牛东升；温博海；邱玲；陈梅玲；李青凤
目的:本研究以神经性毒剂降解产物为模板分子,在不同反应条件下合成了系列分子烙印聚合物(MIP)作为固相萃取(SPE)填料,以评价和研制一种神经性毒剂降解产物的选择性吸附剂,并研究其吸附机制和影响因素.方法:分别以VX的水解产物甲基膦酸乙酯(EMPA)、俄罗斯VX的水解产物甲基膦酸异丁酯(i-BuMPA)和梭曼的水解产物甲基膦酸片呐酯(PMPA)为模板分子合成MIP,并填充自制MIP-SPE小柱,气相色谱检测,考察功能单体、交联剂、溶剂、温度及MIP粒子的大小等因素对MIP吸附性能的影响.结果:实验表明功能单体和交联剂的种类和用量及模板分子的结构是影响MIP吸附性能的重要因素.以丙烯酰胺为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂合成的MIP适用于对神经性毒剂降解产物吸附行为的考察.以神经性毒剂降解产物为模板分子合成的MIP对各降解产物均呈现较强的吸附,其吸附率与降解产物的结构呈一定相关性.结论:合成的系列MIP可作为通用的神经性毒剂降解产物的选择性吸附剂,用于对样品中神经性毒剂降解产物的萃取.
作者：郭宇姝；胡绪英；谢剑炜 刊期： 2005年第01期
目的:探讨脓毒症时小鼠肠道相关淋巴组织的淋巴细胞促炎及抗炎细胞因子的表达与全身炎症反应的关系.方法:NIH小鼠盲肠结扎穿孔(CLP)造成脓毒症,观察致伤后24 h存活率,并分别在致伤后3、12 h分离小鼠肠上皮间质淋巴细胞(IEL)、Peyer结节淋巴细胞(PPL)及肠系膜淋巴结淋巴细胞(MLNL).采用RT-PCR定量检测促炎细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6和抗炎细胞因子IL-4在肠道相关淋巴组织中的表达.致伤后3、12 h分别抽取门静脉血进行细菌培养及鉴定.结果:致伤后24 h内,脓毒症组(CLP)存活率明显低于假手术组(SHAM)(1/10 vs 10/10),死亡高峰时间为致伤后14～16 h.促炎细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6基因表达在指定时间点内,CLP组明显高于SHAM组(P<0.01);抗炎细胞因子IL4基因表达致伤后3 h同SHAM组比较无明显差异(P>0.05),但在致伤后12 h却明显低于致伤后3 h及SHAM组(P<0.01).CLP组门静脉血培养可见肠源性G-菌生长并随致伤时间的延长细菌培养阳性率明显增加,而SHAM组在指定时间点内未见细菌生长.结论:脓毒症时小鼠肠道相关淋巴组织细胞可见促炎细胞因子基因的过度表达而抗炎细胞因子基因明显低表达,促炎/抗炎细胞因子表达失衡,肠道的免疫屏障受损,肠源性细菌及毒素大量移位,加重了全身的炎症反应,表明肠道在脓毒症时可能是参与全身炎症反应的重要器官.
作者：赵立；陈立军；尉承泽；曲楠；宋旭华；孟宪钧 刊期： 2005年第01期
烟酸是一种降血脂药物,它在体内转化为烟酰胺后,发挥药理作用,后者是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分,参与体内脂质代谢,组织呼吸的氧化过程和糖原分解的过程.烟酸还可降低辅酶A的利用;通过抑制密度蛋白的合成而影响胆固醇的合成,大剂量尚可降低血清胆固醇及甘油三酯的浓度,且有周围血管扩张作用.按照<药品注册管理办法>的规定,其缓释制剂属化学药品第5类.按照我国SFDA的建议,需要进行与已上市普通制剂比较的单次给药的动物药代动力学研究,并与已上市的普通制剂进行比较以考察洛伐他汀-烟酸缓释片是否具备缓释制剂的释药特点.国外已发表的分析方法[1]比较复杂,本文旨在建立一种专属性强、操作简便的测定比格犬血浆中烟酸含量的高效液相色谱检测方法.
作者：张亮；窦桂芳；单文治；孟志云；高文静；李军 刊期： 2005年第01期
目的:研究古典型鼠疫菌与假结核菌ATCC29833基因组间的差异,为进一步认识鼠疫菌的起源与进化奠定基础.方法:通过抑制消减杂交技术比较两种细菌基因组间的差异.结果:与已测序的3株鼠疫菌基因组进行同源性比较,发现了259个假结核菌基因组中存在的特异序列,与基因库进行同源性比较发现了10个假结核菌ATCC29833基因组中存在的新序列.结论:抑制消减杂交技术是一个简单而有效的比较近源微生物基因组之间差异的方法,鼠疫菌在进化过程中失去了大量的基因,假结核菌基因组之间也存在着一定的差别.
作者：王效义；秦珑；戴二黑；童宗中；韩延平；张建国；郭兆彪；宋亚军；周冬生；王津；王俊；杨瑞馥 刊期： 2005年第01期
具有核-壳结构的聚合物微容器不仅可以保护核内包封的物质,而且通过其壳层聚合物材料对环境酸碱度、离子强度、温度等条件的变化相应发生的分子链的可逆收缩与伸展,实现对核内物质的可控吸附和释放,在医学和生物学领域有着许多潜在的用途和优势.本文综述了近年来核-壳结构聚合物微容器的制备方法、智能化控制释放机制及其潜在应用研究进展.
作者：田丰；成国祥；陈世谦；刘长军 刊期： 2005年第01期
既往,高迁移率族蛋白B1被认为是典型的非组蛋白,参与核小体结构的构建及稳定,并参与基因转录及DNA重组、修复和复制.近些年的研究表明,在特定情况下,高迁移率族蛋白B1可释放于细胞外,发挥广泛的细胞学效应,同时发现,在几种重要疾病的发病过程中高迁移率族蛋白B1发挥了关键的作用,这些发现使其备受关注.本文拟就高迁移率族蛋白B1的基本特征及其广泛的生理作用与病理效应做一综述.
作者：赵敏；陆江阳；吕艺 刊期： 2005年第01期
芥子气中毒体内诊断生物标志物检测技术的研究一直是人们关注的课题,目前芥子气中毒的生物诊断标志物主要有芥子气-DNA加合物、芥子气-蛋白质加合物及芥子气的尿中代谢物(包括水解产物及谷胱甘肽结合物)等.本文综述了上述3类生物诊断标志物的检测方法,包括液质联用(LC-MS)、气质联用(GC-MS)、免疫荧光等技术.
作者：陶胜源；张淑珍；顾明松；谢剑炜 刊期： 2005年第01期
目的:构建能够表达胞壁结合型贝氏柯克斯体27 000外膜蛋白的重组卡介苗.方法:用PCR技术从卡介苗基因组扩增分枝杆菌19 000抗原的细胞壁结合区基因和从贝氏柯克斯体基因组扩增27 000外膜蛋白基因,将它们分别插入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭质粒(pSMT3)的XbaⅠ/BamHⅠ和BamHⅠ/HindⅢ位点.将重组的穿梭质粒转化大肠杆菌并从大肠杆菌提取重组穿梭质粒转化卡介苗. 结果:从含潮霉素的培养基筛选到具有该抗生素抗性的重组卡介苗菌落,用免疫印迹分析重组质粒转化的卡介苗,发现一约27 000的蛋白带与贝氏柯克斯体27 000重组蛋白免疫兔血清发生特异性反应;27 000重组蛋白免疫兔血清做间接免疫荧光检测重组卡介苗,结果为阳性.结论:重组卡介苗能表达贝氏柯克斯体27 000外膜蛋白,表达的27 000外膜蛋白存在于卡介苗菌体表面,卡介苗菌体表面的27 000抗原可能诱导抗Q热免疫应答.
作者：牛东升；温博海；邱玲；陈梅玲；李青凤 刊期： 2005年第01期
蛋白质芯片技术的应用使得对数以千计的蛋白质进行高通量、平行分析成为可能.蛋白质芯片是一种固定了保持天然活性的蛋白质微阵列,广义上,将能与蛋白质特异性结合的DNA和RNA、糖类、合成多肽,其他能够从复杂的混合物中特异性地捕获目的蛋白的小分子物质的微阵列也称为蛋白质芯片.蛋白质芯片可以检测感染性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤等患者体内的疾病标志分子,还能研究蛋白质的功能、与其他蛋白质之间的相互作用、蛋白表达谱等蛋白质组学研究所涵盖的内容.本文将重点阐述蛋白质芯片在功能蛋白质组学研究中的应用进展.
作者：杜宗敏；杨瑞馥 刊期： 2005年第01期
目的:建立大鼠头部暴露吸入染毒致急性肺损伤实验模型以便进行全氟异丁烯(perfluoroisobutylene,PFIB)毒理及防治药物研究.方法:用设计的大鼠头部暴露吸入PFIB染毒装置致动物中毒,测定动物中毒后肺灌流液(BALF)中总蛋白含量和肺湿干比变化,在染毒过程中同时用气相色谱连续监测PFIB浓度.结果:在大鼠头部暴露吸入染毒中,PFIB染毒浓度比较稳定.大鼠吸入PFIB 0.18 mg/L(8～10 min)致肺损伤实验模型比较明显,各项指标变化显著,中毒性肺水肿程度与PFIB浓时积(染毒浓度乘以时间,即CT值)呈正相关,动物中毒后12～24 h肺灌流液中总蛋白含量和肺湿干比显著升高.结论:建立了大鼠头部暴露动态吸入PFIB中毒致急性肺损伤实验模型,该模型比较稳定,可用于观察动物PFIB中毒性肺水肿程度,也可作为PFIB毒理及防治药物研究实验方法.大鼠PFIB中毒途径主要通过呼吸道吸入中毒,其吸入毒性至少比腹腔毒性大10倍.
作者：张宪成；丁日高；张天宏；黄春倩；孙晓红 刊期： 2005年第01期
目的:利用原核表达系统获得重组血管生成素(Ang)并研究其生物学活性.方法:构建高效融合表达载体pGEX-4T-Ang,诱导表达后利用亲和层析的方法纯化目的蛋白,经切割后获得非融合的重组人Ang,利用Western印迹检测表达产物的特异性,通过鸡胚尿囊膜血管增生实验检测重组蛋白的生物学功能.结果:表达的目的蛋白约占菌体总蛋白的20%,亲和层析纯化蛋白的纯度在90%,能够与Ang抗体产生特异性反应,并具有明显的促进血管新生的活性.结论:原核表达的重组Ang具有良好的生物学活性.
作者：邹民吉；徐东刚；马百坤；苏航；彭善云；王嘉玺 刊期： 2005年第01期
目的: 研究mCcd1新基因在小鼠胚胎发育过程中的基因表达,为其功能研究提供线索. 方法: 用地高辛标记mCcd1 RNA探针, 对E9～E11.5小鼠整体胚胎进行原位杂交,检测胚胎发育过程中基因的表达.结果: 在E9～E11.5都有不同程度的表达,E9和E10.5全身都表达,但表达量低.在E11.5的小鼠胚胎开始神经特异性表达,在中脑、眼原基、端脑、菱脑、间脑和脊髓观察到清晰的杂交信号.结论: mCcd1在胚胎发育过程中的表达有阶段性,在E9和E10.5广泛表达,而在E11.5该基因表现出神经系统特异性表达,这些提示它可能参与了神经系统的发育.
作者：景孝堂；吴燕；刘淑红；马子敏；刘毅；马鑫；范文红；范明 刊期： 2005年第01期
目的:了解河南省HIV耐药性毒株的流行状况及其进化规律.方法:以河南省南部某乡未经抗病毒治疗的艾滋病患者(45人)以及经抗病毒治疗3个月和6个月的部分患者(分别为118人和124人)为研究对象,通过逐一访谈了解一般情况、服药方案、服药依从性及保障措施、抗病毒治疗前后的临床表现等,同时采集14 ml EDTA抗凝静脉血,检测CD4/CD8细胞数、病毒载量及基因型耐药性.结果:抗病毒治疗3个月和6个月时,患者的病情好转率分别是55.1%和50.8%,CD4+T细胞数较未服药治疗的患者显著提高;耐药性毒株的流行率由未服药人群的13.9%快速上升到服药3个月的45.4%和服药6个月的62.7%.还发现耐药性突变位点和突变的频次显著增加,服药3个月时,耐药性突变位点集中在103位、106位和215位密码子;服药6个月时,突变的位点大幅度增加,突变率超过5%的位点有15个.病毒耐药谱的变化表现为,首先快速出现对非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)类药物(DLV、EFV和NVP)具有高度耐药性的毒株,在此基础上,陆续出现对核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)类药物(AZT、DDI、D4T、DDC)具有低度和潜在耐药性的毒株.由于服用AZT、DDI和NVP,导致对NVP的高度耐药性毒株和对AZT、DDI低度耐药性毒株的广泛流行,还出现了对DLV、EFV、D4T、3TC和FTC的严重交叉耐药性.服药依从性较差可能是导致耐药性毒株快速出现的主要原因.结论:河南省部分地区HIV耐药性毒株的流行已经达到较高的水平,需要尽快补充新的药物并改变治疗方案,同时应保持较好的服药依从性.
作者：李敬云；李宏；李韩平；王哲；杨坤；辛天义；鲍作义；刘思扬 刊期： 2005年第01期
目的:构建我国自行分离的SARS冠状病毒BJ01株基因组全长cDNA分子,为阐明SARS病毒致病的分子机制奠定基础.方法:采用分段克隆的方法对病毒全基因组进行分段扩增和克隆,然后将全基因组各cDNA片段分别进行体外连接获得全长cDNA分子,并对其接头序列进行PCR扩增和测序鉴定.结果与结论:获得了SARS病毒BJ01株基因组全长cDNA分子,对其接头处序列的测定结果表明,该全长cDNA分子为SARS病毒BJ01株的特异序列.
作者：赵卓；韩剑峰；陈水平；秦成峰；姜涛；于曼；何维明；秦鄂德 刊期： 2005年第01期
鞘磷脂衍生物神经酰胺(Cer)、鞘氨醇(Sp)及1-磷酸鞘氨醇(S1P)在调控细胞增殖、存活及凋亡中发挥着重要作用.鞘氨醇激酶(SPK1)是调控细胞内Cer、Sp、S1P代谢平衡的关键酶.SPK1磷酸化Sp生成S1P,S1P通过细胞内和细胞外作用机制调节细胞生长和凋亡.SPK1参与细胞因子的信号传递.高表达 SPK1抑制半胱天冬酶的裂解并上调Bcl-2基因的表达.本文综述了SPK的结构、调控及对细胞凋亡的调节作用.
作者：李庆芳；王立生 刊期： 2005年第01期
目的:研究S波段高功率微波(HPM)对家兔眼的损伤效应.方法:家兔在散瞳麻醉只暴露头部的条件下,分3个剂量水平,单次HPM远场平面波照射,于照后7个时间点,通过肉眼、眼底镜、裂隙灯观察,以及视网膜电图测定、组织病理学方法等研究HPM对家兔的角膜、晶状体、视网膜等眼重要部位的结构与功能的影响.结果:HPM照射后,角膜表面粗糙,一周内恢复;晶状体后皮质出现点状混浊斑,逐渐发展为片状;视网膜组织病理切片观察到弥漫性视网膜损伤,视乳头下方视敏感区损伤重,其他部位较轻,感光细胞的内外节层以及外核层均有不同程度的病理改变;视网膜电图b波幅值降低说明视网膜功能下降.结论:单次HPM照射兔眼(平均功率密度≥60 mW/cm2,照射时间≥30 min),可导致眼结构和功能的损伤,损伤程度呈现一定剂量相关性.
作者：周游；单清；苏镇涛；李子建；马萍；钱焕文 刊期： 2005年第01期
目的:观察密码子优化的SARS-CoV N基因的重组质粒,以及DNA初始免疫-蛋白加强免疫方式诱导小鼠的体液免疫应答水平,探讨提高SARS-CoV DNA免疫原性的途径.方法:SARS-CoV BJ01株N基因和密码子优化N基因分别通过从病毒RNA中RT-PCR扩增和人工合成获得,并克隆至pVAX1载体.将重组质粒DNA以100 μg/只的剂量肌肉注射免疫BALB/c小鼠,于第20天同剂量再免疫1次后,于第40天再用50 μg/只剂量的N蛋白加强免疫.每次免疫后于第10天采集血清,用ELISA检测血清中抗SARS-CoV N蛋白特异性抗体效价.同时设单纯重组质粒DNA免疫组和重组N蛋白免疫组作为对照.结果:密码子优化的N基因的重组质粒DNA免疫可诱导小鼠产生高水平体液免疫应答;而采用DNA初始免疫-N蛋白加强免疫的方式则可使抗体效价提高至少10倍.结论:密码子优化和DNA初始免疫-蛋白加强免疫这两种途径均可提高SARS-CoV N基因重组质粒DNA在小鼠中的体液免疫应答水平.
作者：姜涛；陈水平；于曼；赵慧；秦成峰；段鸿元；秦鄂德 刊期： 2005年第01期
本文综述了表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)的结构、性质、生理作用、合成部位及消化道内EGF的来源,文中突出地描述了EGF对实验动物上消化道黏膜的保护和对消化性溃疡的治疗作用.人源性EGF的运用已进入临床,预示着EGF将会在消化道溃疡的治疗中发挥重要作用.
作者：智庆文；张凤英；李仕贵；孙曼霁 刊期： 2005年第01期
20世纪末伴随着人类基因组计划的实施,相继产生了基因组学和蛋白质组学.基因组学和蛋白质组学知识的迅速拓展,对人类各方面都产生了深远影响,特别是给制药业以极大的支持.基因组学、蛋白质组学正逐步成为发现新的药物治疗靶标,鉴定先导化合物,论证药效,研究代谢规律及毒副作用的有效方法.这些研究方法将极大地提高药物发现和药物研发的速度和效率.本文就基因组学和蛋白质组学对新药研发带来的影响作简要分析.
作者：庞乐君；王松俊；刁天喜 刊期： 2005年第01期
目的:建立一种基于16S rDNA寡核苷酸芯片的检测和鉴定常见致病菌的技术. 方法:以16S rDNA为靶标,针对待检细菌设计合成一系列寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片.细菌DNA经通用引物扩增标记后,与芯片杂交,对杂交图谱进行分析归纳,得到一套种和属特异的检测模式.结果:以本室保存的33株菌(包括7个属15个种)进行初步检验,结果表明,种水平上的鉴定准确率为78.79%,21.21%可鉴定到属的水平.结论:该研究建立的16S rDNA寡核苷酸芯片技术可以稳定、特异地实现细菌的高通量鉴定,为进一步检测研究奠定了基础.
作者：郑桂丽；翟俊辉；唐学玺；王津；郭兆彪；杨瑞馥 刊期： 2005年第01期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
