韩聚强；焦园园；丁丽华；袁斌；王晓辉；张浩；李杰之；吕秋军；叶棋浓
DNA芯片技术现已广泛应用于分子生物学、运用生物学以及临床医学等领域进行DNA鉴定、定量及功能分析.本文对基因表达谱芯片技术在阿尔茨海默病、帕金森病及恶性肿瘤相关药物靶点的发现、发展等方面的进展作一综述.
作者：黄璜；程肖蕊；周文霞；张永祥 刊期： 2006年第06期
目的:探讨大鼠触须毛囊真皮鞘细胞体外培养生长特性和电镜下超微结构特征.方法:显微分离大鼠触须毛囊真皮鞘,组织块法原代培养获得真皮鞘细胞,免疫组化和免疫荧光染色进行细胞鉴定,MTT法测定细胞生长曲线,并通过扫描电镜和透射电镜观察其超微结构.结果:真皮鞘细胞原代培养5～7 d仅有少量细胞由组织块中长出,培养14 d方可传代.传代后细胞呈克隆样丛状生长,细胞丛相互连接呈网状,3～5 d传一代,可连续传10代以上.扫描电镜见毛囊真皮鞘内有许多散在的纺锤形细胞,胞体丰满,表面不光滑,有较长的细胞突起.透射电镜下见细胞核大,富含常染色质,核仁明显,胞浆中细胞器少,胞膜下可见由细丝样结构组成的致密斑.结论:大鼠触须毛囊真皮鞘细胞原代生长迟缓,传代后细胞增殖旺盛,其超微结构特点提示该细胞分化程度较低,属于成体中较为幼稚的间充质细胞.
作者：李幼忱；刘杰；王德文；杨莉；高亚兵；马俊杰；马洪强；张康蓉 刊期： 2006年第06期
1 临床资料患者,男性,36岁.因发热、咽痛、腰部不适、全身肌肉酸痛6 d于2004年7月11日入院.病后患者体温38.5～39.8℃,无明显咳嗽、咳痰、心悸、气促、腹痛、腹泻及尿频、尿急、尿痛等.入院时查体结果:体温39.6℃,呼吸24次/min,心率110次/min,血压120/70 mmHg;急性热病容,意识清楚,精神较差,全身皮肤、黏膜未见皮疹和出血点,浅表淋巴结未触及肿大,颈软对称,咽部充血,双侧扁桃体Ⅰ度肿大,双肺呼吸音清,未闻及干湿性啰音,律齐,心音正常,未闻及杂音.
作者：赵秀萍；杨键 刊期： 2006年第06期
目的:探讨不同时间SARS死亡患者肺纤维化的病变经历过程及特点.方法:以6例SARS死亡患者(分别于发病后9,14,20,29,33,38 d死亡)肺标本为对象,应用常规HE染色、三联染色、苦味酸-天狼猩红-偏振光法和电镜等技术方法,观察SARS肺组织的病理变化和纤维化的病理过程以及胶原纤维、网状纤维和弹力纤维的变化特点、Ⅰ型与Ⅲ型胶原纤维分布规律及其超微结构变化.结果:SARS发病后于9～38 d死亡的6例患者肺脏出现程度不等的成纤维细胞变化和纤维组织增生,其中2例(33,38 d)发生典型的肺纤维化病变.肺间质组织和成纤维细胞变化可大致分为4种类型:成纤维细胞轻度活跃型,见于9,14 d死亡例;成纤维细胞增生型,见于20 d死亡例;纤维组织增生型,见于29 d死亡例;纤维化形成型,见于33,38 d死亡例.经三联染色和天狼猩红染色证实,纤维增生以胶原为主,其中Ⅰ型胶原增生较Ⅲ型胶原明显.结论:初步认为,肺脏4种类型病变本质上反映了SARS肺纤维化的发生发展过程,可能经历4个阶段,即:成纤维细胞轻度活跃期、成纤维细胞增生期、纤维组织增生期和纤维化形成期.SARS肺纤维化病变特点为:(1)纤维化出现较早(33 d);(2)纤维化病变呈进行性发展;(3)以Ⅰ型胶原纤维为主;(4)局灶性分布突出.
作者：曹惠君；王德文；李宁；赵景民；周本成；陆江阳；彭瑞云；李杨；高亚兵 刊期： 2006年第06期
目的:分析美国国家安全特需药相关领域研究的现状和发展趋势.方法:文献计量分析法.结果:共检出相关领域研发文献484篇.特殊环境医学文献多,占48%,特殊自然环境损伤防护以热损伤防护居多,应激医学防护占有相当比重,而且以战场应激为重;核化生防护占35%,以生、化防护为主;战创伤急救占13%,以抗感染为先;新概念武器医学防护只占4%,以激光损伤防护为主.结论:美国政府非常重视国家安全特需药物的研发,文献计量分析结果比较客观地反映了美国政府对国家安全特需药研发的支持情况,这些领域的研究状况与美国国家安全战略需求相符.
作者：刘超；张永祥；李哲；王玉民 刊期： 2006年第06期
在细胞凋亡的调控过程中,Bcl-2家族蛋白发挥了关键作用.BFL1/hA1是Bcl-2家族中分子结构、作用途径和转录调控研究得比较深入的一个分子.BFL1/hA1通过与Bcl-2家族促凋亡成员Bid的功能形式tBid的BH3结构域紧密结合,阻止了tBid与促凋亡蛋白Bak和Bax相互作用,从而阻止了细胞色素c向胞质中释放,抑制细胞凋亡的发生.佛波酯(phobol ester)和炎症细胞因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)等可以有效地诱导BFL1/hA1的表达.包括NF-κB在内的多种转录因子通过蛋白质和蛋白质及蛋白质和DNA相互作用形成一个大的转录调控复合物--增强体结合到BFL1/hA1基因的5′调控区,促进其转录水平的上调.
作者：卢克锋；张令强；贺福初 刊期： 2006年第06期
目的:采用RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术抑制HERG基因的表达,探讨HERG基因编码钾通道对人成神经细胞瘤细胞(SH-SY5Y)存活及增殖的影响.方法:构建发卡状RNA干扰质粒(shRNA-HERG)转染SH-SY5Y细胞,再分别使用半定量RT-PCR和Western印迹方法观察shRNA-HERG 对SH-SY5Y细胞中HERG基因mRNA及其编码蛋白表达的干扰效果.利用SH-SY5Y细胞的生长曲线和集落形成实验,观察转染shRNA-HERG质粒对SH-SY5Y细胞存活及增殖能力的影响.结果:转染shRNA-HERG干扰质粒后,SH-SY5Y细胞中HERG基因的mRNA水平及其编码的钾通道蛋白表达水平显著下降.与对照组相比,shRNA-HERG使SH-SY5Y细胞生长曲线明显下压,细胞倍增时间延长136.8%.集落形成实验结果显示,无论接种细胞数为50,100或200,shRNA-HERG组克隆形成率均显著下降,与shRNA-control组和未干扰组相比,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:所构建的shRNA-HERG表达质粒能有效抑制HERG基因编码钾通道蛋白的表达,明显抑制SH-SY5Y细胞的生长和增殖.
作者：赵杰；魏晓莉；马晓芸；郑建全 刊期： 2006年第06期
目的:克隆人α-半乳糖苷酶A(α-GalA)cDNA,并在毕赤酵母中表达重组的人α-GalA.方法:利用RT-PCR方法从人肝癌细胞中克隆人α-半乳糖苷酶A cDNA并构建到可用甲醇诱导的分泌型巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαA 中.将重组质粒导入毕赤酵母并用Zeion抗生素筛选转化细胞.在甲醇诱导后,利用SDS-PAGE 、Western 印迹及酶活测定方法在酵母上清中鉴定重组的人α-GalA.结果:获得人α-GalA cDNA,构建酵母表达质粒pHGCZɑA,将重组表达载体导入到酵母细胞,并在上清中检测到人α-GalA蛋白.结论:获得了人α-GalA cDNA及具有生物活性的重组人α-GalA,为临床应用于法布莱氏病的治疗奠定了基础..
作者：徐莉娟；高红伟；季守平；宫锋；章扬培 刊期： 2006年第06期
目的:利用酵母双杂交技术筛选与ERβ相互作用的蛋白,为进一步研究ERβ的功能奠定基础.方法:从乳腺cDNA文库中钓取ERβ-AF1 cDNA,构建诱饵蛋白载体pAS2-1-ERβ-AF1,利用酵母双杂交筛选技术,在乳腺cDNA文库中筛选与ERβ-AF1相互作用的蛋白.将含有pACT2-候选基因的酵母菌与含有pAS2-1-ERβ-AF1的酵母菌进行交配实验,利用LacZ报告基因检测ERβ-AF1与候选蛋白之间是否存在相互作用.然后将ERβ-AF1和候选蛋白分别构建到pGEX-KG和pET-28a上,并纯化GST-ERβ-AF1和His-候选蛋白融合蛋白,利用GST沉淀实验进一步验证ERβ-AF1和候选蛋白的体外相互作用.结果:所获取的候选蛋白为CTGF,是CCN 多肽家族成员.交配实验表明,CTGF与ERβ-AF1特异相互作用,而不与空载体或BRCT1对照相互作用.GST沉淀实验进一步验证,CTGF与ERβ、ERα均存在相互作用,但与CTGF同源性较高的NOV蛋白却不与ERβ、ERα结合.结论:CTGF和ERβ存在特异的相互作用.
作者：韩聚强；焦园园；丁丽华；袁斌；王晓辉；张浩；李杰之；吕秋军；叶棋浓 刊期： 2006年第06期
盐酸托烷司琼是一种5-羟色胺3(5-HT3)受体拮抗剂,可以抑制消化道及中枢5-HT3受体,能有效预防和治疗化疗药物引起的恶心、呕吐(chemotherapy-induced nausea and vomiting, CINV),毒副作用轻微.我院自2003年11月至2004年12月,参加了国家卫生部批准的国产盐酸托烷司琼注射液的多中心临床试验研究(批件号:2003L02116).其中包括在防治含顺铂及阿霉素化疗方案所致CINV方面的研究,现将其部分结果,即防治环磷酰胺(CTX)+阿霉素(ADM)+5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗方案(CAF方案)引起的食欲下降以及恶心、呕吐的研究结果报道如下.
作者：杨武威；徐建明；杨涛；刘亚利；王平辉；高亚杰；谭小新；陈正堂；周世文；段玉忠；苏炳华 刊期： 2006年第06期
目前临床应用的几乎所有抗抑郁剂,包括一线用药选择性5-HT重摄取抑制剂(selective serotonin reuptake inhibitors, SSRIs),都存在起效延迟(显著起效需2～4周)和有效率不高(约75%)的问题.研究表明,5-HT1A受体拮抗剂可增强SSRIs的抗抑郁活性并缩短起效时间,这为新型药物的研发展示了诱人的前景[1,2].帕罗西汀(paroxetine)是SSRIs类抗抑郁剂中的典型代表.吲哚洛尔(pindolol)为β受体阻断药,主要用于治疗高血压、心律失常等疾病.有研究表明,吲哚洛尔也具有5-HT1A受体拮抗效应[1～4].近年来,国外已有吲哚洛尔与SSRIs类抗抑郁药合用治疗抑郁症的临床研究报道,但研究结果并不一致且相互矛盾,可能与配伍比例及服药次数不同有关,从而限制了该方向的探索研究[3,4].
作者：张有志；李云峰；陈爽；赵楠；刘艳芹 刊期： 2006年第06期
目的:探讨LRP16基因促进MCF-7细胞增殖的分子生物学机制.方法:(1)将ERα模式启动子调控的荧光素酶报告子(3×ERE-Luc)与ERα,LRP16真核表达载体共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(2)将3×ERE-Luc,ERα真核表达载体、针对LRP16的小干扰RNA(LRP16-siRNA374,LRP16-siRNA668)或对照小干扰RNA(control-siRNA)共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(3)用Northern 印迹与Western 印迹方法检测抑制LRP16基因后MCF-7细胞中ERα下游靶基因对雌激素刺激的反应性.结果:(1)LRP16增强3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性,并呈现剂量依赖性,该效应依赖于雌激素对ERα的激活;(2)Northern 印迹结果显示,抑制LRP16表达限制了雌激素对ERα下游靶基因表达水平的刺激上调,包括E2F1、视黄酸受体(RARα)、c-fos和MTA3,但没有影响组织蛋白酶D(cathepsin D)的反应性;Western 印迹结果显示,抑制LRP16限制了雌激素对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的刺激.结论: (1)雌激素反应性靶基因LRP16反馈增强ERα介导的转录激活活性;(2)LRP16基因通过增强ERα介导的转录激活活性调节其下游靶基因的表达,主要通过改变cyclin D1的水平促进MCF-7细胞的增殖.
作者：臧丽；韩为东；母义明；伍志强；李琦；赵亚力；陆菊明；潘长玉 刊期： 2006年第06期
目的:从犬粪便病料中分离和鉴定犬细小病毒(canine parvovirus, CPV)抗原变异株CPV-2a和CPV-2b.方法:将疑似犬细小病毒感染的病犬粪便接种猫肾细胞,进行病毒分离、常规病毒学鉴定和分子生物学鉴定.结果:常规病毒学鉴定和分子生物学鉴定表明,分离得到5株犬细小病毒抗原变异株,其中2株为CPV-2a,3株为CPV-2b.结论:本研究分离的5株犬细小病毒为研究CPV变异及制备CPV特异性诊断试剂奠定基础.
作者：杨敬；刘宏伟；刘大伟；战大伟；范薇；隋丽华；孙岩松 刊期： 2006年第06期
目的:观察高压氧(HBO)预适应对高原颅脑损伤(TBI)大鼠行为学、局部脑血流(rCBF)、局部脑组织氧分压(PbtiO2)和脑含水量的影响,探讨高压氧预适应对高原颅脑损伤的神经保护作用.方法:SD大鼠42只随机分为平原组、高原组和高压氧预适应组,各组按Feeney自由落体撞击法造成TBI模型,采用Longa评分法进行神经功能缺损评分,采用Moor DRT4激光多普勒血流监测仪(LDF)和LICOX CMP组织氧分压监测仪分别监测伤区rCBF和PbtiO2变化.结果:伤后24 h高原组较平原组神经功能缺损评分上升,rCBF和PbtiO2下降,脑组织含水量增加,高压氧预适应组较高原组神经功能缺损评分下降(P＜0.05), rCBF和PbtiO2升高(P＜0.05和P＜0.05),脑组织含水量降低(P＜0.01).结论:高压氧预适应对高原颅脑损伤具有神经保护作用,可以使rCBF和PbtiO2升高,脑组织水肿程度减轻,神经功能改善.
作者：胡胜利；金清东；刘智；朱刚；林江凯；王宪荣；冯华 刊期： 2006年第06期
患者为女性,45岁,回家后因口渴误服过氧乙酸一口(具体量不详),服后自感口腔、咽部、食管及胃部烧灼感,咽部疼痛不能讲话,恶心,口吐白沫伴胸闷、憋气等,在家未予特殊处理,半小时后来院就诊.当时查体结果:体温37.0℃,心率78次/min,血压130/80 mmHg,心界不大.实验室检查结果:WBC 9.4×109/L,RBC 4.92×1012/L,HB 162 g/L,PLT 122×109/L,中性0.934,PO272.8 mmHg,PCO2 37.2 mmHg,pH 7.409,血钾3.8 mmol/L.临床诊断:急性过氧乙酸中毒.心电图特征(图1):心律为窦性,心率76次/min,可见Q-T间期延长致0.48 s.心电图诊断:(1)窦性心律;(2)Q-T间期延长.患者经抗感染、补液、利尿、保护胃黏膜、营养心肌、保肝及对症支持措施治疗后康复出院.
作者：刘亚红；杨青 刊期： 2006年第06期
复制型DNA疫苗是基于常规DNA疫苗和RNA复制子疫苗的基础上发展起来的一种新型疫苗,既具有稳定性好、安全性高的优点,又实现了外源基因的高效表达.本文就复制型DNA疫苗的构建、作用机制、优点以及新的研究进展作一简要综述.
作者：刘国栋；刘荷中；于继云；郭炳冉 刊期： 2006年第06期
目的:构建炭疽毒素保护性抗原第四结构域PA4基因的重组Semliki森林病毒(Semliki forest virus, SFV)复制子载体,并观察PA4抗原在重组SFV复制子载体中的表达.方法:将PA4基因克隆到基于RNA和DNA的SFV复制子表达载体中,获得的重组SFV复制子载体直接转染BHK21细胞,通过间接免疫荧光和Western印迹试验检测PA4在细胞中的表达;与辅助病毒载体共转染制备重组病毒颗粒,通过间接免疫荧光和Western印迹检测PA4在重组病毒颗粒感染细胞中的表达.结果与结论:成功地构建了基于RNA和DNA的PA4重组SFV复制子载体,并且在体外基于RNA和DNA的重组SFV复制子表达载体能够在细胞中有效地表达非分泌型和分泌型的PA4抗原,制备了具有感染能力并能表达PA4抗原的重组病毒颗粒,为进一步以SFV复制子作疫苗载体观察炭疽新型复制子疫苗的免疫原性奠定了基础.
作者：余云舟；孙志伟；俞炜源 刊期： 2006年第06期
目的:为进一步研究脑红蛋白(NGB)的生理功能并为基因治疗缺血性脑损伤提供有效的表达载体,应用细菌内同源重组方法分别构建含NGB及绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒表达载体,并对其进行鉴定.方法:用电转方法将腺病毒基因组质粒pAdEasy-1导入BJ5183细菌,制备BJ5183-pAdEasy-1细菌,再以后者作为电感受态细菌,与线性化质粒pShuttle-CMV-NGB进行同源重组,获得重组腺病毒质粒pAdEasy-NGB,转染293细胞,制备含脑红蛋白基因的重组腺病毒.结果:通过PCR、序列测定和Western印迹杂交鉴定,确认该重组腺病毒表达载体可正确表达脑红蛋白.结论:成功地构建了表达NGB基因的重组腺病毒载体,为深入开展脑红蛋白的功能研究以及用于缺血性脑损伤疾病的基因治疗奠定了基础.
作者：刘铖；高艳；秦树桐；文圣梅；王立生；张成岗 刊期： 2006年第06期
介绍了人体免疫细胞T细胞、B细胞以及树突状细胞(dendritic cell,DC)在急性和慢性乙肝病毒感染后的免疫发病机制及其发展规律中的作用研究进展,并阐述了它们在乙肝慢性化机制中的作用.
作者：李树龙；姜颖；贺福初 刊期： 2006年第06期
目的:建立梭菌属神经毒素基因快速鉴定和分型的PCR方法.方法:根据GenBank提供的肉毒毒素及破伤风毒素基因序列,综合应用多种生物学软件与在线分析平台,设计特异性及通用检测引物,对各型梭菌属毒素基因进行PCR扩增,验证扩增反应的特异性、通用性、灵敏度及重复性.结果与结论:设计了针对A,B,E,F型肉毒毒素、破伤风毒素基因轻链毒性活性区的5对特异引物,以及重链跨膜区和结合区的一对通用引物(BonAB-P01/P02,BonB-P01/P02,BonE-P01/P02,BonF-P01/P02,TET-P01/P02,TY-P01/P02).对各型神经毒素进行特异性扩增并在型间进行交叉实验,检测特异性良好,没有交叉反应;通用扩增结果显示均得到1 100 bp大小的条带.目前此检测方法灵敏度可达到(1～3)×103个菌.该检测方法特异性强,灵敏度高,可以用于梭菌属神经毒素基因的快速筛查与鉴定分型.
作者：杨慧盈；王慧；包士中；史晶；荫俊 刊期： 2006年第06期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
