糖尿病患者由于存在持续高血糖使非酶糖酰化速率加快，导致组织缺氧，血液粘滞度增高［1］，同时内皮细胞释放内皮素、P-选择素等血管活性物质［2］，使肾小球毛细血管张力变化，引起肾血流动力学改变，使肾小球处于高滤过状态引起肾损害。本文通过定量检测尿中微量蛋白［包括白蛋白(mAlb),IgG］,N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)，探讨其在糖尿病肾损害中的临床价值。1 材料与方法1.1 检测对象 (1)临床确诊的糖尿病患者152例，其中男85例，女67例，平均年龄43.2±15.5岁。(2)对照组65例，健康献血员。1.2 尿微量蛋白测定尿微量白蛋白及IgG采用酶免疫法(ELISA)测定，NAG采用终点比色法，试剂盒均由福建太阳生物技术公司提供，严格按说明书操作，各组间采用t检验统计结果。 尿中两种微量蛋白及NAG含量正常参考值上限为:mA1b<19 mg/L,IgG<5.0 mg/L,NAG<18.5 U/L,测定结果高于参考值上限者判断为阳性。
作者：董德平；严冲；钱开成；周永华 刊期： 2001年第03期
急性酒精中毒可以引起机体多脏器的损害，为了探讨其对红细胞膜结构和功能的影响，我们通过实验分析了急性酒精中毒后不同时段红细胞耐低渗能力的动态变化。1 研究对象和方案 13例志愿者系本院工作人员和实习生，男12例，女1例，年龄20-41岁，受试者平时无经常饮酒史，体检肝肾功能无异常改变。受试前一周内禁止饮食含酒精食物。试验当天饮酒前抽血一次，然后在30分钟内饮食相当于80 g酒精的高度白酒(配以少量的面包和水)，在饮酒后的不同时间抽血分析。2 测定方法 红细胞膜脆性试验测定方法参考《全国临床检验操作规程》中红细胞渗透脆性试验和红细胞孵育渗透脆性试验。根据红细胞低渗溶解曲线，选择NaCl浓度为4.0 g/L(50%溶解管)来分析酒精中毒后不同时段红细胞膜脆性的动态改变。3 测定结果3.1 饮酒前后红细胞在各梯度浓度NaCl溶液中的溶解曲线见图1、表1(以各浓度下溶血百分率表示)。
作者：郭希超；陈晓刚；陈瑜；虞朝晖；厉有名 刊期： 2001年第03期
对于肺癌的辅助诊断和监测，常用的血清肿瘤标志物为:CEA、TSA、β2-MG、TUM等，鉴于它们均为非特异性的肿瘤相关抗原，检测肿瘤的敏感性及特异性均有限。我们将上述4种标志物进行联合测定和评价，并分析、比较不同的组合，以提高检测肺癌的敏感性。现报告如下。1 材料与方法1.1 健康人对照组 65例健康成人，男36例，女29例，年龄均在45～56岁。1.2 肺癌组经临床、实验室、影像学、病理学等确诊的58例肺癌患者，男46例，女12例，年龄均在42～70岁。1.3 术后组对肺癌组其中45例患者进行了术后6个月～2年的追踪检测，复诊时由CT及放射检查确定是否有转移或复发。
作者：张桂英；邓法文；田新 刊期： 2001年第03期
由于化疗能引起肿瘤病人的骨髓抑制，所以，需要持续监测有关的血细胞参数。血小板数(Plt)及平均血小板体积(MPV)为常用的两个血小板参数。本文对41例肿瘤患者化疗前后Plt及MPV的变化进行监测，以探讨由化疗引起的骨髓抑制与Plt、MPV变化之间的关系。1 材料与方法1.1 标本 41例住院化疗病人。男19例，女22例，平均年龄55.2岁。其中胃肠道肿瘤14例，肺癌16例，乳腺癌9例，肝癌2例，全部病例经病理证实，均未发生骨转移。1.2 方法 JT-IR血细胞分析仪(Coulter)，取静脉血0.5 ml,5 μl EDTA*K2 150 g/L抗凝，2小时内测定:化疗前1次；化疗后一周内隔天1次；一周后每3天1次；三周后1～2次/周，直至Plt恢复至化疗前水平。所测数据进行成组比较t检验。
作者：孙巍；刘秀巧；万文徽 刊期： 2001年第03期
胰岛素是调节糖代谢的主要激素，其分泌主要受血糖浓度的调节。经典的放射免疫法测定的是免疫反应性胰岛素(IRI)，包括前胰岛素原、胰岛素原和真胰岛素(TI)及其中间代谢产物的总水平，而不是单纯的TI水平。TI是胰岛素中真正有生理活性的部分，测定TI可客观评价β细胞功能。测定TI的ELISA法试剂盒说明书参考值为10 mU/L左右，无性别、年龄差异。国内暂没有参考值的报道，我们测定了164例体检健康人以确定参考值。1 对象和方法1.1 调查对象体检健康人(BMI<25;空腹血糖3.9～6.5 mmol/L;血脂正常；无糖尿病、高血脂病史)164例，其中男性115例，女性49例，平均年龄44.31岁±10.96岁(18～84岁)。1.2 血清标本的采集和保存过夜禁食后于晨7～8时抽取空腹静脉血约3 ml,3 000 r/min离心，分离出血清，放入-20℃冰箱冷藏一个月待测。
作者：冯雪凤；黄群；朱大龙；田成功 刊期： 2001年第03期
目的研究异体复合组织移植-手移植术后病人外周血T淋巴细胞亚群及CD3＋HLA-DR＋T细水平的动态变化。方法用流式细胞术测定了2例异体手移植术后不同时间外周血CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD3＋HLA-DR＋(活化T细胞)细胞百分率，及CD4/CD8比值，以病人术前一周结果作对照。结果使用免疫抑制剂后，于术后第1日CD3＋、CD3＋CD4＋、CD3＋CD8＋、CD3＋HLA-DR＋细胞水平，CD4/CD8比值都开始降低，以3～5日为低水平。术后8日，上述指标逐渐回升，至15日后基本趋于平稳，但CD3＋、CD3＋CD4＋细胞及CD4/CD8比值仍明显低于术前，而CD3＋CD8＋、CD3＋HLA-DR＋细胞水平则高于术前。结论异体复合组织-手移植术后病人外周血T淋巴细胞亚群及CD3＋HLA-DR＋细胞水平的变化与单一组织器官移植(肾移植)术后稳定期的变化一致，也与病人术后的稳定病情相吻合。
作者：裘宇容；杨春莉；王前；刘飞；郑小飞 刊期： 2001年第03期
目的建立连续监测法测定腺苷脱氨酶的方法。方法用连续监测法对pH值、腺苷浓度等反应条件进行实验研究，并对所建立的方法进行评价。结果用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ:含α-酮戊二酸6 mmol/L,NADH 0.35 mmol/L,ADP 0.8 mmol/L,EDTA-Na2 0.1 mmol/L,谷氨酸脱氢酶1000 U/L；试剂Ⅱ:腺苷12 mmol/L;均用磷酸盐缓冲液(0.1 mol/L);pH 7.2。线性范围达97 U/L,批内 CV=4.90%,批间CV=6.53%。与波氏显色法有良好的相关性(r=0.9902)。结论本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。
作者：周有利；冯景；毛达勇；李德奎 刊期： 2001年第03期
目的初步探讨TT病毒血源性传播以外的传播途径。方法用半巢式聚合酶链反应检测6位TT病毒感染的肝病患者粪便标本中TTV DNA，测序，分型，比较其与血清中病毒滴度的关系。结果在血清病毒滴度较高的2例患者(104/ml,103/ml)的粪便标本中检出了TTV DNA(104/ml,102/ml)，基因型分别为1a,1b;在血清病毒滴度仅为101／ml的4位患者中，仅1例检出了TTV DNA(101/ml),为一种新的基因型。结论肝病患者粪便标本中TTV病毒颗粒含量与血清滴度直接相关，TT病毒可能具有血源及粪口双重传播途径。
作者：贺波；周晶；任立晟；蔡璇 刊期： 2001年第03期
目的探讨一种皮肤炎性病变中的细菌及此菌的分类位置。方法利用形态、生理和生化性状等表型性状进行较全面而系统的细菌鉴定。结果从病变中分离出单一的革兰阳性菌，此菌具有杆、球循环生活周期，专性需氧，生化反应不活泼，对常用的抗生素多呈抗药。结论此菌属于罕见的条件致病菌，国内外文献很少涉及。从表型性状分析此菌为国内从未报道的表皮短杆菌。
作者：尤敏；管福来；赵乃昕 刊期： 2001年第03期
目的探讨光量子血液疗法对血小板的影响。方法血液光量子前后进行血小板计数和血浆α颗粒膜蛋白-140(GMP-140)测定，并对光量子前后的血小板形态进行电镜观察。结果与光量子化前相比，量子化后，血液的血小板数有所下降(P<0.05),血浆中的GMP-140含量显著升高(P<0.01)，电镜结果显示量子化后血小板伪足形成增多，并伴有血小板碎片。结论在本试验条件下紫外线照射对血液中的血小板有激活和形态损害作用。
作者：栾建凤；朱培元；雷千红；万柏珍；叶东 刊期： 2001年第03期
目的建立检测穿孔素mRNA的定量RT-PCR方法。方法用限制性内切酶制备竞争性模板，建立定量RT-PCR方法，检测正常人及部分肿瘤病人外周血的穿孔素mRNA水平。结果 6例正常人的外周血穿孔素mRNA含量为0.51±0.40 pmol/ml,消化道肿瘤患者的穿孔素mRNA水平与正常相比，有显著差异(P<0.01)，乳腺肿瘤及白血病患者的穿孔素mRNA水平与正常人相比，没有差异。结论穿孔素mRNA水平的降低可能是肿瘤发生的一个重要原因；除穿孔素途径以外，还存在别的抗肿瘤的效应机制。
作者：秦卫松；李芳秋；武建国 刊期： 2001年第03期
目的利用伯氏疏螺旋体基因工程抗原外膜蛋白C(OspC)建立间接ELISA，检测莱姆病特异性抗体IgM。方法基因工程抗原OspC的包被浓度和酶标抗μ链单抗所用浓度及血清稀释倍数，均由方阵滴定法确定，并进行精密度、特异性试验、阻断试验和干扰试验。结果 OspC佳浓度为150 μg/L，批内平均变异系数4.6%，批间平均变异系数14.2%，用ELISA测定临床已确诊莱姆病33例，57例正常体检者，同时与进口ELISA试剂盒比较，两方法符合率97.8%。结论该方法特异性强、敏感性高、实验结果可靠，是莱姆病早期诊断的好方法。
作者：贾月萍；周国萍；曾丽苹；高峰 刊期： 2001年第03期
目的建立适合于自动化分析的人血清和尿肌酐的肌酐亚氨水解酶偶联谷氨酸脱氢酶指示系统的酶促动力学测定方法。方法在反应体系中加入异柠蒙酸脱氢酶及其作用底物异柠檬酸，再生由主反应前氨消耗的NADPH和α-酮戊二酸，其后加入镁离子络合剂CyDTA和肌酐亚氨水解酶的启动试剂启动反应，在此同时NADPH和α-酮戊二酸的再生反应被终止，测定NADPH于340 nm处吸光度的变化，计算样品中肌酐的浓度。结果本法测定线性范围为40～2000 μmol/L,批内和常规条件下的变异系数均小于5%，回收率为98.5%，与高效液相色谱法具有良好的相关性(r=0.9930)。乳糜、黄疸、溶血、酮体、乳酸盐、临床常用的治疗药物和高至2 mmol/L的氨对测定没有干扰。结论本法操作简便、精确，推荐作为常规测定方法。
作者：徐国宾；朱立华；夏铁安 刊期： 2001年第03期
目的介绍尿素酰基裂解酶酶偶联测定血清总钙的方法。方法双试剂两点法；缓冲液为三乙醇胺(TEA，pH 8.0,200 mmol/L);试剂Ⅰ:含NaHCO326.0 mmol/L,NADPH 0.4 mmol/L,α-酮戊二酸8.0 mmol/L,尿素酰基裂解酶115 U/L，GLDH 43.0 kU/L;试剂Ⅱ:含NaHCO3 26.0 mmol/L,ATP 6.2 mmol/L。结果方法线性范围为0.5～5.0 mmol/L,批内和批间平均变异系数分别为2.13%和2.69%。平均回收率为102.7%。本法(Y)与邻甲酚酞络合酮法(OCPC法，X1)比较:r=0.981,Y1=1.02X1－0.021;与偶氮胂Ⅲ法(X2）比较:r=0.978,Y2=0.99X2＋0.03。血清胆红素高达300 μmol/L,血红蛋白4 g/L,镁2.5 mmol/L,NH＋4 2.0 mmol/L,Trig 8.0 mmol/L对本法无明显干扰。结论本法具有简便、准确、快速，适用于自动分析等特点。
作者：蒋兴亮；唐中；张均 刊期： 2001年第03期
目的根据引物二聚体形成原理，建立一种新的克隆目的基因的方法。方法人工合成两条或两条以上3′端互补配对的寡核苷酸链，寡核苷酸链、Taq酶和dNTP按一定比例混合，PCR扩增延伸，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果。结果 PCR产物经电泳鉴定，可见一条清晰的特异条带。结论此方法能合成500 bp以下的短片段目的基因。
作者：徐祥；刘昕；梁华平；代佳平；毛琼国；罗艳 刊期： 2001年第03期
目的建立一种高效的基因多态性检测方法。方法用等位基因特异性扩增(ASA)和等位基因特异性扩增酶联免疫法(ASA-ELISA)对CYP1A1基因m2多态性进行检测。结果两种方法的检测结果基本一致，仅有1例不相同。ASA-ELISA将地高辛标记在扩增产物上，然后通过酶联免疫法检测扩增产物，检测灵敏度与等位基因特异性扩增(ASA)后琼脂糖凝胶电泳相比高100倍。结论该方法具有操作简单、快速、灵敏度高等特点，可用于大标本量的基因多态性检测。
作者：周新文；石云；周宜开 刊期： 2001年第03期
目的评价基于选择性水解原理的两种低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的直接测定法(Ⅰ法和Ⅱ法)的精密度、准确度和特异性。方法将这两种方法与聚乙烯硫酸沉淀法(PVS法)作了比较，并以超速离心分离的HDL和LDL组分分析了对LDL-C测定的特异性与准确性。结果高、低两种LDL-C浓度混合血清所测定的结果表明这两种方法均有良好的精密度，总CV值直接测定Ⅰ法3.96%～4.42%，直接测定Ⅱ法0.78%～3.91%，都可达到临床满意的程度。48份临床标本测定结果(±s)分别为3.68±1.23 mmol/L(PVS法)，3.25±1.11 mmol/L(直接测定Ⅰ法)和3.37±1.21 mmol/L(直接测定Ⅱ法)，直接测定法与PVS法测定结果的差异无统计学意义。PVS法(X)与直接测定Ⅰ法(Y)的回归方程为Y=0.848X+0.121(r=0.9427),与直接测定Ⅱ法(Y)的回归方程为Y=0.914X+0.007(r=0.9353)，两种直接测定法与PVS法有良好的相关。对超离心HDL和LDL组分测定的结果表明两种直接测定法对LDL-C有较好的特异性。稀释试验的结果表明两种直接测定法均有良好的线性，线性范围至少可达9.28 mmol/L。结论以选择性水解法直接测定LDL-C具有较好的精密度，对LDL有很好的特异性，适应自动分析，可以真实反映LDL-C的水平，值得在临床推广应用。
作者：贺娟；李清华；戴强 刊期： 2001年第03期
目的探讨2型糖尿病周围神经病变(DPN)与抗神经节苷酯(GS)抗体的关系。方法采用固相酶联免疫吸附法对2型糖尿病神经病变和无神经病变以及其他神经病变和正常人进行抗神经节苷酯IgM、IgG抗体检测。结果 DPN组抗GS-IgM、抗GS-IgG抗体分别为46.7%和20.0%，明显高于无神经病变组和其他神经病变组及正常人。结论抗神经节苷酯抗体与糖尿病周围神经病变关系密切，其在病理过程中可能起着重要作用。
作者：周微雅；李妮；钟华；颜晓东；陈晖 刊期： 2001年第03期
RhD抗原是除ABO血型系统之外具免疫原性的红细胞抗原分子，在Rh血型系统中占重要地位［1］。D抗原根据其抗原量的变化表现其抗原性的强弱，表型D—/D—抗原性强，其次为弱D(Du)、弱为Del型［2］。既往对Du及Del基因结构仅限于推测，笔者采用基因检测技术分析构成Du、Del型基因的结构，现报告如下。1 材料和方法1.1 Du标本 5例，用血清学技术2次检定，方法按《中国输血技术操作规程》操作［3］。1.2 Del标本 8例，经血清学技术检定为Rh阴性(方法同上)的标本再用吸收放散试验检定。采用三氯乙烯和三氯甲烷放散法［2］。8例标本中，6例表现型为CCee，2例为Ccee。
作者：张志梅；兰炯采 刊期： 2001年第03期
自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的患者在每次输血刺激后可产生同种抗体，同种抗体在其自身抗体掩盖下不易被发现，如再次输血后，可引起溶血性输血反应，新近我们遇到一例AIHA伴同种抗-E报道如下。 患者，女，84岁，患难治性骨髓异常综合症(MDS)，多次输血支持治疗，于2000年4月出院。同年8月中旬又感头晕乏力加剧，胃纳减退，实验室检查:Hb 40 g/L,RBC 1.04×1012/L,总胆红素33.4 μmol/L,要求输血而住院。1 血清学检查1.1 患者红细胞与广谱抗人球蛋白(Immucor公司产品)直接试验(DAT)阳性。1.2 红细胞定型用氯奎二法(试剂配制和方法见文献［1］)去除致敏抗体后的血型为O，DCe。1.3 抗体鉴定患者血清原液与谱细胞(上海市血液中心产品)反应，在盐水中均不凝集，在抗人球蛋白试验中均出现凝集，强度各有不同，继而将患者血清1∶4稀释后再与谱细胞做抗人球蛋白试验，结果呈抗-E格局(见表1)。
作者：谈素红；洪小珍 刊期： 2001年第03期
我们用荧光定量PCR检测宫颈分泌物中Ureaplasma urealyticum(解脲支原体，简称Uu)，结果如下。1 材料和方法1.1 仪器 PE-5700荧光定量PCR仪，万分之一天平Chyo JK180。1.2 试剂盒达安基因诊断中心产品。1.3 方法1.3.1 标本来源培养法阳性的解脲支原体感染病人的宫颈分泌物41份。1.3.2 棉拭子取样法将长8 cm棉拭子装入长10 cm的塑料离心管中，加热封口，经60Co照射灭菌。在分析天平上称量每只管的重量，标于管上。取样时，在管上端剪口，取出拭子，插入宫颈口捻转并停留数秒，取样后小心放回试管中，立即送检，称取该管重量。将取样后总管重量减去取样前总管重量即为所取宫颈分泌物的重量。加入1 ml生理盐水，震荡提取分泌物，分取定量体积(d)于1.5 ml塑料离心管中，10 000 r/min 离心10 min,弃上清液，加入50 μl裂解液，沸水裂解10 min，吸取2 μl于反应管中与标准曲线反应管一同按下列条件扩增:93℃ 2 min预变性，然后按93℃ 45 S、55℃ 120 S共40个循环。反应结束后电脑按标准曲线计算待测样品反应管中每微升体积Uu的考贝数(Copy/μl)，后按下列公式计算每克分泌物中含Uu的拷贝数(Copy/g): Copy/g=(Copy/μl×50 μl)/(g×d/1000)
作者：张宁；唐轶；李力；段云葵；齐倩 刊期： 2001年第03期
糖原累积病(Glycogen storage disease,GSD)是糖原代谢途径中与糖原合成和分解有关的某些特定酶的缺陷，导致糖原在不同组织异常储积而造成的疾病。以往，这类疾病的确诊常需要进行组织活检，不仅造成损伤，亦不易为病人接受。本文试用红细胞糖原测定，替代肝糖原测定，作为GSD患者的筛查和诊断手段，报道如下。1 材料和方法1.1 试剂 (1)淀粉葡萄糖苷酶、已糖激酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、糖原，均为Sigma产品。临用前将糖原按文献［1］用0.6 mol/L的高氯酸溶液配制成浓度度为50 mg/L的工作液。(2)酶反应缓冲液:浓度为70 mmol/L，pH 7.7的PBS，内含Mg2＋、NADP、ATP(Sigma产品)，终浓度分别为4 mmol/L,1.3 mmol/L,1.3 mmol/L。
作者：陶德定；舒丹；林汉华 刊期： 2001年第03期
本文对类风湿性关节炎(RA)、风湿性心脏病(RC)、系统性红斑狠疮(SLE)等患者进行红细胞CR1分子的测定，以探讨该病种的红细胞CR1分子数量表达和变化的相关性，现报告如下:1 材料和方法1.1 免疫试剂鼠抗人CR1单抗(IgG1、E11克隆)，鼠抗人CD2单抗(无关单抗)，碱性磷酸酶标志的羊抗鼠IgG。1.2 底物现配现用。1.3 Buffer液常规使用的PBS(等pH 7.2的磷酸缓冲盐液)。其它缓冲液有S/BSA:0.15 mol/L N.S+2 g/L小牛血清+1 g/L叠氮钠；PBS/BSA:含有20 g/L的BSA+1 g/L的叠氮钠的PBS分别分装于25 ml的容器中，并于4℃冰箱保存。1.4 血标本及处理对照组(NC)60例标本取自健康人群。类风湿关节炎42例，风心36例，SLE 23例标本均为本院住院确诊病人。EDTA抗凝血1 ml在采血后4 h内测定。1.5 RBC制备 EDTA抗凝血用PBS洗涤4次；每次去除缓冲液及上清，用显微镜检查洗涤后完全清除血液中淋巴细胞和血小板。取0.1 ml RBC置于干净试管中，加入0.9 ml S/BSA和0.1 ml用PBS现配的戊二醛，充分混匀，置室温30 min，再将RBC用S/BSA涤1次，用PBS配成2%的浓度，分装1 ml，保存于-70℃。
作者：覃志坚；傅瑞全；黄承乐 刊期： 2001年第03期
目的选择合适的苯唑西林(OXA)浓度用于筛选凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的MRS型耐药。方法采用K-B纸片法、琼脂稀释法和β-内酰胺联合酶抑制试验对141株CNS进行检测。结果 OXA浓度为0.25 μg/ml时，有8株OXA敏感株(MSS)被误判为耐药株(MRS)，误判率为8.33%；选择OXA 0.5 μg/ml时，1株MSS误判为MRS，误判率为1.04%；选择OXA 0.75 μg/ml时无MSS或MRS的误判。结论选择0.75 μg/ml OXA作为筛选浓度检测CNS的MRS型耐药较为适合。
作者：王婷婷；邵海枫；张小卫；刘斌；李珍大 刊期： 2001年第03期
我们应用Array protein system,应用速率散射比浊法定量分析ALL患者血清与CSF中β2-MG对急性淋巴细胞性白血病(ALL)治疗及颅内浸润诊断的应用价值。1 材料与方法1.1 检测对象我院收治腰穿及出院后确诊的ALL患者，其中急淋中枢神经系统白血病(CNSL)与非中枢神经系统白血病(NCNSL)患者各18例，年龄2～13岁，病人腰穿取CSF同一天静脉抽血，标本离心取上清液-20℃冻存；正常对照组脑脊液系外科小手术行腰椎麻醉的病人，正常对照血清系健康体检的正常人群，均20例，同时检测。2 检测方法2.1 CSF、血清中β2-MG及CSF中白蛋白(Alb)定量检测使用Beckman公司的Array蛋白质分析系统及其原装试剂，其中CSF中的β2-MG按测量血中β2-MG的方法进行操作。2.2 血清中Alb应用Beckman CX7全自动生化分析仪及其原装试剂定量检测。
作者：赵亮；叶书来；林斌 刊期： 2001年第03期
目的研究低离子聚合物Polybrene对透射免疫比浊测定的增强效应。方法应用聚乙二醇和Polybrene建立了一种新的检测体系，双试剂、双波长、两点终点法检测免疫球蛋白含量。结果 Ig低检测浓度为1 mg/L，脂血(Trig<4.0 mmol/L)、黄疸(T Bil<70 μmol/L)、和溶血(Hb<10 g/L)对测定无影响。批内CV分别为3.25%和2.67%，批间CV分别为3.5%和3.13%，与进口试剂相比较，结果无显著性差异，P>0.05。结论 Polybrene可明显增加检测吸光度，提高检测灵敏度。
作者：郭新荣；储伟强 刊期： 2001年第03期
目的了解HBV感染的不同血清学指标组合的HBV-DNA阳性情况。方法对415份血清同时行ELISA方法测定HBV-M及普通PCR法检测HBV-DNA。结果 HBsAg(+)组HBV-DNA阳性率为77.8%(270/347)，HBsAg(-)组HBV-DNA阳性率19.1%(13/68)，二者差别显著(P<0.001)。其中153例HBsAg(+)HBeAg(+)抗HBc(+)血清，HBV-DNA全部阳性，阳性率为100%，HBsAg(+)抗HBe(+)抗HBc(+)组血清HBV-DNA阳性率为66.9%(79/118)，HBsAg(+)抗HBc(+)组血清HBV-DNA阳性率为50%(38/76)，抗HBs(+)组为18%(9/50)，9例抗HBs(+)抗HBe(+)抗HBc(+)血清中2例HBV-DNA阳性，3例抗HBs(+)抗HBc(+)血清中1例HBV-DNA阳性，4例单一抗HBc(+)血清中1例HBV-DNA阳性。结论单凭HBsAg或HBeAg是否阳性来判断肝脏中HBV复制及有无传染性是不够的，易造成部分慢性乙型病毒性肝炎的漏诊，对HBsAg阴性无论抗HBs是否阳性，只要有HBV感染后的任何血清学依据，都应进一步检测血清HBV-DNA作为诊断乙型肝炎的第二步筛选，有条件时肝活检加以证实。
作者：李娟；王春平；陈佩兰；陈天宝；范公忍；邓涛；彭晓君；胡大荣 刊期： 2001年第03期
生化自动分析仪使用多点连续监测速率法测定酶的活性。这类仪器均通过对信号(吸光度)——时间反应曲线的监查，控制分析质量，一般设有检查反应的线性和监测底物耗尽的参数。但能使用通用试剂的仪器没有预先固定的参数设置，需要使用人员根据试剂和方法的不同自己去设置参数，如果未设置或设置不当会造成错误结果。虽然各家仪器设计的具体方法不同，但基本原理是一致的。本文以东芝(TOSHIBA)公司生产的TBA-40 FR生化自动分析仪测定ALT为例，介绍有关的参数设置方法。
作者：刘丽卿；刘正华；施旭东；丁昊；柏素红；陈佃才 刊期： 2001年第03期
红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD),是磷酸戊糖旁路中产生还原型辅酶Ⅱ的关键酶。G6PD缺乏症是一种常见的人类遗传性酶缺陷疾病，其基因突变是导致G6PD缺乏症的主要分子基础。G6PD基因定位于X染色体长臂2区8带(x,q2.8)上，全长20 114 bp，由13个外显子和12个内含子组成。在G6PD的突变中nt1 376 G-T和nt1 388 G-A两个点突变是中国人中常见的突变，占发病率的65%左右。它们都位于12外显子上，位置上仅相差12个碱基。云南是G6PD缺陷的高发区，因此我们就第12外显子的突变用PCR-DGGE技术进行了研究，研究结果如下。
作者：王玉明；段勇；许冰莹；刘华 刊期： 2001年第03期
对608例自身免疫溶血性贫血(AIHA)和215例阵地性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者作溶血性贫血(溶贫)系列检查，测出26例患者直接抗人球蛋白试验(Coombs试验)和血清酸溶血试验(Ham试验)均为阳性。经分析和随访，明确了诊断，现报道如下。1 材料和方法1.1 病例选择 26例双阳性患者均来自本院血液科，诊断标准根据文献［1］。其中男8例(AIHA5例，PNH3例)，女18例(AIHA15例，PNH3例)年龄16～70岁，平均年龄35岁。1.2 资料收集初、复诊患者进行血浆游离血红蛋白(P-Hb)、结合珠蛋白(Hp)测定、糖水、Coombs和Ham试验，部分患者还进行尿含铁血黄素测定(Rous试验)和蛇毒因子溶血试验(CoF)。同时对红细胞上自身抗体和/或补体进行免疫分型及阳性滴度测定，并作治疗前后的比较及阳性变化的记录，此外，还收集血常规，网织红计数(Ret)等检测结果。
作者：周有宁；林宝爵 刊期： 2001年第03期
目的探讨血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、D-二聚体(D-D)对凝固法(Clauss法)测定纤维蛋白原(Fib)的影响。方法留取22例体检正常标本和86例FDP、D-D可能增高的患者标本，分别用PT-衍生法(PT-der法)和Clauss法测定其Fib浓度，ELISA法测定其FDP、D-D含量。再将正常混合血浆和高FDP、D-D浓度的异常混合血浆以不同比例混合后同上法测其Fib、FDP、D-D的浓度。结果 PT-der法和Clauss法测定正常组血浆的Fib无显著性差异，P>0.05,而对PDP、D-D增高的异常血浆，用两种方法测得的Fib有显著性差异，Clauss法结果低于PT-der法，两者差值与FDP、D-D的浓度呈正相关。结论表明FDP、D-D会使Clauss法测定Fib的浓度偏低，其偏低的幅度与FDP、D-D的含量呈正相关。
作者：王明山；谢海啸；陈晓东 刊期： 2001年第03期
本文测定了19例急性心肌梗死(AMI)病人血清CK-MB酶活性及其酶蛋白浓度，并对其在临床中的应用进行了初步比较。1 材料与方法1.1 实验对象门诊AMI病人19例，年龄55～85，男12例，女7例；疾病对照组为非心肌梗死(NAMI)的急诊病人17例，年龄35～85岁，男12例，女5例；正常对照组为健康体检之健康人26例，年龄20～52岁，男18例，女8例。1.2 仪器与试剂1.2.1 CK-MB酶蛋白浓度测定雅培AxSYM全自动免疫化学发光分析仪及CK-MB酶蛋白浓度测定试剂盒。1.2.2 CK-MB酶活性测定日立7170s型全自动生化分析仪，CK-MB酶活性测定试剂盒由日本第一化学株式会社提供。1.3 实验方法 19例AMI的门诊急诊病人在进行心电图检查的同时采取血液标本，以后每隔2 h采集一次血液标本。连续采集20次。同样采集NAMI以及健康对照组人群之血清标本。立即离心分离血清后储存于-80℃冰箱中待测CK-MB酶蛋白浓度。而CK-MB酶活性则立即进行测定。
作者：宋宇；钟家启；赵岚；王顺 刊期： 2001年第03期
人类巨细胞病毒(CMV)感染能引起移植物的慢性排异，正确诊断及治疗CMV感染可有效提高移植物的存活率，减少医疗费用。然而在众多CMV感染的实验室检查中，究竟哪一种方法可靠一直存有争议。本项目采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测CMV DNA，报道如下。1 材料和方法1.1 92名1997年1月至2000年5月在我院接受肾移植的患者，移植时间2个月～40个月。收集中段晨尿，临床上有感染症状的患者在抗病毒治疗后反复留取尿标本，共收集标本112份。1.2 TagMan和CMV DNA荧光定量试剂由达安基因诊断中心提供。1.3 PE5700荧光定量PCR仪和计算机自动荧光检测仪(PE公司)。1.4 标本处理留取中段晨尿10 ml密封送检，取1 ml至1.5 ml离心管中，12 000 r/min离心10 min，弃上清，沉淀加生理盐水打匀，15 000 r/min离心5 min，沉淀加50 μl DNA提取液充分混匀，沸水浴10 min,10 000 r/min离心5 min,取上清液2 μl做PCR反应。1.5 PCR扩增及荧光测定取CMV PCR反应管，直接加入处理后样品2 μl，振荡器振荡2～3s混匀，将反应管放入PCR仪，93℃ 2 min预变性，93℃ 45s,55℃ 120 s,共做40个循环。然后通过计算机自动荧光检测CMV DNA含量，结果以基因拷贝数/ml表示。
作者：于青；谢匡成；姚建；徐琴君 刊期： 2001年第03期
为了解近年来新生儿脐炎患者脐部分泌物致病菌情况，对我院1998年1月～1999年12月新生儿脐炎患者的脐部分泌物标本进行分离培养，结果报告如下。1 材料与方法1.1 标本来源 52份脐部分泌物用无菌棉拭采取，标本来自我院住院患儿，年龄小1天，大22天，取样后立即送检。1.2 细菌分离与鉴定按常规方法培养分离，接种微量生化反应管，细菌鉴定到种，微量生化反应管为市售。2 结果2.1 病原菌分布 52份标本中有50份检出病原菌，检出率为96%，其中3份检出2种致病菌。检出的53株菌株中革兰阳性球菌35株(66%)，其中金黄色葡萄球菌23株(43%)，凝固酶阴性葡萄球菌8株(15%)，藤黄微球菌1株(2%)，粪肠球菌3株(6%)；革兰阴性杆菌18株(34%)；其中大肠埃希菌13株(24%)，弗劳地枸橼酸杆菌2株(4%)，普通变形杆菌2株(4%)，铜绿假单胞菌1株(2%)。3 讨论 新生儿脐炎的病原菌是以金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌多见，本组50例细菌培养阳性标本中，金黄色葡萄球菌23例，大肠埃希菌14例，与文献报道一致。药物敏感实验中未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌，提示万古霉素对多重耐药性葡萄球菌有很强的杀菌作用，由于其副作用较大，用于新生儿少见。本组患儿中有5例合并败血症，均由金黄色葡萄球菌引起，脐部分泌物与血液培养出相同菌株。根据药敏结果，临床用头孢唑啉、头孢三嗪、头孢噻肟治疗，均疗效良好。
作者：杨丽；朱小妮 刊期： 2001年第03期
美国实验室标准化委员会(NCCLS)抗微生物敏感试验纸片法执行标准中指出:对沙门菌属的药敏试验仅测试氨苄西林、TMP/SMZ、喹诺酮类，对肠道外菌感染加试氯霉素和一种三代头孢菌素。并且明确强调对于氨基糖甙类，一、二代头孢类，即使体外有活性，临床却无效，故不宜报告为敏感。由于以前NCCLS的规则在我国不够普及，所以常有错误报告，如赵宏等报道(上海医学检验杂志，1999，(2)∶77)，330株伤寒沙门菌对庆大霉素、卡那霉素、头孢唑啉的敏感率均为100%，丁胺卡那霉素为91.67%。陈有土报道(临床检验杂志，2000，18(4)∶239)，126株甲型副伤寒沙门菌对庆大霉素耐药率为6.5%，丁胺卡那霉素的耐药率为5.7%。杨华富等报道(临床检验杂志1996，15(3)∶145)，162株伤寒沙门菌对庆大霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素也均有较高的敏感性，耐药率分别为7.41%、10.49%和13.58%。本人查阅了本院1995～1999年间沙门菌感染患者的病历100份，其中曾用氨基糖甙类治疗过的有12份，无一例好转，在改用或联用喹诺酮类、氯霉素或头孢三代后方控制病情。4例曾用过头孢唑啉，只有一例好转(不能排除自然痊愈的可能)。因此，微生物工作者在进行有关菌种药敏试验的同时，必须按NCCLS标准和《全国临床检验操作规程》要求进行，以免误导临床。
作者：王伟军；寿利祥；朱百荣 刊期： 2001年第03期
患者，郁某，男，61岁。因全身多部位骨痛2.5年，加重伴面色苍白6个月入院。1998年7月确诊为多发性骨髓瘤(IgG型)。先后经CTX、VDS、马法兰、表阿霉素等共7个疗程化疗，病情控制不佳。X片显示肋骨、胸4、髂骨、股骨均有骨质破坏并有压缩性骨折。肝肾功能检查:总蛋白77 g/L、白蛋白22 g/L、球蛋白55 g/L、A/G=0.4/1.0、ALT正常；BUN 28.4 mmol/L、Cr 366 μmol/L,Glu 3.9 mmol/L。免疫学检查:血清蛋白电泳A 28.2%、α1 2.0%、α2 7.0%、β4.1%、γ 58.7%；IgG 51.5 g/L、IgA 0.5 g/L、IgM 0.5 g/L。血清钙2.88 mmol/L，血清磷3.41 mmol/L。血液学检查:WBC 4.1×109/L、N 83%、L 12%、M 5%，RBC 2.10×1012/L、Hb 63 g/L,PLT 43×109/L;ESR 140 mm/h;外周血片形态学观察，未发现异常细胞。骨髓涂片:骨髓瘤细胞32%。尿液检测:尿蛋白0.75-1.5 g/L;尿本周蛋白强阳性(+++)；尿沉渣镜检：红细胞0-2/HP、白细胞3-6/HP，偶见透明管型，可见非典型细胞，胞体直径约15-30 μm，形态圆、椭圆或不规则，有的聚集成团，细胞核隐约或清晰可见，核略偏位或居中、胞浆无颗粒。尿沉渣涂片自然干燥后用瑞-吉染色，油镜观察，此类细胞胞浆灰蓝色至蓝色，着色深浅不一，有的呈不规则的云雾空泡样改变，核偏位于一侧，核染质较粗糙、疏松，有的可见隐约的核仁。根据形态学特征确认为骨髓瘤细胞(见图1)。
作者：周道银；凌励；周岳松 刊期： 2001年第03期
1 病例摘要 患者，男，19岁，双眼结膜充血，流泪，畏光，有脓性分泌物。曾用氯霉素、氢化可的松滴眼有好转，但停药后又复发，持续了2个多月，于2000年3月18日来我院就诊，分别于3月18日、3月19日、3月20日，连续3次取眼分泌物做培养，均分离出Listeria grayi(格氏李斯特菌)。后经选用敏感药物红霉素，四环素滴眼而痊愈。2 细菌分离与鉴定取患者双眼分泌物，接种血琼脂培养基。置35℃ 24 h,出现细小、表面光滑，灰白色，圆形的菌落，直径1～2 mm,无β溶血环。革兰染色为阳性短小杆菌，可见到典型的V型或成双排列。将培养4天的细菌再作革兰染色，有较多的细菌呈阴性，但形态无改变。3 生化反应该菌氧化酶阴性，触酶阳性，有动力，能发酵葡萄糖、乳糖、半乳糖；甘露醇，肌醇，水解七叶苷，VP试验呈阳性反应。CAMP试验、硝酸盐还原、木糖、鼠李糖、水解马尿酸盐、山梨醇、松三糖均为阴性。4 药敏试验 K-B法，该菌对红霉素、四环素、复方新诺明敏感。对青霉素、氨苄青霉素、羟苄青霉素、头孢三嗪、卡那霉素、丁胺卡那霉素均耐药。
作者：敖必蓉 刊期： 2001年第03期
2000年7月，我们从1例先天性心脏病患者血液标本中先后2次分离出Streptococus constelltus(星座链球菌)，现报道如下。1 病例摘要 患者，女，47岁。因时有尿路烧灼感、发热1个月入院。查体:体温36.5℃，神清，腹软。实验室检查:小便常规正常，血WBC 6.5×109／L，N 0.67，L 0.32，M 0.01，Hb 130 g/L，PLT 235×109／L。入院第2天和第4天分别抽血做细菌培养，均分离出纯培养星座链球菌。用青霉素和氨苄青霉素治疗10天后，体温恢复正常，血培养复查为阴性，病情痊愈出院。2 细菌培养鉴定2.1 生物学特性无菌抽取患者静脉血5 ml注入双相血培养瓶(梅里埃公司)混匀。35℃36 h后见血培养瓶混浊，转种到血平板，1份放置CO2孵箱内35℃24h，另1份放置需氧培养24～36h后，均可见细菌生长，CO2环境下细菌生长较好。菌落较小，针尖大，呈灰白色，圆形，边缘整齐，不溶血。涂片染色为革兰阳性球菌，星形或短链状排列。
作者：张国雄；杨桂珍；江广安 刊期： 2001年第03期
华东地区中西医结合实验医学第三次学术会议暨讲习班，定于2001年10月15～18日在江西省吉安市(井冈山)举行，现开始征文并接受报名。征文内容涉及实验医学各个方面新进展、新技术、新方法、经验总结等论文(含临床、检验、药理、动物实验、中医现代化研究等)，另附500字左右论文摘要1份；讲习班内容主要涉及微生物免疫新进展、临床研究新成果及微生物自动化检测等，授Ⅰ类继续教育学分。会议征文截止时间为8月31日，讲习班报名截止时间为9月30日。征文及报名请寄南京市汉中路282号江苏省中西医结合学会韩剑秋收(邮编210029，电话025-6617284)，请注明××学术会议和××讲习班。
作者： 刊期： 2001年第03期
ABO血型正反定型为血型血库实验室中重要的基本工作。ABO正反定型不合有技术性问题及理论性问题。技术性问题容易解决，只要认真重复试验，仔细核对血样和试剂，正确读取结果及防止书写错误即可避免，但理论性问题有时相当复杂，必须对ABO血型的基本理论全面了解才能解决。1 ABO正反定型不合的技术性问题 ABO正反定型不合存在如下技术性问题:血样搞错；书写错误；红细胞悬液太浓或太淡；漏加或误加试剂；试剂污染或失效；离心机速度未核实；结果判断方法不规范、标准不统一；判断结果时只注意了红细胞凝集而忽略了溶血现象。2 ABO正反定型不合的理论性问题 ABO正反定型不合理的理论性问题相当深奥，有时也不易弄清。在企图探查正反定型不合的原因之前，首先必需核对被检者的姓名、年龄、诊断、妊娠史、输血史。试剂的来源、品质和质量、人源抗血清还是单克隆试剂，必要时还应测定被检者免疫球蛋白的水平。
作者：毛菊珍；张莉尼；陈忠 刊期： 2001年第03期
