周如华；张健；李景辉；陈维忠
1 案例资料1.1 简要案情2013年7月15日,犯罪嫌疑人撬锁进入某住户家中,盗取金佛、名贵字画及现金10余万元等物品.因现场已被严重破坏,无法提取指纹等痕迹,仅提取到1把螺丝刀,怀疑曾被嫌疑人使用,要求进行人体脱落细胞DNA检验.1.2 DNA提取及检验DNA提取取细轴棉签用TES缓冲液浸湿(半干),采用两步擦拭法分别擦拭螺丝刀橡胶把手和金属杆两部分,分别放入1.5mL离心管中,各加入TES400μL、10％ SLS 80μL及10mg/mL蛋白酶K 20μL;涡旋振荡10s,37℃消化6h;再加入10mg/mL蛋白酶K 10μL,涡旋振荡10s,37℃消化6h;每管加满硫氰酸胍溶液,12 000r/min离心2min,将上清液移至干净的1.5mL离心管中,每管加入20μL硅珠悬液;室温静置10min,涡旋震荡5s后再静置10min,12 000r/min离心2min,弃上清.在沉淀物中加入70％的冷乙醇1mL,充分悬浮,12 000r/min离心2min,弃上清;重复上述洗涤过程1次后烘干.加入10μL去离子水,充分溶解沉淀物,56℃保温20min,12 000r/min离心2min,取上清液备用[1].
作者：李承承；冯燕；俞卫东 刊期： 2014年第05期
1 案例资料1.1 简要案情作者在对1例非正常死亡案件死者的血样进行DNA检验中,发现D3S1358基因座呈三带型.1.2 检验方法STR分型 按照硅珠法[1]提取血样模板DNA,用Identifiler Plus荧光检测试剂盒进行PCR扩增,产物在ABI 3130XL遗传分析仪进行分型检测,使用GeneMapper ID-X软件进行数据分析.筛选阳性克隆设计的引物序列见表1.PCR反应体系为25 μL,内含反应混合物10μL、引物混合物(20μmol/L)0.3μL、Taq酶(5U/μL)0.25 μL、模板DNA 4μLo PCR程序:95℃11min;94℃45s,58℃45s,72℃ 1min,共30个循环;60℃ 60min.PCR产物按Bio-Basic pUCm-T Vector手册操作,与T载体连接后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,涂布LB平板培养基(含氨苄青霉素、IPTG、X-Gal),37℃培养14～16h,筛选白色阳性克隆菌落.
作者：王旻东；袁文勇；俞卫东 刊期： 2014年第05期
本文应用DNATyperTM 19直扩试剂盒(公安部物证鉴定中心研制),对湖南地区汉族人群18个STR基因座进行遗传多态性调查,为法医学研究和实践提供基础数据.1 材料与方法1.1 样本从湖南省违法犯罪人员数据库筛选获得2 437份湖南地区汉族无关个体血样(博坤公司血样采集卡),样本来源地覆盖全省14个市州.1.2 STR扩增及分型检测采用DNATyperTM 19直扩试剂盒进行直接扩增,操作按试剂盒说明书进行[1-2],扩增产物经3730xl型遗传分析仪(美国AB公司)检测,GeneMapper v3.2.1软件分型.
作者：张建；谭卓毅；白雪；陈水琴；冯锐；赵兴春 刊期： 2014年第05期
1 案例资料任某,男,48岁.2013年4月14日被人用石块打伤头部,伤后2h到医院就诊.病历记载:被人打伤后无昏迷,感头晕,头痛,伴有恶心呕吐,鼻腔出血.入院查体:神志清楚,语言流利,查体合作.瞳孔对光反应灵敏,右额部肿胀、压痛,局部皮肤擦伤.4月14日CT片示:右额部皮下软组织肿胀、增厚并见高密度影,近颅骨处可见低密度影,相应部位颅骨下可见点状低密度影;右侧额骨(额窦前后壁)可见低密度影,断端未见明显错位,额窦内可见高密度影,可见液平(图1).三维重建示骨折线自右额部至眉弓部.4月15日CT片示:右额部软组织肿胀高度变低,向四周弥散,越过矢状缝;右侧额叶可见斑片状高密度影,CT值69HU,周边可见环形低密度影;右额部颅骨可见线样低密度影,额窦内可见高密度影及液平(图2).4月17日CT片与前片比较变化不大.4月23日CT片示:右侧额叶脑挫伤已吸收.脑池、脑沟无增宽,脑室无扩大.中线结构居中(图3).诊断:右额叶挫裂伤;右额头皮血肿;右额骨骨折;右额窦积液;脑外伤后神经反应.同年5月6日进行法医学检验,查体未见明显外伤,未诉其他不适.
作者：曹文平；赵彬；孙德江 刊期： 2014年第05期
人类反转座核元件LINE-1序列和Alu序列甲基化水平的变化与多种疾病的发生、发展有密切的联系,因此是相关疾病,尤其肿瘤和癌症预测、诊断、治疗及预后的新标记.近年来,二者在法医学方面的研究也逐渐展开,主要集中在同卵双生子的鉴别、年龄的鉴定、组织的鉴定等方面,有望成为法医DNA分析领域新一代的遗传标记.本文综述LINE-1序列和Alu序列甲基化在医学、法医学等领域的研究进展,希望能为相关研究和应用提供参考.
作者：徐洁；付光平；杜情情；李淑瑾 刊期： 2014年第05期
目的 建立全血中亚硝酸盐的离子色谱分析方法.方法 将0.5mL全血和1mL水混合,用乙腈沉淀血液中的蛋白质后依次过C18柱、Ag柱和Na柱,用于去除其中的有机物和氯离子后进行离子色谱检测,并对蛋白沉淀溶剂、前处理柱等佳实验条件进行考察.结果 采用本文方法对空白添加全血进行检测,在色谱图上亚硝酸根离子及其氧化产物硝酸根离子的保留时间分别为10.02min、19.21min.选择乙腈作为蛋白沉淀剂,C18柱去除有机物,Ag柱去除氯离子,Na柱去除银离子.全血中亚硝酸根离子的检出限为0.05 μg/mL,亚硝酸根和硝酸根的总回收率为95.9％ ～ 117.3％.结论 本文方法简便,回收率好,灵敏度高,适用于中毒者血液中亚硝酸盐的检测.
作者：唐磊；应剑波；高珊；时巧翠；姚伟宣 刊期： 2014年第05期
年龄推断是法医学研究的重要内容.近年来表观遗传学研究发现,基因组DNA甲基化总体水平随年龄增加而降低,同时部分位点的甲基化水平却随年龄增加而升高.通过检测DNA甲基化水平,构建与之相关的年龄变化模型,可用于推断个体年龄.本文对DNA甲基化与个体年龄的相关性、适用于法医学领域的检测方法及其在法医学年龄推断方面的应用前景进行综述,希望能为相关研究和应用提供参考.
作者：徐程；丰蕾；杨帆；李彩霞；凃政；胡兰 刊期： 2014年第05期
目的 比较7种一氧化碳中毒血样分光光度含量测定方法的特点及适用性.方法 用空白血添加一氧化碳配制不同浓度的样品,采用双波长法、还原法(3种)、切线法和导数光谱法(2种)进行检测,对各种方法线性范围、重现性和操作中注意事项等内容进行考察,并用实际案件检材验证和比较.结果 还原法一在30％～70％、还原法三在20％～100％,其他方法在20％～70％范围内,线性关系良好;样本浓度超过或低于50％,采用切线法有一定误差;导数法及还原法三因需要制备CO饱和样本,操作略微繁琐,但导数光谱法计算结果准确性好.结论 几种方法均可用于一氧化碳中毒血的检测,实验结果可为方法的实际应用提供借鉴和帮助.
作者：张婷；王瑞花；于忠山 刊期： 2014年第05期
1 案例资料1.1 简要案情某日,3名男子在公共场所寻衅滋事逃逸,警察在现场提取到遗留的3枚嫌疑人咀嚼过的槟榔,要求进行DNA分型.1.2 DNA检验样本处理3枚槟榔中2枚较干燥,表面纤维稀疏蓬松,直接剪取槟榔纤维;1枚表面相对潮湿,用无菌脱脂棉在表面进行擦拭.DNA提取及纯化将上述槟榔纤维和擦拭脱脂棉分别置于1.5mL EP管中,加1 000μL纯水清洗,离心,弃上清,保留约100μL液体和沉淀物;加300 μL20％ Chelex-100溶液和20μL 20mg/mL PK,56℃过夜;振荡,100c℃ 15min;振荡,13 000r/min离心5min.取约400μL上清液,使用纳米磁珠试剂盒进行纯化.
作者：胡清清；何仕霞；胡晓星；黄方方；黄代新 刊期： 2014年第05期
目的 观察不同死亡原因大鼠尸体血液中红细胞溶血速度的变化规律,为死亡原因的法医学推断提供新思路.方法 40只SD大鼠随机分为4组,分别以断髓、置于99％ CO的空间、高坠、勒颈方式处死后,取各组大鼠右心室血液,于死后即刻(0h)、8h、16h、24h、32h、40h、48h、56h、64h、72h,采用显微镜数码图像法进行全血红细胞计数(CBC),并对组内和组间数据进行统计学比较分析.结果 4组血液红细胞数量在死后即刻至72h期间,均随时间的延长因溶血而减少.其中0～ 16h,各组溶血速度无明显差异(P ＞0.05);16 ～48h,速度加快,溶血速度以CO中毒组(88.50 ±25.99)％快,其次为高坠(69.33±29.52)％和断髓组(48.78±3.17)％,机械性窒息组(41.90±9.61)％慢,组间比较具有显著性差异(P ＜0.05);56h后,溶血速度再次减慢,至72h机械性窒息组仍有少量红细胞存在.结论 4组不同死因大鼠死后不同时间红细胞计数均减少,各组间差异具有统计学意义,其变化特征可为死亡原因的推断提供新的思路.
作者：丁劲峰；徐国辉；杨胜昌；赵琳琳；高香亭；陈盼；王笑明 刊期： 2014年第05期
目的 筛选识别可卡因的特异性核酸适体,制备可卡因核酸适体测试条(盒).方法 通过SELEX技术筛选可卡因核酸适体,制备胶体金标记可卡因完全抗原(COC-BSA),制作可卡因层析测试条,并对方法特异性、灵敏度、准确性等性能指标进行考察和验证.结果 甲基苯丙胺等64种药品和毒品采用本文研制的可卡因测试条检测,结果均为阴性,无交叉反应;检测可卡因低浓度在5ng/mL,比胶体金单克隆抗体方法检测高5倍;将测试条密封45℃烘烤1个月后,检测结果与未烘烤过的测试条检测结果一致;与GC/MS检测结果对照,准确性为100％.结论 本文研制的可卡因核酸适体检测试条,性能稳定,特异性良好,灵敏性和准确性均可达到实际检测的要求,在毒品、毒物的检测中具有广阔的应用前景.
作者：曾立波；胡小龙；张玉荣；丁国荣；张润生；朱凯；梁晨；曹芳琦 刊期： 2014年第05期
目的 观测大鼠-骨骼肌损伤后不同时间点的病理学变化,为损伤时间推断的研究和应用提供依据和参考.方法 SD大鼠40只随机分为实验组(35只)和对照组(5只),实验组用500g重的打击器打击大鼠右下肢,建立大鼠骨骼肌机械性损伤动物模型,并随机均分为伤后6h、12h、1d、3d、7d、10d、14d组.应用HE染色、Mallory染色和图像分析法观测大鼠骨骼肌损伤的病理学改变.结果 伤后6h,损伤区骨骼肌变性、间质大量出血和炎细胞浸润;12h～1d,骨骼肌坏死,伴大量炎细胞浸润,以PMNs和MNCs为主,数量分别达到高峰;3d起,坏死骨骼肌被逐渐清除,PMNs和MNCs数量逐渐减少,FBCs和新生骨骼肌开始出现,少量胶原纤维形成;7d,FBCs和新生骨骼肌数量继续增多,伴新生血管生成和胶原纤维沉积;10d～ 14d,FBCs数量和胶原纤维沉积分别达到高峰.结论 大鼠骨骼肌损伤区PMNs、MNCs和FBCs数量,以及胶原纤维沉积随损伤经过时间的规律性变化,可为损伤经过时间推断研究提供参考.
作者：于天水；官大威；刘力；赵锐；张海东；百茹峰；郭兆明；张艳；张振华 刊期： 2014年第05期
目的 人骨骼和牙齿DNA提取方法的比较和优化.方法 收集18份不同个体的长骨、30颗磨牙和同一个体2根股骨、8颗磨牙.利用TissueLyser-Ⅱ组织破碎仪和PreFiler Express BTATM法医DNA提取试剂盒(BTA法),应用Automate ExpressTM自动化法医DNA提取系统提取DNA,进行STR分型,与脱钙法进行比较,并进行实验条件优化.结果 用TissueLyser-Ⅱ结合BTA法,约2.5h即可完成骨骼和牙齿的DNA提取,分型成功率分别为94.4％和96.7％.与脱钙法比较,两种方法获得DNA质量浓度和检出率比较接近(P＜0.05),但BTA法在操作过程方面更具优势.佳样本量为100mg,消化时间为2h.结论 采用TissueLyser-Ⅱ组织破碎仪结合BTA法对骨骼和牙齿进行DNA提取和分型检验,能满足实际检案的要求,可在法医学实践中选择使用.
作者：骆继怀；孙红兵；杨鑫；哈飞；高海鹏 刊期： 2014年第05期
1 案例资料简要案情2011年9月18日,7人驾驶私人游艇出海游玩,在近海岸的A海域(温州瑞安)遭遇大浪,游艇倾覆沉没,其中5人死亡.4名死者(男性)于9月20日在A和B海域(温州苍南)分别被打捞上岸;另1名死者姚某(女,40岁)于9月28日在C海域(福建平潭)被打捞后即被冷冻.经查询,9月18日至20日A和B地平均高气温29.3℃、低气温21℃,风力3～4级,9月18日至28日C地平均高气温27℃、低气温23℃、风力6～7级.
作者：汤家全 刊期： 2014年第05期
无名尸体身源鉴定需要进行DNA分型检验,样本的采集多通过心脏穿刺抽取血液.但也常会遇到操作失败,抽取不到血液.本文介绍一种锁骨下静脉穿刺采取尸体血液的方法,可为同行参考.1 操作方法尸体置于仰卧位,将一次性注射器(50mL)的活塞向后抽出2cm,在胸锁关节外约2cm锁骨上缘处向内下斜45°进针穿刺,刺入1cm后,边进针,边抽动活塞.其过程中如感觉阻力过大,可将注射器内的空气向组织内注射一部分后再继续进针,直至抽出血液.血液不易抽出时,可适当垫高尸体的肢体、臀部;如发现针头堵塞,需清理或更换针头后再抽.
作者：王玉辉 刊期： 2014年第05期
1 案例资料1.1 简要案情2007年10月26日,某山林的水沟内发现1具白骨化尸体,仅胃、肝残存少许腐败组织.1.2 毒物分析检验检材处理 取绞碎后胃、肝组织各约30g,用无水硫酸钠脱水,加入苯15mL,置于具塞三角烧瓶中超声提取20min,震荡20min,用活性炭过滤.重复上述操作,分别用酸液调至pH =2及用碱液调至pH=10,合并提取液,溶剂自然挥干,用1 mL无水乙醇溶解,备检.提取泥土作对照组,重复上述操作,样品待检.
作者：武湖；李瑞；神伟 刊期： 2014年第05期
本文采用PowerPlex 16 System荧光标记复合扩增系统,对广东东莞地区汉族群体15个STR基因座遗传多态性进行分析调查,旨在为法医学个体识别、亲权鉴定及相关研究提供基础数据.1 材料与方法1.1 样本采集东莞地区祖孙三代均生活在东莞地区汉族无关个体的血样或带毛囊头发样本共600例,均为作者所在实验室积累,其中男性324例,女性276例.
作者：袁艳君；杨柳青；易俊波；王军 刊期： 2014年第05期
以DNA为基础的STR和SNP遗传标记的检验,已广泛应用于各种个人识别、亲子鉴定和人口失踪案件.但现场DNA样本分型不能与相关个体匹配时,利用特征表型信息SNP则可能为侦查提供有价值线索.本文综述了近年来特征表型信息SNP在法医学应用中的研究进展,并简述其发展方向,旨在为相关研究和应用提供参考和借鉴.
作者：许淼；李淑瑾；丛斌 刊期： 2014年第05期
1 案例资料简要案情某女性,55岁,因纠纷被他人掌击左面部后右侧头部倒地,即感头昏、耳鸣,数小时后出现右耳听力下降,左耳闷胀感.临床检查伤后4天入院,无吸烟、饮酒史,近期无感染,血压21.3/12.8kPa(160/96mmHg).专科检查见:双耳外耳道通畅,鼓膜未见穿孔.电测听示右耳骨导(BC)消失,气导(AC)极度聋.声导抗检查示:双耳鼓室压图A型;峰压点右耳0dapa,左耳15dapa;镫骨肌反射右耳同侧未引出,左耳对侧2kHz120dB引出,0.5kHz、1 kHz、4kHz均未引出.听力学检查示:双耳咽鼓管功能良好,右耳全聋.颞骨磁共振平扫检查(MR)及内耳迷路水成像检查无异常.入院诊断:右耳突发性聋.2周后复查听力示右耳全聋.出院修正诊断:右耳迷路震荡.
作者：赵丽丽；陈晓瑞 刊期： 2014年第05期
1 案例资料1.1 案情简要及现场勘验某女,41岁,某日被人发现死于租住的房屋内.该屋为单间结构,木门上球型锁完好,无撬压痕迹.尸体俯卧于房间地面的竹凉席上,衣着完整,赤脚.死者口鼻部被封口胶带缠绕多层,剩余部分垂落于死者头部右侧.房间西侧窗户的防盗网无撬压痕迹,防盗网顶部系有1条红色尼绒绳(对折4次并多次打结),顶端距离地面205cm,末端距离地面170cm,其正下方有1把折叠椅,椅面距离绳顶端160cm.房间衣柜内物品整齐,垃圾桶内有1段封口胶(起始部位)及1张沾有血迹的止血贴,此外未发现明显痕迹物证.经查,死者多年不孕,数天前曾做输卵管堵塞疏通治疗手术.
作者：李学刚；郭勇；戚函；阙正龙 刊期： 2014年第05期
中国法医学杂志
主管:中华人民共和国公安部
主办：中国法医学会 公安部物证鉴定中心
