张树卓；戴薇薇；孙洪良；李昕；郑建全；李锦
目的:探讨新设计CpG寡聚脱氧核苷酸(ODN)在小鼠体内的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:建立C57BL/6小鼠腹腔、皮下荷黑素瘤肿瘤模型,腹腔注射CpG ODN,观察荷瘤鼠生存时间、肿瘤生长曲线,计算抑瘤率.用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中白细胞介素(IL)12和免疫球蛋白E(IgE)含量;3H-TDR掺入法检测脾脏B细胞、T细胞增殖活性;51Cr释放法检测NK细胞杀伤活性;中性红法检测腹腔巨噬细胞吞噬功能.结果:CpG10,CpG11能明显延长腹腔接种肿瘤小鼠的生存时间,与阳性对照CpG1826相比P＜0.01;二者平均抑瘤率(皮下荷瘤鼠)分别为(55.2±2.3)%与(40.7±1.7)%,显著高于CpG 1826 [抑瘤率(17.8±7.6) %](P＜0.05,P＜0.01).CpG10/CpG11可促使荷瘤小鼠血清IL-12含量显著升高( P＜0.01),IgE含量显著下降( P＜0.01);明显刺激B细胞、T细胞增殖能力以及NK细胞的杀伤活性( P＜0.01),对腹腔巨噬细胞的吞噬功能有显著提高( P＜0.01).CpG10免疫增强活性较CpG1826更强( P＜0.05).结论:CpG ODN能激活荷瘤鼠抗肿瘤免疫反应,从而抑制小鼠黑素瘤的生长,新结构寡核苷酸的CpG10呈现优于阳性对照的良好抗肿瘤免疫效应.
作者：杜海燕；宋海峰；夏绍友；李娜；欧伦；邹佳；孙效；吉爱国；汤仲明 刊期： 2007年第04期
目的:研究与丝/苏氨酸蛋白激酶Plk1(polo-like kinase 1)相互作用的分子.方法:通过酵母双杂交技术初步确定可能与Plk1存在相互作用的靶分子,进一步通过蛋白分子的细胞亚定位、体内免疫共沉淀和GST-pulldown分析Plk1与候选蛋白之间的相互作用.结果:细胞亚定位表明,Plk1与转录阻遏子NAC1(transcriptional repressor nucleus accumbens-1, transcriptional repressor NAC1)在空间上存在相互作用的可能,酵母双杂交、体内免疫共沉淀、GST-pulldown分析均表明Plk1和NAC1存在相互作用.结论:Plk1和NAC1存在相互作用,二者的相互作用可能在细胞的发育分化、肿瘤及神经系统疾病的发生发展中起着重要作用.
作者：熊福银；温叶飞；林艳丽；周艳荣；施庚寿；田利源；曾强成；韩正滨；邓继先；陈红星 刊期： 2007年第04期
目的:探讨应用关节镜治疗全关节结核的方法和疗效. 方法:收集1995年2月至2006年5月经关节镜治疗的33例全关节结核病例,其中肩关节结核4例,肘关节结核3例,髋关节结核5例,膝关节结核18例,踝关节结核3例.镜下对关节彻底清理,对干酪样坏死组织或脓液进行结核杆菌培养和药物敏感性试验,术毕置管冲洗.术后关节腔用抗结核药物冲洗1～2周,肩、肘关节绷带固定3周后活动,髋、膝、踝关节石膏固定12周(22例)或外固定架固定3～6个月(2例).根据药敏试验结果进行抗结核治疗,持续1年.结果:本组33例均获3个月以上随访,根据Ikeuchi膝关节评分标准,疗效优25例,良8例.髋、膝、踝关节全部融合,所有关节伤口均一期愈合.结论:对于早、中、晚期,甚至合并窦道形成的全关节结核,均可考虑行关节镜下关节清理术.对全关节结核的镜下清理可以彻底清创,减轻创伤,降低伤口不愈合率,保持非负重关节的功能,提高负重关节的融合率.在药敏试验指导下的有针对性的抗结核治疗非常重要.
作者：孙继桐；黄迅悟；余方圆；马远征 刊期： 2007年第04期
肝脏是机体重要的实质性器官,肝富集转录因子及其相互作用构成的复杂调控网络精确地控制着肝脏的早期发育及其各项功能的发挥.目前依据其结构特征将肝富集转录因子分为7大家族,这里着重介绍这7类肝富集转录因子的结构特征、在肝组织中的生理功能及其调控网络的新进展.
作者：汪莉 刊期： 2007年第04期
目的:利用Red重组系统构建aroL和aroK缺失的大肠杆菌工程菌株.方法:本研究应用PCR扩增两翼与目的基因上下游同源的、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化大肠杆菌BW25113.在阿拉伯糖诱导下,含有质粒pKD46的菌株DH5α表达λ噬菌体的3个重组蛋白,利用含同源臂的氯霉素抗性片段分别替换目的基因aroK和aroL,并进一步利用FTP位点专一性重组将氯霉素抗性基因删除.结果:成功地敲除了aroK和aroL基因.结论:莽草酸是一种具有极高价值的精细化工产品和医药中间体,具有广泛的医药、化工应用价值.莽草酸是莽草酸途径中的重要中间产物,它在莽草酸激酶(aroK和aroL)的作用下流向3-磷酸莽草酸,阻碍了莽草酸在大肠杆菌体内的堆积.敲除上述基因将为使用大肠杆菌发酵生产莽草酸奠定基础.
作者：汪莉；王玉民 刊期： 2007年第04期
肿瘤-睾丸抗原又称CT抗原,是一类在多种肿瘤组织中表达而在正常组织中除睾丸外不表达的抗原,因而是很有前途的肿瘤疫苗候选抗原.本文就目前肿瘤-睾丸抗原的定义、分类及其在肿瘤组织及正常组织中表达的特点和作为疫苗的临床研究进展作一综述.
作者：江华；姜永强 刊期： 2007年第04期
近年来,依达拉奉脑保护作用的研究取得了很大进展,尤以对缺血性脑卒中和新生儿缺血缺氧性脑病的防治研究为深入,而联合治疗策略也得到了广泛的重视.本文就近5年这些热点研究的新进展进行综述.
作者：魏国荣；徐天昊；彭瑞云 刊期： 2007年第04期
儿童呼吸道病毒性感染发热常发生于冬春两季,特点为突发高热,伴头痛、全身肌肉关节疼痛不适等.这种病毒性感染具有一定的传染性,需及时治疗.作者应用银翘散加减治疗该病取得了较好临床疗效,现报道如下.
作者：王文波；王伟 刊期： 2007年第04期
目的:克隆小鼠早期胚胎发育相关的新基因uTRIM,研究其胞内亚定位及功能.方法:通过数字差异显示搜索到可能和小鼠早期胚胎发育相关的新基因uTRIM,用RT-PCR方法从体外培养的小鼠囊胚中分离得到其全长cDNA;将其克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1中,在HEK 293细胞内表达后确定uTRIM分子的亚细胞定位.用RNAi对其在胚胎发育早期的功能进行初步的研究.结果与结论:uTRIM基因只在胚胎发育早期和成体睾丸组织中表达,亚细胞定位显示该蛋白位于细胞质中.RNAi结果显示抑制uTRIM表达使小鼠受精卵体外发育速度加快,提示uTRIM参与早期胚胎发育的负调控.
作者：田利源；周艳荣；吴晓洁；林艳丽；卢建申；温叶飞；熊福银；徐宁；邓继先；陈红星 刊期： 2007年第04期
放射治疗(radiation therapy ,RT)是一种重要的癌症局部治疗手段,免疫治疗是肿瘤全身系统性治疗方法之一,二者联合应用可以起到很好的协同抗肿瘤作用.本文将对RT与免疫治疗联合应用治疗肿瘤的研究进展进行综述.
作者：王浩；贾锐；阎瑾琦；于继云 刊期： 2007年第04期
目的:研究粘质沙雷菌在不同温度下蛋白表达谱的差异,为探讨温度对生理特性和代谢产物的影响奠定基础.方法:采用双向电泳技术对25℃/37℃培养的粘质沙雷菌蛋白表达谱进行了比较和分析,差异蛋白点经过胶内酶切后进行MALDI-TOF质谱鉴定,所得到的肽指纹图谱用Mascot进行检索.结果与结论:共鉴定到31个差异点对应于23种蛋白.其中,S-腺苷甲硫氨酸合成酶的表达在37℃下调,给出了有关灵菌红素生物合成的新证据;此外,研究还发现,鲱精胺酶在37℃表达上调,提示粘质沙雷菌精氨酸代谢可能会随温度发生改变.
作者：高建峰；朱力；刘先凯；严群；杨树兴；冯尔玲；植懿丹；廖祥儒；王恒樑 刊期： 2007年第04期
目的:建立不同辅助亚基与功能亚基重组体瞬时表达的N型钙离子通道细胞模型,观察不同亚基组成的N型钙离子通道的电学特征,揭示不同辅助亚基对功能亚基的调节作用.方法:将N型钙离子通道亚基α1B/α2δ/β1b的cDNA分别体外转录为cRNA后,注射至去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞中,表达48 h后使用双电极电压钳技术记录其电流.结果:向注射N型钙通道cRNA的细胞以一系列去极化刺激可诱发90%的细胞记录到内向电流.其电流可被N型钙离子通道特异性拮抗剂ω-CTX MVⅡA (1 μmol/L)完全阻断.α1B单独表达时可形成功能性N型钙离子通道,通过记录到电流后而得出电流-电压曲线(I-V曲线),可知产生电流峰值的膜电压约为20 mV(21.17±1.44)mV(n=7);α1B/β1b共表达时I-V曲线方向为超极化,电流达到峰值的电压为(12.35±0.88) mV(n=7,P＜0.01);功能亚基与α2δ亚基共表达时,I-V曲线稍向正电位方向,电流达到峰值的电压为(23.25±1.25) mV(n=7,P＜0.01);在α1B/α2δ/β1b共表达时,尽管有α2δ亚基存在时,β1b亚基仍显著地使I-V曲线向超级化方向(17.08±1.86) mV(n=7).本实验也观察了不同重组体电流的稳态失活电压,其中α1B表达电流的半数失活电压为-12.0 mV,α1B/α2δ表达电流的半数失活电压为-13.5 mV,α1B/β1b表达电流的半数失活电压为-51.4 mV,而α1B/α2δ/β1b共表达时电流半数失活电压为-54.9 mV.结论:成功地建立不同亚基组成的N型钙离子通道在爪蟾卵母细胞的功能性表达,不同的辅助亚基与功能亚基组合体现了通道不同的动力学特性,表明N型钙通道在体内可能具有功能的多样性.这些结果为今后深入研究N型钙通道奠定了基础.
作者：张树卓；戴薇薇；孙洪良；李昕；郑建全；李锦 刊期： 2007年第04期
目的:研究双肾藤乙醇提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠的降血糖作用.方法:采用85%乙醇煎煮双肾藤,获得其提取物.采用四氧嘧啶诱发糖尿病,建立糖尿病小鼠模型.双肾藤提取物灌胃给药,第一周剂量为1 000 mg/kg,第2和第3周剂量为500 mg/kg,二甲双胍为阳性药(250 mg/kg).每天测定小鼠饮水量和耗食量,给药7 d和20 d测定小鼠血糖及血浆中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和胰岛素水平.实验结束后测定小鼠肝脏、肾脏和脾脏重量指数.结果:双肾藤提取物具有显著降血糖活性(P＜0.01),效果与二甲双胍相近,能明显减少糖尿病小鼠饮水量和耗食量,轻度降低糖尿病小鼠血浆甘油三酯含量,但对总胆固醇、HDL-C及胰岛素水平无明显影响.该提取物能引起糖尿病小鼠肝脏萎缩.结论:双肾藤提取物对四氧嘧啶糖尿病小鼠具有明显降血糖作用,但可能作用于胰腺外.
作者：单俊杰；段秀梅；赵奇志；赵毅民 刊期： 2007年第04期
目的:构建人单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因的慢病毒载体质粒,并建立其慢病毒表达系统.方法:利用酶切分别获取目的基因TK片段及慢病毒pLenti6/V5载体片段,将目的基因插入载体相应酶切位点,构建pLenti6/V5-TK质粒.构建的重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定.利用慢病毒表达系统(ViraPowerTM Lentiviral Expression Systems),将重组质粒与包装系统质粒(pLP1,pLP2,pLP/VSVG) 4质粒共转染293T细胞,48 h后收集培养上清并感染大鼠胶质瘤细胞9L,抗稻瘟菌素(blasticidin, BSD)筛选9L/TK细胞.MTT方法测试更昔洛韦(ganciclovir GCV)对体外培养的9L/TK细胞杀伤效果.结果与结论:构建的质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确;该质粒与包装质粒共转染293T细胞获取的慢病毒滴度达2.7×105转导单位(transducing units,TU)/ml.经BDS筛选的9L/TK细胞对GCV杀伤敏感.成功构建了TK基因慢病毒载体质粒pLenti6/V5-TK,并建立了其慢病毒表达系统.
作者：林健；戴学军；王伟民；徐如祥；姜晓丹；袁振华；曹晖；蒋立新 刊期： 2007年第04期
目的:应用刀豆素A(ConA)亲合层析结合液相色谱串联质谱法(HPLC-MS)发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白.方法:收集生长2周的结核菌培养液,经过滤浓缩得到培养滤液蛋白(culture filtrate protein, CFP).应用ConA亲合层析法纯化CFP中的糖蛋白,经SDS-PAGE电泳结合考马斯亮蓝染色后,对蛋白条带进行胰蛋白酶消化.应用HPLC-MS检测消化后的糖肽结构并与结核菌H37Rv蛋白质数据库进行比对,寻找新的糖蛋白.结果:CFP经ConA亲合层析纯化后的电泳结果显示有数条蛋白条带出现,经筛选相对分子质量26×103蛋白可能为糖蛋白.酶切消化该蛋白得到的多肽在HPLC-MS上保留时间26.24 min处显示有多肽色谱峰,其对应的一级MS图提示该多肽总质量为1 467原子质量单位(AMU),二级MS图显示为多个质荷比(m/z)逐级减少为54(一个己糖的分子质量单位为162 AMU)的多肽,提示有己糖丢失.同时,MS分析肽链氨基酸序列并证实蛋白的糖基化存在.与结核菌H37Rv蛋白质数据库比对结果提示,结核菌分泌的26×103蛋白为一新的糖蛋白,即铜-锌超氧化物歧化酶.结论:应用ConA亲合层析结合HPLC-MS发现了一个新的结核分枝杆菌糖蛋白.
作者：刘振桐；姜妙娜；贾玉杰 刊期： 2007年第04期
目的:通过乙肝病毒(HBV)核酸定量、HBV血清学标志物(HBV-M)、ALT、AST指标的监测,观察慢性乙型肝炎患者服用拉米呋啶的疗效.方法:选择986例慢性乙型肝炎患者,治疗组786例,服用拉米呋啶治疗药物(100 mg/d),对照组200例,未服用治疗药物,两组定期采血作HBV-DNA定量、HBV-M、肝功能检测.结果:治疗1年后治疗组391例HBV-DNA阴转(＜104 cps/ml)(49.7%),对照组8例阴转(4%);治疗组786例ALT、AST异常者703例恢复正常(89.4%),对照组200例18例恢复正常(9.0%);治疗组HBeAg/Anti-HBe转换84例(19.2%),HBeAg阴转62例(14.2%).对照组5例HBeAg/Anti-HBe转换(4.2%).结论:拉米呋啶能有效抑制HBV的复制,降低ALT和AST,促进HBeAg / Anti-HBe 转换及HBeAg阴转.
作者：杜琼；刘小琦；张玲英；杨正林；杨明清；杨洋 刊期： 2007年第04期
瞬时受体电位通道蛋白(TRP)家族由一类特殊的阳离子通道蛋白组成,在神经细胞及其他非兴奋细胞中有重要作用,其中在介导多种感觉生理功能方面的作用尤其显著.TRP结构与功能的深入研究为阐明感觉生理功能的分子机制提供了重要线索.本文综述TRP家族在温度感受、机械刺激感受、光感受和化学信号感受等方面的研究进展.
作者：孙滔；张成岗 刊期： 2007年第04期
目的:筛选可以与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域缺失的Id2相互作用的蛋白.方法:用重叠延伸PCR方法将Id2中的HLH结构域缺失,并插入到pGBKT7载体,构建 BD∶ Id2-DBM-δHLH融合诱饵质粒;构建MCF-7细胞的ds cDNA文库;采用共转化方法进行Id2-DBM-δHLH相互作用蛋白的酵母双杂交筛选,采用PCR方法扩增阳性克隆中的AD∶ cDNA序列并测序;将获得的AD∶ cDNA质粒分别与BD∶ Id2-DBM-δHLH诱饵质粒共转化酵母进行配对验证.结果:酵母双杂交方法共筛选到19个阳性克隆,PCR方法在这19个克隆中共扩增到28条片段,序列测定证实含18个不同的基因,对其中的13个进行配对验证后证实了其中8个与HLH缺失型Id2相互作用,这8个基因分别是:UXT、VIM、KRT7、FHL2、SEI1、PCBP1、SIVA和LSM2.结论:本研究首次利用HLH缺失型Id2作为诱饵,利用酵母双杂交技术筛选识别了一族新的Id2相互作用蛋白,为进一步研究Id2的功能调控以及非HLH依赖的功能活性奠定基础.
作者：伍志强；孟元光；赵亚力；杨洁；田丽媛；司艺玲；韩为东 刊期： 2007年第04期
FHL蛋白是分子结构中仅含有4个半LIM结构域的蛋白质家族,人类FHL蛋白有4个成员:FHL1、FHL2、FHL3及ACT.它们通过LIM结构域与某些结构蛋白、激酶、转录调控因子等多种蛋白质相互作用,对某些基因的表达、细胞分化与发育、细胞骨架形成等发挥重要调控作用.FHL2是其中研究深入的成员.本文介绍FHL2的结构特征、组织和细胞中的分布、FHL2与其他蛋白之间的相互作用、生物学功能,以及在肿瘤和其他疾病的发生和发展中的作用等方面的研究进展.
作者：熊志红；孙启鸿；叶棋浓 刊期： 2007年第04期
目的:探讨脾源性酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase, Syk)在人乳腺癌细胞中的表达及其对肿瘤细胞侵袭迁移能力的影响.方法:RT-PCR法、免疫荧光法检测不同侵袭能力乳腺癌细胞株--MCF-7(低侵袭性)和MDA-MB-231(高侵袭性) Syk mRNA及蛋白的表达;采用脂质体介导的方法,将Syk基因导入Syk(-)乳腺癌细胞株,利用Transwell小室法检测Syk基因对肿瘤细胞侵袭迁移能力的影响.结果:Syk mRNA及蛋白在MCF-7细胞中呈中等程度表达,在MDA-MB-231中表达缺失;转染Syk基因的MDA-MB-231细胞与转染空载体及未转染MDA-MB-231细胞相比,侵袭及迁移实验中的穿膜细胞数(总迁移细胞数/5HPF)均明显减少(P＜0.05).结论:Syk表达可降低乳腺肿瘤细胞体外侵袭迁移能力.
作者：齐义新；单保恩；胡洁；宋小天；王士杰 刊期： 2007年第04期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
