目的 观察联合美金刚和米诺环素用药在肌萎缩性脊髓侧索硬化病(ALS)转基因小鼠模型治疗中的协同作用.方法 ALS转基因小鼠被随机分成生理盐水对照组、米诺环素组、美金刚组和米诺环素/美金刚组.对腹腔注射米诺环素和美金刚后ALS小鼠的运动能力、发病时间、生存时间以及腓肠肌重量变化进行定量分析.结果 (1)与对照组发病时间(98.3±4.6)d比较,米诺环素组和美金刚组分别为(117.1 ±7.4)、(114.0±3.5) d(P ＜0.05)；对照组生存期为(129.4±6.2)d,米诺环素组和美金刚组分别为(146.2±5.9)、(141.9±6.3) d(P ＜0.05).联合治疗组发病时间和生存期分别为(126.2±8.4)d和(159.1±3.9)d.与对照组比较,米诺环素组、美金刚组和联合治疗组生存时间分别延长13％、11％和23％.(2)对照组小鼠第16周时腓肠肌重量为(83.5±10.2)mg,米诺环素组和美金刚组分别为(133.7 ±12.5)、(130.1 ±10.3) mg,联合治疗组为(186.3±17.9) mg,与对照组和单一用药组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 联合米诺环素和美金刚对治疗ALS小鼠具有协同治疗作用.
作者：张文华；吴承远；李新钢；张伟；苗立峰；江玉泉 刊期： 2012年第02期
目的 观察p53上调凋亡调控因子(PUMA)在甲状腺乳头状癌(PTC)及其配对癌旁组织(NCE)中的表达,探讨PUMA在PTC发生发展中及其诱导细胞凋亡的作用.方法 采用免疫组织化学SP法检测60例PTC及NCE组织PUMA蛋白的表达；应用原位末端标记法(TUNEL)检测PTC及NCE细胞中的凋亡.结果 PUMA蛋白在PTC和NCE组织中的阳性表达率分别为40.00％( 24/60)、63.33％ (38/60)(X2=6.541,P＜0.05).PUMA在PTC中的表达与患者的TNM分期、淋巴转移及病理分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、性别无明显相关(P＞0.05).PUMA在PTC中的表达与其细胞的凋亡有明显相关(X2=12.113,P＜0.01).结论 PUMA作为一种促进凋亡的抑癌基因,参与了PTC的凋亡及发生发展,与PTC的浸润和淋巴结转移有关.
作者：殷德涛；李红强；郑丽丽；陈国；卢秀波 刊期： 2012年第02期
目的 探讨基质金属蛋白酶1/蛋白酶活性受体-1( MMP-1/PAR1)信号通路在脑胶质瘤发展的作用及其意义.方法 应用免疫组织化学方法检测108例原发性胶质瘤患者肿瘤组织中MMP-1和PAR1的表达模式.采用Kaplan-Meier生存分析和Cox比例风险模型分析胶质瘤患者的预后.结果 免疫染色结果显示108例患者活体组织有83.3％表达MMP-1 (90/108),76.9％表达PAR1(83/108).PAR1的表达与MMP-1的表达显著相关(r=0.8,P＜0.01).高级别胶质瘤MMP-1和PAR1的免疫组织化学(IHC)总分明显高于低级别胶质瘤(两者P＜0.01).此外,MMP-1和PAR1表达高的患者Kamofsky行为能力(KPS)评分低于MMP-1和PAR1表达低的患者(两者P＜0.01).而且,患者总体生存率降低的结果表明,MMP-1和PAR1表达情况是胶质瘤的强预后指标(P＜0.01).多因素Cox分析显示KPS (P ＜0.01)、WHO病理分级(P＜0.01)、MMP-1 (P＜0.01)和PAR1 (P ＜0.01)是影响脑胶质瘤预后的独立因素.结论 脑胶质瘤中MMP-1/PAR1信号通路的活化与肿瘤恶性程度及临床结果相关.
作者：李巧玉；张焱；湛利平；袁志诚；陆培松 刊期： 2012年第02期
目的 观察全反式维甲酸(ARTA)联合干扰素(IFN)-β对人骨肉瘤细胞株MG-63的生长抑制试验以及对干扰素/维甲酸联合应用诱导凋亡的相关基因19( GRIM-19)和原癌基因信号转导与转录激活因子-3( STAT3)的表达的影响.方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测不同药物浓度的ATRA/IFN-β,单用或联合应用对MG-63的增殖抑制率；流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI法检测MG-63的凋亡；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MG-63中STAT3与GRIM-19基因的扩增情况；Western blot检测MG-63中STAT3与GRIM-19蛋白的表达.结果 ARTA和IFN-β单用或联合应用均可抑制MG-63的增殖,呈浓度依赖性并与作用时间有关；联合应用抑制作用明显增强,与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.05).ARTA、IFN-β单独作用,可诱导MG-63凋亡；联合应用时,诱导凋亡作用显著增强.ARTA联合IFN-β作用,GRIM-19 mRNA的表达明显增强(1.620±0.095),GRIM-19蛋白明显升高(1.850±0.060),与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.01).STAT3 mRNA的表达明显降低(0.120 ±0.032),STAT3蛋白明显降低(0.540±0.075),与其他组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 ARTA/IFN-β作用,可明显抑制MG-63的增殖并诱导其凋亡,其机制可能是诱导GRIM-19高表达,特异性结合于STAT3的转录活性区域,使原癌基因STAT3的表达降低.
作者：李甲振；张怀栓；镐英杰；张岩；刘永奎；石海龙；闻嘉 刊期： 2012年第02期
目的 观察以肾脏作为远隔器官的远隔缺血后适应能否减轻兔急性肠系膜缺血再灌注损伤.方法 将雄性新西兰兔90只随机分为对照组、缺血再灌注(I/R)组、远隔缺血后适应(IRpostC)组,每组30只.分别干预后采集各组兔部分肠道组织作为标本,试剂盒检测肠道组织内丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)水平,苏木素-伊红(HE)染色,chiu6级评分法观察肠黏膜损伤,电镜下观察肠上皮细胞变化.结果 I/R组肠道组织中MDA、MPO测定值及肠黏膜损伤评分分别为( 14.72±0.21) nmol/mg、( 1.65±0.35) U/g、(3.30±0.69),IRpostC组分别为(7.13 ±0.40) nmol/mg、(0.91±0.33) U/g、2.10 ±0.92,与对照组[(3.28±0.26) nmol/mg、(0.52 ±0.23) U/g、0.69±0.52]比较差异均有统计学意义(P＜0.01).与I/R组比较,IRpostC组肠道组织中MDA、MPO水平及肠黏膜损伤评分明显降低(P＜0.01),电镜下发现细胞损伤减轻.结论 以肾脏作为远隔器官的远隔缺血后适应可明显降低兔急性肠系膜缺血再灌注损伤后肠道组织中MDA、MPO水平及肠黏膜损伤.
作者：杨牟；张居文；陈萍；孙林；车海杰；勇俊；李鲁滨；宋富波 刊期： 2012年第02期
目的 观察白细胞介素(IL)-7是否通过促进CD8+T细胞干扰素-γ(IFN-γ)分泌来增强小鼠抗乳腺肿瘤的免疫效应.方法 荷瘤小鼠瘤体内直接注射IL-7真核表达质粒(pcDNA3-IL-7)；免疫磁珠分选CD4+T、CD8+T细胞并体外培养；流式细胞仪检测细胞内干扰素(IFN)-γ的分泌量；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清IFN-γ的量；噻唑蓝(MTT)法检测CD8+T细胞体外杀伤活性；小鼠体内预先注射anti-CD8抗体阻断活化.结果 pcDNA3-IL-7注射组CD8+T细胞内IFN-γ(38.6±4.4)％、CD8+T细胞培养上清IFN-γ( 136.0±11.2) ng/L,与对照组比较,pcDNA3-IL-7明显促进CD8+T细胞IFN-γ表达量(P＜0.05)；IL-7处理过的荷瘤小鼠CD8+T细胞杀伤活性显著增强,尤其效靶比为100∶1；小鼠体内预先注射anti-CD8抗体阻断CD8+T细胞活化,显著抑制IL-7抗瘤效应(P＜0.05).结论 IL-7通过促进小鼠体内CD8+T细胞分泌IFN-γ介导抗瘤效应,从而增强小鼠机体抗乳腺肿瘤的免疫反应.
作者：汪付兵；陈志芬；陈大平；阳芳；柳琨；冯茂辉；谢伟；朱尤庆；夏冰 刊期： 2012年第02期
目的 观察30例患者肝癌与邻近癌旁组织中激活的T细胞核因子(NFAT)家族基因mRNA表达的差异,探讨NFAT基因在肝癌发生发展中的作用.方法 常规抽提30例患者肝癌组织与癌旁组织中的RNA,去除基因组DNA后反转录成cDNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测标本中NFAT家族基因mRNA表达.结果 NFAT1 mRNA ratio癌组织为0.003 034±0.002 162,癌旁组织为0.010 140±0.009 742；NFAT2 mRNA ratio癌组织为0.000 336±0.000 272,癌旁组织0.002 173±0.003 380；NFAT3 mRNA ratio癌组织为0.002 907±0.002 436,癌旁组织为0.006 427±0.004 502；NFAT4 mRNA ratio癌组织为0.004 198±0.004 787,癌旁组织为0.012 370±0.010 890；NFAT5 mRNA ratio癌组织为0.079 060±0.247 600,癌旁组织为0.282 100±0.686 900；5种NFAT家族基因mRNA水平癌组织均较癌旁组织低(P＜0.01).结论 NFAT家族5种基因的mRNA水平癌组织较癌旁组织中均降低,可能与肝癌的发生发展有关.
作者：张进；刘志苏；刘权焰；龚铖；刘阳；孙江阳 刊期： 2012年第02期
目的 观察人工关节磨损钛微粒的大小及不同微粒-细胞比对成骨细胞低密度脂蛋白受体(Lrp5) mRNA表达的影响.方法 (0.35±0.09) μm磨损钛微粒分别以微粒-细胞比1∶1、10∶1、100∶1、500∶1,(1.5±0.38) μm及(6.25±2.13) μm大小磨损钛微粒以微粒-细胞比10∶1与成骨细胞联合培养,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测成骨细胞Lrp5 mRNA表达.结果 随着钛微粒-细胞比增高,成骨细胞Lrp5 mRNA表达逐渐减低,当钛微粒-细胞500:1时未检测到Lrp5 mRNA表达,各组间差异有统计学意义(P＜0.05).在微粒-细胞比10:1时,(0.35 ±0.09) μm钛微粒组较(1.5±0.38) μm和(6.25±2.13) μm钛微粒组,(1.5±0.38)μm钛微粒组较(6.25±2.13) μm钛微粒组,成骨细胞Lrp5 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 人工关节磨损钛微粒可以通过Lrp5信号途径影响骨形成,微粒大小及数量是决定磨损微粒细胞学反应的重要参量,微粒越小,微粒-细胞比越高,对成骨细胞Lrp5 mRNA表达的抑制性越强.
作者：王钢；刘世清；蔡青 刊期： 2012年第02期
目的 应用高密度寡核苷酸(Oligo)基因芯片技术筛选不同胶质瘤细胞相关基因.方法 提取星形胶质细胞瘤CHG-5细胞株(WHO分级Ⅱ级)、星形胶质细胞瘤U373细胞株(WHO分级Ⅲ级)、星形胶质细胞瘤SHG-44细胞株(WHO分级Ⅳ级)和神经胶质细胞U257细胞株的总RNA并逆转录为cDNA,其中cy5、cy3的dNTP分别掺入不同胶质瘤细胞和神经胶质细胞的cDNA,混合后杂交含22000个人类基因人类高密度Oligo基因芯片,经过洗片和扫描,获得荧光信号图像并用计算机分析,抽取4种差异表达基因用聚合酶链反应(PCR)验证它们不同胶质瘤细胞和神经胶质细胞中的差异表达.结果 从22000条基因中筛选出差异表达基因242条,其中123条表达上调,119条表达下调,包括细胞凋亡、细胞周期蛋白、细胞骨架和运动蛋白等相关基因.结论 基因芯片技术的胶质瘤基因表达谱分析能够高通量筛选胶质瘤相关基因,并高效对基因功能进行研究,有助于认识肿瘤发病机制.
作者：张红；楚胜华；冯东福；马延斌；邱建华；朱志安 刊期： 2012年第02期
目的 观察人胶质瘤细胞株SHG44、BT325、U251和正常人脑星形细胞(NHA)中ADAR2mRNA表达水平及苯乙酸(PA)对U251细胞中ADAR2表达的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time fluorescent quantitative PCR)方法检测胶质瘤细胞中ADAR2mRNA表达水平,检测PA处理前后U251细胞中ADAR2mRNA表达水平的变化；噻唑蓝(MTT)比色法检测PA作用24、48和72 h后U251细胞增殖.Western印迹法检测PA作用前后U251细胞中ADAR2蛋白表达.结果 Real-time PCR检测显示:ADAR2 mRNA在NHA中表达极弱(19.9±2.2),在SHG44和BT325细胞中明显表达(35.6±2.8、78.8±3.2),在U251细胞中表达水平高(101.3±3.5).PA3.0和5.0 mmol/L作用U251细胞24h后,ADAR2mRNA分别为60.3±1.5和50.5±l.2(P＜0.01)；MTT法检测显示PA对U251细胞的增殖呈时间和剂量依赖性抑制(P＜0.01)；Western印迹法显示PA可降低ADAR2蛋白表达水平.结论 在不同的胶质瘤细胞中,ADAR2mRNA表达水平不同；PA可抑制U251细胞中ADAR2mRNA和蛋白水平的表达.
作者：魏君；杜超；綦斌；张萱；宿晓云；田宇 刊期： 2012年第02期
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其分化的神经样细胞与聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架材料的相容性,并探讨两者复合修复周围神经损伤的效果.方法 (1)在体外,通过荧光显微镜、流式细胞仪、扫描电镜等技术观察BMSCs在PLGA上的生长及分化成神经样细胞的情况；(2)在体内,取右侧坐骨神经损伤的SD大鼠,随即分为4组,分别移植单纯PLGA、BMSCs-PLGA、神经样细胞-PLGA及直接缝合神经,术后斜板试验观察4组动物下肢功能情况；60d后处死大鼠,取神经标本做病理切片.结果 (1)在体外,BMSCs在PLGA上生长良好,与同期培养板里面的细胞比较,吸光度值(A)差异无统计学意义(P＞0.05)；(2)在体内,BMSCs及其神经样细胞复合PLGA后能修复损伤的坐骨神经,促进大鼠下肢运动功能的恢复.术后3周,各组大鼠斜板试验的角度分别是:直接缝合组(38.32 ±5.51)度、单纯PLGA组(40.27 ±2.74)度、BMSCs-PLGA组(45.14±3.43)度、神经样细胞-PLGA组(60.56±4.70)度,且神经样细胞-PLGA组显著高于其他组(P＜0.01)；病理切片显示支架与宿主神经组织有良好的生物相容性.结论 BMSCs能诱导分化生成神经样细胞,而PLGA与两者有良好的生物相容性.
作者：符厚圣；周兴；桂有富；郑煜；潘建刚 刊期： 2012年第02期
目的 观察单抗CD44-生物素(Biotin) -亲和素(Avidin)绑定系统在构建组织工程软骨中能否提高软骨细胞与支架的黏附能力.方法 分别制备软骨细胞二维和三维培养体系,分3组:A:壳聚糖+软骨细胞；B:生物素+亲和素化壳聚糖+软骨细胞；C:生物素化单抗CD44+亲和素化壳聚糖+软骨细胞.分别测定细胞展平面积、细胞接种脱落率、细胞增殖率,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Ⅱ型胶原(ColⅡ)、聚集蛋白聚糖(aggrecan )、sox9的mRNA表达,组织学切片观察壳聚糖支架内细胞黏附生长情况.结果 细胞展平面积、细胞增殖率及ColⅡ、aggrecan、sox9的mRNA表达量皆为:C组＞B组＞A组(P＜0.05).细胞接种脱落率:A组为C组的3.71倍、为B组的2.17倍,而B组为C组的1.71倍,A组＞B组＞C组(P＜0.05).组织切片显示细胞在支架内C组增殖旺盛、胞外基质表达较丰富,A组增殖较弱、胞外基质表达较弱,B组介于C与A组间.结论 单抗CD44-Biotin-Avidin绑定系统能比Biotin-Avidin绑定系统更显著的提高软骨细胞与支架的黏附能力,促进组织工程软骨种子细胞的增殖和软骨细胞表型的表达.
作者：林红；周健；沈龙祥；阮玉辉；戴文达；郭常安；陈峥嵘 刊期： 2012年第02期
目的 观察腹主动脉粥样硬化斑块中是否存在纳米细菌,并对其进行鉴定.方法 12例腹主动脉粥样硬化斑块及12例正常动脉血管组织研磨,取上清液培养.8周后收集培养瓶底白色粉末,用纳米细菌单克隆抗体间接免疫荧光法对其进行检测,并利用电镜进一步观察.结果 12例动脉粥样硬化斑块中10例纳米细菌检测阳性,2例阴性,12例正常动脉血管组织中1例纳米细菌检测阳性,11例阴性,差异有统计学意义(P＜0.05).纳米细菌单克隆抗体间接免疫荧光检测时可发出绿色荧光,电镜下测量纳米细菌直径约为100 ～ 300 nm.结论 腹主动脉粥样硬化斑块中存在纳米细菌,它可能导致粥样硬化斑块不稳定.
作者：耿文茂；张倩；吴亚光；秦成坤；苏忠学 刊期： 2012年第02期
目的 观察蛇葡萄素对体外人膀胱癌细胞株T24的增殖抑制作用.方法 以浓度为20、10、5、320、160、80、40 mg/L的蛇葡萄素作用于体外培养的人膀胱癌细胞株T24应用噻唑蓝(MTT)的培养检测增殖抑制方法.结果 浓度为20、10、5 mg/L的蛇葡萄素对体外人膀胱癌细胞株T24的增殖抑制率明显高于浓度为320、160、80、40 mg/L的蛇葡萄素.结论 蛇葡萄素对体外人膀胱癌细胞株T24的增殖有抑制作用,而且增殖抑制率与蛇葡萄素的浓度剂量不成正比例,在一定范围内的浓度达到大的抑制率,不会因浓度增加而抑制率增加.浓度为20、10、5 mg/L更能有效的抑制人膀胱癌细胞株T24的增殖.
作者：龙云；史振军；杨泽娟；耿燚；田立新 刊期： 2012年第02期
目的 探讨银杏叶提取物(GBE)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 将80只清洁级雄性SD大鼠随机分为2组:对照组(A组,给予生理盐水治疗,n=40只),银杏叶提取物干预组(B组,给予等量的银杏叶提取物,n =40只),每组再分4个亚组,即再灌注后1、3、6、24 h组,每个亚组10只.制作大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型.应用苏木素-伊红(HE)染色法观察脑组织形态学变化及免疫组织化学SABC法检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在脑组织中的表达；应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血小板活化因子(PAF)在血清中的浓度变化.结果 HE染色:A组发现明显的梗死灶、神经细胞坏死、凋亡,神经细胞外形难以辨认,大部分细胞结构消失.B组形态相对正常,损伤较A组轻.iNOS免疫组织化学结果:缺血再灌注1h后可见少量iNOS阳性表达细胞,3、6、24h可见iNOS阳性表达细胞明显增多,并且开始出现核移位现象,包括神经元、神经胶质细胞、血管内皮细胞等,各时间点(1、3、6、24 h)iNOS的阳性表达IA值B组(1851.38 ±242.12、2005.41±290.52、2625.28±385.21、3142.50 ±425.72)显著低于A组(1950.25±298.26、2232.45±305.28、325 1.22±425.26、3965.36±521.62) (P ＜0.05).再灌注后PAF的血清浓度升高,6h达高峰,24h开始下降,再灌注后各时间点(1、3、6、24 h)B组PAF的血清浓度(15.36±2.12、18.56 ±3.28、28.21±4.26、22.48±4.21) μg/L显著低于A组(20.52±4.26、28.25±6.18、36.08±7.45、30.26±6.02)μg/L(P ＜0.05).结论 iNOS和PAF在大鼠脑缺血再灌注后均显著增高.银杏叶提取物可能通过抑制PAF和iNOS的表达减轻脑缺血再灌注损伤,银杏叶提取物对大鼠缺血再灌注后的脑组织有显著的保护作用.
作者：段长虹；付庆林；靳国庆；王崇军；王丽娜；史瑞锋；赵东方 刊期： 2012年第02期
目的 观察力学刺激对软骨细胞凋亡信号转导分子半胱氨酸酶-3( Caspase-3)及B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bax mRNA表达和凋亡的影响.方法 兔膝关节软骨分离培养,在第3代软骨细胞培养瓶中加入不同剂量的Caspase-3、bcl-2、bax抑制剂,力学刺激诱导凋亡,然后检测软骨细胞凋亡率,聚合酶链反应(PCR)半定量分析Caspase-3 bcl-2、bax mRNA表达.结果 力学刺激诱导软骨细胞凋亡,在加入抑制剂的各组和空白组的凋亡率差异有统计学意义(P＜0.05)；各组Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达和空白组差异有统计学意义(P＜0.05).Caspase-3抑制剂组的凋亡率和Caspase-3表达明显相关(r=0.69,t=3.41,P＜0.01)；bcl-2抑制剂组和bcl-2的表达明显相关(r=0.73,t=3.97,P＜0.01);bax抑制剂组和bax的表达明显相关(r=0.89,t =6.69,P＜0.01)；各组差异均有统计学意义.结论 Caspase-3、bax抑制剂能对抗力学刺激诱导的凋亡,而bcl-2抑制剂使凋亡增加,各组Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达发生相应改变.
作者：李雄峰；戴利成；庄汝杰；庄伟；周国顺 刊期： 2012年第02期
目的 观察脾切除对大鼠肝大部分切除术后细菌移位的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组),2/3肝切除组(PHx组),肝切除加脾切除组(PHx +Sp组).85只大鼠中30只用于测定门静脉压力,55只用于分析细菌移位、血浆内毒素、血浆D-乳酸、肠组织病理学及免疫功能.结果 PHx组门静脉压力(13.34±0.64) cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)显著高于SO组(7.64±0.44) cm H2O和PHx+ Sp组(10.30±0.69) cm H2O(P＜0.01).PHx组的细菌移位率高于SO组(65.00％比6.67％;P ＜0.01),也明显高于PHx+ Sp组(25.00％；P ＜0.05).大鼠血浆内毒素中位数SO组为0.00 ng/L,PHx组为4.05 ng/L,PHx +Sp组为1.47 ng/L(P ＜0.01).血浆D-乳酸在SO组和PHx+ Sp组也较PHx组低(分别为1.68、23.36、39.09 g/L,P＜0.01).结论 脾切除能降低肝大部分切除大鼠门静脉压力,增强肠黏膜屏障功能,减少内毒素和细菌移位的发生.
作者：陈文哲；胡昆鹏；林楠；邓浩；潘卫东 刊期： 2012年第02期
目的 构建含有人沉默调节蛋白6(hSIRT6)基因的重组原核表达载体,获得高效表达hSIRT6蛋白的基因工程菌,以及较高产量的SIRT6蛋白.方法 取205 ng HEK293细胞总RNA逆转录后合成的cDNA为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增hSIRT6的编码序列,并克隆至原核表达载体pGEX-4T-3中,构建重组的质粒pGEX-4T-3/SIRT6;将重组质粒pGEX-4T-3/SIRT6转化感受态细菌BL21( DE3),在含100 mg/L氨苄西林的LB平板37℃培养过夜,以pGEX-4T-3空载体作为对照,在相同条件下转化并异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)蛋白.产物经SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定.结果 PCR产物大小及双酶切鉴定证明所克隆的基因是hSIRT6,DNA测序进一步证实与GeneBank序列完全一致.获得高表达及纯化的SIRT6-GST融合蛋白,该可溶蛋白的相对分子质量为72×103,经Western blot鉴定证实为目的蛋白.结论 成功构建了基因重组体pGEX-4T-3/hSIRT6,并制备出可溶性SIRT6-GST融合蛋白.
作者：夏天；刘建湘；姚景宏；吴太鼎；刘子建；杨述华 刊期： 2012年第02期
目的 观察术前不同给药对垂体生长激素(GH)腺瘤增殖指标细胞周期相关核抗原Ki-67的抗体(Mib-1)和DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)的影响状况,探讨佳治疗手段.方法 对362例GH腺瘤标本应用免疫组织化学染色计算Mib-I和TopoⅡα标记指数,收集相关临床资料并加以统计处理.结果 Mib-1和TopoⅡα的标记指数与肿瘤Hardy分级和侵袭性显著相关(P＜0.01),全切率只与前者显著相关(P＜0.01).不同药物干预对Mib-1和TopoⅡα标记指数影响差异有统计学意义(P＜0.01),生长抑素类似物(SA)可以有效降低增殖指标指数(P＜0.05),多巴胺受体激动剂(DA)单用及与SA合用以及SA合用生长激素受体抑制剂(GHRA)对增殖指标均无明显影响(P＞0.05).结论 Mib-1和TopoⅡα标记指数高低可作为判断GH腺瘤侵袭程度和预后的指标.术前给予SA有助于降低术后肿瘤复发和侵袭力,GHRA不适合单独给药,建议与SA合用.DA适合于生长激素泌乳素混合腺瘤.
作者：徐钰；Michael Buchfelder；雷霆 刊期： 2012年第02期
目的 探讨骨髓基质干细胞复合Ⅰ型胶原海绵对兔膝关节浅层大面积软骨缺损的修复作用；观察3H-TdR对骨髓基质干细胞的示踪作用.方法 骨髓基质干细胞复合组织工程支架Ⅰ型胶原海绵,植入修复兔膝关节大面积浅层软骨缺损模型,分别于术后4、12、24周取材,观察修复效果;运用3H-TdR标记骨髓基质干细胞,同法植入软骨缺损区,分别于术后4、12、16及24周取材,液体闪烁计数定量分析、乳胶封片、4周后显影定性分析.结果 实验组术后4周缺损表面未见明显的新生软骨形成；12周,缺损表面有少量的新生软骨形成；24周,缺损表面的新生软骨较4、12周的新生软骨明显,仍存在部分缺损尚未修复.对照组则均未见明显的修复.修复组织的细胞核内均有放射活性,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),提示修复组织的细胞来源为体外移植的细胞,而非自体细胞,至术后24周,植入的细胞仍然存活.结论 该方法对兔膝关节软骨缺损具有修复作用,但不能完全修复；所修复组织的细胞来源为植入的骨髓基质干细胞；3H-TdR标记对骨髓基质干细胞具有较好的长期示踪作用.
作者：陈雷；林建华；吴朝阳 刊期： 2012年第02期
目的 观察金纳多预处理后,水通道蛋白-1( AQP-1)在大鼠离体肺缺血再灌注损伤过程中的表达及其功能.方法 将40只大鼠随机分为供体组和受体组(n=20).供体组再随机分为2组(n=10),低钾右旋糖苷液(LPD)灌注组与LPD+金纳多组；受体组也随机分为2组(n=10).LPD灌注组大鼠左肺设为A组,右肺设为B组,为对照组.LPD+金纳多灌注组左肺设为C组,右肺设为D组,为对照组.建立大鼠离体肺缺血再灌注模型,分组造模后,取肺组织,免疫组织化学法检测肺组织AQP-1的表达；RT-PCR检测肺组织AQP-1 mRNA的表达；免疫印迹法检测肺AQP-1蛋白的表达.结果 A组及C组肺组织中AQP-1蛋白表达的相对灰度值分别为0.65±0.06、0.88±0.11,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).AQP-1在A组及C组肺组织中的mRNA表达平均相对A值分别为0.30±0.08、0.49 ±0.11,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 肺移植术前给予金纳多治疗,可减轻供肺的损伤.
作者：李向楠；潘雪；赵松；张春阳；朱登彦；王鹏 刊期： 2012年第02期
目的 探讨Yap1蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义.方法 应用免疫组织化学方法检测Yap1在35例前列腺癌组织和16例良性前列腺增生组织中的表达,用平均吸光度值(积分吸光度/面积,IA/area)代表阳性细胞的表达水平；并探讨Yap1与前列腺癌临床病理参数之间的关系.结果 Yap1在良性前列腺增生组的表达水平(IA/area =0.1867 ±0.0753)明显高于前列腺癌组(IA/area=0.0782 ±0.0614),两组差异有统计学意义(P＜0.01,F=16.942)；Yap1蛋白主要表达在细胞质.Yap1蛋白表达程度与前列腺癌的Gleason评分无明显相关(P＞0.05),但Yapl在Gleason 7分组(IA/area =0.0548±0.0441)的表达强度高于Gleason 9分组(IA/area=0.1296±0.0957) (P ＜0.05).结论 前列腺癌中Yap1蛋白低表达可能与前列腺的发生、发展有关.
作者：胡晓勇；徐月敏；乔勇；俞建军；陈杰 刊期： 2012年第02期
目的 观察血清中可溶性CD20分子(sCD20)在肾移植急性排斥反应时的变化,探讨血清sCD20水平变化与移植肾预后的关系.方法 收集50例肾移植患者外周血,酶联免疫吸附测定法检测血清中sCD20水平.结果 25例急性排斥反应患者术前血清sCD20为(1750.60±359.59) ng/L,与稳定组(936.96±181.71) ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；移植术后急性排斥反应组血清sCD20为(2516.20 ±511.33) ng/L,与稳定组(988.40 ±215.78)ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；而且sCD20值水平较高的患者移植肾存活时间明显少于sCD20值水平较低的患者.结论 CD20分子在移植肾急性排斥反应和预测肾移植预后中可能起重要作用.
作者：石利平；苏泽轩；程云华；丁泓文；陈洁；李文浩；郝彤彤 刊期： 2012年第02期
目的 观察钛合金颗粒对体外培养小鼠成骨细胞增殖以及核因子(NF) -κB受体活化因子配体(RANKL)的影响,探讨假体周围骨溶解机制.方法 体外培养小鼠成骨细胞,随机分为空白对照组和钛合金颗粒处理A(0.01％)、B(0.10％)、C(1.00％)组.采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测培养24、48、96、168 h成骨细胞增殖活性.分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养24、48 h后成骨细胞的RANKL mRNA表达及培养上清液的RANKL含量.结果 培养48 h,A组、B组与对照组比较细胞增殖活性差异无统计学意义(P＞0.05),C组与其他各组比较细胞增殖活性明显降低(P＜0.01).培养168 h,B组细胞增殖活性下降,和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).培养24、48 h,和对照组比较,各实验组RANKL mRNA表达及分泌量均明显升高(P＜0.01),各实验组之间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 钛合金颗粒可降低成骨细胞增殖活性,促进成骨细胞RANKL表达与分泌,是假体周围骨溶解机制之一.
作者：刘林；谢守祥；赵宁军；姚爱明；秦宏敏；许铁 刊期： 2012年第02期
目的 观察上调miRNA-133a表达是否可改善缺血再灌注损伤后心肌损害及心脏功能.方法 建立活体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.将实验动物随机分为5组:(1)空白对照组(Sham组)；(2)缺血再灌注损伤组(I/R组)；(3)缺血再灌注损伤+miRNA-133a模拟物agomiR-133a组(I/R+ agomiR-133a组)；(4)缺血再灌注损伤+阴性对照序列组(I/R+ scramble组)；(5)缺血再灌注损伤组+生理盐水组(I/R+ NS组).于再灌注24h分别使用实时定量聚合酶链反应(Real-TimePCR)法检查心肌内miRNA-133a表达水平；经胸超声心动检查大鼠心脏功能；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死以及TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡.结果 I/R+ agomiR-133a组心肌内miRNA表达水平显著高于I/R组(P＜0.01).上调miRNA-133a表达水平可显著减少再灌注后心肌梗死面积[(37.0±3.1)％比(58.0±4.4)％,P＜0.01],抑制心肌细胞凋亡(38.4±6.0比15.7±5.2,P＜0.01),并改善心脏功能[LVEF:(64.8 ±2.9)％比(52.8±4.0)％,LVFS:(31.1±1.2)％比(25.2±0.8)％,P＜0.01].NS与scramble对再灌注后心肌损伤及心脏功能无显著影响.结论 上调心肌内miRNA-133a表达水平可显著减轻缺血再灌注损伤24h后心肌损害,并改善心脏功能.
作者：田轶魁；付强；董福强；杜鑫；芦志红；魏民新 刊期： 2012年第02期
目的 观察铁过载小鼠骨质疏松模型中血清骨转换指标的变化.方法 腹腔注射生理盐水和枸橼酸铁铵建立对照和高铁小鼠模型.小动物活体成像系统测定小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中铁蛋白、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)含量.结果 高铁组小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度显著低于对照组(P＜0.05).高铁组小鼠血清中铁蛋白、TRAP-5b、CTX、RANKL含量分别为(269.72±54.06) μg/L、(41.46 ±8.00) U/L、(7720.00 ±3554.00) pmol/L、(94.22±29.79) ng/L,显著高于对照组( 101.18±17.10) μg/L、(19.57±9.02)U/L、(3140.00 ±632.00) pmol/L、(47.70±15.08) ng/L(P＜0.05)；BALP、BGP含量分别为(7.84±1.74) μg/L、(58.54±4.60) μg/L,明显低于对照组(18.63±6.23) μg/L、( 100.99±18.22) μg/L(P＜0.05)；OPG含量两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 铁过载可能通过抑制骨形成,促进骨吸收引起小鼠骨质疏松.
作者：贾鹏；徐又佳；张鹏；李冰燕；张增利；钱忠明 刊期： 2012年第02期
目的 探讨他克莫司对大鼠实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)的治疗作用及其机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组(C)、EAP模型组(M)、低剂量治疗组(L)和高剂量治疗组(H),各组再按给药时间分为2周(2W)和4周(4W)2个亚组.EAP模型造模成功后低剂量和高剂量治疗组分别给予他克莫司0.2 mg/(kg·d)和0.8 mg/(kg·d)灌胃,连续2周及4周.检测前列腺组织匀浆和血清中白细胞介素(IL)-2和巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-1α的含量,观察前列腺、脾和胸腺组织形态学改变,计算前列腺、脾和胸腺的脏器系数.结果 他克莫司干预后组织形态学显示前列腺组织中炎症细胞减少,腺腔壁得到一定的修复.M2W、L2W和H2W组血清IL-2和MIP-1α分别为(156.80±19.11)、(124.56±17.20)、(114.46±20.65) ng/L和(164.99±22.25)、(112.03±19.90)、(104.91±11.91) ng/L;前列腺组织匀浆IL-2和MIP-1α分别为(219.26±23.11)、(191.56±19.08)、(186.63±20.90) ng/L和(216.46±18.50)、(196.55±17.84)、(194.74±18.14) ng/L.M4W、L4W和H4W组血清IL-2和MIP-1α分别为(156.23±19.83)、(129.27±17.25)、(134.26±16.11) ng/L;(157.93±34.55)、(159.09±29.17)、(154.54±29.85) ng/L;前列腺组织匀浆IL-2和MIP-1α分别为(217.92±23.23)、(186.07±11.56)、(180.37±18.26) ng/L; (209.66±14.65)、(186.17±17.79)、(186.16±18.27) ng/L.除4周组血清MIP-1 α外差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 他克莫司减少EAP大鼠模型前列腺组织中的炎症细胞,这一作用可能与其抑制IL-2的产生和T细胞的活化有关.
作者：袁道彰；苏泽轩；钟玲；刘玉峰；陈洁；丁泓文；都兴华 刊期： 2012年第02期
目的 观察应用自体骨髓基质干细胞(BMSCs)复合珊瑚修复山羊全长腭裂骨缺损的效果.方法 体外成骨诱导山羊BMSCs复合珊瑚修复山羊全长腭裂骨缺损,以单纯珊瑚植入缺损作为对照组.于术后2、12、24、32周行头颅CT扫描并三维重建,术后24、32周行大体取材、苦味酸-品红染色和Micro-CT骨密度分析.结果 成骨诱导BMSCs在珊瑚支架生长良好.三维CT显示早期实验组骨痂较多,对照组可见珊瑚明显降解,术后24、32周腭裂骨缺损被修复,修复比例分别达(88.52±10.95)％、(90.52 ±8.12)％,组织学显示实验组有大量成熟骨,骨基质和胶原形成良好,对照组缺损不能愈合(P＜0.05),Micro-CT显示新生骨密度(759.48± 96.45 )mg HA/cm3、( 823.93±112.07) mg HA/cm3,接近正常骨(P＞0.05).结论 山羊BMSCs成骨诱导后与珊瑚复合能修复完全性腭裂骨缺损,组织工程技术可用于修复腭裂骨缺损.
作者：徐海艇；徐晓斐；王健；余力；张波；朱昌 刊期： 2012年第02期
目的 探讨肝内胆管细胞癌(ICC)白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-6(IL-6)表达的临床意义.方法 采用免疫组织化学Envision二步染色法检测69例ICC肿瘤组织和63例癌旁组织IL-17和IL-6的表达,分析两者的关系及其与临床病理特征和预后的关系.结果 肿瘤和癌旁组织中IL-17+细胞密度中位值分别为36.0/HP(每高倍视野)和8.0/HP；肿瘤组织IL-17低表达组和高表达组IL-6阳性表达率分别为46.9％和75.0％;IL-17和IL-6的表达呈正相关(r=0.256,P＜0.05)；肿瘤组织IL-17低表达组术后生存时间较长(P＜0.01),Cox多因素分析提示肿瘤组织IL-17表达水平( HR=2.462,P＜0.05)是ICC患者术后的独立预后因素.结论 ICC肿瘤组织IL-17表达与IL-6表达呈正相关,与ICC患者术后生存呈负相关,可作为预测患者预后的指标.
作者：张金野；李书红；王俊；林国和；李升平 刊期： 2012年第02期
目的 探讨复制蛋白A1(RPA1)在人食管癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色法检测40例食管癌组织和癌旁组织中RPA1的mRNA及蛋白.结果 RPA1的mRNA及蛋白在食管癌组织和癌旁组织中均有表达,食管癌组织中RPA1表达水平明显高于相应的癌旁组织(P＜0.05),食管癌组织中RPA1表达水平与患者年龄、性别以及肿瘤大小无明显相关,而与肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移明显相关.结论 食管癌组织中RPA1的表达与其进展及转移密切相关.
作者：顾玉明；王洵；肖晋昌；王俊；周战英；许伟；裴冬生；郑骏年 刊期： 2012年第02期
目的 观察糖尿病性勃起功能障碍(DMED)大鼠的睾酮水平变化对其阴茎海绵体平滑肌组织和超微结构的影响.方法 将3个月龄雄性Wistar大鼠20只随机等分为两组:正常对照组和DMED组,行放射免疫法测定其血清睾酮浓度和masson染色观察阴茎海绵体平滑肌(CCSM)密度以及通过透射电镜观察海绵体平滑肌细胞的超微结构.结果 DMED组大鼠的血清睾酮水平(17.445 ±2.540) nmol/L较正常组(338.457±63.802) nmol/L明显下降(P＜0.01)；同时DMED组大鼠CCSM密度(5.640±0.597)％较正常对照组(19.890±1.957)％亦明显减少(P＜0.01),透射电镜下还观察到DMED组大鼠阴茎CSMC的核浆比增大,高尔基复合体明显肥大以及线粒体水肿.结论 睾酮水平下降可能导致DMED大鼠阴茎海绵体平滑肌发生病理变化.
作者：刘全亮；王行环；杨中华；周章炎；胡万里；彭谋 刊期： 2012年第02期
二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)是一种具有多种功能的细胞表面糖蛋白,广泛存在于各种细胞.近年来研究结果表明DPPⅣ的活性与慢性肝脏疾病有一定的相关性[1].本研究旨在建立非酒精性脂肪肝(NAFLD)幼鼠模型,检测血清DPPⅣ的水平及DPPⅣ在肝脏的表达.
作者：阚璇；韩芹；刘戈力 刊期： 2012年第02期
有研究表明下尿路缺血在下尿路疾病病程中发挥重要作用[1-3].通过球囊损伤髂动脉内膜研究人员成功制造了兔下尿路缺血模型以研究其在下尿路疾病中作用机制[4],但该方法存在一定缺点.我们对兔下尿路缺血模型进行改进并与原模型对比观察.
作者：沈文；李萍；肖育华；邓志雄；邱晓拂；华伟；黄成；胡卫列 刊期： 2012年第02期
肺癌是目前常见的恶性肿瘤之一,其死亡率居于整个恶性肿瘤死亡率的首位.其中非小细胞肺癌又占到了肺癌的85％.患者被确诊为肺癌时,往往多数已经处于中晚期[1].尽管人们在非小细胞肺癌( NSCLC)的早期诊断中付出了巨大努力,但是非小细胞肺癌的整体5年生存率也仅有15％[2].肺腺癌在非小细胞肺癌中占到大约30％,并且有易转移等特点,是肺癌治疗及研究中的重点.信号转导与转录激活子3( STAT3)及黏蛋白1( MUC1)基因一直以来被认为与肺癌的发生发展及转移等密切相关,MUC1基因也刚刚被证实是STAT3基因的下游靶基因[3].我们通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测70例肺腺癌组织及50例正常肺组织中STAT3及MUC1基因,探讨其与肺腺癌淋巴结转移的关系.
作者：于洋；刘相燕；王洲；孙志钢 刊期： 2012年第02期
我们采用小鼠骨髓基质干细胞诱导生成破骨细胞(OCL),观察不同浓度的伊班磷酸钠对OCL形成的影响,确定其抑制OCL形成的低有效浓度,并观察此浓度伊班磷酸钠对OCL黏附、迁移、破骨功能的影响.
作者：张为；王会旺；王云霞；杨大龙；甄增江；张英泽；申勇 刊期： 2012年第02期
影响肾癌患者肿瘤转移的主要因素是肿瘤的侵袭性和耐药性.我们通过应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组织化学方法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)与谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)在肾癌及癌旁组织中的表达,探讨它们在肾癌转移及耐药机制形成过程中所起的作用.
作者：孙传洋；孙伟；章良；许立军；单玉喜 刊期： 2012年第02期
干细胞凭借其多组织分化潜能,成为当前医学界包括血液科、神经科、心脏科、骨科、皮肤科等在内的多学科研究热点[1-3].我们在近期工作中偶然发现将干细胞移植到特定物理密度的材料表面时,干细胞有顺材质硬度分化的特性.我们借助低熔点琼脂糖设计出一种物理密度梯度介质,比较干细胞在该梯度介质中的生长状态和组织分化特点,观察物理因素对干细胞横向组织分化的干预效果.
作者：刘晓智；刘振林；姜忠敏；陈镭；苏治国；王骏飞；李罡 刊期： 2012年第02期
脊髓损伤的机制和修复治疗是当前神经科学研究的热点之一.建立标准化的脊髓损伤动物模型是实验和临床研究的迫切需要.我们设计并制造了脊髓损伤动物模型实验台(专利授权号:200920255035.4)[1].本研究旨在观察实验台的使用效果.
作者：双卫兵；刘强；焦守镔；杨扬 刊期： 2012年第02期
我们采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative-PCR)技术检测增生性瘢痕患者3种阿片肽受体( MOR、KOR、DOR)的表达水平,并分析其临床意义.
作者：朱江婷；程飚；刘宏伟 刊期： 2012年第02期
重症急性胰腺炎(SAP)是一个死亡率极高的疾病,O'Neills等[1]研究结果表明,SAP时外周血中性粒细胞(PMN)凋亡受到抑制.核因子-κB(NF-κB)作为一个重要的核转录因子,在细胞凋亡中发挥着重要的作用.本研究旨在观察NF-κB的活化在SAP大鼠外周血PMN凋亡中的调控作用.
作者：吴彦彦；许兰涛 刊期： 2012年第02期
血小板衍生生长因子(PDGF)-C是Li等[1]新近发现的血管内皮生长因子(VEGF)/PDGF家族成员.研究结果表明其不仅具有与VEGF相似的作用,还具有多重独特的表达形式和生物学效应.本研究旨在通过克隆大鼠PDGF-C基因开放阅读框,从而构建增强型绿色荧蛋白(pIRES2-EGFP-PDGF-C)真核表达载体.
作者：唐博；孙建明；罗文军；陈以宽；龚建平 刊期： 2012年第02期
我们应用脱氧核糖核酸(DNA)重组技术构建可表达人VEGF-B的真核细胞表达质粒,并将其转染于传代培养的骨髓间质干细胞(MSCs)中,探讨采用VEGF-B联合细胞移植治疗心肌缺血可行性.
作者：杨哲；张勇；王胜；梁家立；王惠；粱爽 刊期： 2012年第02期
我们基于真空下在犬工股骨柄上等离子喷涂纯钛(Ti)后再复合羟基磷灰石(HA) -Ti阶梯式涂层,探讨该复合阶梯式涂层的力学性能和固定关节假体的可行性.
作者：曾宪林；邹枕玮；杨述华 刊期： 2012年第02期
尿液定量、定性分析的前提是能精确采集尿液并确保尿液未受污染,但目前尚无市售的采集小动物尿液的器械或装置,为此,我们自制一种专用于雄性大鼠的集尿器.
作者：赵利；孙建良；罗贤哲 刊期： 2012年第02期
有研究表明,SLC22A18表达显著抑制胶质瘤U251细胞的增殖和恶性生物学特征[1-2],推测SLC22A18调控U251细胞重要细胞周期调控蛋白p21和p27是其抑制U251细胞增殖的主要机制.本研究旨在探讨SLC22A18表达抑制胶质瘤U251细胞增殖的分子机制,揭示SLC22A18的基因功能.
作者：楚胜华；马延斌；冯东福；邱建华；张红；朱志安 刊期： 2012年第02期
本研究旨在观察谷氨酰胺(Gln)对肠上皮I/R损伤细胞凋亡及其基因表达和信号转导的影响,现报道如下.一、材料与方法1.材料:L-谷氨酰胺颗粒、CX21显微镜、Nikon80i荧光显微镜、RM2135切片机、DAB显示液、TUNEL试剂盒、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Dntp、DNA Marker、DEPC、Trizol、ATC 201型PCR扩增仪、温度梯度基因扩增仪、凝胶成像系统、引物(上海生工生物工程技术服务有限公司).
作者：喻宗繁；耿小平；万圣云；于庆生 刊期： 2012年第02期
目的 探讨手辅助腹腔镜(HALS)左半结肠切除术的安全性、可行性.方法 将住院的50例结肠癌患者随机分为HALS组(25例)和开腹组(25例)两组,比较两组的手术时间、术中出血量、淋巴结清扫、术后肛门排气时间、术后住院时间、术后并发症及C反应蛋白的变化.结果 HALS组术中出血量少于开腹组[(83.16 ±27.61) ml比(196.76 ±59.47) ml,P＜0.05]；术后肛门排气时间短于开腹组[ (45.78±11.62)h比(74.08±16.12)h,P＜0.05]；术后住院时间短于开腹组[(8.24±2.46)d比(11.63±3.07)d,P＜0.05]；术后6dC反应蛋白少于开腹组[(21.68±6.97)比(67.32±28.31),P＜0.05].结论 手辅助腹腔镜左半结肠切除安全有效,具有创伤小、术后恢复快等优点.
作者：吴殿超；刘丽芳；霍志斌 刊期： 2012年第02期
目的 观察甲状腺癌行甲状腺叶全切或次全切术后甲状腺功能的变化,为术后补充甲状腺素提供时间和量的依据.方法 对我院2009年1月至2011年4月间行甲状腺叶全切或次全切除的88例甲状腺癌患者术前(0 d)、术后第1天(1 d)、术后第3天(3 d)和术后第5天(5 d)的甲状腺功能[游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、血清三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)]进行检测,对比手术前后变化规律.结果 88例行甲状腺叶全切或次全切除患者的FT3和T3在各时点均呈下降趋势,差异有统计学意义(FT3:F =47.752,P＜0.01；T3:F=15.317,P＜0.01),且术后3d起FT3和T3逐渐上升接近正常值下限；FT4和T4术后1d均上升,随后逐渐下降,FT4值在0d、术后1d及5d差异无统计学意义(P＞0.05),T4值在0d、术后1d差异无统计学意义(P＞0.05),其余各时间点间差异均有统计学意义(P＜0.05)；TSH在术后1d下降,3d及5d逐渐上升,TSH值在0d、术后1d差异无统计学意义(P＞0.05),其余各时间点间差异均有统计学意义(P＜0.05),且TSH在术后3d接近正常值上限,于术后5d超过正常值上限.结论 甲状腺癌患者行甲状腺全切或次全切除术后1d甲状腺功能不降或下降不明显,可不检测甲状腺功能和补充甲状腺激素；术后3d起甲状腺功能明显下降,应及时监测,并根据甲状腺功能下降情况适当补充甲状腺激素.
作者：耿中利；孙刚；马斌林；任光辉；单美慧 刊期： 2012年第02期
近年来,外科手术技术的进步及新兴化疗药物的问世明显提高了结直肠肿瘤患者的近期疗效,然而患者的长期生存并无明显改善,5年总生存率始终徘徊在50％～60％[1].因此,探究影响结直肠肿瘤患者预后的因素并进行干预,有可能为改善其治疗效果提供新的途径.
作者：陈钰锋；吴现瑞；吴小剑；兰平 刊期： 2012年第02期
大黄素是一种天然的蒽醌类化合物,存在于很多植物的根和皮、霉菌、地衣中,并且是许多中草药的有效成分[1-2].大黄素的药理学研究结果表明其可以作为泻药、抗菌药、免疫抑制剂、血管舒张剂、强心剂、保肝药,尤其是其抗肿瘤作用[1-2].现就大黄素抗肿瘤作用及其机制的几个主要方面,包括细胞周期阻滞作用、细胞增殖抑制作用、凋亡诱导作用、化疗增敏作用、抗血管生成作用、肿瘤转移抑制作用研究进展作一综述.
作者：王伟；王坚 刊期： 2012年第02期
目的 探讨用气动隔膜泵施行搏动体外循环的可行性,并观察该装置对犬肝肾功能的影响.方法 利用气动驱动装置、气动隔膜泵、膜肺及体外循环管道建立搏动体外循环回路,连续运转3d后检测搏动体外循环装置的稳定性及测定相关参数；并将20条成年健康杂种犬随机分为实验组(n=10)和对照组(n=l0),实验组施行气动隔膜泵搏动体外循环,对照组施行滚压泵平流体外循环,连续转机6h,比较两组犬肝、肾功能及细胞结构变化.结果 气动隔膜泵搏动体外循环装置性能稳定,聚氨酯隔膜能耐受高强度连续工作,影响搏动灌注效果的因素包括驱动的正负压力、搏动频率及占空比.两组犬转机后6h,尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)较转机前明显升高(P＜0.01),实验组BUN(t=1.622,P＜0.01)、Cr(t=1.599,P ＜0.01)、AST(t=1.970,P＜0.05)、ALT(t=1.363,P＜ 0.05)升高水平明显低于对照组(P＜0.05).结论 气动隔膜泵的设计符合体外循环原理；气动隔膜泵搏动体外循环方式是可行的,在较长时间的体外循环过程中,其对重要脏器功能的保护作用优于平流体外循环.
作者：王湘；李刚；张锐；姬尚义；季军；叶小青 刊期： 2012年第02期
目的 建立可靠的个体化髋臼骨折术后三维有限元模型,并对其进行力学分析.方法 选择髋臼双柱骨折患者1例行骨盆CT扫描,Mimics 10.01(Metarialise公司交互式医学影像控制系统)重建三维模型,Magic 9.9软件对模型进行面网格修饰,经体网格划分及附材质后构建个体化髋臼骨折术后有限元模型,导入有限元分析软件Abaqus 6.9加载并分析各部位应力特点.结果 建立了个体化髋臼骨折术后三维有限元模型.加载并行有限元分析结果表明应力沿骶髂关节向前后柱传导,左右侧髋臼前壁、臼顶负重区、髋臼后壁出现应力集中,且两侧应力均值无明显差异.与正常髋臼相应区域比较,发生骨折的髋臼在骨折线分布区出现明显应力增高,左侧正常髋臼应力均值为1.19 Mpa,右侧术后髋臼应力均值为1.48 Mpa,有明显差异.结论 利用Mimics建立的个体化髋臼骨折术后有限元模型,具有较高真实性和精确度,有限元法为髋臼骨折术后评价提供了一种有效的生物力学方法.
作者：刘勇；魏帅帅；李国庆；杨述华；杜靖远；郑启新 刊期： 2012年第02期
目的 建立脂多糖(内毒素,LPS)单独诱导小鼠急性肝损伤模型及致死模型.方法 分别以生理盐水、LPS 10、30、50、80 mg/kg腹腔注射小鼠,筛选LPS诱导小鼠急性肝损伤和致死剂量.分别以生理盐水、LPS 30、50 mg/kg腹腔注射小鼠,绘制各组小鼠的生存曲线,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肝组织损伤情况,免疫组织化学染色检测肝组织核因子(NF) -κB p65蛋白的表达和核转位变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α含量.结果 对照组小鼠无死亡和肝组织损伤,肝组织内NF-κB p65蛋白表达水平低,无核转位现象,血清中TNF-α含量低.腹腔注射LPS 30 mg/kg组小鼠无死亡,出现肝组织损伤,肝组织内NF-κB p65蛋白表达水平增加、出现核转位,血清中TNF-α含量升高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).腹腔注射LPS 50 mg/kg组小鼠存活不超过120 h,肝组织严重损伤,肝组织内NF-κB p65蛋白表达水平以及核转位显著增加,血清中TNF-α含量显著增高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 成功建立脂多糖诱导肝损伤动物模型和致死模型,为在体内进一步研究p55PIK对LPS-NF-κB通路奠定基础.
作者：刘韦成；罗学来；李兆明；邓豫；曹小年；杨熹；李川；金源；李小兰；陶德定；胡俊波；王晶 刊期： 2012年第02期
结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一.全球范围内,结直肠癌位居恶性肿瘤的第3位.新数据显示,结直肠癌全世界每年新发病例为120万,患者确诊后5年存活率仅为55％,且约有20％的患者在初诊时即发现有远处脏器的转移.尽管随着治疗模式的改变及科学技术的发展,结直肠癌治疗疗效有了一定的提高,但多年来其5年生存率并无多大改观.目前,提高结直肠癌患者的疗效主要依靠个体化的综合诊断和治疗,而其主要依据仍然是传统的临床病理分期,即TNM分期或Dukes分期.这两种分期系统为预测结直肠癌患者的预后及指导治疗提供了较好的依据,但它们的局限性在于都是以肿瘤在肠壁中的浸润深度、淋巴结转移、远处转移为基础,并没有考虑结直肠肿瘤本身所存在的异质性:临床病理诊断为同一分期的患者,采用相同方案治疗的效果不同和预后不同.传统的临床病理分期方法并不能有效地区别不同生物学行为的结直肠癌.因此,基于分子标识物研究为基础的结直肠癌分子分型将使得肿瘤的治疗方案更匹配肿瘤的生物学行为和发展规律,将会显著改变以往的肿瘤治疗策略,从而改善患者的预后.
作者：王磊；陈典克；汪建平 刊期： 2012年第02期
目的 探讨胱硫醚-β-合酶(CBS)启动子区的超甲基化与基因表达及功能的相关性.方法 通过结合重亚硫酸盐处理的直接测序、实时定量聚合酶链反应(PCR)、荧光偏振免疫法及免疫组织化学等技术对不同叶酸浓度( 25、150 nmol/L)下培养的人正常结肠黏膜上皮细胞株(NCM460)细胞和患者组织样本(包括肿瘤组织及相应的正常组织95例)中CBS基因启动子区CpG岛超甲基化与基因表达及功能进行研究.结果 低叶酸浓度培养下NCM460细胞中CBS基因的表达下调,检测高甲基化组(H-M组:＞41.7％,83例)和低甲基化组(L-M组:≤41.7％,107例)组织样本中CBS基因表达水平,两组差异有统计学意义(P＜0.01).在NCM460细胞内,CBS基因的下调能够导致同型半胱氨酸积聚,检测H-mRNA组(＞3.19,45例)和L-mRNA组(≤3.19,40例)患者的血清中同型半胱氨酸的水平,L-mRNA组患者血清中同型半胱氨酸的水平显著高于H-mRNA组.结论 CBS启动子区的超甲基化极有可能导致CBS基因表达水平的下调,影响细胞内的甲基代谢,进而参与结直肠癌的发生、发展等一系列病程.
作者：黄少雄；涂小煌；李文生；宋京翔 刊期： 2012年第02期
目的 观察细胞分化决定蛋白Numb与Notch1在结直肠癌组织中的表达模式,探讨两者与结直肠癌临床病理指标及患者预后的关系.方法 采用固定化蛋白质印迹法( Western blot)及免疫组织化学回顾性检测Numb与Notch1在60例切除结直肠癌组织中的表达,分析两者表达模式与结直肠癌临床病理学指标的关系；同时研究其表达与患者生存的关系.结果 结直肠癌组织中Notch1蛋白表达水平明显高于正常肠黏膜,平均为正常肠黏膜中的2.60倍(43/60比17/60,P＜0.01).而Numb蛋白表达水平明显低于正常肠黏膜,平均为正常肠黏膜的0.52倍(39/60比21/60,P＜0.01).Notch1表达水平与Numb表达呈显著负相关(r=-0.782,P＜0.05).同时两者表达与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关.Notch1高表达的患者(43例)预后明显差于Notch1低表达表达的患者(17例,P＜0.05),而与之相反的是Numb低表达(39例)预后差于Numb高表达患者(21例),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Numb与Notch拮抗性表达可能与结直肠癌发生发展密切相关,可作为结直肠癌某些生物学行为及判定预后的新的参考指标.
作者：曲军；张辉；叶颖江；董令仪；禚洪庆；王杉 刊期： 2012年第02期
目的 观察联合激动Toll样受体(TLRs)的树突细胞对小鼠结肠癌的杀伤作用以及荷瘤小鼠的生存时间.方法 用转染人癌胚抗原(CEA)的MC38小鼠结肠癌细胞株(MC38-CEA)和MC38细胞株(1×106个/只)皮下注射人CEA转基因小鼠,7d后将不同的树突状细胞(DC)疫苗(1×106个/只)于对侧皮下注射小鼠,每周2次测量各组小鼠肿瘤的垂直直径,并记录小鼠的生存时间,绘制各组肿瘤生长曲线和小鼠生存曲线.结果 在预防性疫苗干预的MC38-CEA肿瘤模型中,第41天联合TLR且荷载CEA肽段的DC(TLR-DC+ CEA)组小鼠肿瘤平均体积(1091.20±226.12) mm3明显小于其余各组(P＜0.01),并且存活期明显优于其余各组(P＜0.01)；在治疗性疫苗干预时,第41天TLR-DC+ CEA组小鼠肿瘤平均体积(6487.20±1024.47) mm3,小于磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(9361.20±2654.64) mm3(P＜0.05),而与其余对照组差异无统计学意义(P＞0.05)；在小鼠MC38肿瘤模型中,各组肿瘤平均体积差异无统计学意义(P＞0.05),且各组小鼠存活期差异无统计学意义(P＞0.05).结论 联合激动TLR的DC疫苗能抑制表达CEA的小鼠结肠癌生长并延长小鼠生存期.
作者：董天庚；牛伟新；洪信强；李文翔；秦新裕 刊期： 2012年第02期
目的 构建原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤模型(肝转移模型),探讨Kiss-1基因在移植瘤存活、生长和转移中的作用.方法 选择Kiss-1基因阳性和阴性表达的人结直肠癌组织块各1块,分别建立裸鼠皮下移植瘤和裸鼠盲肠原位移植瘤模型,并观察移植瘤生长和肝转移.结果 裸鼠第2代皮下移植瘤模型构建成功率Kiss-1基因阳性组为37.50％,阴性组为100.00％,差异有统计学意义(P＜0.05)；裸鼠盲肠原位移植瘤模型构建成功率,第1代为41.67％(Kiss-1阳性组为12.25％,阴性组75.00％),第2代为75.00％(Kiss-1阳性组为56.25％,阴性组为93.75％)；Kiss-1阴性组成功率均高于阳性组,差异有统计学意义(P＜0.05)；皮下移植瘤模型和第1代盲肠原位移植瘤模型中均未发现肝转移,第2代盲肠原位移植瘤模型中肝转移率Kiss-1阳性组为33.33％,阴性组80.00％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Kiss-1基因表达缺失有助于提高原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤肝转移模型构建的成功率,提示它具有抑制结直肠癌移植瘤存活、生长和转移的作用.
作者：陈绍勤；林素勇；戴起宝；涂明美 刊期： 2012年第02期
目的 观察人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因对SW480细胞生物学特性的影响.方法 将重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA (hTERT-shRNA)用脂质体转染法导人大肠癌细胞株SW480,实验分4组,每组设3个复孔,分别于转染后24、48、72 h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达,免疫细胞化学法检测hTERT蛋白表达,PCR-TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,终端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法和透射电镜观察细胞凋亡变化及共聚焦显微镜观察线粒体膜电位(MMP)的改变.结果 转染后48 h hTERT-shRNA组hTERT mRNA相对表达量为0.32±0.03,hTERT蛋白表达的平均灰度值为209.60±17.10,端粒酶A450 ～ A630值为2.242±0.284,较其他对照组均明显降低(P＜0.05,P＜0.01)；G0/G1期细胞为(49.37±1.63)％,增殖指数为(50.60±1.57)％,凋亡指数为22.2％,较其他对照组均明显增高(P ＜0.05,P＜0.01)；凋亡细胞体积明显缩小,表面突起和微绒毛减少,甚至消失,线粒体Rhodamine 123平均荧光强度为719.99±17.08,MMP水平显著下降(P＜0.01).结论 RNA干扰(RNAi)沉默hTERT基因能有效抑抑制SW480肿瘤细胞生长,并降低端粒酶活性,诱导肿瘤细胞凋亡.
作者：葛莲英；刘爱群；罗小玲；蔡艳玲 刊期： 2012年第02期
目的 探讨缺氧诱导因子(HIF) -1α与转录因子Snail在直肠癌中的表达及其侵袭转移的关系并评估预后.方法 采用免疫组织化学SABC法检测87例直肠癌组织中HIF-1 α与Snail的表达,分析两者在不同的临床病理分期与分化程度的直肠癌中的表达及其与预后的关系.结果 免疫组织化学检测结果显示直肠癌组织中HIF-1α、Snail的阳性表达率分别为58.6％ (51/87)、71.3％ (62/87),HIF-1α与Snail的表达与直肠癌的Dukes分期、远处转移及生存率有关(P＜0.05).HIF-1α与Snail的表达呈显著正相关(P＜0.05).结论 HIF-1 α、Snail蛋白的高表达可能是促进直肠癌侵袭转移的重要生物学标志.
作者：肖帅；卢先州；刘龙飞；李峰；周筱筠；龙建武 刊期： 2012年第02期
目的 在应用二甲肼(DMH)诱导大鼠结肠癌的模型上观察雌激素对结肠黏膜隐窝分裂、隐窝变异及隐窝上皮增殖状况的影响.方法 将30只雌性大鼠分为假手术和卵巢切除后DMH处理,卵巢切除术加DMH的同时给予雌二醇处理或溶剂处理,及假手术加溶剂处理共5组,8周后检测各指标.结果 DMH处理后异形隐窝灶(ACF)总数量及大ACF数量[异常隐窝内隐窝数(AC)＞6个]明显升高( 57.80±6.54,P＜0.01；9.00±3.16,P＜0.01),隐窝分裂指数明显升高(17.60±4.93,P＜0.01),隐窝分裂指数与正常隐窝体积及异常隐窝的AC值正相关,而与正常隐窝增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平不一致.卵巢切除后DMH的作用更明显,而卵巢切除后补充雌激素可以抵消卵巢切除的作用.结论 雌激素可影响DMH诱导的ACF,其机制与影响结隐窝分裂相关.
作者：蔡开琳；李永生；王继亮；汤守元；燕普；杨佳；曾建挺；赵翔；陶凯雄；王国斌 刊期： 2012年第02期
目的 构建大鼠早期黏膜下浸润结直肠癌( SICRC)与非黏膜下浸润结直肠癌(SNICRC)模型并鉴定两者的差异蛋白,以筛选早期SICRC的生物学标记.方法 应用N-甲基-N-亚硝基脲( MNU)诱导建立大鼠SICRC与SNICRC模型.二维荧光差异定量双向电泳技术(2D-DIGE)和基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱鉴定出SICRC与SNICRC的差异蛋白.荧光定量Real-time PCR和Westem blot实验验证所选蛋白的鉴定结果.结果 成功建立大鼠SICRC与SNICRC模型.2D-DIGE发现SICRC和SNICRC之间有5个差异表达蛋白(P值均＜0.01).质谱分析鉴定这5个蛋白发现,与SNICRC和正常对照(NC)比较,转凝蛋白(Transgelin)、肽基脯氨酰异构酶A和原肌球蛋白1在SICRC表达上调,而碳酸酐酶Ⅱ(CAⅡ)与一种未命名蛋白表达下调.Real-time PCR和Westemblot验证结果显示,Transgelin mRNA和蛋白水平在SICRC组(33.05±0.75、86.63±1.83)高于SNICRC( 22.68±0.89、67.93±2.39)和NC组(18.07 ±0.55、44.25±1.55)(P值均＜0.05),而CAⅡmRNA和蛋白水平在SICRC组(18.01±0.53、41.55±1.89)低于SNICRC组(26.28±1.08、61.11±1.57)和NC组(33.08±0.76、83.43 ±1.61)(P值均＜0.05),变化趋势与蛋白质组学一致.结论 2D-DIGE是筛选早期SICRC与SNICRC差异表达蛋白的有效手段,鉴定的差异蛋白有可能成为临床早期黏膜下浸润结直肠癌筛选和诊断的生物学标记.
作者：张靖；宋明全；朱金水；周洲；许志朋；陈维雄；陈尼维 刊期： 2012年第02期
目的 观察罗格列酮在盲肠结扎穿刺(CLP)大鼠肠道胰岛素信号中的作用.方法 将SD大鼠随机分为CLP组(C组)、假手术组(S组)、罗格列酮组(R组)、罗格列酮+胰岛素组(RI组)、CLP+胰岛素组(CI组)和正常组(N组).R、RI组在CLP前30 min灌胃给予罗格列酮；RI、CI组在CLP后152 min股静脉注射胰岛素；N组是正常大鼠.6组大鼠术前30 min和术后每30 min测空腹血糖,在155 min取动脉血和近端空肠待检.测血和肠黏膜肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度,行肠道组织病理学分析肠道损伤和炎症,免疫组织化学检测肠道胰岛素受体,同时检测胰岛素受体(IR)-β蛋白水平和胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达及其酪氨酸磷酸化.结果 罗格列酮可帮助控制CLP术后高血糖,明显降低血清和空肠黏膜中的TNF-α水平；C、N组肠道损伤和炎症差异无统计学意义,IR-分布在肠黏膜的腔内侧；罗格列酮降低R组和RI组(比C组比较,P＜O.01)IR-β蛋白表达,C组IRS-1的酪氨酸磷酸化明显降低(比R组比较,P＜0.05),罗格列酮增加R组(比C组比较,P＜0.05)和胰岛素诱导的RI组(比C组比较,P＜0.01)的IRS-1酪氨酸磷酸化；罗格列酮治疗后,胰岛素明显增加IRS-1酪氨酸磷酸化(R比RI组比较,P＜0.01)；各组IRS-1总蛋白差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CLP模型大鼠早期出现高血糖,空肠无明显炎症表现,肠黏膜胰岛素信号却是异常的；罗格列酮可控制CLP术后高血糖,并可降低全身和局部肿瘤坏死因子的浓度,改善空肠黏膜胰岛素信号.
作者：张斌；石斌；杨帆；尹超；郭鸿；刘丽平；李斌；曹永强；魏花萍；侯启亮 刊期： 2012年第02期
目的 观察微小RNA(miRNA)在结肠慢传输型便秘(STC)病变结肠组织和正常结肠组织中的差异表达.方法 收集6例STC病变结肠组织和正常结肠组织标本,应用miRNA芯片检测miRNA在STC病变结肠组织和正常结肠组织中的表达.结果 5种miRNA在STC病变结肠组织正常结肠组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05).与正常结肠组织比较,miR-20b、miR-27b、miR-30b、miR-128及miR-129-3p在STC结肠组织中表达下调,统计学组间差异倍数均在1.2倍以上,其中miR-128及miR-129-3p下调明显,统计学组间差异倍数大于2倍.结论 部分miRNA在STC结肠组织和正常结肠组织中存在差异表达,可能参与了STC发生的分子机制.
作者：汪名飞；刘志苏；江从庆；宋惊喜；丁召；唐胜利；钱群 刊期： 2012年第02期
目的 观察磷脂酶Cε1(PLCE1)基因过表达对结肠癌细胞生长增殖的影响.方法 通过基因转染、0.7 g/L浓度的G418压力维持筛选出PLCE1过表达100倍以上的SW620结肠癌细胞株；通过噻唑蓝(MTT)生长曲线、克隆形成、裸鼠成瘤等实验观察PLCE1基因过表达对结肠癌细胞生长及增殖的影响.结果 PLCE1基因过表达导致结肠癌细胞生长速度减慢,实验组平板克隆吸光度(A)值为0.3225±0.0065,软琼脂克隆数为11.80 ±2.56,肿瘤质量(0.317±0.169)g,均较亲本组和对照组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05),提示转染PLCE1基因后细胞恶性程度降低.结论 PLCE1过表达抑制结肠癌细胞的生长,该基因可能是新的结直肠癌相关抑癌基因.
作者：王晓亮；周崇治；裘国强；樊军卫；彭志海 刊期： 2012年第02期
目的 通过甲基化芯片对叶酸缺乏导致人正常结肠黏膜上皮细胞(NCM460)的DNA甲基化状态变化进行筛查,探讨相关位点与散发性结直肠癌发生的关系.方法 借助NimbleGen公司的甲基化芯片,检测不同叶酸浓度(高叶酸浓度为150 nmol/L,低叶酸浓度为25 nmol/L)培养的NCM460细胞中基因启动子区CpG岛的甲基化状态,并通过结合重亚硫酸盐的测序方法在细胞和15例(男∶8,女∶7)结直肠癌患者的组织样本中对芯片的结果进行验证.结果 从高叶酸浓度培养的NCM460细胞中筛选到了2680个发生了甲基化的CpG岛,从低叶酸组筛选到了3073个.在21号染色体上,17个基因启动子区CpG岛发生了超甲基化或去甲基化的改变,其中8个基因甲基化状态的改变可能与结直肠癌的发生相关.结论 叶酸缺乏导致人NCM460的DNA甲基化状态改变可能与结直肠癌的发生相关.
作者：李文生；涂小煌；黄少雄；解燕川；宋京翔 刊期： 2012年第02期
目的 筛选前哨淋巴结(SLN)中与结直肠癌早期转移相关的蛋白质.方法 术中取43名结直肠癌早期患者的SLN及对应的正常淋巴结(NLN).提取SLN和NLN两组总蛋白后行双向凝胶电泳和质谱法对差异蛋白进行筛选和鉴定.用蛋白质印迹法和免疫组织化学法对其中的转移相关蛋白行进一步研究.结果 两组间检测出40种差异表达的蛋白质,SLN中表达升高且与转移相关的蛋白分别为核不均一核糖核蛋白A1( hnRNP A1)、埃兹蛋白(Fzrin)、微管蛋白β-2C (tubulin β-2C)和膜联蛋白A1(Annexin A1).蛋白定量结果显示两组间4种蛋白表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 结直肠癌SLN与NLN蛋白表达存在差异.筛选出的4种转移相关蛋白可能成为结直肠癌早期淋巴转移的标志物.
作者：韩军；何震宇；董小刚；史传兵；闻浩；汪宝林 刊期： 2012年第02期
目的 探讨结直肠癌中整合素α5β1和血管内皮生长因子(VEGF)的表达与各临床病理因素的关系,以及两者在结直肠癌中表达的相关性.方法 对116例结直肠癌患者采用原位杂交染色方法检测正常结直肠黏膜及结直肠癌组织中α5β1和VEGF的表达.结果 结直肠癌组织中α5β1和VEGF的表达阳性率分别为56.00％和61.29％,正常结直肠黏膜两者表达的阳性率分别为4％、6％,与正常结直肠黏膜中的表达阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.05)；α5β1及VEGF两者表达与性别、年龄、肿瘤大小无明显相关(P＞0.05),在组织学分化差、淋巴结转移、Dukes'分期高者α5β1和VEGF表达率增高,而且浸润深度较深者VEGF表达率增高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)；在结直肠癌组织中α5β1表达和VEGF表达呈正相关(rs=0.63,P＜0.01).结论 α5β1和VEGF在结直肠癌组织中表达增高,提示其参与结直肠癌的发生、发展.
作者：向小芳；杨桂芳；杨倩；陈大平；冯茂辉 刊期： 2012年第02期
目的 观察慢病毒介导的人黏蛋白1(MUCl)核心肽串联重复(TR)基因修饰树突状细胞(DC)后体外诱导的特异性抗结肠癌免疫效应.方法 CD14+外周血单核细胞诱导DC,感染含人MUC1TR基因的慢病毒表达载体pLV-MUC1,感染后DC按DC/T=1∶10与自体T淋巴细胞共培养21 d诱导产生细胞毒性T淋巴细胞(CTL),CTL与肿瘤靶细胞以5∶1、10∶1、20∶1的效靶比共孵育,乳酸脱氢酶(LDH)释放法和Elispot法分别检测CTL体外杀伤活性及干扰素(IFN)-γ的释放,以空载pLV-GFP感染DC组和未感染DC组作为对照进行比较.结果 pLV-MUC1感染DC后荧光显微镜下可见绿色荧光表达,流式检测感染效率约为32％；诱导产生的CTL对MUC1和HLA-A2双阳性的HCT-116肿瘤细胞的杀伤活性[E/T =5∶1时为(12.74±1.91)％,10∶1时为(23.14±2.97)％,20∶1时为(35.38±3.15)％]显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01)；感染后DC诱导的CTL分泌IFN-γ的能力明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 慢病毒介导的MUC1核心肽TR基因修饰的DC可有效诱导体外特异性抗结肠癌免疫效应.
作者：王斌；朱毅；张静静；徐泽宽 刊期： 2012年第02期
目的 探讨肿瘤浸润淋巴细胞(TIL) CD3和人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR)在大肠癌组织中的表达与患者生存预后的关系.方法 应用免疫组织化学及流式细胞术测定60例大肠癌组织中CD3与HLA-DR表达,分析检测结果与临床病理特点及患者预后的关系.结果 免疫组织化学检查显示肿瘤浸润淋巴细胞CD3和HLA-DR在60例大肠癌组织中阳性细胞表达率分别为23/60(38.33％)及25/60(41.67％),其表达与患者性别、年龄及淋巴结转移无明显相关,与大肠癌组织病理分化程度、肿瘤Dukes分期及患者预后相关.CD3和HLA-DR表达率与肿瘤的分化程度呈正相关,同时随大肠癌Dukes分期显示,Dukes分期越高其CD3和HLA-DR表达率越低；而≥5年生存率患者组CD3和HLA-DR表达率明显高于＜3年死亡患者组,差异有统计学意义(P＜0.05).经流式细胞术测定CD3、HLA-DR均呈低表达；CD3、HLA-DR在≥5年生存患者组表达率显著高于＜3年死亡组患者,差异有统计学意义(P＜ 0.05),与患者年龄、性别、淋巴结转移及组织病理分化程度无关.结论 肿瘤浸润淋巴细胞CD3和HLA-DR可以作为判断大肠癌患者预后的重要参考指标之一.
作者：赵洪远；杨伟明；王超宇；刘宙 刊期： 2012年第02期
现代外科学,开始于19世纪.当时外科得到飞跃性发展,主要原因是解决了手术带来的三大难题:疼痛、感染和失血.随着外科的发展,大型手术变得安全和常规化.继而,外科的再发展趋于两极化,其一极是走向大型和英勇手术,即进行以前不可能进行的手术,这包括大型切除和重建手术、单个或多器官移植等.另一极的发展是减低手术创伤,但可达到同样手术目标,这包括显微外科手术、影像引导的手术和微创手术.微创手术的新发展,又包括腹腔镜单孔手术、自然腔道内镜手术、机器人手术和远程手术.
作者：刘晓欣；刘允怡 刊期： 2012年第02期
普外科作为外科学领域内大的一个分支,经过百余年的发展和积淀,在基本理论、基本操作以及术式选择等方面已完全成熟并成为经典.普外科的发展也进入到了一个相对平稳的时期.而随着时代的进步,如何在确保手术疗效的前提下,尽可能地减少手术创伤,缓解患者痛苦,加速患者恢复,成为外科发展的又一个重要方向.在这一背景下,以腹腔镜技术为代表的一系列微创技术为传统普外科的创新与发展注入了新的活力,在这短短20余年时间内得到迅猛发展,腹腔镜下可以完成包括胰十二指肠切除术在内的各类手术,对普外科的发展产生重大影响.
作者：郑民华；马君俊 刊期： 2012年第02期
近年,结直肠癌外科无论在临床研究还是基础研究都取得了迅速的发展.早期筛查、早期诊断的手段不断丰富;结直肠癌发病相关的信号通路、基因及表观遗传学改变进一步得以揭示;一些用于结直肠癌的预防性药物得到证实和应用;对直肠癌浸润及转移规律的揭示,使大部分低位直肠癌得以保肛,术后生活质量明显改善;腹腔镜结直肠癌手术的安全性和有效性得到更多的临床试验支持;预测化疗疗效的生物标志物不断被揭示,使得个体化治疗成为目前结直肠癌领域耀眼的亮点之一;靶向药物的应用,显著提高了转移性结直肠癌的疗效;新辅助治疗、新型化疗药物及方案的出现,使结直肠癌术后复发率和生存率得到显著改善.总之,以手术治疗为主的多学科联合的个体化综合治疗模式已经形成,结直肠癌外科的研究已步入分子生物学、遗传学、基因学、药理学及临床医学等多学科交叉融合的转化医学时代.现就近年结直肠癌外科取得的主要研究进展进行回顾和展望.
作者：周总光；杨烈 刊期： 2012年第02期
