合欢皂苷及苷元的分离鉴定

白细胞介素1受体拮抗剂对无镁诱导培养的大鼠发育中神经元惊厥性损伤的保护作用

目的:探讨IL-lra对体外发育不同阶段神经元惊厥性损伤的拮抗作用及可能机制.方法:以培养的发育中皮层神经元为研究对象,MTT代谢率观察神经元损伤,激光共聚焦显微镜扫描检测神经元[Ca2+]i,real-time定量RT-PCR方法测定NMDAR mRNA表达.结果:(1)IL-1ra预处理后再给无镁+IL-1ra处理,与同期单纯无镁组比较,6 d的神经元MI T代谢率无明显改变,而17 d的神经元显著增高.(2)IL-1ra预处理后,6 d、17 d的神经元[Ca2+]i峰值显著低于同期单纯无镁组,但拮抗[Ca2+]i增高的作用在6d的神经元较17d的神经元更明显.(3)IL-lra预处理后,6 d、17 d的神经元NR1 mRNA表达有所降低,且IL-1ra降低不同培养时间NR1 mRNA的作用差异无显著性;用IL-1ra后17d神经元的NR2A mRNA表达降低,与同期对照组比较差异无显著性,而6 d神经元NR2A mRNA表达仍高于同期对照组;IL-1ra对不同培养时间NR2B mRNA均无明显降低作用.结论:IL-1ra对神经元惊厥性损伤的保护作用有一定的年龄依赖性.这种保护作用可能通过减轻细胞内Ca2+超载及其它机制实现.

作者：姜玉武；曹海燕；王静敏；薄涛；吴希如 刊期： 2004年第04期

5-HT2C基因多态与共患学习困难的儿童注意缺陷多动障碍的相关性

目的:探讨共患与不共患学习困难(1earning disorder,LD)的儿童注意缺陷多动障碍(attention deficit hy-peractivi disorder,ADHD)与5-HT2c受体基因(HTR2C)C-759T和G-697C两种多态之间的关联.方法:检测189个共患LD的ADHD核心家系(ADHD+LD)和299个不共患LD的ADHD核心家系(ADHD-LD)的C-759T和G-697C两种多态,并对各等位基因和单体型进行传递不平衡检验(TDT).结果:在ADHD-LD家系中,-759C(x2=6.961,P=0.008)和-697G(x2=8.346,P=0.004)等位基因优先传递,就单体型而言,-759C/697G传递较多(x2=9.000,P=0.002 7),而-759T/-697C传递较少(x2=7.784,P=0.0053);但是,在ADHD+LD家系中未发现任何等位基因和单体型的传递不平衡现象.结论:ADHD共患LD与否在HTR2C基因C-759T和G-697C两种多态水平上有明显的遗传差别.HTR2C基因与ADHD-LD相关联.

作者：李君；王玉凤；周儒伦；张浩波；汪冰；杨莉 刊期： 2004年第04期

趋化素样因子2 mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达

目的:检测趋化素样因子2(chemokine-like factor 2,CKLF2)mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达.方法:实验组以手术缩窄大鼠腹主动脉致心肌肥厚,对照为假手术组;应用竞争PCR方法检测两组左心室CKLF2mRNA表达差异.结果:与假手术组相比,手术组术后早期(第17天)心肌中CKLF2mRNA表达增高,第45天时降到假手术组水平.结论:CKLF2mRNA在心肌肥厚早期表达增加.

作者：任鸿坤；洪涛；蒋捷；龚艳君；王志坚；卜定方；周爱儒 刊期： 2004年第04期

北京大学泌尿外科研究所加快走上国际学术大舞台的步伐

作者： 刊期： 2004年第04期

妊娠滋养细胞肿瘤中细胞的增殖与凋亡

妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic tumor,GTT)是一组以滋养细胞异型增生为特征的疾病,多于妊娠流产或正常产后发生,是妇科常见的疾病.GTT包括部分性葡萄胎(partial hydatidiform mole,PM)、完全性葡萄胎(complete hydatidiform mole,CM)、侵袭性葡萄胎(invasive hydatidiform mole,IM)、绒毛膜上皮癌(choriocarcinoma,CCA)和胎盘部位滋养细胞肿瘤(placenta site trophoblastic tumor,PSTT).

作者：胡建功；李民；宋立刚；金小平；赵晓明；高子芬 刊期： 2004年第04期

中国安阳地区人群IRF-3基因Codon427位点多态性与食管癌的关联性研究

目的:探讨河南省安阳地区人群干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF-3)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与食管癌发生的关联.方法:提取安阳地区152例食管癌患者及当地食管拉网普查个体191例外周血基因组DNA,用PCR方法扩增IRF-3基因含Codon 96、194、377、427这4个多态性位点的片段,并采用DNA直接测序法明确个体基因型,用x2检验计算多态性分布频率.结果:IRF-3基因Codon96、194、377处3个多态性位点在安阳人群中没有多态性,Codon 427位点在安阳正常人群与安阳食管癌患者两组间差异有显著性,0R=2.38(95%CI=1.15～4.95,P＜0.05).结论:IRF-3基因Codon 427的多态性增加食管癌发生的易感性,在增加食管癌的发病风险性方面,C等位基因约是G等位基因的2.38倍.

作者：张春风；曹邦伟；陆哲明；邢海平；崔建国；宁涛；柯杨 刊期： 2004年第04期

PDCD5蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变和宫颈癌中的表达

目的:了解凋亡基因PDCD5在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithe1ial neoplasia,CIN)和宫颈鳞癌中的表达,分析PDCD5在宫颈癌的发病中所起的作用.方法:采用免疫组织化学的方法,对93例宫颈组织(其中包括正常宫颈18例,CIN I级19例、CINⅡ级18例、CINⅢ级20例、宫颈癌18例)的组织切片进行PDCD5的免疫组化染色.采用人工阅片评分及计算机辅助染色强度判定2种方法判断宫颈组织PDCD5的染色阳性率及染色强度.采用单因素方差分析法判断PDCD5的表达与正常宫颈、CIN、宫颈鳞癌的相关性.结果:免疫组织化学的结果显示,在正常宫颈及CIN I级组织中,PDCD5表达多呈强阳性,CINⅡ级以上及宫颈癌组织表达呈递减趋势.正常宫颈组织、CIN各级及宫颈癌组织之间PDCD5的平均光密度值分别为0.322、0.366、0.287、0.252和0.206,各级病变之间差异均有显著性.在整体上说,PDCD5的表达在CIN I级较正常升高,在CINⅡ级以上随宫颈病变的进展呈下降趋势.结论:PDCD5可能在不同程度上参与了宫颈细胞从CIN至宫颈癌进程中的调控.

作者：刘朝晖；张岱；李克敏；廖秦平 刊期： 2004年第04期

北京大学第一医院皮肤科成功实施Mohs显微外科手术

作者： 刊期： 2004年第04期

发育中Wistar大鼠大脑皮层甲基化结合蛋白-2基因表达变化

目的:研究甲基化结合蛋白-2(methyl-CpG-binding protein 2,mecp2)基因在发育中正常Wistar大鼠大脑皮层表达水平的变化.方法:应用实时定量PCR(real-time PCR),Northern印迹杂交对mecp2基因在正常Wistar大鼠发育的不同阶段:胚胎第15天(E15)、第17天(E17)、第19天(E19)、出生当日(P0),生后第7天(P7)、生后第14天(P14)、生后第28天(P28),成年期大鼠mRNA的表达水平进行定性、定量分析;应用Western印迹杂交对MeCP2的表达水平进行半定量分析.结果:mecp2基因是在正常Wistar大鼠大脑皮层中表达的mRNA,约为10kb.从胚胎至成年期的发育过程中,mecp2基因mRNA的表达虽有波动,但差异无显著性.mecp2基因在正常Wistar大鼠大脑皮层中仅表达一种MeCP2,相对分子质量为75 000.在不同发育阶段其表达水平表现为,胚胎E15表达水平低,自胚胎E19始至成年期MeCP2表达水平较E15明显增高.生后第7日至成年期,各时间点间表达水平的变化差异没有显著性.结论:随着正常Wistar大鼠大脑皮层神经元的发育成熟,MeCP2的表达水平逐渐增高,说明MeCP2对神经元的成熟有重要作用,并可能与维持神经元的成熟状态有关.

作者：张玉稚；潘虹；王汉森；包新华；吴希如 刊期： 2004年第04期

硬膜外麻醉能保护术后患者的纤溶功能

目的:研究不同麻醉方式对应激反应、凝血和纤溶功能的影响.方法:实施全子宫切除的30例患者随机分为3组:连续硬膜外麻醉组(组E,n=10),硬膜外麻醉联合全身麻醉组(G+E,n=10)和单纯全麻组(G组,n=10).硬膜外麻醉的阻滞平面采用7.5g/L的布比卡因维持在T6到L3,术后行患者自控硬膜外镇痛(PCEA),全身麻醉采用常规方法完成,术后行患者自控性镇痛(PCA).分别在麻醉前(T0)、术毕(T1)和术后第24小时(T2)、第72小时(T3)采集血样测定儿茶酚胺浓度、凝血和纤溶参数.结果:E组和G+E组患者的去甲肾上腺素(NE)水平在围术期没有明显变化,但在G组患者却显著高于基线值(P<0.01)和其它两组患者(P<0.05).在T1时,3组患者的肾上腺素水平均明显高于T0并达到峰值(P<0.01),然后在T3恢复正常.3组患者的纤维蛋白原水平(FIB)在T1明显降低(P<0.01),但术后快速升高并在T3达到高(P<0.01).在T3时G+E组和G组患者的FIB水平明显高于E组患者(P关键词：麻醉硬膜外全身子宫切除术应激血液凝固纤维蛋白溶解

作者：王天龙；齐琰琴；杨拔贤；赵磊 刊期： 2004年第04期

乙酰胆碱对大鼠海马神经细胞内钙信号及细胞间通讯的影响

目的:探讨乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对大鼠海马细胞间通讯(gap junctional intercellular communication,GJIC)的影响.方法:原代混合培养海马细胞;利用激光共聚焦扫描显微镜观察Ach作用后细胞内游离钙的变化;用荧光染料的刮除负载法检测Ach作用后GJIC的变化.结果:Ach(0.05～0.10 mmol/L)可引起海马细胞内钙离子浓度变化.共聚焦扫描显微镜观察显示Ach作用后细胞内钙离子浓度升高,该变化大小依赖于Ach浓度,并能被东莨菪碱拮抗.荧光染料的刮除负载法检测发现细胞与0.05 mmol/L Ach共同孵育60h后GJIC明显增强.结论:Ach使细胞间由缝隙连接介导的细胞间通讯明显增强.

作者：王丽珺；胡白和；何其华；樊景禹 刊期： 2004年第04期

稀土离子La3+、Ce3+、Tb3+、Y3+对肌醇磷脂信号系统中蛋白激酶C的作用

以往的研究证明稀土离子(Ln)具有类似磷脂酶C(PLC)的作用[1,2],促进肌醇磷脂(PIP2)水解产生三磷酸肌醇(IP3)和甘油二酯(DAG).已知IP3和DAG分别激活肌醇磷脂信号系统中的IP3/Ca2+和DAG/蛋白激酶C(PKC)两条信号传递途径.DAG激活PKC转位,以磷酸化形式对许多蛋白质和酶类进行修饰,从而调节和控制一系列生理反应.本工作以大鼠肝脏、人红细胞以及K562细胞为研究对象,采用免疫组织化学方法、酶联免疫法(ELISA)以及激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)研究稀土离子La3+、Ce3+、Tb3+和Y3+对PKC的含量、分布和转位的影响.

作者：李霞；刘会雪；杨晓达；刘湘陶 刊期： 2004年第04期

7种吸收促进剂的鼻黏膜毒性及评价方法

目的:考察常用吸收促进剂的鼻黏膜毒性.方法:采用测定黏膜纤毛持续运动时间、测定黏膜纤毛输送速率和考察黏膜形态3种方法评价了7种[十二烷基硫酸钠(SDS),去氧胆酸钠(SDC),苄泽35(Brij35),吐温80(Tween 80),乙二胺四乙酸钠(EDTANa2),2-羟丙基-β-环糊精(2-Hp-β-CD),卵磷酯(lecithin)]常用的吸收促进剂的鼻黏膜毒性.结果:对纤毛持续运动时间的影响1%SDS>1%SDC>1%Brij35>5%Tween80>0.1%EDTA>5%HP-β-CD>1%lecithin.对纤毛输送速率的影响1%Brij35>1%SDC>1%SDS>0.1%EDTA>1%lecithin>5%Tween80>5%HP-β-CD.黏膜形态学考察毒性1%SDS≈1%SDC≈1%Brij35>5%Tween80>0.1%EDTA≈5%HP-β-CD≈1%lecithin.以上浓度均为质量分数.结论:3种评价鼻黏膜毒性方法之间具有很好的相关性.

作者：赵莹；张大卫；郑爱萍；于少云；武凤兰 刊期： 2004年第04期

血脑屏障体外实验模型的建立

目的:应用培养的CBA/J小鼠脑血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMVEC)构建血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的体外实验模型.方法:将BMVEC种植在明胶包被的24孔板细胞插入器的微孔滤膜上培养至汇合状态,通过4 h液面渗漏实验、扫描和透射电镜、血脑屏障形成前后膜两侧的电阻以及辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)的通透性和RMP-7对血脑屏障通透性的调控作用来证实BBB的形成.结果:BMVEC培养至汇合后,4 h液面渗漏实验成为阳性;扫描电镜显示细胞形成单层,透射电镜证实细胞间形成紧密连接;跨细胞电阻(the transendothelial electrical resistance,TEER)分别为汇合前和人脐静脉内皮细胞的3.2倍和7.7倍;对HRP的通透率分别为前对照组的13.4%和6.7%;RMP-7处理使HRP在BBB的通透率增加了2.7倍.结论:构建的BBB体外模型在形态学、电阻和通透性方面具备了BBB的基本特性,适用于中枢神经系统药物跨BBB能力的研究.

作者：谢英；叶丽亚；张小滨；侯新朴；娄晋宁 刊期： 2004年第04期

用MAPs制备新肿瘤相关基因1A6/DRIM的多克隆抗体

目的:获得1A6/DRIM的N端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析.方法:针对1A6/DRIM的N端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联,将此多聚抗原肽(mutiple antigenic peptides,MAPs)免疫新西兰大白兔,从免疫兔血清中获得1A6/DRIM的多克隆抗体.结果:用Western Blot技术证明了1A6/DRIM的N端抗体,与C端特异性单克隆抗体识别相同的1A6/DRIM基因表达的310 000蛋白条带,经过Western Blot和免疫荧光的方法初步证实1A6/DRIM在多种胃癌细胞系、乳腺癌细胞系以及肝癌细胞系中表达,免疫荧光显示1 A6/DRIM主要定位在细胞核内.结论:对于用谷胱苷肽巯基转移酶(Glutathion-S-transferase,GST)融合蛋白方法不能诱导表达的蛋白,可利用合成MAPs制备抗原的方法获得抗体.本研究用此方法制备的抗体特异性识别1A6/DRIM蛋白产物并证明该基因主要在多种肿瘤细胞的核内表达.

作者：黄莹莹；武晓楠；杜晓娟；宁涛；李宁；朱军；柯杨 刊期： 2004年第04期

白细胞介素-9在慢性阻塞性肺病发病中的作用

目的:探讨白细胞介素-9(IL-9)在慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)气道炎症中的作用.方法:分别对30例COPD稳定期患者(A组)、31例哮喘缓解期患者(B组)、15例正常对照者(C组)进行诱导痰检查,用夹心酶联免疫吸附法测定诱导痰上清液IL-9、IL-5、IL-8浓度;采用免疫组织化学SP法染色及图象分析技术测定IL-9阳性细胞百分数及含量.结果:A、B组IL-9浓度与C组差异有显著性.IL-9阳性细胞主要分布在巨噬细胞的胞浆内,A、B组IL-9阳性细胞百分数与C组差异有显著性(x2=20.821、19.908,P均<0.001).A组中性粒细胞百分数、IL-8水平明显高于B、C组;A组IL-9与巨噬细胞呈正相关(r=0.407,P=0.039).结论:IL-9在COPD患者较正常人明显增高,且与气道内的巨噬细胞、IL-8水平有关,可做为COPD气道炎症的又一检测指标.

作者：刘政；姚婉贞；陈燕；丁艳苓 刊期： 2004年第04期

钙通道阻滞剂维拉帕米对甲基苯丙胺所致大鼠小脑神经细胞凋亡的抑制作用

目的:研究维拉帕米对甲基苯丙胺(MA)导致神经细胞损伤的影响,探讨维拉帕米的保护机制.方法:采用MTT法,乳酸脱氢酶(LDH)法,观察MA的神经毒性作用.运用DNA电泳法、流式细胞仪法,观察MA致神经细胞凋亡的作用,并研究了维拉帕米的保护作用.结果:(1)MA(0.25～3.00mmol/L)作用48 h和60h,能增加大鼠小脑神经细胞系R2细胞LDH的漏出率,分别为48.2%～89.3%和62.5%～97.3%,与对照组相比,差异有显著性(P＜0.01),活细胞明显减少;应用流式细胞仪检测,在G1峰前出现亚二倍体峰,MA所致R2细胞凋亡呈一定的时间依赖性和剂量依赖性.DNA电泳图谱则表现出典型的梯状条带.(2)维拉帕米(0.5～5.0 μmol/L)减少MA导致的R2细胞LDH的漏出率,改善细胞形态,对MA诱导R2细胞凋亡有明显的抑制作用.结论:维拉帕米对MA诱导的神经细胞凋亡具有保护作用,MA神经毒性作用可能与L型电压依赖性钙通道有关.

作者：周军兰；梁建辉；李长龄 刊期： 2004年第04期

MBTTM托槽系统矫正病例支抗磨牙的三维位置变化

目的:研究经MBTTM托槽系统矫正病例的支抗牙--上颌第一磨牙的三维位置变化;比较一步滑动法和两步滑动法对治疗后牙齿的轴倾度、转矩度和扭转的影响;比较横腭杆(TPA)对矫正后上磨牙轴倾度、转矩度和扭转的影响.方法:对37例上颌后牙需大支抗的患者应用MBTTM托槽系统进行矫正,其中19例应用一步滑动法,18例应用两步滑动法.所有的病例均采用口外弓加强支抗,其中21例还使用了TPA;利用YM-2115三维测量仪和三维测量软件对患者治疗前后的上颌模型进行测量和重叠测算,得出牙齿矫正后空间位置变化.结果:矫正后上第一磨牙平均前移(4.5±1.1)mm,伸长(1.5±0.9)mm;近中舌向扭转(3±7).(一步滑动法和两步滑动法间差异无显著性;TPA组和非TPA组间差异有显著性);近中倾斜(6±4).(一步滑动法大于两步滑动法,差异有显著性);上磨牙平均发生(3±6).冠颊向转矩(一步、两步滑动法间差异无显著性).结论:应用MBTM托槽系统行拔牙矫治后,上磨牙出现冠颊向转矩、近中扭转和近中倾斜的趋势.矫治过程中,一步滑动法比两步滑动法更容易造成上磨牙的近中倾斜.TPA对抗磨牙扭转的作用较其它作用更为明显.

作者：张晓芸；张静；贾绮林；许天民 刊期： 2004年第04期

注意缺陷多动障碍儿童注意网络的特点

目的:探讨注意缺陷多动障碍儿童(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)注意网络的特点.方法:以25例符合DSM-Ⅳ诊断标准的ADHD门诊患儿,以及按年龄、性别和智商配对的25名正常儿童为研究对象;采用神经心理测试软件ANT(attentional networks test)对其觉醒、指向及执行控制三种注意网络的效率进行测试与比较.结果:(1)ADHD组的总体正确率(91.2±9.5)%明显低于正常对照组(97.0±2.9)%,差异有高度显著性(P=0.006).(2)ADHD组执行控制网络项效应量(118±38)ms明显高于对照组(93±28)ms,差异有显著性(P=0.012).(3)未发现ADHD组与正常对照组的觉醒和指向两个注意网络存在差异.结论:本研究提示ADHD儿童可能存在执行控制网络缺陷.

作者：汪冰；隋嫚秋；王玉；范津 刊期： 2004年第04期

胃肠B细胞淋巴瘤的增殖与凋亡及其与幽门螺杆菌的关系

目的:探讨胃肠B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma,BCL)的临床病理特点、不同组织学分型胃肠,BCL肿瘤细胞增殖与凋亡情况,以及BCL与幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)的关系.方法:用免疫组化方法进行肿瘤组织学分类、HP的表达、细胞增殖性及凋亡相关因子检测;末端转移酶生物素标记法[TdT(terminal deoxynucleotidyl transferase)dUTP nick end-labeling,TUNEL]检测细胞凋亡数.结果:57例胃肠BCL中,MALT淋巴瘤(mucosa-associated lymphoid tissue,MALT)15例(胃9例,肠6例),弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)42例(胃28例,肠14例).MALT和DLBCL的平均凋亡指数(apoptotic index,AI)分别为O.16%和2.54%,平均增殖指数(proliferation index,PI)分别为2.22%、8.71%,p53的阳性表达率分别为6.7%和35.7%,并且PI值(P=0.026)及p53(P=O.044)差异有显著性;而Bcl-2的阳性表达率分别为60.0%、35.7%,HP的阳性率分别为66.7%、23.8%,且差异有显著性(P=0.005).结论:HP与胃肠MALT淋巴瘤关系密切.DLBCL的细胞凋亡和增生活性较MALT高,MALT Bcl-2的高表达可能与其低凋亡率有关.p53促进凋亡,p53基因突变可能在MALT向DLBCL转化过程中起一定的作用.抗HP抗体免疫组化染色必要时可以用于胃肠BCL中的HP检测.

作者：尹洪芳；李挺；张莹 刊期： 2004年第04期