刘睿;李亚荣
目的:观察茯苓多糖灌胃对甲醛诱导小鼠体内DNA加合物含量的影响,探讨茯苓多糖的抗遗传毒性效应.方法:40只成年昆明种雄性小鼠随机分成阳性对照组(甲醛染毒)、茯苓多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只.阳性对照组灌注0.4 ml浓度为0.5 g/L的甲醛溶液,茯苓多糖组小鼠除了灌胃0.2 ml浓度为1.0 g/L的甲醛溶液外,还灌胃0.2 ml不同浓度的茯苓多糖溶液(低剂量组2.0 g/L,中剂量组4.0 g/L和高剂量组8.0 g/L).1周后摘眼球取血,用ELISA法测定各组小鼠血清DNA加合物含量.结果:4组间DNA加合物浓度差异有统计学意义(P<0.01),茯苓多糖中剂量组和高剂量组DNA加合物浓度均低于阳性对照组(P<0.01).茯苓多糖剂量越高,DNA加合物浓度越低,呈现明显的剂量-效应关系(rs=-0.869,P<0.01).结论:茯苓多糖小鼠灌胃可抑制DNA加合物的形成,且存在剂量-效应关系,作用随茯苓多糖剂量的提高而增强.
作者:张志军;黄雪梅;胡昌军 刊期: 2018年第12期
目的:探讨IL-17在大鼠肾移植急性排斥反应过程中的表达特点及其意义.方法:将大鼠随机分为正常对照组、同系基因对照组、同种异体移植组、免疫抑制剂干预组,并建立肾移植急性排斥反应模型,用RT-PCR及免疫组织化学方法检测急性排斥时IL-17在肾组织中的表达.结果:同种异体移植组在移植后第3天、5天和7天,移植肾IL-17均明显升高,与其他组相比,均有统计学意义(P<0.05),其中以第5天为高,差异具有统计学有意义(P<0.05).结论:IL-17参与了大鼠肾移植急性排斥反应的发生,并为早期事件,IL-17检测可能为人类肾移植早期急性排斥反应的诊断和治疗提供理论依据.
作者:滕昊林;于金宇;刘念;赵军;高宝山;薛立娟 刊期: 2018年第12期
目的:探讨长链非编码PCA3靶向miR-194的表达通过ERK信号通路对前列腺癌细胞增殖和凋亡的作用及机制.方法:qPCR检测PCA3和miR-194在不同前列腺癌细胞中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测PCA3与miR-194的相互作用;克隆形成实验和凋亡实验检测抑制PCA3后前列腺细胞增殖能力和凋亡行为的变化,及过表达miR-194后前列腺细胞增殖能力和凋亡行为的变化;Western blot检测抑制PCA3后ERK信号通路蛋白的表达水平及过表达miR-194后ERK信号通路蛋白的表达水平变化.裸鼠体内成瘤试验检测PCA3对前列腺癌细胞成瘤能力的影响.结果:与其他前列腺癌细胞相比,LNCaP细胞中PCA3的表达水平高,miR-194的表达水平较低;双荧光素酶试验证实PCA3可以调控miR-194的表达及活性,抑制PCA3的表达可以减弱前列腺癌细胞的增殖能力,加强其凋亡行为;过表达miR-194后前列腺癌细胞的增殖能力和凋亡行为得到一定的恢复;抑制PCA3的表达可以下调ERK信号通路的蛋白表达,抑制ERK信号通路的激活;同时过表达miR-194后可以逆转PCA3对ERK信号通路的抑制作用.抑制PCA3的表达后可以有效减弱前列腺癌细胞的体内成瘤能力.结论:PCA3可以靶向调节miR-194通过ERK信号通路调控前列腺癌细胞的增殖和凋亡行为.
作者:韩兴涛;杨凌博;魏澎涛;李小辉;孙建涛;杨锦建 刊期: 2018年第12期
目的:探究α-1抗胰蛋白酶在A型主动脉夹层发病和治疗中的作用与机制.方法:取2012年4月~2016年4月在我院行手术治疗的Stanford A型主动脉夹层患者8例、升主动脉瘤患者8例、正常组8例的资料信息,比较各组血管组织中AAT的蛋白和基因表达水平同时检测血清中AAT含量的变化.使用人原代血管内皮细胞验证AAT对于血管内皮细胞在胰酶刺激下发生细胞凋亡的保护作用,采用皮下缓释angⅡ和血管注射胰酶构建比格犬血管夹层模型,给予AAT治疗后检测Caspase家族蛋白及基因的表达水平.结果:使用RT-PCR及Western blot检测,发现在A型血管夹层患者和主动脉瘤及正常人血管组织中均有不同程度的AAT表达,其中在主动脉瘤患者中AAT表达水平较正常组显著升高(P<0.05),在A型主动脉夹层患者中AAT表达较正常组显著下调(P<0.05);在人原代血管内皮细胞中使用AAT预孵育12h后原代在MMP-2/9压力的作用下,其组织表达的Caspase家族蛋白Caspase-3、Caspase-8较PBS预孵育组显著下调.在动物模型体内,AAT治疗能够显著下调Caspase家族蛋白的mRNA和蛋白水平(P<0.05).结论:AAT能够通过抑制Caspase家族蛋白的激活进而抑制血管内皮细胞的凋亡,终保护血管组织,阻止其形成动脉夹层.
作者:李继军;夏利民;宋凯;田爱丽;陆树洋;亚尔麦麦提·穆萨;阿迪力江·居麦 刊期: 2018年第12期
目的:应用免疫法建立ITP动物模型,模拟疾病的病理状态,进一步分析探讨各项指标以判定疾病模型是否成功.方法:将BALB/c小鼠随机分为两组,即正常组、模型组.模型组按照100 μl/20g剂量向小鼠腹腔内注射1∶4稀释的豚鼠抗BALB/c小鼠血小板血清(GP-APS),隔日1次,隔日检测外周血小板水平.两周后,检测小鼠外周血PAIgG水平、骨髓巨核细胞数量及形态分类,了解骨髓象、脾脏组织病理和脾脏脏器指数变化.结果:GP-APS稀释倍数为1∶128时仍成阳性,说明豚鼠血清中已产生了特异性抗体.与正常组及造模前比较,ITP小鼠模型外周血小板明显降低,抗血小板抗体明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05),注射GP-APS后24 h模型小鼠外周血小板数低.与正常组比较,模型组小鼠骨髓巨核细胞总数明显增加(P<0.05),而产板巨核细胞减少(P<0.01).同时模型组小鼠脾脏指数明显大于正常组(P<0.01).结论:与正常组比较,ITP小鼠外周血小板下降、抗血小板抗体升高、骨髓巨核细胞增多并伴成熟障碍,与ITP临床表现基本相符;应用GP-APS免疫法可成功建立ITP小鼠疾病模型.
作者:肖建红;李君君;张阳春 刊期: 2018年第12期
目的:分析预测幽门螺杆菌(Hp)外膜蛋白Omp18的免疫优势表位,并进一步验证确定其免疫优势片段的免疫原性.方法:通过生物信息学软件DNAStar分析预测幽门螺杆菌外膜蛋白Omp18的潜在优势表位,并由北京赛百盛基因技术有限公司合成相应的优势片段;片段通过口服免疫的方式免疫接种雌性BALB/c小鼠,每周1次共免疫4次.末次免疫10 d后处死小鼠,取血清检测IgG、IgA水平,取肠道灌洗液检测sIgA水平;取小鼠脾细胞ELISA法检测细胞上清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6水平,并通过MTT比色法检测脾细胞增殖情况;末次免疫10d后Hp标准株攻击小鼠2次,4周后处死小鼠,取胃组织进行快速尿素酶实验,并计算每组的感染率.结果:ELISA法检测各片段免疫小鼠血清IgG、IgA以及肠道sIgA水平均高于对照组,且差异有显著统计学意义(P<0.05);各免疫组脾细胞上清INF-γ、IL-2水平均显著高于对照组(P<0.05),而IL-4、IL-6水平较对照组则差异无显著统计学意义(P>0.05);MTT比色法结果显示各片段刺激后小鼠淋巴细胞均有显著增殖(P<0.05);快速尿素酶实验结果提示各片段免疫后均能显著减少小鼠胃组织中Hp的感染(P<0.05).结论:通过生物信息学软件分析预测的外膜蛋白Omp18优势片段均具有较好的免疫原性,且对Hp感染有一定的保护作用.
作者:卿蕊;向晴可;刘众齐;肖非;阳帆 刊期: 2018年第12期
目的:探讨力学拉伸对巨噬细胞极化的影响及可能涉及的机制.方法:对Raw264.7细胞施加5%幅度力学拉伸,活/死细胞染色检测拉伸对细胞生长的影响;运用流式细胞仪及RT-PCR检测拉伸对细胞表面标志物及相关基因表达量的影响;Western blot检测NF-κB信号通路中蛋白表达量的影响.结果:5%幅度的细胞拉伸并不会对Raw264.7细胞的生长造成影响,但Raw264.7细胞表面M1极化分子CD86的表达显著减少,M2极化分子CD206的表达显著增加,CD86/CD206的比例下降;同时抗炎细胞因子基因的表达明显上调.此外,5%幅度拉伸降低了NF-κB信号通路中NIK和Pi-P65蛋白的表达量.结论:5%幅度的细胞拉伸抑制了NF-κB信号通路的激活从而促进Raw264.7细胞向M2方向极化.
作者:陈咪咪;褚耿磊;黄迎康;李斌;施勤 刊期: 2018年第12期
目的:探讨五味子甲素对失血性休克大鼠肾脏损伤的作用及作用机制.方法:复制失血性休克大鼠模型并给予不同浓度五味子甲素.试剂盒检测血清血肌酐(Scr)、血尿氮(BUN)含量及线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.qRT-PCR检测炎症因子的mRNA水平,Western blot检测NLRP3炎症小体活化的标记因子的表达.结果:五味子甲素(40 mg/kg,80 mg/kg)能显著降低血清BUN和Scr的含量;同时,五味子甲素(80mg/kg)能明显升高线粒体中SDH、SOD和GSH-Px的活性,降低IL-1β和TNF-α的rnRNA和蛋白表达水平;此外,五味子甲素还可明显抑制NLRP3炎症小体活化的标记因子Caspase-1的表达.结论:五味子甲素可通过抑制NLRP3炎症小体活化减轻失血性休克大鼠肾损伤.
作者:甘永雄;俞凤 刊期: 2018年第12期
目的:探讨丹参提取物对高血压性心脏病(HHD)大鼠神经免疫的调节作用.方法:构建HHD大鼠模型,随机分为A组、B组、C组和D组,每组10只,另取10只健康大鼠记为对照组,A组和对照组腹腔注射生理盐水5 ml,B组、C组和D组分别腹腔注射0.75 ml/mg、1.5 ml/mg、3.0 ml/mg各5 ml丹参乙醇提取物溶液,注射持续4周.采用心脏超声诊断仪测定左心室收缩末期内径(LVESD)、舒张末期内径(LVEDD)、左心室射血分数(LVEF),采用尾动脉无创性血压测量收缩压(SBP)、舒张压(DBP);酶联免疫法测定外周血P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,流式细胞术检测外周血自然杀伤性细胞(NK)、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)活性,计算CD4+/CD8+值.结果:五组所检测指标比较均有显著性差异(P<0.05),A、B、C、D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4 +/CD8+显著高于对照组(P<0.05),LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ、TNF-α显著低于对照组(P<0.05);B、C、D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于A组(P<0.05),LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ、TNF-α显著低于A组,C、D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于B组,LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ、TNF-α显著低于B组(P<0.05);D组LVEF、IL-10、SP、VIP、NK、CD4+/CD8+显著高于C组(P<0.05),LVEDD、LVESD、SBP、DBP、NE、AngⅡ显著低于C组(P<0.05),C、D组TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05).结论:丹参提取物对HHD大鼠有改善心脏功能和降低血压作用,推测很可能通过调节神经免疫因子水平发挥作用.
作者:吴应强;叶久茂;范腾阳;吴进霞;陈小燕 刊期: 2018年第12期
miR-146家族包括两个成员miR-146a和miR-146b,与miR-146a不同,miR-146b在免疫应答方面的生物学信息很少;本文讨论了miR-146b的产生、作用机制、信号通路以及在相应疾病中的作用,为miR-146b的进一步研究提供思考和借鉴.
作者:薛庆节;张瑞华;熊化保 刊期: 2018年第12期
目的:探索淫羊藿苷对缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制.方法:MTT检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;蛋白印迹检测VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平.结果:与对照组相比,缺氧组细胞增殖明显升高,侵袭和迁移能力明显增强(P<0.05).淫羊藿苷处理缺氧组细胞后,细胞增殖能力明显下降,侵袭和迁移能力明显减弱(P<0.05).而且,缺氧组VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平显著高于正常组(P<0.01).与缺氧组相比,缺氧加药组VEGF、p-Pl3K、p-AKT和Rac蛋白水平明显降低(P<0.01).结论:淫羊藿苷通过VEGF通路抑制缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力.
作者:刁婷婷;田骋;王洪亮;姜玉珍 刊期: 2018年第12期
目的:探讨IgAN患者MYH9基因Rs4821480位点基因单核苷酸多态性与病理及预后关系.方法:经肾组织活检确诊148例IgAN,56例随访.外周血提取DNA,采用限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP) Rs4821480位点不同基因型与IgAN病理及预后的关系.结果:(1)三种基因型病理免疫荧光IgA、病理免疫荧光C3、镜下血尿、病理HASS分级、蛋白尿程度等无统计学差异.(2) Kaplan-Meier生存分析整体比较,从肾活检到肾功能减退时间,TT基因型快于其他基因型,基因型组两两比较,GG基因型与TT基因型有统计学差异.(3)采用Cox比例风险模型将多因素对预后的影响进行分析,结果显示发病时年龄、高血压、蛋白尿、CCR影响肾病患者预后.结论:Rs4821480位点基因型与病理无关,T等位基因的可能影响患者预后.
作者:田园青;张悦凤;王彩丽 刊期: 2018年第12期
医学免疫学内容抽象,难学难懂.作为教师如果做到以下六个方面“巧开篇、明主线、重内涵、接地气、多互动、善总结”,可以有效地提高教学水平,增加学生学习兴趣.
作者:米娜;吴瑗;赵汉宁;冯胜军;唐小梅;徐军发 刊期: 2018年第12期
目的:研究探讨宫颈上皮内病变(CIN)及早期宫颈癌与患者全身及局部体液免疫功能的变化之间的关系.方法:检测宫颈上皮内病变103例(包括LSIL组20例及HSIL组83例),Ⅰ期宫颈癌60例及HPV阴性且宫颈活检正常者25例(阴性对照组)的外周血免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和补体C3、C4,以及阴道灌洗液中的免疫细胞因子IL-2和IL-10.结果:①外周血免疫球蛋白检测结果:免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和补体C3、C4在阴性对照组、LSIL组、HSIL组和早期宫颈癌组四组间的差异均无统计学意义(P>0.05),但IgA似有随着宫颈病变进展而升高的趋势.②阴道灌洗液中免疫细胞因子检测结果:IL-2在阴性对照组、LSIL组、HSIL组和早期宫颈癌组中的表达逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.001);而IL-10的表达逐渐升高,差异亦有统计学意义(P<0.05).结论:CIN及早期宫颈癌作为宫颈局部病变,除对与黏膜免疫相关的IgA可能有一定影响外,对其他的全身体液免疫指标影响不大.但宫颈病变可导致阴道的局部免疫降低,促进病变发展.因此,阴道灌洗液中IL-2及IL-10的变化可为宫颈病变进展的预警指标之一.
作者:曾月;陈梦捷;覃露;王鹤 刊期: 2018年第12期
目的:观察活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对人乳腺癌细胞化疗的增敏作用,并初步探讨其调控机制.方法:人乳腺癌细胞株MCF-7培养至对数期后,分为5组,每孔5个复孔,多柔比星(Dox)组、低、中、高剂量组和对照组分别用0.4 μg/ml Dox、0.4μg/ml Dox+(10、30、60 mmol/L) NAC、磷酸盐缓冲液(PBS)进行处理.对比48 h后细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平,并对比48 h后含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA及蛋白相对表达量.结果:细胞凋亡率组间、时间及交互比较差异均有显著统计学意义(P<0.05);细胞凋亡率、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白相对表达量组间比较,对照组低,Dox组其次,低、高剂量组稍高,中剂量组高;ROS荧光强度组间比较,对照组低,中剂量组其次,低、高剂量组稍高,Dox组高;Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量组间比较,对照组高,Dox组其次,低、高剂量组稍低,中剂量组低;细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低、高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05),其他每2组间比较差异有统计学意义(P<0.05);组内比较,除对照组细胞凋亡率随时间延长差异无统计学意义(P>0.05),其他各组细胞凋亡率均随时间延长显著增加(P<0.05).结论:在一定范围,NAC可增强DOX的化疗敏感性,促进人乳腺癌细胞凋亡、调节细胞内ROS含量,其中30 mmol/L的NAC效果佳,推测是通过降低Bcl-2mRNA及蛋白表达,增强Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达,且与Bcl-2/Bax信号通路有关.
作者:王静 刊期: 2018年第12期
目的:探讨钩状效应对化学发光法测定甲胎蛋白(AFP)的影响与解决方案.方法:将所有AFP仪器测定结果>2 000 ng/ml标本都进行稀释重测.结果:39 484份标本中发现3例由于钩状效应而导致的错误结果.结论:当前的仪器和试剂无法对超高浓度AFP标本进行正确的测定或提示,必须对化学发光法测定AFP时可能存在钩状效应而导致错误结果的现象引起重视.
作者:崔怀中;王莹;孙少丹 刊期: 2018年第12期
胰腺癌肿瘤微环境在胰腺癌的发生发展中起重要作用,也是导致胰腺癌患者对放、化疗不敏感及预后效果差的主要原因.免疫治疗主要通过激活人体自身免疫系统来对抗肿瘤,是继手术及放、化疗之后又一重要的抗肿瘤手段.但是,由于胰腺癌特有的肿瘤微环境的存在,限制了免疫治疗的效果.因此,从胰腺癌肿瘤微环境出发,设计新的免疫治疗策略来克服胰腺癌肿瘤微环境的影响,或根据肿瘤特点采取联合治疗的策略,对于提高胰腺癌的疗效具有重要的意义.本文就胰腺癌的肿瘤微环境特点及对其进行免疫治疗策略的研究进展进行综述.
作者:刘文增;胡渊;张彩 刊期: 2018年第12期
目的:研究芍药苷(PF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠关节滑膜成纤维样滑膜细胞(FLS)异常增殖的影响.方法:采用完全弗氏佐剂足跖注射法制备AA大鼠,造模后第28天股动脉放血处死大鼠,分离培养FLS,大鼠足爪肿胀评分法检测PF灌胃治疗对AA大鼠的治疗作用,ELISA检测PF对AA大鼠FLS细胞因子IL-8表达的影响,MTT检测PF加入FLS培养液对AA大鼠FLS增殖的影响,Real time qPCR检测PF加药对AA大鼠FLS促凋亡基因Bax、凋亡因子Caspase 3、抗凋亡基因Bcl-2、RA病理基因Fibronectin表达的影响.结果:PF显著抑制AA大鼠足爪肿胀程度,PF加入FLS培养液后对FLS增殖具有一定的抑制作用,对AA大鼠FLS中Bax、Caspase 3表达具有显著上调作用,对Bcl-2、Fibronectin、IL-8表达具有显著抑制作用.结论:PF可能通过抑制AA大鼠FLS异常增殖抑制AA大鼠病理发展.
作者:缪成贵;周丽丽;熊友谊;魏伟;陈兵兵;常俊 刊期: 2018年第12期
目的:探究金丝桃苷(HS)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及作用机制.方法:不同浓度HS处理细胞,MTT检测细胞活性,流式检测细胞凋亡,免疫荧光检测细胞核皱缩情况,Western blot检测P53/Caspase通路蛋白表达情况.结果:根据预实验结果,选择10、20和50 nmol/L三个剂量的HS进行后续试验.HS(20 nmol/L)处理细胞4d能明显抑制HepG2细胞增殖(P<0.05),HS(50 nmol/L)处理细胞3、4d能显著降低细胞增殖倍数(P<0.05);与HepG2组比较,HS(10、20、50 nmol/L)组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),凋亡细胞数明显增多(P<0.05);HS(20、50 nmol/L)处理细胞后,HepG2细胞通路蛋白P53、Caspase-9和Caspase-3表达水平明显升高(P<0.05).结论:HS能抑制肝癌HepG2细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与诱导P53/Caspase信号通路激活有关.
作者:蒋参;熊慧生;巫桁锞;文军;梁玲 刊期: 2018年第12期
外泌体是活细胞分泌到细胞外的微小囊泡.近年来,越来越多的研究发现外泌体会影响血液系统恶性肿瘤的病程进展.外泌体生物标志物的判定有可能作为血液系统恶性肿瘤早期诊断、疗效评价或者预后判断的依据.本文就白血病、淋巴瘤及其他血液系统恶性肿瘤相关外泌体的新研究进行综述.
作者:李伟伟;李归冀;樊华;李剑平 刊期: 2018年第12期