郑民华；马君俊
目的 探讨胱硫醚-β-合酶(CBS)启动子区的超甲基化与基因表达及功能的相关性.方法 通过结合重亚硫酸盐处理的直接测序、实时定量聚合酶链反应(PCR)、荧光偏振免疫法及免疫组织化学等技术对不同叶酸浓度( 25、150 nmol/L)下培养的人正常结肠黏膜上皮细胞株(NCM460)细胞和患者组织样本(包括肿瘤组织及相应的正常组织95例)中CBS基因启动子区CpG岛超甲基化与基因表达及功能进行研究.结果 低叶酸浓度培养下NCM460细胞中CBS基因的表达下调,检测高甲基化组(H-M组:＞41.7％,83例)和低甲基化组(L-M组:≤41.7％,107例)组织样本中CBS基因表达水平,两组差异有统计学意义(P＜0.01).在NCM460细胞内,CBS基因的下调能够导致同型半胱氨酸积聚,检测H-mRNA组(＞3.19,45例)和L-mRNA组(≤3.19,40例)患者的血清中同型半胱氨酸的水平,L-mRNA组患者血清中同型半胱氨酸的水平显著高于H-mRNA组.结论 CBS启动子区的超甲基化极有可能导致CBS基因表达水平的下调,影响细胞内的甲基代谢,进而参与结直肠癌的发生、发展等一系列病程.
作者：黄少雄；涂小煌；李文生；宋京翔 刊期： 2012年第02期
目的 观察甲状腺癌行甲状腺叶全切或次全切术后甲状腺功能的变化,为术后补充甲状腺素提供时间和量的依据.方法 对我院2009年1月至2011年4月间行甲状腺叶全切或次全切除的88例甲状腺癌患者术前(0 d)、术后第1天(1 d)、术后第3天(3 d)和术后第5天(5 d)的甲状腺功能[游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、血清三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)]进行检测,对比手术前后变化规律.结果 88例行甲状腺叶全切或次全切除患者的FT3和T3在各时点均呈下降趋势,差异有统计学意义(FT3:F =47.752,P＜0.01；T3:F=15.317,P＜0.01),且术后3d起FT3和T3逐渐上升接近正常值下限；FT4和T4术后1d均上升,随后逐渐下降,FT4值在0d、术后1d及5d差异无统计学意义(P＞0.05),T4值在0d、术后1d差异无统计学意义(P＞0.05),其余各时间点间差异均有统计学意义(P＜0.05)；TSH在术后1d下降,3d及5d逐渐上升,TSH值在0d、术后1d差异无统计学意义(P＞0.05),其余各时间点间差异均有统计学意义(P＜0.05),且TSH在术后3d接近正常值上限,于术后5d超过正常值上限.结论 甲状腺癌患者行甲状腺全切或次全切除术后1d甲状腺功能不降或下降不明显,可不检测甲状腺功能和补充甲状腺激素；术后3d起甲状腺功能明显下降,应及时监测,并根据甲状腺功能下降情况适当补充甲状腺激素.
作者：耿中利；孙刚；马斌林；任光辉；单美慧 刊期： 2012年第02期
我们采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative-PCR)技术检测增生性瘢痕患者3种阿片肽受体( MOR、KOR、DOR)的表达水平,并分析其临床意义.
作者：朱江婷；程飚；刘宏伟 刊期： 2012年第02期
目的 观察应用自体骨髓基质干细胞(BMSCs)复合珊瑚修复山羊全长腭裂骨缺损的效果.方法 体外成骨诱导山羊BMSCs复合珊瑚修复山羊全长腭裂骨缺损,以单纯珊瑚植入缺损作为对照组.于术后2、12、24、32周行头颅CT扫描并三维重建,术后24、32周行大体取材、苦味酸-品红染色和Micro-CT骨密度分析.结果 成骨诱导BMSCs在珊瑚支架生长良好.三维CT显示早期实验组骨痂较多,对照组可见珊瑚明显降解,术后24、32周腭裂骨缺损被修复,修复比例分别达(88.52±10.95)％、(90.52 ±8.12)％,组织学显示实验组有大量成熟骨,骨基质和胶原形成良好,对照组缺损不能愈合(P＜0.05),Micro-CT显示新生骨密度(759.48± 96.45 )mg HA/cm3、( 823.93±112.07) mg HA/cm3,接近正常骨(P＞0.05).结论 山羊BMSCs成骨诱导后与珊瑚复合能修复完全性腭裂骨缺损,组织工程技术可用于修复腭裂骨缺损.
作者：徐海艇；徐晓斐；王健；余力；张波；朱昌 刊期： 2012年第02期
目的 观察上调miRNA-133a表达是否可改善缺血再灌注损伤后心肌损害及心脏功能.方法 建立活体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.将实验动物随机分为5组:(1)空白对照组(Sham组)；(2)缺血再灌注损伤组(I/R组)；(3)缺血再灌注损伤+miRNA-133a模拟物agomiR-133a组(I/R+ agomiR-133a组)；(4)缺血再灌注损伤+阴性对照序列组(I/R+ scramble组)；(5)缺血再灌注损伤组+生理盐水组(I/R+ NS组).于再灌注24h分别使用实时定量聚合酶链反应(Real-TimePCR)法检查心肌内miRNA-133a表达水平；经胸超声心动检查大鼠心脏功能；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死以及TdT介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)检测心肌细胞凋亡.结果 I/R+ agomiR-133a组心肌内miRNA表达水平显著高于I/R组(P＜0.01).上调miRNA-133a表达水平可显著减少再灌注后心肌梗死面积[(37.0±3.1)％比(58.0±4.4)％,P＜0.01],抑制心肌细胞凋亡(38.4±6.0比15.7±5.2,P＜0.01),并改善心脏功能[LVEF:(64.8 ±2.9)％比(52.8±4.0)％,LVFS:(31.1±1.2)％比(25.2±0.8)％,P＜0.01].NS与scramble对再灌注后心肌损伤及心脏功能无显著影响.结论 上调心肌内miRNA-133a表达水平可显著减轻缺血再灌注损伤24h后心肌损害,并改善心脏功能.
作者：田轶魁；付强；董福强；杜鑫；芦志红；魏民新 刊期： 2012年第02期
有研究表明下尿路缺血在下尿路疾病病程中发挥重要作用[1-3].通过球囊损伤髂动脉内膜研究人员成功制造了兔下尿路缺血模型以研究其在下尿路疾病中作用机制[4],但该方法存在一定缺点.我们对兔下尿路缺血模型进行改进并与原模型对比观察.
作者：沈文；李萍；肖育华；邓志雄；邱晓拂；华伟；黄成；胡卫列 刊期： 2012年第02期
目的 观察脾切除对大鼠肝大部分切除术后细菌移位的影响.方法 将SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组),2/3肝切除组(PHx组),肝切除加脾切除组(PHx +Sp组).85只大鼠中30只用于测定门静脉压力,55只用于分析细菌移位、血浆内毒素、血浆D-乳酸、肠组织病理学及免疫功能.结果 PHx组门静脉压力(13.34±0.64) cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)显著高于SO组(7.64±0.44) cm H2O和PHx+ Sp组(10.30±0.69) cm H2O(P＜0.01).PHx组的细菌移位率高于SO组(65.00％比6.67％;P ＜0.01),也明显高于PHx+ Sp组(25.00％；P ＜0.05).大鼠血浆内毒素中位数SO组为0.00 ng/L,PHx组为4.05 ng/L,PHx +Sp组为1.47 ng/L(P ＜0.01).血浆D-乳酸在SO组和PHx+ Sp组也较PHx组低(分别为1.68、23.36、39.09 g/L,P＜0.01).结论 脾切除能降低肝大部分切除大鼠门静脉压力,增强肠黏膜屏障功能,减少内毒素和细菌移位的发生.
作者：陈文哲；胡昆鹏；林楠；邓浩；潘卫东 刊期： 2012年第02期
目的 探讨肝内胆管细胞癌(ICC)白细胞介素-17(IL-17)和白细胞介素-6(IL-6)表达的临床意义.方法 采用免疫组织化学Envision二步染色法检测69例ICC肿瘤组织和63例癌旁组织IL-17和IL-6的表达,分析两者的关系及其与临床病理特征和预后的关系.结果 肿瘤和癌旁组织中IL-17+细胞密度中位值分别为36.0/HP(每高倍视野)和8.0/HP；肿瘤组织IL-17低表达组和高表达组IL-6阳性表达率分别为46.9％和75.0％;IL-17和IL-6的表达呈正相关(r=0.256,P＜0.05)；肿瘤组织IL-17低表达组术后生存时间较长(P＜0.01),Cox多因素分析提示肿瘤组织IL-17表达水平( HR=2.462,P＜0.05)是ICC患者术后的独立预后因素.结论 ICC肿瘤组织IL-17表达与IL-6表达呈正相关,与ICC患者术后生存呈负相关,可作为预测患者预后的指标.
作者：张金野；李书红；王俊；林国和；李升平 刊期： 2012年第02期
目的 观察人胶质瘤细胞株SHG44、BT325、U251和正常人脑星形细胞(NHA)中ADAR2mRNA表达水平及苯乙酸(PA)对U251细胞中ADAR2表达的影响.方法 实时荧光定量聚合酶链反应( Real-time fluorescent quantitative PCR)方法检测胶质瘤细胞中ADAR2mRNA表达水平,检测PA处理前后U251细胞中ADAR2mRNA表达水平的变化；噻唑蓝(MTT)比色法检测PA作用24、48和72 h后U251细胞增殖.Western印迹法检测PA作用前后U251细胞中ADAR2蛋白表达.结果 Real-time PCR检测显示:ADAR2 mRNA在NHA中表达极弱(19.9±2.2),在SHG44和BT325细胞中明显表达(35.6±2.8、78.8±3.2),在U251细胞中表达水平高(101.3±3.5).PA3.0和5.0 mmol/L作用U251细胞24h后,ADAR2mRNA分别为60.3±1.5和50.5±l.2(P＜0.01)；MTT法检测显示PA对U251细胞的增殖呈时间和剂量依赖性抑制(P＜0.01)；Western印迹法显示PA可降低ADAR2蛋白表达水平.结论 在不同的胶质瘤细胞中,ADAR2mRNA表达水平不同；PA可抑制U251细胞中ADAR2mRNA和蛋白水平的表达.
作者：魏君；杜超；綦斌；张萱；宿晓云；田宇 刊期： 2012年第02期
目的 观察人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因对SW480细胞生物学特性的影响.方法 将重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA (hTERT-shRNA)用脂质体转染法导人大肠癌细胞株SW480,实验分4组,每组设3个复孔,分别于转染后24、48、72 h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达,免疫细胞化学法检测hTERT蛋白表达,PCR-TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,终端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法和透射电镜观察细胞凋亡变化及共聚焦显微镜观察线粒体膜电位(MMP)的改变.结果 转染后48 h hTERT-shRNA组hTERT mRNA相对表达量为0.32±0.03,hTERT蛋白表达的平均灰度值为209.60±17.10,端粒酶A450 ～ A630值为2.242±0.284,较其他对照组均明显降低(P＜0.05,P＜0.01)；G0/G1期细胞为(49.37±1.63)％,增殖指数为(50.60±1.57)％,凋亡指数为22.2％,较其他对照组均明显增高(P ＜0.05,P＜0.01)；凋亡细胞体积明显缩小,表面突起和微绒毛减少,甚至消失,线粒体Rhodamine 123平均荧光强度为719.99±17.08,MMP水平显著下降(P＜0.01).结论 RNA干扰(RNAi)沉默hTERT基因能有效抑抑制SW480肿瘤细胞生长,并降低端粒酶活性,诱导肿瘤细胞凋亡.
作者：葛莲英；刘爱群；罗小玲；蔡艳玲 刊期： 2012年第02期
目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)及其分化的神经样细胞与聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架材料的相容性,并探讨两者复合修复周围神经损伤的效果.方法 (1)在体外,通过荧光显微镜、流式细胞仪、扫描电镜等技术观察BMSCs在PLGA上的生长及分化成神经样细胞的情况；(2)在体内,取右侧坐骨神经损伤的SD大鼠,随即分为4组,分别移植单纯PLGA、BMSCs-PLGA、神经样细胞-PLGA及直接缝合神经,术后斜板试验观察4组动物下肢功能情况；60d后处死大鼠,取神经标本做病理切片.结果 (1)在体外,BMSCs在PLGA上生长良好,与同期培养板里面的细胞比较,吸光度值(A)差异无统计学意义(P＞0.05)；(2)在体内,BMSCs及其神经样细胞复合PLGA后能修复损伤的坐骨神经,促进大鼠下肢运动功能的恢复.术后3周,各组大鼠斜板试验的角度分别是:直接缝合组(38.32 ±5.51)度、单纯PLGA组(40.27 ±2.74)度、BMSCs-PLGA组(45.14±3.43)度、神经样细胞-PLGA组(60.56±4.70)度,且神经样细胞-PLGA组显著高于其他组(P＜0.01)；病理切片显示支架与宿主神经组织有良好的生物相容性.结论 BMSCs能诱导分化生成神经样细胞,而PLGA与两者有良好的生物相容性.
作者：符厚圣；周兴；桂有富；郑煜；潘建刚 刊期： 2012年第02期
目的 探讨骨髓基质干细胞复合Ⅰ型胶原海绵对兔膝关节浅层大面积软骨缺损的修复作用；观察3H-TdR对骨髓基质干细胞的示踪作用.方法 骨髓基质干细胞复合组织工程支架Ⅰ型胶原海绵,植入修复兔膝关节大面积浅层软骨缺损模型,分别于术后4、12、24周取材,观察修复效果;运用3H-TdR标记骨髓基质干细胞,同法植入软骨缺损区,分别于术后4、12、16及24周取材,液体闪烁计数定量分析、乳胶封片、4周后显影定性分析.结果 实验组术后4周缺损表面未见明显的新生软骨形成；12周,缺损表面有少量的新生软骨形成；24周,缺损表面的新生软骨较4、12周的新生软骨明显,仍存在部分缺损尚未修复.对照组则均未见明显的修复.修复组织的细胞核内均有放射活性,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),提示修复组织的细胞来源为体外移植的细胞,而非自体细胞,至术后24周,植入的细胞仍然存活.结论 该方法对兔膝关节软骨缺损具有修复作用,但不能完全修复；所修复组织的细胞来源为植入的骨髓基质干细胞；3H-TdR标记对骨髓基质干细胞具有较好的长期示踪作用.
作者：陈雷；林建华；吴朝阳 刊期： 2012年第02期
目的 观察罗格列酮在盲肠结扎穿刺(CLP)大鼠肠道胰岛素信号中的作用.方法 将SD大鼠随机分为CLP组(C组)、假手术组(S组)、罗格列酮组(R组)、罗格列酮+胰岛素组(RI组)、CLP+胰岛素组(CI组)和正常组(N组).R、RI组在CLP前30 min灌胃给予罗格列酮；RI、CI组在CLP后152 min股静脉注射胰岛素；N组是正常大鼠.6组大鼠术前30 min和术后每30 min测空腹血糖,在155 min取动脉血和近端空肠待检.测血和肠黏膜肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度,行肠道组织病理学分析肠道损伤和炎症,免疫组织化学检测肠道胰岛素受体,同时检测胰岛素受体(IR)-β蛋白水平和胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达及其酪氨酸磷酸化.结果 罗格列酮可帮助控制CLP术后高血糖,明显降低血清和空肠黏膜中的TNF-α水平；C、N组肠道损伤和炎症差异无统计学意义,IR-分布在肠黏膜的腔内侧；罗格列酮降低R组和RI组(比C组比较,P＜O.01)IR-β蛋白表达,C组IRS-1的酪氨酸磷酸化明显降低(比R组比较,P＜0.05),罗格列酮增加R组(比C组比较,P＜0.05)和胰岛素诱导的RI组(比C组比较,P＜0.01)的IRS-1酪氨酸磷酸化；罗格列酮治疗后,胰岛素明显增加IRS-1酪氨酸磷酸化(R比RI组比较,P＜0.01)；各组IRS-1总蛋白差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CLP模型大鼠早期出现高血糖,空肠无明显炎症表现,肠黏膜胰岛素信号却是异常的；罗格列酮可控制CLP术后高血糖,并可降低全身和局部肿瘤坏死因子的浓度,改善空肠黏膜胰岛素信号.
作者：张斌；石斌；杨帆；尹超；郭鸿；刘丽平；李斌；曹永强；魏花萍；侯启亮 刊期： 2012年第02期
目的 观察铁过载小鼠骨质疏松模型中血清骨转换指标的变化.方法 腹腔注射生理盐水和枸橼酸铁铵建立对照和高铁小鼠模型.小动物活体成像系统测定小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中铁蛋白、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b)、Ⅰ型胶原C端肽(CTX)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)含量.结果 高铁组小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度显著低于对照组(P＜0.05).高铁组小鼠血清中铁蛋白、TRAP-5b、CTX、RANKL含量分别为(269.72±54.06) μg/L、(41.46 ±8.00) U/L、(7720.00 ±3554.00) pmol/L、(94.22±29.79) ng/L,显著高于对照组( 101.18±17.10) μg/L、(19.57±9.02)U/L、(3140.00 ±632.00) pmol/L、(47.70±15.08) ng/L(P＜0.05)；BALP、BGP含量分别为(7.84±1.74) μg/L、(58.54±4.60) μg/L,明显低于对照组(18.63±6.23) μg/L、( 100.99±18.22) μg/L(P＜0.05)；OPG含量两组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 铁过载可能通过抑制骨形成,促进骨吸收引起小鼠骨质疏松.
作者：贾鹏；徐又佳；张鹏；李冰燕；张增利；钱忠明 刊期： 2012年第02期
目的 探讨复制蛋白A1(RPA1)在人食管癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色法检测40例食管癌组织和癌旁组织中RPA1的mRNA及蛋白.结果 RPA1的mRNA及蛋白在食管癌组织和癌旁组织中均有表达,食管癌组织中RPA1表达水平明显高于相应的癌旁组织(P＜0.05),食管癌组织中RPA1表达水平与患者年龄、性别以及肿瘤大小无明显相关,而与肿瘤的浸润深度以及淋巴结转移明显相关.结论 食管癌组织中RPA1的表达与其进展及转移密切相关.
作者：顾玉明；王洵；肖晋昌；王俊；周战英；许伟；裴冬生；郑骏年 刊期： 2012年第02期
目的 观察微小RNA(miRNA)在结肠慢传输型便秘(STC)病变结肠组织和正常结肠组织中的差异表达.方法 收集6例STC病变结肠组织和正常结肠组织标本,应用miRNA芯片检测miRNA在STC病变结肠组织和正常结肠组织中的表达.结果 5种miRNA在STC病变结肠组织正常结肠组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.05).与正常结肠组织比较,miR-20b、miR-27b、miR-30b、miR-128及miR-129-3p在STC结肠组织中表达下调,统计学组间差异倍数均在1.2倍以上,其中miR-128及miR-129-3p下调明显,统计学组间差异倍数大于2倍.结论 部分miRNA在STC结肠组织和正常结肠组织中存在差异表达,可能参与了STC发生的分子机制.
作者：汪名飞；刘志苏；江从庆；宋惊喜；丁召；唐胜利；钱群 刊期： 2012年第02期
目的 探讨缺氧诱导因子(HIF) -1α与转录因子Snail在直肠癌中的表达及其侵袭转移的关系并评估预后.方法 采用免疫组织化学SABC法检测87例直肠癌组织中HIF-1 α与Snail的表达,分析两者在不同的临床病理分期与分化程度的直肠癌中的表达及其与预后的关系.结果 免疫组织化学检测结果显示直肠癌组织中HIF-1α、Snail的阳性表达率分别为58.6％ (51/87)、71.3％ (62/87),HIF-1α与Snail的表达与直肠癌的Dukes分期、远处转移及生存率有关(P＜0.05).HIF-1α与Snail的表达呈显著正相关(P＜0.05).结论 HIF-1 α、Snail蛋白的高表达可能是促进直肠癌侵袭转移的重要生物学标志.
作者：肖帅；卢先州；刘龙飞；李峰；周筱筠；龙建武 刊期： 2012年第02期
目的 观察血清中可溶性CD20分子(sCD20)在肾移植急性排斥反应时的变化,探讨血清sCD20水平变化与移植肾预后的关系.方法 收集50例肾移植患者外周血,酶联免疫吸附测定法检测血清中sCD20水平.结果 25例急性排斥反应患者术前血清sCD20为(1750.60±359.59) ng/L,与稳定组(936.96±181.71) ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；移植术后急性排斥反应组血清sCD20为(2516.20 ±511.33) ng/L,与稳定组(988.40 ±215.78)ng/L比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；而且sCD20值水平较高的患者移植肾存活时间明显少于sCD20值水平较低的患者.结论 CD20分子在移植肾急性排斥反应和预测肾移植预后中可能起重要作用.
作者：石利平；苏泽轩；程云华；丁泓文；陈洁；李文浩；郝彤彤 刊期： 2012年第02期
我们应用脱氧核糖核酸(DNA)重组技术构建可表达人VEGF-B的真核细胞表达质粒,并将其转染于传代培养的骨髓间质干细胞(MSCs)中,探讨采用VEGF-B联合细胞移植治疗心肌缺血可行性.
作者：杨哲；张勇；王胜；梁家立；王惠；粱爽 刊期： 2012年第02期
目的 观察p53上调凋亡调控因子(PUMA)在甲状腺乳头状癌(PTC)及其配对癌旁组织(NCE)中的表达,探讨PUMA在PTC发生发展中及其诱导细胞凋亡的作用.方法 采用免疫组织化学SP法检测60例PTC及NCE组织PUMA蛋白的表达；应用原位末端标记法(TUNEL)检测PTC及NCE细胞中的凋亡.结果 PUMA蛋白在PTC和NCE组织中的阳性表达率分别为40.00％( 24/60)、63.33％ (38/60)(X2=6.541,P＜0.05).PUMA在PTC中的表达与患者的TNM分期、淋巴转移及病理分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、性别无明显相关(P＞0.05).PUMA在PTC中的表达与其细胞的凋亡有明显相关(X2=12.113,P＜0.01).结论 PUMA作为一种促进凋亡的抑癌基因,参与了PTC的凋亡及发生发展,与PTC的浸润和淋巴结转移有关.
作者：殷德涛；李红强；郑丽丽；陈国；卢秀波 刊期： 2012年第02期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
