李楚凌；史剑波
目的:用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达人血管内皮生长因子(VEGF),分离纯化并检测其生物学活性,以研究其在药学领域潜在的药用价值.方法:利用PCR技术扩增VEGF基因片段,克隆到pQE30表达载体中,转化E.coli M15菌株后用IPTG进行诱导表达.经裂解细胞、变性、复性和Ni-NTA agarose金属螯合柱层析等方法纯化得到VEGF.用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成实验检测VEGF的生物活性.结果:重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了相对分子质量为20 600的融合蛋白,它以不溶性的包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30%左右.经分离纯化融合蛋白SDS-PAGE显示为单一区带.CAM结果表明给药组血管生成数(21.7±3.1、39.3±2.8) 与对照组(15.4±1.9、29.2±4.2)相比有明显增加(P<0.05).结论:利用原核表达系统得到血管内皮生长因子具有天然VEGF生物学活性,为进一步的应用研究奠定了基础.
作者：王晓华；吉琼梅；吴朝霞；董文心 刊期： 2004年第04期
目的:研究肝细胞肝癌中突变型P53和MDM2蛋白的表达对临床预后判断的意义.方法:应用免疫组织化学方法,检测72例原发性肝细胞肝癌手术切除标本突变型P53、MDM2蛋白的表达;与临床病理学指标和术后生存期进行分析比较.结果:突变型P53蛋白阳性28例(38.89%),MDM2蛋白阳性23例(31.94%),二者阳性表达有相关性 (r=0.248, P＜0.05).突变型P53、MDM2蛋白阳性表达病例生存率明显低于突变型P53、MDM2蛋白阴性表达病例(P＜0.01).突变型P53和MDM2蛋白表达均阳性病例13例(18.06%),中位生存期的生存率低.单因素及多因素分析显示,突变型P53蛋白表达、MDM2蛋白表达、肿瘤大小与中位生存期的生存率有关,MDM2是统计学上有意义的独立预后指标(P＜0.0001).结论:应用免疫组织化学方法检测突变型P53和MDM2蛋白的表达可作为原发性肝细胞肝癌预后判断的指标.
作者：王华曦；潘运龙；覃莉；蒋光愉；严林；李文生 刊期： 2004年第04期
概述了SARS-CoV的S蛋白的结构及功能相关研究.严重急性呼吸综合症相关的冠状病毒(SARS-CoV)引起2003年我国南方非典型肺炎爆发流行,波及多个国家和地区.目前全球许多学者对SARS-CoV进行了广泛的研究,发现S蛋白是病毒表面的主要蛋白,它构成冠状病毒科特征性的冠状样结构,在严重急性呼吸综合症的发病机制起着关键性作用,可介导表达相关受体的宿主细胞感染.现已鉴定出SARS-CoV的S蛋白相关受体,同时它在抗病毒感染中是一个关键靶蛋白.
作者：唐小龙；江振友；向军俭；孙晗笑 刊期： 2004年第04期
急性脑血管意外(脑卒中)是常见急危重症,分为缺血性和出血性两大类,是引起死亡的3大病因之一,且致残率、死亡率高.对此类患者早期进行及时有效的诊治,采取正确合理的救护措施是降低病死率及致残率的关键.因此,临床上对急性脑血管意外患者的早期诊治及院前救护工作提出了更高的要求.现将我科155例急性脑血管意外患者的院前救护体会报告如下.
作者：潘燕珍；吴素芳；谭巧君 刊期： 2004年第04期
综述了新生儿高胆红素血症的诊断技术及病因研究现状,如免疫学和分子生物学方法的新研究进展,高胆红素血症患儿基因的突变、缺陷的研究现状以及高胆红素血症患儿的某些酶的活性情况等.
作者：黄从付；柳国胜 刊期： 2004年第04期
目的:了解眼镜蛇毒灌胃后的兔血清(serum of rabbit taking orally cobra venom,SRCV)对人鼻咽癌CNE-2细胞的影响.方法:采用体外细胞培养的方法,观察SRCV对人鼻咽癌CNE-2细胞及人胚肺成纤维细胞的细胞毒作用,及对细胞生长和分裂指数的影响.结果:发现SRCV能够明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞的生长,且其抑制效应随剂量的增加而增加,但该血清对正常人胚肺成纤维细胞的生长却没有明显影响.结论:SRCV对鼻咽癌CNE-2细胞的生长有明显的抑制作用,并且有高度的选择性.
作者：任先达；张海伟；叶春玲；蔡绍晖；叶开和 刊期： 2004年第04期
目的:研究舌慢适应传入纤维终止于三叉神经脊束核和三叉神经感觉主核形成突触的类型及突触各组成部分出现频率的差异,为神经生理学研究和神经解剖学研究提供参考资料.方法:用猫作为试验动物,采用确定部位和功能的传入纤维进行细胞内注射,电镜连续切片观察技术.结果:1.猫舌慢适应传入纤维终止于三叉神经脊束核形成的突触以中间型为主;2.猫舌慢适应传入纤维终止于三叉神经感觉主核形成的突触以复杂型为主;3.形成三联体的数目及形成突触的各组成部分出现的频率,三叉神经感觉主核相对较高.结论:三叉神经感觉主核是舌的主要终止核团.
作者：武延格；潘三强；韩辉；宿宝贵；吕来清 刊期： 2004年第04期
目的:了解激酶插入区域受体(kinase insert domain receptor, KDR)基因和脑信号蛋白Ⅲ (Semaphorin3,Sema3)基因在再生障碍性贫血(AA)和正常人的骨髓基质细胞(BMSC)和骨髓造血细胞中的表达情况.方法:收集9例AA和33例正常骨髓标本,分离单个核细胞(MNC)后体外长期培养扩增BMSC,并收集悬浮细胞(骨髓细胞).RT-PCR-ELISA检测KDR基因和Sema3基因在BMSC和造血细胞中的表达,分析表达率,并以管家基因β2微球蛋白(β2M)为内参照进行半定量分析.结果:KDR基因在正常对照BMSC中的表达率(97.0%)明显高于对应的骨髓细胞(70.8%,P=0.007).KDR基因在AA的BMSC和骨髓细胞中的表达率和表达水平与正常对照比较均无显著差异.Sema3基因在正常BMSC中的表达水平明显低于其对应的骨髓细胞(P=0.035).Sema3基因在AA的BMSC和骨髓细胞中的表达率和表达水平与正常对照组比较均无显著差异.KDR基因和Sema3基因的表达水平在正常造血细胞中呈显著正直线相关(r=0.703,P=0.002).结论:KDR基因在BMSC中的高表达提示其可能在维持造血微环境中有重要作用.Sema3基因在造血细胞中的高表达状态提示其可能具有维持造血细胞生存的作用.KDR基因和Sema3基因在AA中的表达变化不大.
作者：王震；李扬秋；吴秀丽；陈少华；杨力建；张洹；朱康儿；韩忠朝 刊期： 2004年第04期
目的:探讨鸦胆子油乳剂在体外对喉乳头状瘤细胞的抑制作用.方法:将不同质量浓度的鸦胆子油乳剂加入体外培养的喉乳头状瘤细胞中,通过MTT法和流式细胞仪观察其对喉乳头状瘤细胞的抑制作用.结果:鸦胆子油乳剂对喉乳头状瘤细胞有明显的抑制作用,并且随药物质量浓度的增高及作用时间的延长而增强.结论:鸦胆子油乳剂对喉乳头状瘤细胞有明显的抑制作用,为临床小儿喉乳头状瘤术后应用鸦胆子促进康复提供了实验依据.
作者：江逊；曾耀英；狄静芳；何贤辉；冯铮；曾山；陈文弦 刊期： 2004年第04期
目的:探讨电子喉镜下声带疾病的手术治疗方法.方法:Olympus电子喉镜和监视器下切除声带多种病变133例.结果:声带小节66例,1次手术治愈54例,2次治愈8例,1例有效,3例3次手术均复发,总有效率95.5%.声带息肉55例,1次治愈35例,2次治愈6例,7例有效,有效率87.2%,7例无效;声带乳头状瘤5例,1次手术成功;声带囊肿5例,1次手术成功;不典型上皮增生2例,1次手术成功.结论:电子喉镜下进行声带炎性病变和良性肿瘤的效果明确,具有手术简单,视野清晰,可重复操作,费用低等优点.
作者：李杜若；黄丽葵；高春生 刊期： 2004年第04期
目的:探讨nm23-H1基因的表达与白血病细胞HL-60增殖之间的关系.方法:以25 ng/mL阿糖胞苷处理HL-60细胞,MTT法测定细胞生长抑制率,NBT还原比色法判断细胞分化状况,RT-PCR检测nm23-H1基因表达的变化;构建nm23-H1基因的真核表达质粒pEGFP-N1-nm23-H1,转染HL-60细胞,通过细胞生长曲线和血清依赖性实验检测nm23-H1基因的过表达对HL-60细胞生长的影响.结果:小剂量Ara-C对HL-60细胞的生长呈时间依赖性抑制,作用4 d后细胞NBT还原能力增强且nm23-H1基因的表达下调;转染nm23-H1基因的HL-60细胞生长加快、血清依赖性下降.结论:Ara-C对HL-60细胞增殖的抑制作用与下调nm23-H1基因的表达有一定关系;nm23-H1基因在HL-60细胞中的过表达有促细胞增殖的作用,即增高了HL-60细胞的恶性程度.
作者：袁茵；王一飞；张美英；熊盛；李久香；胡红梅；刘秋英；吴志聪 刊期： 2004年第04期
目的:探讨雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜的表达.方法:利用大鼠内异症动物模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测子宫内膜ER和PR mRNAs的表达情况.结果:内异症模型组大鼠异位内膜ER、PR mRNAs的表达低于在位内膜和对照组正常子宫内膜,与后两者比较差异有显著性意义(P<0.01);而模型组在位内膜ER、PR mRNAs的表达与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05).内异症模型组异位内膜ER/PR mRNA大于在位内膜和正常子宫内膜ER/PR mRNA(P<0.01).结论:内异症大鼠异位内膜ER mRNA表达的相对增高在内异症的发生与发展中起着一定的作用.
作者：郑辉；李洪义；宇丽；王自能；金海燕；王跃春 刊期： 2004年第04期
目的:加深对临床表现不典型的肾综合征出血热的认识,减少误诊率.方法:对26例不典型的肾综合征出血热进行回顾性分析,总结其临床表现的特点及误诊状况.结果:不典型的肾综合征出血热早期误诊率高达65.38%.尽管所有的病例均有发热,但常因某一脏器或其它症状表现突出而导致误诊.结论:不典型的肾综合征出血热临床表现多种多样,应予以重视.及时检查肾综合征出血热抗体,可避免漏诊误诊.
作者：梁旭竞；何玮；张立伐 刊期： 2004年第04期
腔镜下甲状腺切除术是近年开展的新技术,它把手术切口微小化并隐藏起来,从而减少手术对患者的创伤,降低了并发症的发生,达到美观微创和治疗的目的.我院于2003年3月～2003年4月开展了经胸壁入路的腔镜下甲状腺切除术65例,现将术中并发症的防护措施报告如下.
作者：熊英；吴小珊 刊期： 2004年第04期
目的:探讨各种影像学手段对肺隔离症的诊断价值.方法:搜集经手术病理、主动脉造影证实的27例肺隔离症病人,其中叶内型25例,叶外型2例.所有病例都摄有胸部正侧位片,23例行平扫及增强扫描(其中5例行螺旋动态增强CT扫描),6例行磁共振成像MRI检查,3例行血管造影.结果:胸部平片表现为肺内结节、团块状影(21例)及囊性病变(6例).CT示含气体或液体的囊肿或软组织肿块18例,病变为肺气肿所包裹5例.螺旋CT对异常供血血管显示率(83%)高于普通CT检查(59%).MRI中4例为软组织结节或肿块,2例为含气囊肿,3例显示出异常的主动脉供血血管.结论:胸部X线平片对肺隔离症的发现及定位有价值,CT(尤其是螺旋CT动态增强扫描)及MRI可取代血管造影立体地显示主动脉异常供血血管,且对肺部病变的评价具有优越性,是肺隔离症的佳影像学检查手段.
作者：夏宇；周飞；张铁钢；曾纪珍；韩亮星 刊期： 2004年第04期
对主要的现代影像学检查方法在颈部肿块诊断中的应用进展进行综述,在各种影像检查中,超声以简便易行作为首选,螺旋CT以较高分辨率的多轴位成像而被广泛应用,MRI以高软组织分辨率、多参数、多方位成像和新技术的不断应用而成为佳的诊断方法.
作者：陈碧敏；李恒国 刊期： 2004年第04期
目的:评价吲哚美辛对人喉癌Hep-2细胞系的抑制作用.方法:应用不同剂量的吲哚美辛作用于人喉癌细胞系Hep-2后,进行细胞形态观察,并用台盼蓝染色法检测细胞生长情况和流式细胞仪分析细胞DNA含量.结果:Hep-2细胞系在吲哚美辛作用下,细胞生长形态改变,细胞活力降低,流式细胞仪分析形成明显的亚二倍体峰,并与药物剂量及作用时间有依赖关系,电镜下见凋亡细胞.结论:吲哚美辛能抑制人喉癌细胞系Hep-2的生长,诱导细胞凋亡.
作者：王继群；高煜；山艳春；江逊；狄静芳；冯铮 刊期： 2004年第04期
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和神经生长因子(NGF)对免疫功能的影响.方法:通过小鼠巨噬细胞吞噬,溶血空斑形成细胞(PFC)和脾细胞增殖等实验,观察bFGF和NGF对正常小鼠免疫细胞功能的影响.结果:一定剂量的bFGF、NGF对小鼠免疫细胞功能有较明显的促进作用,且表现具有协同促进效应,而同剂量的NGF对免疫功能的促进作用略强于bFGF.此外,bFGF、NGF还能协同促进活化淋巴细胞分泌sIL-2R.结论:一定剂量的bFGF、NGF表现出较明显的免疫促进作用,并存在协同效应.
作者：王文君；林剑 刊期： 2004年第04期
目的:构建和表达一种带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和人酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor, aFGF)突变体的融合蛋白S,在创伤皮肤表面应用时能自动裂解成有抗感染功能的天蚕素杂合肽AD和皮肤修复功能的aFGF突变体.方法:利用PCR技术分别扩增出带有凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD基因和aFGF突变体基因.再利用两者作为模板,用PCR方法扩增出编码融合蛋白S的DNA.将该DNA片段插入到载体pPICZαA中,并利用电转法将质粒转入毕赤酵母smd1168中,Zeocin抗性筛选重组转化子.甲醇诱导72 h,SDS-PAGE电泳检测融合蛋白S的表达,并用Western-blot杂交检测融合蛋白S的免疫原性.结果:筛选出的重组转化株在甲醇诱导后能表达相对分子质量约为19 000的融合蛋白S,而该蛋白能与aFGF抗体产生免疫反应.结论:用PCR方法获得编码含凝血酶切割位点的天蚕素杂合肽AD和aFGF突变体的融合蛋白S DNA,并在毕赤酵母中实现了表达.
作者：苏志坚；吴晓萍；郑青；黄亚东；庞实锋；冯雅；李校堃 刊期： 2004年第04期
目的:研究电针对脑梗死大鼠尾壳核、海马CA1区缺血半影(IP)区神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元的影响,为探讨针刺治疗脑梗死神经机制提供实验依据.方法:采用线栓法建立大鼠永久性大脑中动脉栓塞的脑梗死模型,分为缺血组和缺血+电针组;用免疫组化的方法观察尾壳核、海马CA1区IP区nNOS免疫阳性神经元表达的变化.结果:(1)缺血组:缺血1 d,尾壳核IP区nNOS免疫阳性神经元深染固缩;缺血7 d后,阳性神经元数目增加(P<0.05);在海马CA1区IP区,缺血1 d,阳性神经元分布广;缺血7 d,数目减少(P<0.05);缺血14 d,数目较缺血7 d时增加(P<0.05).(2)缺血+电针组:尾壳核IP区nNOS免疫阳性神经元数目较缺血组增加(P<0.05);在海马CA1区IP区,电针1 d,阳性神经元分布局限,数目较缺血组减少(P<0.01),电针7 d后,数目较缺血组增多(P<0.05).结论:电针对nNOS免疫阳性神经元调节具有双重性.既能减少电针1 d时海马IP区nNOS表达,减轻一氧化氮(NO)的毒性作用;又能加速海马(电针7、14 d)、尾壳核IP区nNOS表达的恢复.
作者：王芳；潘三强；吕来清；宿宝贵 刊期： 2004年第04期
暨南大学学报（自然科学与医学版）杂志
主管:广东省教育厅
主办：暨南大学
