张伟红;伍晓凡;甘景梨;高存友;李晓琼;牛锋;陈建辉
目的 观察不同的腹部外科手术操作对大鼠肠道运动功能以及肠神经系统内乙酰胆碱酯酶(AchE)神经元和一氧化氮合酶(NOS)神经元的影响,探讨腹部外科手术对肠道运动功能影响的神经机制.方法 48只SD大鼠随机分为单纯开腹组、肠道按摩组、肠道手术组和正常对照组(n=12),各组术后灌服炭末,测定小肠炭末推进率,同时取各组相同部位的小肠和大肠,制作肠肌间神经丛铺片标本,采用AchE和NADPH-d组化染色观察AchE、NOS阳性神经元的分布密度和染色情况.结果 炭末推进率(%)肠道手术组、肠道按摩组低于单纯开腹组和正常对照组(P<0.01),肠道手术组低于肠道按摩组(P<0.05),单纯开腹组与对照组比较降低不明显(P>0.05);与正常对照组比较,肠道手术组、肠道按摩组的小肠和大肠肌间神经丛内AchE阳性神经元数量(个/200倍视野)减少(P<0.01),阳性表达减弱,NOS阳性神经元数量增多(P<0.01),阳性表达增强,节间束纤维粗大,而单纯开腹组的变化不明显;与肠道按摩组比较,肠道手术组小肠和大肠肌间神经丛内的NOS阳性神经元数量较多(P<0.01),胞体大而染色深,节间束纤维较粗大,而AchE阳性神经元数量和染色的差异不明显.结论 腹部外科手术在一定程度上会影响或损伤肠神经系统的胆碱能和氮能神经,这可能是腹部外科手术后发生肠道运动功能障碍的神经机制之一.
作者:张军明;任艳华;郑膺;张婵;刘芬;余正平;雷亚宁 刊期: 2007年第02期
端粒酶与肿瘤发生、早期诊断、预后密切相关,已成为新的肿瘤标志物及肿瘤治疗的新靶点[1].土荆皮酸(pseudolaric acid B,PAB)是从荆树皮中提取的一种二萜类化合物,可通过caspase-3及p53/Bax/Bcl-2途径诱导细胞凋亡,对多种肿瘤具有良好治疗效果[2].本实验应用不同浓度的PAB处理卵巢癌A2780细胞,观察PAB对其端粒酶活性的影响,现报道如下.
作者:胡云;李克深;毛东伟;贺彩军 刊期: 2007年第02期
目的 探讨艾司洛尔对心肺复苏后大鼠心肌线粒体ATP酶活性的影响.方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、肾上腺素(AD)组、肾上腺素+艾司洛尔(AD+Es)组,每组22只,制备窒息致大鼠心跳骤停模型,窒息10min后行心肺复苏,测定复苏后30、120、180min心肌线粒体ATP酶活性.复苏期间监测心电图、心率、体温、平均动脉压.结果 与Sham组相比,AD组复苏后心率加快(P<0.01),AD、AD+Es组复苏后心肌线粒体ATP酶活性降低(P<0.01);与AD组相比,AD+Es组ATP酶活性升高(P<0.05或0.01).结论 艾司洛尔有保护复苏后大鼠心肌线粒体ATP酶活性的作用.
作者:陈延英;孟凌新;贾有海;赵广翊;崔健君 刊期: 2007年第02期
糠秕马拉色菌毛囊炎临床十分常见,尤其年轻军人发病率较高.2002年5月~2005年11月于南京军区福州总医院皮肤科门诊就诊的年轻男性军人中,疑似糠秕马拉色菌毛囊炎者3 180例,刮皮屑直接镜检后初步诊断的共2 842例,现将其检查及治疗经过报道如下.
作者:刘向农;陈向齐;陈胜平 刊期: 2007年第02期
目的 参照2005年NASH临床研究网络病理学会(NASH-CRN)评估方案,研究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的病理特点.方法 对130例NAFLD的肝穿组织进行常规HE、网状纤维和Masson三色染色,观察分析NAFLD的病理改变.采用免疫组织化学染色排除其他非NAFLD肝病.结果 脂肪变性、肝细胞气球样变、小叶内炎症和纤维化发生普遍,脂肪变性以大泡型为主,肝腺泡3带为著,肝细胞气球样变发生率为94.6%,小叶内炎症多为轻度炎症.统计学分析示,脂肪变性与小叶内炎症、纤维化、肝细胞气球样变程度间呈正相关(r值分别为0.587、0.374、0.488,P均<0.01).随脂肪变性、小叶内炎症、纤维化程度的加重,微肉芽肿、脂性肉芽肿和凋亡小体出现频率呈增加趋势.随气球样变程度加重,巨大线粒体和糖原核发生率明显增高(P均<0.01).结论 在NAFLD的评估中,除脂肪变性、肝细胞气球样变、小叶内炎症和纤维化外,汇管区炎症也应予以重视.微肉芽肿、脂性肉芽肿和凋亡小体是否可作为NAFLD病情进展的组织学指标尚需进一步验证.
作者:周光德;赵景民;丁效蕙;潘登;孙艳玲;杨建法;赵雨来 刊期: 2007年第02期
目的 检测乙型肝炎病毒(HBV)全基因组转染对人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞中microRNA(miRNA)表达的影响,为进一步探讨肝细胞中HBV复制的分子生物学机制提供平台.方法 分别提取HepG2.2.15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞,实验组)和其亲本HepG2细胞(对照组)的总RNA并分离miRNA,采用含509条探针的哺乳动物miRNA表达谱芯片对两组之间差异表达的miRNA进行分析.用SAM软件针对差异miRNA筛选的标准为在两组之间荧光强度差异4倍以上,差异miRNA的整体假阳性率为0.选择其中2个miRNA,应用实时荧光定量RT-PCR方法对芯片结果进行验证.结果 HepG2.2.15细胞与HepG2细胞间差异表达的miRNA共27个(占5.3%),其中7个表达上调,20个表达下调.miR-181d和miR-15a的实时荧光定量RT-PCR验证结果与芯片表达结果基本一致.结论 肝细胞中存在着与HBV复制相关的miRNA,这些上调和下调表达的miRNAs可能参与了HBV在肝细胞中的复制.
作者:刘妍;张亮;戴久增;王琳;赵建晴;徐东平 刊期: 2007年第02期
目的 构建天然溶瘤型新城疫病毒(NDV)Italien株血凝素-神经氨酸酶(HN)基因的真核表达载体并进行产物表达.方法 采用RT-PCR法从病毒RNA中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体pcDNA3.1-HN,脂质体法转染CHO-K1,G418筛选稳定表达克隆.用Western blot、免疫荧光法检测HN蛋白的表达.结果 经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实真核表达载体pcDNA3.1-HN构建正确.Western blot和免疫荧光分析表明HN基因在CHO-K1中成功表达.结论 天然溶瘤型NDV Italien株的HN cDNA被成功克隆,所构建的真核表达载体pcDNA3.1-HN可以在CHO-K1细胞中稳定表达.
作者:张华;边惠洁;尉丁;李亚琳;杨滨;陈志南 刊期: 2007年第02期
近年,有关S100β的研究非常活跃.本文研究了急性颅脑外伤手术患者血清S100β的变化,并在手术后6个月时对患者进行简易智能量表(mini-mental state examination, MMSE)评分,以探讨其相关性.
作者:甘国胜;祝松;陈利民;陈敏;林俊明 刊期: 2007年第02期
目的 探讨术前区域性动脉灌注化疗对晚期乳腺癌细胞凋亡及其相关基因表达的影响.方法 将56例晚期乳腺癌患者随机分为治疗组(术前动脉灌注化疗)和对照组(未行术前化疗),各28例.利用TUNEL法检测两组的癌细胞凋亡情况,运用免疫组化方法检测两组bcl-2、bax基因的表达状况.结果 乳腺癌细胞凋亡指数(AI)治疗组为7.28%±2.68%,对照组为4.21%±1.87%;bcl-2基因的表达,治疗组为0.68±0.06,对照组为2.24±0.36;bax基因的表达,治疗组为0.72±0.06,对照组为0.38±0.04.上述指标两组间比较均有显著性差异(P<0.05).结论 术前区域性动脉灌注化疗能诱导肿瘤细胞凋亡,而术前化疗后肿瘤细胞AI上升与化疗的疗效有关;术前化疗可影响乳腺癌细胞凋亡相关基因的表达,bcl-2/bax在诱导细胞凋亡中起重要作用,可作为预测化疗效果的指标.
作者:何建苗;蒲永东;马小军;杨波;董立国;曹志宇;刘卫平 刊期: 2007年第02期
目的 观察高效抗逆转录病毒治疗(HAART)前后人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)慢性感染儿童外周血HIV-1特异性CTL的反应特点,并分析其影响因素.方法 采集24例HIV-1 慢性感染儿童外周血并分离PBMCs,常规进行CD4 T细胞绝对数和血浆病毒载量测定.应用tetramer染色技术和ELISPOT技术分别测定HIV-1表位特异性CTL频率和IFN-γ产生细胞的数量.结果 在80%的HIV-1慢性感染儿童外周血可检测到HIV-1特异性的tetramer+ CTL细胞和HIV-1表位肽刺激的IFN-γ产生细胞.未经HAART治疗和HAART治疗失败的儿童,其体内CTL反应明显强于HAART治疗成功的儿童,并且这种CTL反应与HAART治疗时间呈明显的负相关.结论 HAART治疗后外围血HIV-1特异性CTL反应明显降低,持续的HIV-1抗原刺激是维持外周血HIV-1特异性CTL反应的主要因素.
作者:金磊;赵清霞;张政;福军亮;何云;姚金霞;王福生 刊期: 2007年第02期
目的 构建人survivin特异性siRNA,探讨其对骨肉瘤细胞MG63细胞周期及survivin表达的影响.方法 构建survivin特异性的RNA干涉载体,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系,以Western blot法检测survivin蛋白表达变化,透射电镜、Hoechst染色检测细胞凋亡情况,流式细胞仪检测细胞周期变化.结果 成功构建了survivin基因siRNA真核表达载体PsiS,获得了稳定转染的细胞系.与正常MG63细胞、阴性对照细胞相比,MG63/PsiS细胞中survivin蛋白表达减少,部分细胞核致密浓染或碎块状浓染,凋亡率增加了7倍,而G2/M期细胞减少近50%.结论 特异性siRNA能够明显抑制survivin基因在MG63细胞中的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡.
作者:杨彤涛;李存孝;黄立军;张志培;范清宇;马保安;周勇 刊期: 2007年第02期
随着肝移植手术的开展,术后长期存活病例不断增多,而各种原因致移植肝失功能需再次肝移植的患者也在增加.我们回顾性分析了第二军医大学长征医院自1996年开展肝移植手术以来的20例再次肝移植患者的麻醉资料,总结再次肝移植的麻醉管理经验,供临床参考.
作者:徐海涛;石学银;袁红斌;叶军青;何星颖;蒋京京 刊期: 2007年第02期
目的 研究内源性睾酮对高脂饮食去势雄性家兔早期动脉硬化的影响.方法 将30只雄性新西兰白兔随机分为3组:单纯去势组、生理水平组[去势后肌注十一酸睾酮(TU)]和假手术组,每组各10只.制备不同睾酮水平的高脂雄兔模型,饲养12周后测定血脂及载脂蛋白水平,随后处死动物观察并测量冠状动脉及肾动脉的内膜厚度.结果 单纯去势组血清TC、TG、LDL-C、ApoB、LDL-C/HDL-C、ApoB/ApoA1明显高于假手术组和生理水平组(P<0.01),冠状动脉早期动脉硬化程度重于假手术组和生理水平组(P<0.05),而肾动脉内膜厚度与假手术组和生理水平组比较无显著性差异(P》0.05).结论 内源性睾酮水平的降低对高脂饮食雄兔冠状动脉早期动脉硬化有促进作用.
作者:王蓉;范利;李晓鹰;武强 刊期: 2007年第02期
目的 人工合成A型肉毒毒素Hc段基因,并在大肠杆菌中进行高效表达.方法 人工合成Hc段基因,选择宿主细胞偏爱的同义密码子替换其原有稀有密码子,使AT含量降至57.3%,然后将其克隆入pQE-60表达载体,在大肠杆菌中进行可溶性表达.结果 可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的11.5%左右,表达产物可被A型肉毒毒素马血清抗毒素识别.结论 成功地表达并鉴定了A型肉毒毒素Hc蛋白,为进一步进行A型肉毒毒素的疫苗或抗体研究奠定了基础.
作者:张效云;刘进军;董明纲;徐志伟 刊期: 2007年第02期
目的 研究Caspase-1激活的细胞因子在实验性重症急性胰腺炎(SAP)肾损害中的作用.方法 SD大鼠32只,随机分为正常对照组(HC组)、SAP6h组、SAP12h组、SAP18h组,每组8只.采用5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发大鼠SAP模型.通过HITACHI-7150型自动生化分析仪检测大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),ELISA法测定血清IL-1β水平,酶化学法测定肾组织髓过氧化物酶(MPO)活性,半定量RT-PCR检测肾内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA的表达.结果 SAP造模后各组血清BUN、Cr和IL-1β水平显著升高,并伴有肾组织MPO显著增加,与HC组相比差异均具有统计学意义(P<0.01).HC组肾内可见Caspase-1及IL-18 mRNA表达,但IL-1β mRNA表达较弱;SAP各组肾内Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA表达显著上调(P<0.01).结论 Caspase-1激活、IL-1β及IL-18的过度表达可能与SAP肾损害有关.
作者:张晓华;朱人敏;许文安;万海军;陆恒 刊期: 2007年第02期
目的 分析非糖尿病人群尿白蛋白与肌酐比值(ACR)的测定结果之间的性别差异,为中国制定诊断微量白蛋白尿的性别特异性标准提供参考数据.方法 对北京石景山地区中老年人群进行流行病学调查,无糖尿病者行口服75g葡萄糖耐量试验(OGTT),同时进行问卷调查并对体检的1 580例非糖尿病完整资料进行统计,分析ACR的性别差异及原因.结果 非糖尿病人群中,男性尿肌酐浓度显著高于女性(8.1 vs 5.5mmol/L,P<0.05);男性ACR显著低于女性(2.6 vs 3.1mg/g,P<0.05).正常血糖(NGT)人群、糖调节受损(IGR)人群及合并后的非糖尿病人群中男性ACR的95%正常上限均为23mg/g,女性ACR的95%正常上限分别为27、32和28mg/g.结论 过夜晨尿(次尿)测定ACR诊断不同性别微量白蛋白尿确实存在差异,不同性别应采用不同的诊断标准.
作者:卢艳慧;陆菊明;王淑玉;李春霖;刘力生;郑润平;田慧;王先令;杨丽娟;张育青;潘长玉 刊期: 2007年第02期
目的 探讨人类成纤维细胞生长因子受体1的Ⅲb亚型(FGFR1-Ⅲb)在胰腺癌细胞中的作用. 方法 以脂质体法将人类全长FGFR1-Ⅲb表达质粒pSVK4/FGFR1-Ⅲb稳定转染入PANC-1胰腺癌细胞,通过MTT试验、软琼脂试验、细胞迁移试验、单个细胞运动试验和裸鼠移植瘤试验检测FGFR1-Ⅲb在转染的胰腺癌细胞中的功能. 结果 转染FGFR1-Ⅲb受体的胰腺癌细胞,在细胞生长、细胞迁移、细胞运动、移植瘤形成及生长方面均受抑,且移植瘤Ki-67表达减低、肿瘤组织中坏死灶减少. 结论 人类FGFR1-Ⅲb受体为胰腺癌细胞的功能性受体,对胰腺癌细胞具有抑制作用.
作者:刘占兵;杨尹默;乔岐禄;赵建勋;黄莚庭;Marko Kornmann 刊期: 2007年第02期
目的 比较老年患者结肠镜检查时靶控输注和静脉推注异丙酚的麻醉作用和对呼吸循环功能的影响.方法 50例55岁以上行结肠镜检查的患者,随机分为两组.靶控组靶控输注异丙酚,目标血药浓度3μg/ml;静注组静脉推注异丙酚2mg/kg,间断追加每次20~50mg.记录患者检查过程中的血压、心率、血氧饱和度及体动反应,麻醉后患者呼唤睁眼时间和应答时间.结果 两组的检查时间和体动反应发生情况没有显著差异.靶控组异丙酚用量高于静注组,呼唤睁眼时间较静注组长(P<0.05).靶控组的低收缩压、低舒张压显著高于静注组,靶控组低血压的发生率显著低于静注组(P<0.05).结论 靶控输注异丙酚麻醉可以维持相对稳定的循环功能,比静脉推注更适合老年患者结肠镜检查的麻醉.
作者:孙雪峰;郝建华;靳恒;吕宏大 刊期: 2007年第02期
肝病患者发生肺曲霉菌病的报道较少,一旦发生则预后不良,特别是在重型肝炎患者中,病死率很高.为提高对本病的认识及救治成功率,现对解放军第302医院2000~2005年严重肝病合并肺曲霉菌病的病例进行临床分析.
作者:王晓峰;程勇前;王红旗;赵平;周华 刊期: 2007年第02期
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞的可能性.方法 将SD大鼠MSCs用DAPI标记后注入受体大鼠体内.75只受体大鼠随机分为5组(n=15):肺损伤组、MSCs治疗组、MSCs对照组、单个核细胞对照组和正常对照组.分别于MSCs、单个核细胞注入受体大鼠体内1、2、4周后观察肺组织结构变化,检测肺组织中植入细胞情况及广谱细胞角蛋白的表达水平.结果 MSCs治疗组大鼠肺组织在各时间点均有少量植入的细胞,并且部分植入的细胞表达广谱细胞角蛋白.MSCs植入后2周大鼠细支气管壁有少量植入的细胞同时表达广谱细胞角蛋白.其余各组未发现植入细胞的标记.结论 MSCs可在损伤的大鼠肺组织中分化为肺泡上皮细胞和支气管上皮细胞.
作者:赵峰;李圣青;张宇飞;陈卫强;侯志峰;吴昌归;戚好文 刊期: 2007年第02期