王晓霞；王兴；李自力
目的: 探讨中国人iNOS基因是否存在单核苷酸多态性及其在中国人中的频率.方法:DHPLC方法结合直接测序和PCR-RF LP技术,在有代表性的中国人中进行筛查.结果:在iNOS基因全部被测外显子中,有6 个外显子发现可疑双峰图型,可能存在杂合突变,对其测序后在iNOS基因第16外显子发现C→T突变 (称为Tsp多态性),使编码的氨基酸由丝氨酸 (serine,Ser)改变为亮氨酸 (leucine,Leu),设计PCR-RFLP方法并监测全部测序样本,PCR -RFLP与测序结果一致.在有代表性的43例中国人中,Ser和Leu等位基因频率分别为75.58% (65/86)和24.4 2% ( 21/86);三种基因型观察频率分别潍 Ser/Ser:62.79%; Ser/Leu:25.58%; Leu/Leu:1 1.63%, 与期望频率(分别为57.12%, 36.91%和5.96%)差异无显著性(P>0.05),说明符合H ardy -Weinberg遗传平衡定律.结论:中国人群中存在iNOS基因Ts p多态性,且频率较高.
作者：沈靖；王润田；王理伟；王朝曦；邢厚恂；王滨燕；郭春华；王心如；徐希平 刊期： 2001年第06期
目的:从兔的颞下颌关节骨关节病模型动物获得髁状突软骨细胞并行体外培养.方法:采用部分关节盘手术切除的方法制造颞下颌关节骨关节病模型,组织大体观察、超微结构观察和组化检测方法确定骨关节病的存在.在此基础上,通过机械分离、胰蛋白酶和胶原酶联合消化的方法从骨关节病髁状突软骨组织中获得软骨细胞,进行体外环境下的贴壁培养;通过软骨细胞特异性蛋白的免疫组化方法进行细胞鉴定.四甲基偶氮唑盐法比较病理模型细胞与正常细胞的增殖能力差异.结果:上述颞下颌关节骨关节病模型全面地模拟了骨关节病变关节软骨组织的特征;利用机械分离、胰蛋白酶胶原酶联合消化的方法成功地从骨关节病髁状突软骨组织中分离出软骨细胞并在体外贴壁条件下培养成活;应用特异性的Ⅱ型胶原多克隆抗体和聚合性糖胺多糖单克隆抗体对培养细胞进行免疫组化检测鉴定,均显示阳性.骨关节病髁状突软骨细胞的增殖能力高于正常细胞.结论:成功地建立了骨关节病髁状突软骨细胞的体外模型;骨关节病早期的髁状突软骨细胞表现出增殖活跃的特性.
作者：常嘉；马绪臣；孙开华；武登诚；焦岩涛 刊期： 2001年第06期
血管紧张素Ⅱ(AⅡ)在肾病综合征(NS)蛋白尿产生、水肿形成和肾小球硬化中发挥作用.为探讨肾局部肾素-血管紧张素系统(RAS)在NS中的作用,对阿霉素肾病大鼠(ADR)肾小球AⅡ受体进行测定.材料与方法:(1)雄性SD大鼠,随机分为对照组和肾病组,经尾静脉一次性注射盐酸阿霉素( 6 .5 mg*kg-1).部分动物结合实验前给予依那普利(10 mg·kg-1·d -1 ).(2)肾小球的分离纯化参照Fong氏的方法.(3)放射配基结合实验:反应体系-- 反应介质、肾小球、标记AⅡ和系列浓度的非标记AⅡ.反应体积300 μl.依次加入反应介质、肾小球、标记AⅡ和非标记AⅡ,在22 ℃振荡水浴中反应60 min,冰水终止反应.过滤分离结合的配基.自动γ计数仪测量放射性强度,所得数据作Scatchard分析,求出解离常数(Kd) 和大结合容量(Bmax).(4)放免法测定血浆AⅡ.(5)数据以[AKx- ±s表示,受体参数用配对比较t检验.
作者：樊志荣；卢义侠；李长龄 刊期： 2001年第06期
野生型p53能够诱导p21表达,引起多种肿瘤细胞的生长抑制 ,而突变p53则无此作用 [1].目前发现在多种肿瘤中p53和p21两种基因都存在着较为明显的改变,其在大肠癌中的表达情况及其与临床资料的关系尚无统一结果,我们采用免疫组织化学方法对1994～19 96年间在北京大学第一医院进行手术的50例大肠癌患者的手术切除标本进行了突变型p53和 p21蛋白表达检测,探讨他们与大肠癌临床病理资料和预后之间的关系.1 材料与方法选取1994～1996年我院收治的50例大肠癌病人石蜡标本,男30例,女20例,平均年龄为 57.52 岁,所有病例均有完整的临床资料、明确的病理诊断和3年的随访纪录.采用SP法进行石蜡切片免疫组化染色,p53抗体为小鼠IgG单抗(Dako公司产品),p21抗体为小鼠IgG单抗(Nococastra公司产品),SP试剂盒为美国ZYMED产品.实验参照SP试剂盒说明书进行.参考美国亚利桑那州癌症中心病理科及有关文献标准,按肿瘤着色数量多少将染色强度分为4级:不着色为阴性(-),0～25个细胞着色为弱阳性(+),26～50个细胞着色为阳性(++) ,着色细胞大于50个为强阳性(+++).统计学处理采用秩和检验、χ2检验、 Wilcoxon检验和Log-rank检验(spss/pc+软件).
作者：孟基拉；徐文怀；王智勇；鞠晓明 刊期： 2001年第06期
目的:观察下颌骨牵引成骨术后不同时期下牙槽神经 (inferior alveolar nerve, IAN)超微结构的改变,探讨牵引成骨术对神经组织结构的影响 .方法:恒河猴16只,10只行单侧牵引,6只行双侧牵引,共22侧,未手术侧神经作为对照.截骨安放牵引器时均保留下牙槽血管神经束的完整,5 d间歇期后,以每次0. 5 mm,每日2次的速度进行牵引,共15 d, 分别于牵引完成后0、2、4、6、12周时取双侧下颌颏神经,制作超薄切片,透射电镜下观察对照及牵引侧IAN超微结构的变化.结果: 牵引完成时可见牵引侧轴浆内细胞器增多,其结构及排列紊乱;髓鞘松散、脱落形成髓球;Schwann细胞内含大量髓鞘残片.推测这是由于牵引速度超过了神经再生的速度,造成牵引侧IAN的退行性变.牵引后2周神经病变减轻,4 周后神经出现修复性变化,Schwann细胞明显增生,形成新的髓鞘.至牵引后12周,牵引侧I AN超微结构基本恢复正常.结论:下颌骨牵引成骨术可对IAN产生一定的损伤性影响,但这是暂时、可逆的,由于神经自身的再生和修复功能,远期神经形态结构可恢复正常.
作者：王晓霞；王兴；李自力 刊期： 2001年第06期
硫喷妥钠和丙泊酚为静脉麻醉剂,临床麻醉中用于诱导及气管内插管,两种药物都会引起明显的血流动力学改变.以往研究证实儿茶酚胺在麻醉诱导及插管过程中具有明显变化,是引起血流动力学改变的一个因素.本文旨在比较丙泊酚与硫喷妥钠麻醉诱导气管内插管的血流动力学及儿茶酚胺改变.1 材料与方法择期手术病人22例,ASAⅠ～Ⅱ级,无其它系统疾病.随机分为2组:硫喷妥钠组(SP组)、丙泊酚组(PR组),每组11例.麻醉诱导采用等效剂量硫喷妥钠5 mg*kg-1(SP组)或丙泊酚2.5 mg*kg -1( PR组)静脉缓慢注射(1 min),意识消失后面罩吸氧,给予维库溴铵0.1 mg*kg-1 肌松以利插管,呼吸减弱后以面罩间歇正压通气.2 min后抽取血样,记录血流动力学数据. 以弯喉镜显露声门, 进行气管内插管,插管在10 s内完成.男性选用7.5～8.0 Fr、女性选用7.0～7.5 Fr 一次性气管内导管.插管后1 min抽取血样,记录血流动力学参数.经动脉抽取血样立即放入含有肝素的试管内,0 ℃保存.低温离心,取血浆置于低温冰箱内保存等待测定 .血浆儿茶酚胺浓度测定采用改良荧光法.
作者：范志毅；马琼；王庚 刊期： 2001年第06期
目的:研究准分子激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK )角膜瓣复位后的黏附机制.方法:实验组24只新西兰兔分为8组,每组3 只;对照组3只.左眼按近视-10. 00 D行LA SIK术.分别于术后即刻、24 h、1周、2周、1月、3月、6月及12月行裂隙灯显微镜检查, 并取角膜行光镜观察及免疫组织化学染色,检测细胞外基质(extracellular matrix, ECM)成分,包括I型胶原、Ⅲ型胶原、Ⅵ型胶原、纤维连接蛋白(cellular fibronection , cFN)、细胞黏合素(tenascin ,TN)、Ⅳ型胶原及层黏连蛋白(laminin, LN). 结果:裂隙灯显微镜检查术后角膜瓣贴附紧密;光镜观察角膜瓣交界面早期存在缝隙 ,晚期贴附紧密;免疫组织化学检测角膜瓣交界面术后早期有cFN的明显表达及Ⅲ型胶原、Ⅵ型胶原的表达,无I型胶原、Ⅳ型胶原、LN及TN的表达.结论:LASIK术后早期, 角膜瓣与其下的基质层之间的黏附由FN、Ⅵ型胶原及Ⅲ型胶原完成.
作者：齐虹；唐军民；朱秀安 刊期： 2001年第06期
目的:研究二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞DNA的损伤作用及细胞缝隙连接通讯的影响.方法:分别采用单细胞凝胶电泳技术和细胞划痕染料标记示踪技术检测二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞DNA的损伤作用及细胞缝隙连接通讯的影响.结果:浓度为0.01～1.0 mmol·L-1的二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞的DNA损伤作用较强,出现较多的DNA断裂.1.0 mmol·L-1的二甲胂酸还可明显抑制细胞缝隙连接通讯,提示二甲胂酸可能有促癌活性.结论: 二甲胂酸的遗传毒性较强,同时二甲胂酸可能有促癌活性.
作者：邓芙蓉；金昱；王慧；李新华；郭新彪 刊期： 2001年第06期
目的:探讨肾上腺髓质素(adrenom edullin, AdM)对同型半胱氨酸(homocysteine,H CY)诱导的气道平滑肌细胞增殖的影响和HCY对肺组织合成分泌AdM的影响.方法 :在培养的大鼠气道平滑肌细胞上,测定3H-TdR参入;用放免法测定肺组织和孵育液中AdM含量.结果: 0.5 mmol·L-1 HCY刺激气道平滑肌细胞(airwa y smooth muscle cells,ASMC)增殖 ,AdM(10-9,10-8,10-7mol·L -1)呈浓度依赖方式抑制 HCY 诱导的ASMC增殖;HCY(0.1,0.5,1.0 mmol·L-1)以浓度依赖方式诱导肺组织合成和分泌AdM,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)可抑制其作用.结论 :在肺HCY和AdM呈相互作用关系,HCY调节AdM的生成,而AdM影响HCY的生物学效应.
作者：王建丽；赵鸣武；王晓红；孙永昌；唐朝枢 刊期： 2001年第06期
目的:分析正常人下颌骨各部位宽度的生长发育特点,探讨其发育规律.方法:对2 6名正常青少年每年同期摄取头颅定位后前位片,连续6年,并进行X线头影测量分析.结果:(1)相对于18岁,13岁时下颌骨各部位宽度的发育量均完成93%以上;除外髁突内侧点、髁突颈点间距,女性发育完成量大于男性.(2)男女性下颌基骨宽度在15～16岁均有一生长高峰;女性13～17岁下颌角点间距增加,17岁后稳定,角前切迹点间距生长量不多;男性下颌基骨宽度的发育可持续到青春迸发期后.(3)髁状突间宽度,女性生长至17岁即稳定,男性仍有生长,集中表现在髁状突外上方间宽度.喙突间距女性16岁后稳定;男性晚于女性 1年进入稳定期.结论:上述结果可为正畸临床制定矫治计划提供参考.
作者：周文莲；林久祥 刊期： 2001年第06期
贲门癌术后吻合口复发再手术是一较复杂的过程,尤其是手术入路及消化道重建器官的选择。1995年10月～2000年11月本院治疗此类患者7例。现报道如下。临床资料:男6例,女1例,年龄34～66岁,平均55.3岁。病理诊断均为腺癌,经腹行食管 -胃部分切除,食管-胃吻合术。复发间隔6个月～7年,1年以内者3例,2年以上者4例。1例上切缘病理癌残留。6例再次吞咽不适或梗阻,1例上消化道出血。X线吻合口狭窄,钡剂受阻,吻合口部可见充盈缺损,黏膜破坏。病理均证实为复发癌。腹部B超及CT均无其他脏器转移。全麻下行再手术,经腹2例,经胸3例,胸腹联合2例;行吻合口部食管-残胃部分切除,食管- 胃弓下吻合术5例。2例病变广泛未能切除,行剖腹探查1例,空肠造瘘术1 例。术后切口感染 1例,脓胸1例。随访至今,未切除复发癌者2例分别于术后1月和2月死亡。余生存,时间短者已6月。
作者：陈克能；张为民；张力建；叶国经 刊期： 2001年第06期
目的:应用反义寡核苷酸技术,对培养的人肾小球系膜细胞(glomerular mesan gial cells, GMC)进行内皮素-1(endothelin,ET-1)基因表达的抑制试验,探讨ET - 1基因表达与GMC增殖效应的关系.方法:以阳离子脂质体lipofectin介导的基因转移方法, 将前内皮素原ppET-1的反义寡聚脱氧核苷酸(a ntisense oligodeoxynucleotide,As-ODN ) 及其对照序列正义寡聚脱氧核苷酸(sense oli godeoxynucleotide,Se-ODN)、错配寡聚脱氧核苷酸(mismatch oligodeoxynucleotide,Mi s-ODN) 分别导入GMC. 通过生物素标记的 As-ODN显色反应,观察寡聚脱氧核苷酸的转移效果;用半定量反转录聚合酶链反应(rever s e transcription-polymerase chain reacti on,RT-PCR)检测寡核苷酸链对GMC的ppET- 1 m RNA表达的影响;用放射免疫分析(radio im munoassay,RIA)观察寡核苷酸链对GMC的ET- 1 蛋白分泌的作用;用氮蓝四唑盐(MTT)试验分析寡核苷酸链对GMC增殖的效应.结果:寡核苷酸链被转移入GMC.10 nmol*L-1 As-ODN抑制了GMC的ppET-1 mRNA表达、ET-1蛋白合成和细胞增殖 (各组P<0 .05).结论:特异抑制GMC的ppET-1基因表达能够抑制其增殖,证实GMC 产生的ET-1能刺激GMC自身的增殖,ET-1是GMC自分泌炎症介质之一.
作者：李美花；谌贻璞；张志文 刊期： 2001年第06期
介绍分类与回归树(classification and r egression trees, CART)的发展历史、结构、组成和特点.CART包括分类树和回归树两部分,分类树的结果变量是分类变量,回归树的结果变量是连续变量.CART是一种树型结构,由树结和连线组成, 在末端的树结又称为终止结.CART可分析同质性较差的数据,采用替代变量的方法解决缺失数据问题,不要求数据的分布,可同时利用各种类型的数据.CART的树型结构与临床思维十分接近,有利于CART在临床研究中的应用. CART可用于临床研究数据分析,其应用范围有待于不断扩展.
作者：赵一鸣 刊期： 2001年第06期
目的:研究血小板源生长因子(platelet-der i ved growth factor, PDGF)受体介导的信号转导通路在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHR)主动脉中的动态变化及其意义.方法:提取大鼠主动脉膜蛋白和胞浆蛋白,用免疫印迹法检测PDGF受体β亚单位,细胞外信号调节激酶(e xtracellular signal-regulated kinase 1/2, ERK 1/ 2)和磷酸化ERK 1/2的变化.结果:4周龄SHR动脉血压无明显变化,12周龄时血压稳定增高. 主动脉PDGF受体β亚单位蛋白的表达在SHR和WKY(Wistar-Kyoto)大鼠都随着年龄的增加而上调,但4周龄和1 2周龄SHR中该受体的表达均明显高于同龄WKY组(分别为28.0%和28.6%, P<0.05);SH R 主动脉中ERK 1/2的含量较同龄WKY组明显增加(P<0.05);12周龄SHR主动脉磷酸化ERK 1/2 的含量亦较同龄WKY组增加28.4%(P<0.05).结论:SHR大鼠主动脉PDG F受体β亚单位和ERK 1/2的上调先于高血压的发生,并在高血压期维持较高水平 ,提示PDGF介导的信号转导系统的活化在自发性高血压的发生和发展中起重要作用.
作者：邢东琦；白桦；孙银平；刘洁；宋宗恩；吴立玲 刊期： 2001年第06期
近年报道瘢痕皮下组织氧分压只是正常组织的27%,低氧分压是由于缺氧造成胶原蛋白沉积导致的血管阻塞而加重缺氧和缺血现象使瘢痕疙瘩局部处于低氧、低血供、低营养状态[1,2]. 本实验旨在研究低营养状态下瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞的增殖及生物合成功能.1 材料与方法低血清成纤维细胞培养方法:将体外培养5代以内的瘢痕疙瘩、增生性瘢痕及正常皮肤成纤维细胞(fibroblast,FB)各6例分别置于含0.5%(体积分数)胎牛血清的DMEM培养液(低血清培养)中培养7 d,取材.以含10% (体积分数)胎牛血清的DMEM培养液为对照组.增殖细胞核内抗原(proliferating cell nuclear antigen, PC NA) 、p16、Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的检测方法:以上各组标本经100 g*L-1多聚甲醛(pH 7.2～ 7.5)固定10 min后,利用免疫组织化学方法(SP法,试剂盒由北京中山生物技术有限公司购置)检测增殖细胞核内抗原PCNA、p16、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的含量.
作者：陈东明；鲍卫汉；徐少骏；王琦 刊期： 2001年第06期
目的:观察中枢白细胞介素-1(interleukin-1, IL -1)受体在足击镇痛及条件恐惧应激刺激诱发镇痛中的作用.方法:本实验用脑室注射(intracerebroventri cular injection, icv)生理盐水(normal saline, NS)或白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 rec ep tor antagonist, IL-1ra)并用热辐射甩尾测痛法检查IL-1ra对足击镇痛及条件恐惧应激刺激诱发镇痛效应的影响;结果:(1) icv NS的大鼠,足击引起痛阈上升; 而icv IL-1ra 30 m in后足击不引起明显的痛阈上升, 但icv IL-1ra 90 min后足击仍出现明显的痛阈上升. ( 2 ) icv NS的大鼠,条件恐惧应激刺激也引起明显的痛阈上升,且该条件恐惧应激刺激诱发的镇痛效应能被icv IL-1ra明显衰减.(3) icv IL-1ra本身对基础痛阈无明显影响.结论:中枢IL-1受体参与足击及条件恐惧应激刺激诱发的镇痛效应.
作者：邹长江；魏明芬；刘卉 刊期： 2001年第06期
肿瘤细胞在组织中穿越和迁移时,会遇到大量的细胞外基质 (extracellular matrix, ECM) 分子与上皮基底膜.纤维连接蛋白(fibronectin, FN)是一种黏附ECM分子,有黏附细胞和扩散介质的作用,在生长发育、创伤愈合和肿瘤形成方面有重要作用[1].FN也通过其趋化性和趋触性刺激细胞运动[2].FN以可溶和不可溶两种形式存在.可溶性FN以高浓度出现在浆液和其他体液及细胞培养液.不可溶性FN充当介质介导细胞的附着.本研究将探索PTF分泌的可溶性因子在鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma, SCC)迁移和浸润中的作用,并确定FN是否是瘤旁纤维细胞(peribumor fibroblast, PTF)条件培养液(conditioned medium, CM)中的趋化因子.
作者：刘宏伟；陈炳良；Ramos Daniel 刊期： 2001年第06期
T细胞的活化需要共刺激信号,其中抗原呈递细胞 (antigen pres enting cell, APC)表面的B7分子和T细胞表面的CD2 8分子的结合是初始T细胞活化所必需的。但T细胞一经活化后,开始表达抑制性受体CTLA-4 , 后者可以与CD28竞争结合B7分子,并显示比CD28更高的亲和力,而阻断第二信号的传导。将其胞外段与免疫球蛋白的Fc段融合构建的融合蛋白CTLA-4Ig,可以有效地阻止T细胞的活化 ,并已被广泛地应用于诱导特异性免疫耐受的形成。但CTLA-4Ig的阻断效应可以被临床器官移植常用的环孢霉素A(cyclos porin A, CsA)所拮抗,因此在临床应用中存在一定的局限性。 FasL是TNF家族成员之一,通常以可溶性三聚体的形式存在。它与T细胞上的Fas(CD95)受体结合可以引起活化诱导的细胞死亡(activation-induced cell death, ACID)。研究报道, FasL介导的ACID在防止器官移植排斥中也具有肯定的效果。但当应用可溶性FasL 诱导特异性细胞凋亡时,常易引起较严重的全身毒、副作用。
作者：金永柱；谢蜀生 刊期： 2001年第06期
目的:观察高同型半胱氨酸血症(hyperhomocyst e inemia)引起的动脉硬化的特点,及补充叶酸、维生素B12对动脉硬化病变的作用. 方法:制备家兔高同型半胱氨酸血症、高同型半胱氨酸血症合并高脂血症的动物模型,并补充叶酸、维生素B12,以正常家兔为对照,分别测定各组同型半胱氨酸(homocysteine, HCY)、叶酸、维生素B12及血脂水平,观察主动脉病理变化.结果:6～8周后发现给予蛋氨酸与同时给蛋氨酸和胆固醇的动物,血浆Hcy均显著升高[分别为(41.3±19.9)对(19.6±5.1) μmol·L-1,P<0.05;(31.6±5.7)对(18.1±2.6) μmol·L -1,P <0.01],后者血浆胆固醇及甘油三脂水平亦明显升高.而同时补充叶酸、维生素B12的动物,Hcy水平未见变化,叶酸、维生素B12升高且差异有显著性[分别为(30.3± 12.0 )对(13.0±5.5) μg·L-1,(53.1±20.1)对(31.5±6.5) μg·L-1 ,P<0.05 ].主动脉切片发现蛋氨酸组及蛋氨酸加胆固醇组血管平滑肌细胞增生,内膜面积增加,蛋氨酸加胆固醇组还见到脂质沉积、斑块形成.蛋氨酸+叶酸+维生素B12组血管内膜正常,与对照组相比差异无显著性.结论: 高同型半胱氨酸血症可引起血管内膜增厚、平滑肌细胞增生等早期动脉硬化改变,叶酸、维生素B12对同型半胱氨酸引起的血管病变可能有预防作用.
作者：孟磊；高炜；赵春玉；薛林 刊期： 2001年第06期
目的:探讨X、Y、18 三色探针同时检测植入前人胚,以鉴定其性别及倍体的可行性 .方法:对体外受精(in vitro fertilizatio n, IVF)所获18个剩余胚104个卵裂球,采用X、Y、18三色着丝粒探针进行FISH分析. 结果:FISH分析成功率97.5%(77/79), 9例(9/11,81.9%)单精受精胚胎为二倍体, 性染色体嵌合未影响胚胎性别的诊断, 7例双精受精胚胎呈多种倍体异常. 结论: 采用X 、Y、18三色探针FISH法同时检测植入前人胚准确、有效,每胚分析2 个卵裂球具有代表性.
作者：姚桂梅；陈贵安；刘平 刊期： 2001年第06期
北京大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：北京大学
