陈愉；张智洁；孙继梅；赵立；李胜歧
PCR已广泛用于HBV感染标志物病毒DNA的定量检测~([1]),对PCR产物进行测序可分析HBV基因点突变,如检测拉夫米定等药物治疗诱导的与耐药相关的HBV基因点突变~([2-3]),研究乙型肝炎慢性化与转归的分子机制~([4]),分析基因多位点突变与HBV感染导致的肝细胞癌转移与复发的疾病预后的关系~([5]).PCR在HBV基因多位点突变的检测与研究中起重要作用.
作者：姚全良；余克花；王鹏；刘金辉 刊期： 2010年第02期
目的 评价改良多重PcR筛查男性非梗阻性无精子症和严重少精子症患者Y染色体AZF缺失类型的价值.方法 在Y染色体STS常规引物序列的5'端连接一段非人类同源序列的寡核苷酸链,合成嵌合引物对.根据非人类同源序列的寡核苷酸链设计通用引物对,与嵌合引物对在同一反应体系中对人类基因组DNA进行多重PCR扩增,并用以评价筛查262例非梗阻性无精子症和严重少精子症患者中AZF a、b、c区域的微缺失状况.结果 用改良多重PCR筛查262例非梗阻性无精子症和严重少精子症患者,发现AZF微缺失33例(12.60%),其中AZF c缺失27例,AZF b+c缺失6例,与EMQN推荐方法检测的结果相比,缺失阳性符合率为100%(33/33),且未出现假阳性.改良多重PCR与EMQN推荐方法检测Y染色体多个STS的电泳结果显示,2种方法得到的sY84、sY86、sY127、sY134、sY254、sY255、SRY位点扩增产物的均一性好,扩增产物条带清晰.结论 改良多重PCR能较好地筛查出男性非梗阻性无精子症和严重少精子症患者Y染色体AZF缺失类型.
作者：叶峻杰；阎慧；李宗芳；郭海；王跃力；李江川；赵树华 刊期： 2010年第02期
ApoA5是人apoAI-CⅢ-AⅣ基因序列中1个血浆载脂蛋白基因家族新成员~([1-2]).构建ApoA5基因敲除及ApoA5转基因鼠模型研究证实,ApoA5可调节TG水平,是冠状动脉疾病一个独立负危险因子~([3]).
作者：倪军；张葵；李雷；魏红霞；邱方；顾光煜 刊期： 2010年第02期
目的 探讨骨髓涂片和切片中巨核细胞多形性改变在慢性MPD(CML-CP、ET、PV及PMF)中的诊断意义.方法 182例MPD患者采用骨髓抽吸-活检双标本同步取材,获取骨髓涂片和切片标本.骨髓涂片行瑞氏-姬姆萨染色和CD4_41免疫组织化学染色,骨髓切片行苏木素-姬姆萨-酸性品红染色.将涂片和切片中的巨核细胞多形性形态定义为5类,分别为Ⅰ型(包含型);Ⅱ型(少分叶核型);Ⅲ型(巨大多分叶核型);Ⅳ型(小核固缩型)和Ⅴ型(脱落型).骨髓涂片和切片中的巨核细胞簇分别计为未见巨核细胞簇状分布(0);小于6个的小簇巨核细胞组成为主(+1);至少6个以上的大簇巨核细胞组成为主(+2)3种情况.同步分析骨髓涂片和切片中的各型巨核细胞多形性变化以及巨核细胞簇的检出率.结果 CML-CP组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和正常型的巨核细胞在骨髓涂片中的检出率分别为(3.73±3.84)%、(14.19±7.62)%、(5.99±4.67)%、(34.37±10.79)%、(9.45±6.87)%及(32.28±7.67)%,在切片中的检出率分别为(3.13±2.30)%、(12.61±9.28)%、(4.94±4.27)%、(35.26 4±9.63)%、(9.47±5.89)%及(34.58±6.81)%,两者差异无统计学意义(t值分别为0.524、0.510、0.645、0.239、0.011、0.869,P均>0.05).ET组Ⅰ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为(6.17±2.89)%,明显高于骨髓切片的(2.42±1.28)%,差异有统计学意义(t=7.183,P<0.01):Ⅴ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为(6.28±3.34)%,明显低于骨髓切片的(10.18±4.03),差异有统计学意义(t=3.944),P<0.01);其余各型(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和正常型)差异无统计学意义(t值分别为0.079、0.122、1.643、1.638,P均>0.05).PV组V型巨核细胞的骨髓涂片检出率为(6.55±4.11)%,明显低于骨髓切片的(10.30±3.34)%,差异有统计学意义(t=2.351,P<0.05),其余各型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和正常型)差异无统计学意义(t值分别为1.635、0.301、0.132、0.704、0.681,P均>0.05).PMF组Ⅳ型巨核细胞的骨髓涂片检出率为(13.05±5.24)%,明显低于骨髓切片的(29.14±8.72)%,差异有统计学意义(t=5.245,P<0.01);正常型巨核细胞在骨髓涂片检出率为(33.58±14.39)%,明显高于骨髓切片的(23.01±7.96)%,差异有统计学意义(t=2.132,P<0.05),其余各型(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ型)差异无统计学意义(T值分别为0.787、0.646、2.062、0.869,P均>0.05).CML-CP组和PV组中骨髓涂片和切片中巨核细胞簇检出率差异无统计学意义(x~2=2.772,P>0.05),均以小簇检出为主.ET组中骨髓涂片中小簇状分布的巨核细胞簇的检出率明显高于切片,而大簇状分布的巨核细胞簇检出率明显低于切片(x~2=13.748,P<0.01).PMF组中骨髓涂片无巨核细胞簇的检出率明显高于切片,而大簇状分布的巨核细胞簇的检出率明显低于切片(x~2=18.741,P<0.01).结论 骨髓涂片与骨髓切片同样可以观察到巨核细胞多形性改变,通过仔细观察巨核细胞多形性改变,我们认为对MPD的分型和鉴别诊断具有一定的参考价值.
作者：朱蕾；卢兴国；赵小英；徐根波；张晓红；王炜琴 刊期： 2010年第02期
目的 研究肺炎嗜衣原体3种重组抗原Cpn0146、Cpn0147及Cpn0308应用于肺炎嗜衣原体感染血清学诊断中的价值.方法 构建pGEX6p-2/Cpn0146、Cpn0147、Cpn0308重组质粒,并诱导表达重组蛋白,采用间接ELISA法和免疫印迹法(Western-blot)分析其免疫原性及其免疫反应性.建立分别以3种重组蛋白为包被抗原的间接ELISA法,与肺炎嗜衣原体IgG商品诊断试剂盒平行检测183份呼吸道感染患者的血清标本及32份沙眼衣原阳性患者血清标本,比较各方法检出准确性及阳性率.结果 GST-Cpn0146、Cpn0147、Cpn0308免疫兔血清中特异性IgG抗体效价滴度分别达1:6 400、1:12 800和1:12 800以上;以3种重组蛋白为包被抗原的ELISA法准确性分别为92.3%、94.5%、96.7%.各方法检测出阳性率结果显示,Cpn0146组的阳性率为38.8%(71/183)、与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异有统计学意义(x~2=12.07,P<0.05);Cpn0147阳性率40.9%(75/183),与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异有统计学意义(x~2=8.10,P<0.05);Cpn0308阳性率44.8%(75/183),与肺炎嗜衣原体IgG试剂盒的阳性率比较差异无统计学意义(x~2=0.57,P>0.05).结论 Cpn0308在肺炎嗜衣原体感染血清学诊断实验中表现出良好的准确性(96.2%)和较高的阳性率(44.8%),可望用于进一步研制肺炎嗜衣原体诊断试剂盒.
作者：陈虹亮；胡旃；周洲；曾焱华；代国知；林应标；吴移谋 刊期： 2010年第02期
目的 通过检测PBC患者血清自身免疫性肝病相关自身抗体,探讨这些抗体在PBC患者中的阳性状况及临床意义.方法 采用IIF法检测247例肝病患者(173例PBC、37例AIH和37例LDC)血清AMA,采用ELISA检测血清自身免疫性肝病相关自身抗体(AMA-M2、抗GP210抗体、抗SP100抗体、抗SLA抗体、抗LC1抗体、抗LKM-1抗体).结果 AMA、AMA-M2、抗GP210抗体、抗SP100抗体、抗LC1抗体、抗SLA抗体和抗LKM-1抗体在173例PBC组的阳性率分别为92.5%(160/173)、86.7%(150/173)、35.8%(62/173)、24.3%(42/173)、0.6%(1/173)、O%(0/173)、0.6%(1/173),在37例AIH组的阳性率分别为18.9%(7/37)、5.4%(2/37)、8.1%(3/37)、13.5%(5/37)、0%(0/37)、5.4%(2/37)、2.7%(1/37),在37例LDC组的阳性率分别为5.4%(2/37)、2.7%(1/37)、5.4%(2/37)、10.8%(4/37)、0%(0/37)、0%(0/37)、0%(0/37).AMA、AMA-M2和抗GP210抗体在PBC患者的阳性率显著高于AIH患者x~2值分别为101.3,100.8和11.0,P均<0.01).而抗SLA抗体在AIH患者阳性率高于PBC患者(x~2=9.4,P<0.01).抗GP210抗体阳性PBC患者ALT、TBIL、DBIL、0GT和ALP水平显著高于阴性患者(U值分别为1212.0、1199.0、1218.0、1074.0、1030.0,P均<0.01).AMA阳性PBC患者IgM水平显著高于阴性患者(U=94.0,P<0.05).结论 抗LC1抗体、抗SIA抗体和抗LkM-1抗体在PBC和AIH中阳性率较低,筛查这3种抗体的临床意义可能不大.抗GP210抗体与PBC患者的肝功能损伤有关,AMA与PBC患者的免疫功能相关,临床筛查抗GP210抗体和AMA对PBC诊断有重要意义.
作者：胡朝军；杨国香；李晞；李永哲；李丽君；张蜀澜；董晓娟；张奉春 刊期： 2010年第02期
壶腹周围癌系指乏特氏壶腹、胆总管下端、胰管开口处、十二指肠乳头及其附近的十二指肠黏膜等处的癌肿.
作者：陈倩；崔京涛；郭野；崔巍 刊期： 2010年第02期
大肠埃希菌是肠道内主要定植菌,是耐药基因的重要储存库~([1]),其耐药水平直接关系到临床感染株的耐药水平,另外,肠道正常定植的大肠埃希菌还可将所携带的耐药基因传递给致病性大肠埃希菌、沙门菌及志贺菌等不同菌属~[2].
作者：周铁丽；周明明；费静娴；干锦益；朱丽青；史银丹；李超；徐祖元 刊期： 2010年第02期
目的 通过克隆人聚角微丝蛋白(filaggrin)基因,构建重组表达质粒,获得具活性的纯化重组蛋白,建立人AFA间接ELISA检测法,以评价AFA在RA诊断中的价值.方法 构建重组表达载体,在大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中表达;融合蛋白经Ni-NAT树脂柱进行亲和层析纯化,建立间接ELISA检测AFA方法,并用于检测114例RA患者、56例SLE患者、32例OA患者及40名健康体检者血清中抗人AFA;分析AFA和抗CCP抗体诊断RA的相关性.结果 扩增出321 bp人filagrin基因片段,构建了具有正确序列的质粒载体pET-28a(+)-filaggrin,转化大肠杆菌Rosettagami(DE3)中经诱导产生高水平的表达产物.经SDS-PAGE分析,在相对分子质量为14 000处出现新生蛋白带.用Ni-NAT树脂纯化后得到具有活性的纯化人filaggrin重组蛋白.间接ELISA检测标本血清结果显示,RA组AFA检测吸光度(A)值为0.473±0.248,与SLE组、0A组及健康对照组的A值(分别为0.160±0.088、0.050±O.018、0.121±0.040)两两组间比较,差异具有统计学意义(t值分别为12.004、14.464、18.078,P均<0.01).AFA在RA组、SLE组及OA组阳性率分别为48.2%、5.4%和3.1%.RA组AFA阳性率与SLE组、OA组及健康对照组比较,差异有统计学意义(x~2=67.088,P<0.01).AFA与抗CCP抗体对RA的诊断呈正相关(r=0.42,P<0.05).AFA与抗CCP阳性一致率为70.1%,114例患者中有10例患者抗体CCP阴性,而AFA检测结果为阳性.AFA对RA诊断的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为48.2%、96.9%、93.2%和67.9%.结论 用纯化fitaggrin融合蛋白建立的间接ELISA检测抗人AFA的方法,对RA诊断具有较好敏感度和特异度,AFA与抗CCP抗体共同检测可提高检测阳性率.
作者：沈波；徐巍；李俊；张晓雪；袁兆林；傅鹰；朱敏；孟哲峰 刊期： 2010年第02期
接合菌(毛霉)导致的人类感染称为接合菌病(毛霉病).接合菌是条件致病性真菌,接合菌病常发生于免疫受损患者,也可见于免疫基本正常的宿主.接合菌感染常见的危险因素包括糖尿病酮症酸中毒、烧伤、器官移植、白血病化疗、长期糖皮质激素治疗、去铁胺治疗、HIV感染以及外伤等~([1]).常见致病性接合菌包括根霉属、毛霉属和根毛霉属.
作者：余进；万喆；鲁巧云；李若瑜 刊期： 2010年第02期
肺孢子菌肺炎是一种由耶氏肺孢子菌引起的呼吸系统机会性感染,见于免疫功能低下或缺陷者~([1-2]).近年来,接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)和肺孢子菌肺炎预防措施的HIV感染发生肺孢子菌肺炎的概率明显减少[1,3],但随着癌症患者、器官移植者、老年患者、先天性或获得性免疫缺陷及因其他疾病而接受免疫抑制剂者等其他肺孢子菌肺炎高危人群的扩大,临床肺孢子菌肺炎患者日趋增多~([4-5]).鉴于肺孢子菌肺炎患者的临床症状、体征、X线胸片及常规实验室检查均无特异性,病原体检出率较低,血清抗体检测因健康人群抗耶氏肺孢子菌抗体阳性率较高而无临床意义等,肺孢子菌肺炎的早期诊断比较困难.
作者：王建成；黄敏君；安亦军；孙岚；郭增柱 刊期： 2010年第02期
α地中海贫血(α地贫)为α珠蛋白基因缺失或点突变引起α珠蛋白合成障碍,形成极不稳定的血红蛋白,导致溶血性贫血.它是我国南方高发遗传性疾病~([1]),严重影响了患者的生存质量.
作者：周红平；罗桂英；饶兆英；钟立群 刊期： 2010年第02期
CTX-M型ESBL是大肠埃希菌中常见的类型,目前发现的CTX-M型ESBL超过80种,根据其氨基酸序列的差异分为5群:CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-9、CTX-M-8和CTX-M-25.我国是CTX-M型ESBL的高发地区,基因型主要以bla CTX-M-14和bla CTX-M-3为主[1],但近年来blaCTX-M-15型所占的比例迅速上升.在欧洲,有资料显示法国、意大利、波兰、西班牙、英国等国家CTX-M-15已经是常见和占据主要地位的ESBL~([2]).
作者：黎晓强；卓超；肖书念；钟南山 刊期： 2010年第02期
蛋白酶敏感的Pr抗原~([1-2])早被Marsh和Jenkins~([3])命名为sp_1,被Roelcke~([4])命名为HD.它们通常被冷抗体性质的IgM型人源单克隆自身抗体检测到,这些自身抗体或来自冷凝集素疾病或是由感染引发的~([5]),只有在罕见的情况下是与自身免疫性溶血性贫血相关~([6-7].
作者：洪慧东；於王骐；潘峰；王金龙；高莉；王家芷；陈兆军 刊期： 2010年第02期
一、历史回顾病毒性肝炎是一种古老的疾病,流行记载可追溯至公元前五世纪.1883年德国不来梅1 289名造船工人,接种了由人淋巴结制备的牛痘疫苗,数周至数月后有15%出现了黄疸,这可能是第一次记录到乙型肝炎的流行.在20世纪40年代,根据流行病学的明显差别,将病毒性肝炎分为两型:传染性肝炎和血清性肝炎.1947年,MaeCallum和Bauer针对传染性肝炎和血清性肝炎提出术语甲型肝炎和乙型肝炎.
作者：陈瑜 刊期： 2010年第02期
由于金黄色葡萄球菌可产生多种毒素,致病性较强,常引起化脓性感染、食物中毒、疖病、肺炎、化脓性关节炎、骨髓炎、心内膜炎及脓毒血症等~([1]).1961年出现第1株MRSA以来,在全球范围内都有由MRSA引起感染的报道,MRSA是医院感染的主要病原菌,且多呈多重耐药性.近不断有报道MRSA在社区中流行,尽管社区获得性MRSA的耐药性比医院获得性MRSA的耐药性轻,但其致病性不容忽视,特别是产PVL的金黄色葡萄球菌的毒力非常强.因此,对含PVL基因的金黄色葡萄球菌进行检测并防止其播散是非常有必要的.
作者：姚丹；余方友；陈坚；张雪青；章圣辉；曾云祥；王良兴 刊期： 2010年第02期
迄今为止,已发现的细菌对氨基糖苷类抗菌药物产生的耐药机制主要有5种,其中由获得性耐药基因介导的耐药机制有2种,即产生氨基糖苷类修饰酶(AMEs)和产16S rRNA甲基化酶.
作者：翁幸鐾；糜祖煌 刊期： 2010年第02期
CHS在临床上非常少见.细胞形态学检查对该病的诊断与鉴别诊断具有重要价值.我们对近期发现的1例CHS的相关临床特征及实验室检查,尤其是外周血、骨髓细胞形态学特点进行了分析.
作者：石磊；骆志成；李倩男；任俊学 刊期： 2010年第02期
目的 应用高通量的小瓶离心法快速分离检测广州市成人流感样病例相关病毒,分析广州地区患有ILI的成人呼吸道病毒感染情况,评价其在临床实验室开展快速病毒培养的意义.方法 采集2009年1-6月广州市成人流感样病例患者标本652份,应用小瓶离心法(包括MDCK、HEp-2、LIE-MK_2和MRC-5 4种细胞),离心接种后,通过观察CPE、血凝(HA)、血吸附(HAD)及直接免疫荧光法(IF)等方法进行病毒分离鉴定.结果 652份成人流感样病例标本中共检出阳性161份,5种病毒病原体,病毒培养阳性率为24.69%,其中甲型流感病毒62株(62/161,38.51%),乙型流感病毒88株(88/161,54.65%),副流感病毒8株(8/161,4.96%),腺病毒2株(2/161,1.24%),呼吸道合胞病毒1株(1/161,0.62%).用小瓶离心培养法发出各种病毒培养报告的平均时间分别为:流感病毒2 d、腺病毒3 d、副流感病毒3 d.结论 (1)离心培养法具有快速、灵敏、高通量的特点,对临床实验室诊断病毒具有应用推广价值.(2)在分离的Iu病原体中,流感病毒占主导,乙型流感病毒为优势毒株,自2009年1月延续至6月,并呈逐步增多的态势,出现夏季高峰.
作者：杨子峰；王玉涛；秦笙；罗翌；关文达；李际强；占扬清；张雪；周荣；莫自耀；陈敬贤；陈荣昌 刊期： 2010年第02期
近年来,随着广谱抗菌药物、免疫抑制剂、糖皮质激素的应用以及介入性医疗操作的开展,嗜麦芽窄食单胞菌感染发病率呈逐年上升趋势,已成为医院获得性肺部感染的主要病原菌之一~([1]).由于其对亚胺培南天然耐药及对多种抗生素的高度耐药,临床可选择的抗菌药物十分有限,使其治疗成为困扰临床医生的棘手问题.氟喹诺酮类药物是治疗嗜麦芽窄食单胞菌的有效药物之一,然而其耐药性亦日趋严重.
作者：陈愉；张智洁；孙继梅；赵立；李胜歧 刊期： 2010年第02期
中华检验医学杂志
主管:中华医学检验杂志
主办：中国科学技术协会
