孙志杰；王常勇；李青旺
目的:实现重组糖蛋白GPⅠbα vWF结合域在巴氏毕赤酵母中的表达.方法:PCR从重组质粒pcDNA3.1-GPⅠbα中扩增GPⅠbα vWF结合域基因,以pPIC9k为表达载体,构建包含该目的基因的酵母重组质粒,转染毕赤酵母GS115,以G418筛选抗性克隆,甲醇诱导表达,SDS-PAGE与点印迹鉴定表达产物.结果:获得编码正确的重组质粒pPIC9k-GP302,电转化GS115,以G418筛选到阳性克隆,诱导表达培养上清进行点印迹,结果表明表达蛋白能够与抗GPⅠbα单克隆抗体结合.结论:获得了表达重组蛋白质GPⅠbα vWF结合域的巴氏毕赤酵母菌株以及重组蛋白质GP302.
作者：王波；苏丽；张玉华；魏广智；王广义；王字玲 刊期： 2004年第02期
呼肠病毒对人类的致病性必须引起重视.本文从呼肠病毒与细胞凋亡、T淋巴细胞、干扰素以及与其他因素相互作用关系等方面,综述了该病毒的致病机制及诱导免疫作用的研究进展.
作者：朱虹；裴杰萍；端青 刊期： 2004年第02期
目的:观察晚期肿瘤患者体外静脉-静脉转流热灌注治疗(VV-PISH)期间血流动力学的变化.方法:18例晚期肿瘤患者,年龄29～73岁,ASAⅠ～Ⅱ级,术前检查心肺功能基本正常,无脑转移和大血管内癌栓形成.麻醉诱导后行桡动脉、右锁骨下静脉穿刺测压,通过右颈内静脉放置Swan-Ganz导管行心功能监测.双侧股静脉经皮穿刺插入股静脉插管,连接体外热疗机(TEMET SYSTEM 1000),经全身肝素化后行热灌注治疗.术中监测食管温度与直肠温度,分别记录加温前、食管温度39℃、40℃、41℃、42℃、42℃1h、42℃2h与降温期40℃、39℃、38℃时的血流动力学参数,对术中血压下降超过基础值的30%或心率＞130次/min者,分别给予去甲肾上腺素和艾司洛尔处理,并记录各时段的药物使用总量.结果:随着体温的升高,心率(HR)、心脏指数(CI)、中心静脉压(CVP)、平均肺动脉压(MPAP)、肺毛细血管楔压(PCWP)逐渐增加,HR,CI,MPAP,PCWP在41℃时与加温前比分别增加了55%,100%,18%和49%.当体温＞41℃,CVP和平均主动脉压(MAP)也开始出现非常显著的变化,此时HR常＞130次/min,MAP降低常超过基础值的30%,需间断静注艾司洛尔和去甲肾上腺素予以控制.去甲肾上腺素用量在42℃1 h～42℃2 h时段明显大于42℃～42℃1 h时段.降温达38℃后HR,CI,CVP,MAP,MPAP基本恢复正常,但PCWP仍高于其正常值的上限.结论:VV-PISH期间随着体温的升高可产生明显的血流动力学变化,当食管温度＞41℃时应使用药物加以调控.治疗平台期的后1h心血管系统对高温的耐受力显著下降.降温达38℃后PCWP仍然明显高于正常值,提示术前选择患者时应注重其循环系统的代偿能力,并加强术中、术后循环系统的监测与调控.
作者：刘友坦；黄绍农；陈志聪；钟飞焱；卢健芳；陈建颜；郑永辉 刊期： 2004年第02期
微囊化胰岛是从20世纪80年代发展起来的细胞移植治疗糖尿病的重要方法.海藻酸-聚赖氨酸-海藻酸微囊(APA)具有广阔的应用前景.本文综述了近年来微囊化胰岛的研究进展,重点分析了微囊材料的生物相容性,微囊的完整性,微囊的移植部位等影响APA 微囊治疗效果的因素,以期为完善微囊化胰岛的治疗效果提供线索.
作者：孙志杰；王常勇；李青旺 刊期： 2004年第02期
目的:在大肠杆菌系统中表达有活性的人β-防御素3(hBD3).方法:从pGEM-T-hBD3重组质粒PCR获得hBD3成熟肽编码区基因,插入pGEX-4T-1构建pGEX-4T-1-hBD3融合表达载体,转化E.coli DH5α宿主菌,进行IPTG诱导,诱导菌经超声裂解后获得包涵体,包涵体经溶解、变性、复性和纯化处理后获得GST-hBD3融合蛋白,再经凝血酶切割,获得纯化的重组hBD3(rhBD3).对rhBD3采用小抑菌浓度测定法测定其对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌活性.结果:以与GST融合表达的方式,运用pGEX-4T-1系统在大肠杆菌中表达了hBD3,融合蛋白以包涵体形式存在.融合蛋白经凝血酶处理使rhBD3释放出来,其对金黄色葡萄球菌的MIC为4 μg/ml;对大肠杆菌的MIC为8 μg/ml.结论:采用pGEX-4T-1融合表达系统在大肠杆菌中成功地表达了有活性的rhBD3.
作者：庹晓晔；徐明达；陈璧；柴家科；盛志勇 刊期： 2004年第02期
目的:了解外源性睾酮对去势雄兔睑结膜微循环的影响.方法:雄性新西兰白兔35只随机分成对照组A、单纯去势组B、低睾酮血症补充组C、生理睾酮血症补充组D和高睾酮血症补充组E共5组.除对照组外其余各组行去势手术,术后肌注十一酸睾酮(TU),剂量分别是3,6,12 mg/kg,形成低睾酮血症、生理水平睾酮血症和高睾酮血症,测定血清血脂和载脂蛋白、雌二醇 (E2 )、总睾酮(TT)水平和E2/TT比值的变化,观察正常对照组与不同剂量的外源性睾酮对高脂饮食去势雄兔睑结膜微循环的形态、流态、外周状态的影响.结果:单纯去势组、高睾酮血症补充组及低睾酮血症补充组微循环田氏积分法测得形态积分值、血流流态积分值及总积分值均高于正常对照组和生理睾酮血症补充组,差异有显著性(P＜0.01).结论:补充生理剂量的外源性睾酮可以通过对血脂代谢、血管内皮功能、凝血功能的改善减轻高脂饮食去势雄兔微循环障碍,从而改善动脉粥样硬化.
作者：卢文宁；朱平；武强 刊期： 2004年第02期
葡萄糖和其他还原糖与蛋白的非酶糖基化反应导致晚期糖基化终产物(advanced glycosylation end products, AGEs)以及由AGEs引发的蛋白交联物的形成,这是糖尿病和衰老过程中引起并发症的主要原因.动物模型和临床前实验表明AGEs抑制剂以及AGEs交联结构裂解剂,如ALT-711,可以从不同的阶段打断AGEs的形成,特别是AGEs裂解剂能够逆转或软化由AGEs造成的组织、器官以及血管的硬化,因而有希望成为一类新型治疗药物,用于治疗糖尿病和衰老过程中由于AGEs引发的各种并发症.
作者：崔浩；钟武；李松 刊期： 2004年第02期
目的:探讨中国正常人群中载脂蛋白E(ApoE)基因编码区及其转录调控区+113G/C多态的分布.方法:采用聚合酶链反应(PCR)和限制性片段长度多态(RFLP)方法,检测ApoE基因编码区及其转录调控区+113G/C多态各等位基因及基因型的频率分布.结果:正常人群中ApoE基因及转录调控区+113G/C多态基因型的分布符合Hardy-Weinberg平衡.按是否含ApoE ε4基因分层后,ε4与非ε4型人群等位基因和基因型频率分布差异均无显著意义(基因型χ2=1.819,P=0.178;等位基因χ2=4.952,P=0.085).按+113G/C多态各基因型分层后,各人群间ApoE基因型差异无统计学意义(G/G 与非G/G χ2=1.145,P=0.95;C/C与非 C/C χ2=3.997,P=0.55).但ε4等位基因与C/C基因型连锁分离的概率为0,ε4纯合基因型与+113G纯合基因型共分离的概率亦为0.结论:中国正常人群中ε4等位基因与+113C纯合基因型及ε4纯合基因型与+113G纯合基因型共分离相当罕见,这两种基因连锁分离时可能不利于中国人群的生存.
作者：赵晓萍；谢惠君；郑惠民；汤国梅；丁素菊；任大明 刊期： 2004年第02期
目的:通过电磁脉冲(EMP)辐照成年犬,长期动态观察角膜、晶状体及视网膜的病理变化,探讨EMP对视觉系统的影响.方法:高场强(2～12)×104 V/m的EMP、1～30次辐照实验犬,采用Feulgen,AgNOR和PI 染色方法,以激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和图像分析技术进行检测.结果:EMP辐射可使晶状体上皮细胞AgNOR和DNA含量下降,前皮质水肿,白内障发生.对EMP损伤敏感程度依次为:晶状体＞角膜＞视网膜.损伤具有剂量-效应相关性.结论:高场强EMP可引起犬晶状体前皮质混浊、白内障发生,损伤具有剂量-效应相关性.
作者：姜涛；王德文；张建；单清；高亚兵；何芳；王晓民；彭瑞云；谷庆阳 刊期： 2004年第02期
目的:研究用甲氧基聚乙二醇(methoxy polyethylene glycol, mPEG)修饰红细胞稀有血型抗原,为制备通用型血寻找可能的途径.方法:用3种具有不同端基的mPEG修饰红细胞,观察其对红细胞表面4种稀有血型抗原的修饰效果及对红细胞结构、功能和存活期的影响.结果:实验表明,在1.0 mmol/L时mPEG-BTC(苯并三唑碳酸酯端基PEG)就可以使红细胞表面Jka,Jkb,k和P1抗原性消失,而对红细胞形态、渗透脆性、自身溶血、乙酰胆碱酯酶、胆固醇、ATP、2,3-DPG含量、变形性以及存活期无影响,其他2种mPEG对红细胞修饰效果不好.结论:mPEG-BTC可有效遮蔽红细胞表面的稀有血型抗原,对其结构、功能及存活期无影响,本实验为mPEG包裹法制备通用型血提供了有力的实验证据.
作者：徐华；李立立；檀英霞；章扬培 刊期： 2004年第02期
目的:应用傅里叶变换红外光谱法分析大鼠乳鼠的原代培养心肌细胞受高功率微波辐照前后细胞结构的改变情况.方法:将培养的心肌细胞分为3组,分别用高功率微波辐照30,60,120 s,然后在傅里叶变换红外光谱仪的红外显微镜上测定每组细胞的红外光谱.结果与结论:发现大鼠乳鼠原代培养心肌细胞受高功率微波辐照后,细胞膜的结构发生了明显改变.傅里叶变换红外光谱分析技术可用于了解大鼠心肌细胞受微波辐照后细胞膜中蛋白质构象变化,尤其是测定细胞膜蛋白质二级结构的变化信息.
作者：宋占军；邓桦；王德文；于水；刘炳玉；郑永红；刘丽萍 刊期： 2004年第02期
在化疗后的肿瘤患者、器官移植者以及其他原因引起的免疫缺陷患者中，深部念珠菌感染已经成为一种重要的医院感染。念珠菌感染患者的预后比一般细菌感染者要差，所以，快速、早期诊断念珠菌感染和及时的抗念珠菌治疗十分重要。以PCR为核心的分子生物学方法是早期、敏感的诊断方法，可用于检测全血和血清标本。我们采用PCR法分别鉴定全血和血清标本中的念珠菌感染，探讨了使用血清标本鉴定念珠菌感染的可行性。
作者：黄媛；牟兆钦；陈建魁；谢湘峰；尹秀云 刊期： 2004年第02期
中枢多巴胺受体包括D1R和D2R两大类,又各有不同的亚型,在机体的体温调节中发挥重要作用,但多巴胺受体不是参与体温调节的惟一因素.本文对多巴胺受体激动剂和拮抗剂的作用特异性进行了重新评价,并总结讨论了两大类多巴胺受体在体温调节中的作用.D1R的活化能够介导体温的下降,而D2R是介导静息体温和稳定体温的主要因素.多巴胺受体之间以及与其他神经递质系统之间存在相互调节和协同作用,共同维持体温平衡.
作者：赵永岐；邢成；范明 刊期： 2004年第02期
目的:探讨慢性乙型肝炎患者血清学标志、HBV DNA载量及HBV前C/C变异与临床病变的关系.方法:随机选取慢性乙型肝炎患者246例,其中轻度102例、中度88例、重度56例,分别应用ELISA、实时PCR法检测其血清中的HBV免疫学标志及HBV DNA含量.同时对HBeAg阴性而HBV DNA含量高拷贝的3例轻度、6例中度及8例重度患者血清,应用巢式PCR方法分离前C/C区全长基因,纯化后克隆入T载体,鉴定后进行序列测定.结果:102例轻度、88例中度及56例重度患者中血清学标志HBsAg,HBeAg,抗-HBc阳性模式分别为53例(51.9%)、46例(52.3%)、33例(58.9%);HBsAg,抗-HBe,抗-HBc阳性模式分别为37例(36.3%)、32例(37.5%)、21例(37.5%);单独HBsAg阳性为8例(7.8%)、5例(5.6%)、1例(1.7%);其他模式分别为4例、5例、1例.HBV DNA含量平均值分别为10 E 5.53拷贝/ml、10 E 6.03拷贝/ml、10 E 6.58拷贝/ml.HBeAg阴性而HBV DNA含量＞10 E 6拷贝/ml的病例数分别为3例、6例、8例.统计分析表明,轻、中、重慢性乙肝患者间血清学标志及HBV DNA含量差异均不具统计学意义,而HBeAg阴性HBV DNA含量高拷贝的患者出现频率差异具有统计学意义.序列测定结果显示17例患者血清的HBV分离株的前C/C区均存在着不同程度的散布变异,其中A83(1 896 nt)变异率高有11例,其次T1862变异7例(与A83变异同时发生的为4例),A1899及T1858变异各1例,在2 150～2 203 nt存在较集中的变异区域,同时发现1例重度患者在2 083～2 203 nt出现缺失突变.结论:慢性乙型肝炎轻、中、重度患者间血清的标志物模式及HBV DNA含量无差异,血清学标志物测定不能代替HBV DNA的定量检测,尤其在出现HBeAg阴转的情况下,为确定病情应进行该项检测.慢性乙肝患者病变的发展与病毒变异可能存在着相关性.
作者：李伯安；戚扬；刘岩；陈昊；舒翠利；郑宇；李靖；高蓉；程云 刊期： 2004年第02期
目的:研究甾体皂苷化合物(化合物9714)对局灶性脑缺血大鼠的影响.方法:采用FeCl3局部损伤血管,诱发血栓形成,造成局灶性脑缺血模型,观察化合物9714对模型大鼠神经症状、脑梗塞范围、脑水肿以及皮质血管脑血流量的影响.结果:化合物9714 20,40 mg/kg组能明显减轻模型大鼠的神经症状及脑梗塞范围,增加模型大鼠的脑血流量;化合物9714 40mg/kg组能明显改善模型大鼠的患侧脑水肿程度,延长脑血流量下降50%所需时间.结论:化合物9714对血栓所致局灶性脑缺血性损伤具有明显的修复作用.
作者：邓云；马百平；徐秋萍；熊呈琦；张爱林；赵阳；刘振权 刊期： 2004年第02期
目的:探讨硒在体外诱导小鼠胚胎干细胞向胰岛细胞分化中的促进作用.方法:将ES-D3小鼠胚胎干细胞悬浮培养7 d形成拟胚体,然后进行贴壁培养,加入分化培养液1诱导6 d,然后用分化培养液2诱导6 d,后用含不同浓度的亚硒酸钠的培养基诱导20 d.对诱导后获得的胰岛素产生细胞团(IPCC)细胞进行双硫腙染色,对染色结果进行体视学分析.进行胰岛素刺激释放试验,用ELISA法测定胰岛素释放量.RT-PCR法检测胰腺细胞相关基因的表达.结果:亚硒酸钠浓度在0.03～810 μmol/L之间时,经过系列诱导后获得的IPCC其DTZ阳性率随着亚硒酸钠浓度的提高而显著升高.当亚硒酸钠浓度为270 μmol/L时DTZ阳性率上升至高点,随后开始缓慢下降;胰岛素分泌释放试验也证实270 μmol/L亚硒酸钠诱导的细胞释放的胰岛素多.RT-PCR结果进一步表明诱导获得的IPCC具有类胰岛组织的功能.结论:硒对胚胎干细胞向胰岛细胞分化具有促进作用.
作者：张妍；郭希民；王常勇；段翠密；张立岭 刊期： 2004年第02期
分析了电离辐射与人体组织相互作用的微观物理机制,确定了电离辐射微剂量学在研究辐射生物效应过程中的重要地位,指出径迹结构研究方法用于计算电离辐射粒子在人体组织中能量沉积时的可行性.
作者：郭勇；张文仲；骆亿生 刊期： 2004年第02期
目的:探讨肋骨和肺组织阻挡对高强度聚焦超声(high-intensity focused ultrasound,HIFU)破坏犬肝组织的影响.方法:20条实验犬随机平均分为对照组和手术组,手术组模拟行肋骨部分切除、肋膈角闭合术(partial costectomy and costophrenic angle closure, PCCAC);以0.8 MHz、焦距120 mm、定点点打、声功率220 W连续照射两组实验犬肝右叶90 s,对肝毁损灶进行面积和体积测定及病理学检查.结果:超声显示手术组犬肝形成(1.04±0.23)cm2回声增强区,对照组没有观察到回声增强区;肉眼下实验犬肝毁损灶体积(3.24±0.47)cm3,与对照组具有显著性差异(P＜0.05);对毁损灶的HE染色证实手术组犬肝毁损灶的坏死程度明显增强,范围增大.结论:肋骨和含气肺组织的遮挡对HIFU破坏犬肝组织具有明显的负影响,行PCCAC后可以有效提高HIFU在肝脏治疗靶区内的有效能量,减少衰减.
作者：秦海峰；黄乃祥；汪伟；罗明玉 刊期： 2004年第02期
目的:探讨PPARγ激活物吡格列酮和15脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)对体外肥大心肌细胞的影响.方法:新生大鼠的原代培养心肌细胞,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激建立体外肥大心肌细胞模型,并用不同浓度的吡格列酮和15d-PGJ2作用于上述细胞.采用RT-PCR法检测肥大心肌细胞特征性基因心钠肽(ANP)和脑钠肽(BNP)的mRNA表达,以3H-亮氨酸掺入实验检测心肌细胞蛋白合成速率,并分析心肌细胞表面积.结果:所建立的肥大心肌细胞模型呈现心肌细胞表面积、ANP和BNP的mRNA表达以及蛋白合成速率均为增加;而吡格列酮和15d-PGJ2可以逆转这些变化,并呈一定的剂量依赖性.结论:PPARγ激活物吡格列酮和15d-PGJ2对体外心肌细胞肥大有抑制作用,提示PPARγ途径介入了心肌肥大的发生发展过程.
作者：伍仕敏；周新；叶平；王琼；高月；刘永学 刊期： 2004年第02期
吗啡主要在肝脏与葡糖苷酸结合并产生两种代谢产物:吗啡-3-葡糖苷酸(M3G)和吗啡-6-葡糖苷酸(M6G).M6G能结合阿片受体,动物实验显示其镇痛作用比吗啡强,不良反应较轻微.M3G与阿片受体亲和力较低,没有镇痛作用,且动物实验表明M3G能对抗吗啡和M6G的镇痛作用,可能参与吗啡耐受的形成.本文综述了吗啡的代谢过程及其代谢产物的药理作用.
作者：黄宇；苏瑞斌 刊期： 2004年第02期
军事医学杂志
主管:军事医学科学院
主办：军事医学科学院
