs3811996可能为男性偏执型精神分裂症的保护因子，支持了GABRB2基因对精神分裂症的易感性。
作者：周林；宗璐；张璐璐；邓聪；赵存友 刊期： 2015年第02期
目的：探讨妊娠滋养细胞肿瘤肾转移的临床表现、影像学表现及治疗方案。方法回顾性分析一例以肾脏自发破裂出血为临床表现的侵袭性葡萄胎患者的病史、辅助检查及诊治经过。结果治疗前患者滋养细胞肿瘤病灶全身多处转移，经依托泊苷、甲氨喋呤、放线菌素-D、长春新碱及环磷酰胺联合鞘内化疗及手术切除子宫及左肾后β-人绒毛膜促性腺激素（Beta human chorionic gonadotrophin,β-HCG）降至正常，影像学检查原转移病灶均吸收好转。结论妊娠滋养细胞肿瘤全身转移引起转移灶出血，该疾病对以上化疗敏感，适时手术可提高患者的治疗效果。
作者：慕庆玲；肖松舒；万亚军 刊期： 2015年第02期
目的：构建24 h连续性血液净化治疗患者的体外循环堵管风险积分模型。方法研究对象为425例连续性血液净化治疗的患者，其中302例用于建立体外循环堵管风险积分模型，103例用来验证该模型，观察终点为CRRT体外循环管路堵塞。所有数据采用SPSS 17.0软件包进行统计分析。结果24 h CRRT体外循环堵塞的风险积分模型的风险评分为0~5分。模型积分系统的ROC曲线下面积0.790（95%CI 0.719~0.826），P<0.001，可较好地判断24 h内CRRT体外循环是否会堵塞。检验结果显示， CRRT体外循环堵管预测积分模型的拟合度良好，预测堵管的发生率与实际堵管发生率无统计学差异（R2=0.301，P=0.232）。验证组病例中低危、中危和高危三组体外循环管路的生存时间有显著性差异（P<0.05）。结论连续性血液净化治疗体外循环堵管风险积分模型，包括血流量不足、无抗凝剂治疗、HCT、LAC和APTT值等可以预测治疗过程中可能发生的堵管问题。根据预测可及时提前进行干预处理，减少了意外不良事件的发生。
作者：何朝生；符霞；梁馨苓；宋利；史伟 刊期： 2015年第02期
目的：观察术前应用不同负荷剂量阿托伐他汀钙对高龄冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗（PCI）预后的影响。方法将120例≥80岁的择期PCI冠心病患者随机分为20 mg他汀组（40例）、40 mg他汀组（40例）和60 mg他汀组（40例），在入院后48~72 h内接受PCI。分别于PCI术前使用阿托伐他汀钙20、40、60 mg/d，观察3组患者术后心脏生化标志物肌酸激酶同工酶（CKMB）、肌钙蛋白I（cTNI）及高敏C反应蛋白（hsCRP）等指标变化及术后1个月内主要不良心脏事件（MACE，包括心源性死亡、心肌梗死和靶血管血运重建）的发生率。结果终20 mg他汀组有34例患者、40 mg他汀组有40例患者、60 mg他汀组有38例患者完成本课题研究，20、40、60 mg他汀组PCI术后12 h、术后24 h hs-CRP与术前对比显著升高（P<0.05），60 mg他汀组术后24 h CKMB、cTNI、hs-CRP显著低于20 mg他汀组（P<0.05）。60 mg他汀组PCI术后30 d内总MACE事件显著低于20 mg他汀组（2.6%比26.5%, P=0.003），主要原因是60 mg他汀组与PCI相关的心肌梗死显著低于20 mg他汀组（2.6%比20.6%, P=0.016）。三组药物不良反应无统计学差异（P>0.05）。结论高龄冠心病患者择期PCI术前强化阿托伐他汀钙60 mg/d可以显著减少与PCI相关的心肌梗死，并且安全性良好。
作者：郭筱燕；黄学成；王琦武 刊期： 2015年第02期
目的：探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者在化疗中期和中后期进行18F-FDG PET/CT显像判断预后的价值差异。方法 DLBCL初诊患者142例，于标准化疗第3~4个疗程结束进行首次18F-FDG PET/CT评价为化疗中期组，于标准化疗5~8个疗程结束进行首次PET/CT评价者为化疗中后期组，两组各有71例，首次PET/CT显像结果记录为阴性和阳性。所有患者随访18~114个月（平均28.73个月），根据随访结果计算无进展生存时间（PFS）和无进展生存率（PFS%），比较化疗中期组与中后期组患者首次18F-FDG PET/CT显像结果与预后的关系。结果化疗中期组18F-FDG PET/CT显像阴性和阳性率分别为63.4%、36.6%，化疗中后期组PET/CT显像阴性和阳性率分别为66.2%、33.8%，两组PET/CT显像阴性率及阳性率无明显差异（χ2=12.423，P>0.05）。PFS比较，化疗中期组首次18F-FDG PET/CT显像阴性和阳性者PFS分别为63.56和19.23个月（P=0.000），化疗中后期组首次PET/CT显像阴性和阳性者的PFS分别为65.78和24.32个月（P=0.000）。化疗中期组和中后期组首次PET/CT显像阴性者PFS时间无显著性差异（63.56 vs 65.78个月，P=0.613）；化疗中期组和中后期组首次PET/CT显像阳性者PFS时间也无显著性差异（19.23 vs 24.32个月，P=0.274）。PFS率比较，化疗中期组首次PET/CT显像阴性和阳性者PFS率分别为73.3%、15.4%（χ2=12.423，P=0.000）；化疗中后期组首次PET/CT显像阴性和阳性者PFS率分别为74.5%、16.7%（χ2=12.423，P=0.000）。化疗中期组和中后期组首次PET/CT显像阴性者的PFS率无明显统计学差异（73.3%vs74.5%，P=0.613）；化疗中期和中后期组首次PET/CT显像阳性者的PFS率也无显著统计学差异（15.4%vs 16.7%，P=0.274）。结论 DLBCL在化疗中期和化疗中后期进行18F-FDG PET/CT显像均可较好地判断预后，在化疗中后期行PET/CT显像判断预后并不优于化疗中期，因此在化疗中期行18F-FDG PET/CT进行预测预后是合适的，不必延后到化疗中后期。
作者：李蕙旨；吴湖炳；王全师；李洪生；周文兰；田颖；董烨 刊期： 2015年第02期
三尖瓣下移畸形又称Ebstein畸形，是一种较为罕见的先天性心脏病，主要病理改变为：三尖瓣（主要隔瓣和后瓣）不附着在瓣环上，而是螺旋形下移至右心室，同时瓣膜及瓣下结构异常。由于右室发育不全及功能障碍和三尖瓣关闭不全导致的右心容量负荷增加，表现为劳累后气急乏力、心悸、发绀和心力衰竭。本文就三尖瓣下移畸形合并难治性右心衰竭及下肢溃疡1例进行报告。
作者：徐飞；周忠江 刊期： 2015年第02期
目的：探讨Src激酶抑制剂PP2对大鼠星形胶质细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。方法实验分为正常对照组，缺氧/复氧组（H/R；缺氧8 h/复氧24 h），PP2+缺氧/复氧组（PP2+H/R；缺氧前给予10μmol/L PP2作用24 h）。MTT法检测各组星形胶质细胞存活率，流式细胞术测定各组星形胶质细胞凋亡率，Western blotting法检测各组星形胶质细胞中Src激酶、Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果 MTT检测结果显示H/R损伤后细胞存活率降低，而在使用PP2预处理后细胞存活率增加（P<0.01）；流式细胞术实验结果显示H/R损伤后细胞凋亡增加，而在使用PP2预处理后细胞凋亡显著减少（P<0.01）；Western blotting法检测结果显示H/R损伤后Src激酶表达增加，用PP2预处理后Src激酶表达降低。H/R损伤后凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2的比值增加，在用PP2预处理后Bax/Bcl-2的比值显著降低（P<0.01）。结论 PP2可对星形胶质细胞H/R损伤起保护作用，其机制可能与抑制Src激酶的蛋白表达和激活抗凋亡机制有关。
作者：谷昱琛；童旭辉；于丽；焦浩；余彬彬；董淑英 刊期： 2015年第02期
肺动脉高压是由多种因素引起的肺血管功能及结构性异常，导致肺血管阻力增加，引发肺动脉压力升高的临床综合征。胰岛素抵抗是多种心血管疾病的重要危险因素之一，但其与肺动脉高压的关系直到近几年才受到关注。研究发现胰岛素抵抗及其伴发的高胰岛素血症、血脂紊乱、炎症反应和氧化应激，可引起肺血管紧张性增高、血管内皮功能受损以及肺血管重塑等，与肺动脉高压的发生、发展密切相关。因此，采取多种措施改善胰岛素抵抗对预防和治疗肺动脉高压具有重要意义。
作者：柯蕊；吴媛媛；王贵佐；李满祥 刊期： 2015年第02期
目的：通过对比分析国产与进口内镜吻合器在腹腔镜辅助直肠癌根治（Dixon）术中的应用效果，探讨国产内镜吻合器的安全性及可行性。方法收集2012年2月~2013年12月期间在本院确诊为直肠癌需行腹腔镜辅助直肠癌根治的病例64例，随机分为研究组35例和对照组29例。术中研究组使用瑞奇外科器械（北京）有限公司生产的ENDO RLC通用内镜直线切割吻合器及一次性钉匣和一次性使用RCS系列端端吻合器，对照组使用强生医疗器材有限公司已广泛应用于临床的对应产品。对比分析两组病例术中及术后情况。结果所有病例均取得了满意的治疗效果。两组间的手术时间、术中吻合成功率、术后并发症（吻合口出血、吻合口瘘、吻合口狭窄）发生率无统计学差异（P>0.05），而研究组术中所用内镜吻合器的平均费用低于对照组（6604.31±699.95 vs 7822.28±576.98），有明显统计学差异（P<0.05）。结论瑞奇外科器械（北京）有限公司生产的国产内镜吻合器应用于腹腔镜辅助直肠癌根治手术中是安全、有效的，并且还可相对降低手术费用，值得临床推广应用。
作者：戎祯祥；张少凌；管建松 刊期： 2015年第02期
目的：分析内毒素又称脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）血症大鼠心肌组织miRNA表达谱变化，探讨miRNA在内毒素血症心肌损伤中的作用。方法20只雄性SD大鼠随机分为对照组（n=10）和LPS组（n=10）。LPS组腹腔注射LPS 10 mg/kg，对照组腹腔注射等量生理盐水。24 h后颈脱臼处死大鼠，取心肌组织。Real-time PCR检测TLR4、TNF-α、IL-1β表达水平，透射电镜观察其超微结构变化。miRNA芯片筛选心肌组织中差异表达的miRNA，Real-time PCR验证候选miRNA实际表达水平。结果 LPS组大鼠心肌组织TLR4、TNF-α、IL-1β表达明显升高，心肌细胞发生胞质空泡，线粒体水肿、结构破坏等超微结构改变。芯片技术及Real-time PCR证实LPS组大鼠心肌组织中miR-194-3p，miR-344a-3p，miR-465-3p，miR-501-5p，miR-3596c，miR-185-3p，miR-877显著上调，miR-208b-3p，miR-547-3p，miR-141-3p，miR-28-5p，miR-3585-5p显著下调。结论内毒素血症大鼠心肌组织中发现的这些差异表达miRNA可能与其心肌损伤发生有关。
作者：丁桃；李阳；唐睿珠；张旋；云雨；李健；王殿华 刊期： 2015年第02期
目的：探究KA1亚受体的表达上调在内质网应激致海马神经元死亡中的作用。方法将70只成年雄性昆明小鼠随机分为红藻氨酸组（KA组）、衣霉素组（TM）500μg/ml组、TM1000μg/ml组和TM2000μg/ml组，海马内注射KA或不同浓度TM，不同时间段（1、2、3、4、5、8、12 h）灌注取脑，灌注取脑前进行Bederson体征评分，全脑切片FJB染色和免疫组化分析。结果 KA组第3、4、5、8h和TM2000μg/ml组第4、5小时，Bederson体征评分表明中枢神经功能出现明显损伤，FJB染色示海马内细胞死亡增加，免疫组化示KA1和P-eIF2α在海马神经元的表达明显上调（P<0.05）。结论海马内注射KA或TM后结果显示内质网应激中有KA1的表达，在神经元凋亡过程中膜外受体KA1可能首先接受凋亡信号，并向细胞内传导，引起内质网功能紊乱，诱发内质网应激，并进一步促使神经元调亡。
作者：袁磊；龚济钦；张海霞；钱诗蕾；徐斌；曾杰；赵娟；禹华旭 刊期： 2015年第02期
目的：探讨3D打印技术结合数字化技术在复杂胫骨平台内固定植入方案设计中的应用价值。方法收集临床复杂胫骨平台骨折病例以及常用胫骨平台钢板的CT数据，在Mimics中进行骨折三维重建、虚拟复位以及建立钢板三维模型库，然后进行内固定方案的数字化设计。3D打印出骨折复位模型以及钢板模型，在3D模型上按照数字化设计内固定方案进行模拟手术。比较数字化虚拟手术与3D模型模拟手术的内固定植入效果。结果3D模型模拟手术的手术效果与内固定数字化设计方案的手术效果一致，二者螺钉长度无明显差异（t=-1.594；v=12；P=0.137）。结论3D打印技术结合数字化设计能有效的提高复杂胫骨平台骨折内固定植入效果。
作者：黄华军；张国栋；欧阳汉斌；杨洋；吴章林；许靖；谢普生；黄文华 刊期： 2015年第02期
目的：通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）中CD133蛋白和Notch1蛋白的表达及相互之间的关系，研究它们与NSCLC患者临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测305例NSCLC组织和80例正常肺组织中CD133、Notch1以及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达情况。结果在NSCLC组和正常肺组织中CD133、Notch1和VEGF蛋白的阳性表达率分别为48.9%、43.9%、45.6%和10.0%、15.0%、0%，两组之间相比差异有统计学意义；CD133、Notch1和VEGF蛋白的阳性表达率在NSCLC患者肿瘤组织的不同分化程度、淋巴结转移与否及临床分期间差异有统计学意义（P<0.05）；且CD133、Notch1和VEGF三种蛋白之间相互呈正相关关系（P<0.001）。Kaplan-Meier生存分析显示，CD133、Notch1和VEGF蛋白阳性表达组患者的生存时间明显短于其阴性表达组患者，差异有统计学意义；Cox多因素回归分析显示，CD133和Notch1蛋白的表达是影响NSCLC患者预后的独立因素（P<0.05）。结论 CD133、Notch1和VEGF参与NSCLC的发生、发展、浸润和转移，联合检测CD133和Notch1蛋白的表达对NSCLC的进展和预后判断有重要意义。
作者：周蕾；武世伍；俞岚；龚晓萌；宋文庆；承泽农 刊期： 2015年第02期
目的：观察日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj32）疫苗诱导免疫鼠脾细胞免疫应答的动态变化，探讨该重组疫苗的免疫机制。方法88只BALB/c鼠随机分为口服组和滴鼻组，口服组小鼠经口服单次接种106克隆形成单位（CFU）重组疫苗，滴鼻组小鼠经滴鼻单次接种105 CFU重组疫苗；于免疫后0~20周内间隔2周每组随机剖杀4只小鼠，取脾并制备脾细胞悬液，分别经未刺激（脾细胞悬液）、SjAWA刺激和ConA刺激培养。MTT法检测脾细胞增殖效率，流式细胞术检测脾CD4+T细胞和CD8+T细胞亚群变化，双抗体夹心ELISA法检测培养上清液中TNF-α、IL-10和IL-12表达水平。结果与0周相比，未刺激、SjAWA刺激和ConA刺激时，口服组和滴鼻组脾细胞均分别在免疫后2~16周和2~18周发生极显著增殖（P<0.01）；两组CD4+T细胞亚群均于免疫后2~12周显著升高（P<0.01），CD8+T细胞亚群在观察期间升高不明显；不同培养条件下，口服组脾细胞因子TNF-α、IL-10和IL-12水平均分别在免疫后2~14周、2~18周和2~14周升高，于8周、10周和6周达峰值；滴鼻组3者分别在免疫后2~14周、2~18周和2~18周升高，于8周、10周和8周达峰值。结论日本血吸虫重组Bb（pGEX-32）疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。
作者：谭建蓉；李文桂；覃婷 刊期： 2015年第02期
目的：研究信号转导通路mTOR体外对乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用，及对抑癌基因PTEN的负反馈调节的影响。方法用pcDNA3.1-mTOR真核表达质粒及空载质粒转染MCF-7；Western blot检测转染后mTOR蛋白的表达；流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡情况；检测转染后PTEN蛋白的表达。结果转染组细胞的生长速度明显增快，而未转染组和转染空载体质粒组无明显变化。转染mTOR基因后，PTEN蛋白的表达明显下降。结论 mTOR可能通过PI3K/AKT/PTEN与mTOR信号转导通路负反馈调节PTEN的表达。mTOR的增高可促进乳腺癌细胞的生长，为mTOR的特异性的抑制剂的运用提供了理论证据。
作者：刘民锋；郭昭泽；董建宇；杨翼鹏；嵇健；刘润奇；延艳；叶长生 刊期： 2015年第02期
目的：采用多肽制备技术和免疫学技术制备抗钠泵α2亚单位截断性片段及其抗体，为检测和研究钠泵α2亚单位的组织学分布及其功能研究提供实验基础。方法根据NCBI-Genebank获得大鼠钠泵α2亚单位M1~M2膜外区截断性片段目的多肽（LAAMEDEPSNDN），采用9-氟甲氧羰基（Fmoc）固相合成法合成目的多肽，并采用碳化二亚胺法制备出多肽与孔戚血蓝素复合物，免疫新西兰大白兔，免疫4次后获得抗血清，测定其效价。随后采用protein A纯化IgG抗体，并将其用于大鼠主动脉血管平滑肌细胞钠泵α2亚单的组织学检测。结果（1）人工合成的大鼠钠泵α2亚单位截断性片段长13氨基酸残基（LAAMEDEPSNDN-C），理论相对分子质量：1408.48，质谱实测相对分子质量：1407.90；高效色谱分析纯度HPLC纯度>85.5%；（2）ELISA法检测免疫后兔子的抗血清效价均大于1∶512000，蛋白A亲和纯化获得亲和纯化抗体浓度为0.965 mg/ml，按照1∶1000稀释（终浓度1μg/ml），ELISA检测抗体效价为1∶256000；（3）该抗体按照1∶100~1∶200稀释可用于免疫细胞学检测。结论成功制备高效价抗钠泵α2亚单位截断性片段抗体可用于钠泵α2亚单位的ELISA和免疫细胞化学实验，为钠泵α2亚单位的组织细胞学检测和功能研究提供新的实验基础。
作者：张明娟；张美程；朱参战；张超英；段宗明 刊期： 2015年第02期
目的：构建经MHCⅡ通路的屋尘螨1类变应原Der p 1的T细胞表位肽疫苗重组载体。方法分别合成TAT、IhC和含编码Der p 1的3段T细胞表位的融合核苷酸序列，用特异性引物PCR扩增相应的基因片段，分别用相应的双酶切后，用T4 DNA连接酶连接形成TAT-IhC-Der p 1-3T融合基因，并插入至原核表达载体pET-28a(+)中，构建重组原核表达载体pET-28a(+)-TAT-IhC-Der p 1-3T，Bam HⅠ和XhoⅠ进行双酶切和测序鉴定。重组载体转化大肠杆菌E. coli BL21（DE3）菌株，IPTG诱导后，经SDS-PAGE电泳分析和Western blot验证，纯化TAT-IhC-Der p 1-3T蛋白后进行IgE结合试验。结果双酶切和测序结果表明，成功构建了pET-28a-TAT-IhC-Der p 1-3T重组原核表达载体；SDS-PAGE电泳分析显示TAT-IhC-Der p 1-3T可诱导表达；Western blot检测表明该融合蛋白纯化成功；IgE结合试验表明TAT-IhC-Der p 1-3T结合屋尘螨过敏病人血清IgE的能力强于Der p 1变应原（P<0.001）。结论成功构建了可表达经MHC通路的编码Der p 1的3段T细胞表位的重组pET-28a-TAT-IhC-Der p 1-3T载体，纯化的TAT-IhC-Der p 1-3T具有较强的IgE结合能力，从而为后续经MHC通路的特异性免疫治疗奠定基础。
作者：赵蓓蓓；姜玉新；刁吉东；李娜；陆维；李朝品 刊期： 2015年第02期
南方医科大学学报杂志
主管:广东省教育厅
主办：南方医科大学
