卿蕊；向晴可；刘众齐；肖非；阳帆
目的:研究海藻酸寡糖(A0)通过T辅助细胞2型相关细胞因子治疗哮喘疾病的疗效.方法:8周龄的SPF级小鼠共32只,雌雄各半,随机分为4组,分别为正常对照组(n=8)、哮喘模型组(n=8)、海藻酸寡糖50 mg/kg组(n=8)和海藻酸寡糖200 mg,/kg组(n=8).在卵清蛋白(OVA)诱导的小鼠哮喘模型中,给予AO两种不同的剂量,分别为50 mg/kg和200 mg/kg.在支气管肺泡灌洗液(BALF)中,通过免疫组化和RT-PCR等方法,分析和比较治疗组和模型组两组的T辅助细胞2型相关细胞因子表达的差异,以及两种剂量的组间差异.结果:与正常组比较,哮喘组BALF中炎性细胞和嗜酸性粒细胞、血清总IgE、BALF中Th2和Th1相关细胞因子的表达(CD3、CD4、CD8和CD68)以及mRNA表达明显增高(P＜0.05).与哮喘组比较,AO治疗组各项指标均明显降低(P＜0.05),而且高、低剂量组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:由于海藻酸寡糖调节Th1/Th2细胞因子是导致哮喘发病的机制.因此,AO治疗哮喘疾病的前景十分可观,可以成为治疗哮喘的候选药物.
作者：沙尚清；尹梅；韩学梅；杨春霞；舒红 刊期： 2018年第12期
目的:探讨miR-17-5p在肝细胞癌(HCC) HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性中的调控作用.方法:使用含野生型MICB基因3'UTR序列、突变型MICB基因3'UTR序列、miR-17-5p mimic序列、miR-17-5p-NC序列、anti-miR-17-5p序列的质粒载体分别或共转染HCC HepG2细胞,使用丙戊酸钠处理转染或未转染细胞.应用荧光素酶活性测定检测miR-17-5p对MICB的调控作用.应用实时荧光定量PCR或蛋白免疫印迹检测细胞或组织中miR-17-5p及MICB mRNA和蛋白表达情况.结果:①与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平显著升高,MICB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平均显著降低,MICB mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P＜0.05).与miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Wt组相比,miR-17-5 p-mimic+MICB 3'-UTR-Wt组荧光素酶活性显著降低(P＜0.05).miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Mut组与miR-17-mimic+MICB 3'-UTR-Mut组的荧光素酶活性差异无统计学意义(P＞0.05).②与对应癌旁非肿瘤组织相比,miR-17-5p在HCC组织中的表达水平显著增加,而MICB蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).miR-17-5p和MICB蛋白的表达与肿瘤直径、远处转移、TNM分期、分化程度等临床病理特征有关(P＜0.05).在HCC肿瘤组织中miR-17-5p与MICB蛋白表达水平呈明显负相关(P＜0.05).③与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组MICB蛋白表达水平均显著降低(P＜0.05).与miR-17-5p-mimic+MICB 3'UTR-Mut组相比,miR-17-5p-mimic+MICB-3'UTR-Wt共转染组中NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均显著增加(P均＜0.05).与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17组NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均显著增加(P均＜0.05).④与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组细胞中MICB表达水平显著降低(P＜0.05).在不同效靶比时,与Ctrl组相比,丙戊酸钠组NK细胞毒性显著增加(P＜0.05).与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性显著降低(P＜0.05).结论:miR-17-5p通过靶向MICB降低HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性,从而抑制NK细胞对肝癌细胞的毒性.
作者：贾萌；薛焕洲；申权；余淼；贾江坤；王佳佳；徐建 刊期： 2018年第12期
目的:探索淫羊藿苷对缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制.方法:MTT检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;蛋白印迹检测VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平.结果:与对照组相比,缺氧组细胞增殖明显升高,侵袭和迁移能力明显增强(P＜0.05).淫羊藿苷处理缺氧组细胞后,细胞增殖能力明显下降,侵袭和迁移能力明显减弱(P＜0.05).而且,缺氧组VEGF、p-PI3K、p-AKT和Rac蛋白水平显著高于正常组(P＜0.01).与缺氧组相比,缺氧加药组VEGF、p-Pl3K、p-AKT和Rac蛋白水平明显降低(P＜0.01).结论:淫羊藿苷通过VEGF通路抑制缺氧诱导的脉络膜视网膜内皮细胞RF/6A增殖、侵袭和迁移能力.
作者：刁婷婷；田骋；王洪亮；姜玉珍 刊期： 2018年第12期
目的:探究金丝桃苷(HS)对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及作用机制.方法:不同浓度HS处理细胞,MTT检测细胞活性,流式检测细胞凋亡,免疫荧光检测细胞核皱缩情况,Western blot检测P53/Caspase通路蛋白表达情况.结果:根据预实验结果,选择10、20和50 nmol/L三个剂量的HS进行后续试验.HS(20 nmol/L)处理细胞4d能明显抑制HepG2细胞增殖(P＜0.05),HS(50 nmol/L)处理细胞3、4d能显著降低细胞增殖倍数(P＜0.05);与HepG2组比较,HS(10、20、50 nmol/L)组细胞凋亡率明显升高(P＜0.05),凋亡细胞数明显增多(P＜0.05);HS(20、50 nmol/L)处理细胞后,HepG2细胞通路蛋白P53、Caspase-9和Caspase-3表达水平明显升高(P＜0.05).结论:HS能抑制肝癌HepG2细胞增殖、促进细胞凋亡,其机制可能与诱导P53/Caspase信号通路激活有关.
作者：蒋参；熊慧生；巫桁锞；文军；梁玲 刊期： 2018年第12期
目的:探索青藤碱对阿奇霉素诱导的大鼠急性肝损伤的影响及其分子机制.方法:SD大鼠随机分为3组:对照组、阿奇霉素(AZM)组和阿奇霉素+青藤碱(AZM+SM)组.苏木素伊红(HE)染色观察肝脏组织病变.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡.免疫组化检测细胞增殖核抗原-67(Ki-67)表达.ELISA检测IL-6、IL-18和IL-1β水平.蛋白印迹检测p38、p-p38、HSP27和p-HSP27表达.结果:青藤碱可减轻阿奇霉素诱导的急性肝损伤大鼠肝脏组织病变.与对照组相比,阿奇霉素组细胞凋亡增加,Ki67表达下降(P＜0.05).与阿奇霉素组相比,阿奇霉素+青藤碱组细胞凋亡降低,Ki67表达升高(P＜0.05).阿奇霉素组IL-6、IL-18和IL-1β水平高于对照组(P＜0.05).阿奇霉素+青藤碱组IL-6、IL-18和IL-1β水平低于阿奇霉素组(P＜0.05).与对照组相比,阿奇霉素组p-p38/p38和p-HSP27/HSP27比值上升(P＜0.05).与阿奇霉素组相比,阿奇霉素+青藤碱组p-p38/p38和p-HSP27/HSP27比值下降(P＜0.05).结论:青藤碱可通过抑制p38通路的活化减轻阿奇霉素诱导的大鼠急性肝损伤.
作者：张家薇；薛冰；崔正军；郭鹏飞 刊期： 2018年第12期
目的:观察活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对人乳腺癌细胞化疗的增敏作用,并初步探讨其调控机制.方法:人乳腺癌细胞株MCF-7培养至对数期后,分为5组,每孔5个复孔,多柔比星(Dox)组、低、中、高剂量组和对照组分别用0.4 μg/ml Dox、0.4μg/ml Dox+(10、30、60 mmol/L) NAC、磷酸盐缓冲液(PBS)进行处理.对比48 h后细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平,并对比48 h后含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA及蛋白相对表达量.结果:细胞凋亡率组间、时间及交互比较差异均有显著统计学意义(P＜0.05);细胞凋亡率、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白相对表达量组间比较,对照组低,Dox组其次,低、高剂量组稍高,中剂量组高;ROS荧光强度组间比较,对照组低,中剂量组其次,低、高剂量组稍高,Dox组高;Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量组间比较,对照组高,Dox组其次,低、高剂量组稍低,中剂量组低;细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低、高剂量组比较差异无统计学意义(P＞0.05),其他每2组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);组内比较,除对照组细胞凋亡率随时间延长差异无统计学意义(P＞0.05),其他各组细胞凋亡率均随时间延长显著增加(P＜0.05).结论:在一定范围,NAC可增强DOX的化疗敏感性,促进人乳腺癌细胞凋亡、调节细胞内ROS含量,其中30 mmol/L的NAC效果佳,推测是通过降低Bcl-2mRNA及蛋白表达,增强Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达,且与Bcl-2/Bax信号通路有关.
作者：王静 刊期： 2018年第12期
目的:探讨五味子甲素对失血性休克大鼠肾脏损伤的作用及作用机制.方法:复制失血性休克大鼠模型并给予不同浓度五味子甲素.试剂盒检测血清血肌酐(Scr)、血尿氮(BUN)含量及线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.qRT-PCR检测炎症因子的mRNA水平,Western blot检测NLRP3炎症小体活化的标记因子的表达.结果:五味子甲素(40 mg/kg,80 mg/kg)能显著降低血清BUN和Scr的含量;同时,五味子甲素(80mg/kg)能明显升高线粒体中SDH、SOD和GSH-Px的活性,降低IL-1β和TNF-α的rnRNA和蛋白表达水平;此外,五味子甲素还可明显抑制NLRP3炎症小体活化的标记因子Caspase-1的表达.结论:五味子甲素可通过抑制NLRP3炎症小体活化减轻失血性休克大鼠肾损伤.
作者：甘永雄；俞凤 刊期： 2018年第12期
miR-146家族包括两个成员miR-146a和miR-146b,与miR-146a不同,miR-146b在免疫应答方面的生物学信息很少;本文讨论了miR-146b的产生、作用机制、信号通路以及在相应疾病中的作用,为miR-146b的进一步研究提供思考和借鉴.
作者：薛庆节；张瑞华；熊化保 刊期： 2018年第12期
目的:研究免疫补体调节蛋白C1抑制物(C1INH)调节巨噬细胞向经典活化巨噬细胞(M1)和选择性激活巨噬细胞(M2)的极化作用.方法:首先从人血中分离单核细胞后,单核细胞在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)或粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)作用下转变为静态巨噬细胞;静态巨噬细胞在干扰素-γ(IFN-γ)或白细胞介素4(IL-4) +IL-13刺激作用下分别转化为M1或M2.通过流式细胞仪观察C1INH对巨噬细胞CD14、CD163、CD206表型标志物的作用;应用RTPCR分析C1INH对巨噬细胞细胞因子、趋化因子、相关酶基因表达影响;利用Western blot方法,探讨在炎症条件下C1INH对巨噬细胞CD14结合Toll样受体4(TLR4)的影响.结果:C1INH抑制M-CSF源性M1的CD14、CD163和GM-CSF源性M2的CD206表型.C1INH减少M1的肿瘤坏死因子(TNF-α)和IL-6表达,而增加M2的15脂氧合酶(ALOX15)和IL-10表达.C 1INH抑制M1的诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA,而提高M2的精氨酸酶1(Arg1)mRNA表达.C1INH促进M1的杀菌活性和M2对菌的吞噬功能.C1INH阻断CD 14-TLR4介导信号传导通路.结论:C1INH调节巨噬细胞极化.
作者：吴世舜；余文博；刘梦元；张海谋；熊君；刘东旭 刊期： 2018年第12期
目的:探究α-1抗胰蛋白酶在A型主动脉夹层发病和治疗中的作用与机制.方法:取2012年4月～2016年4月在我院行手术治疗的Stanford A型主动脉夹层患者8例、升主动脉瘤患者8例、正常组8例的资料信息,比较各组血管组织中AAT的蛋白和基因表达水平同时检测血清中AAT含量的变化.使用人原代血管内皮细胞验证AAT对于血管内皮细胞在胰酶刺激下发生细胞凋亡的保护作用,采用皮下缓释angⅡ和血管注射胰酶构建比格犬血管夹层模型,给予AAT治疗后检测Caspase家族蛋白及基因的表达水平.结果:使用RT-PCR及Western blot检测,发现在A型血管夹层患者和主动脉瘤及正常人血管组织中均有不同程度的AAT表达,其中在主动脉瘤患者中AAT表达水平较正常组显著升高(P＜0.05),在A型主动脉夹层患者中AAT表达较正常组显著下调(P＜0.05);在人原代血管内皮细胞中使用AAT预孵育12h后原代在MMP-2/9压力的作用下,其组织表达的Caspase家族蛋白Caspase-3、Caspase-8较PBS预孵育组显著下调.在动物模型体内,AAT治疗能够显著下调Caspase家族蛋白的mRNA和蛋白水平(P＜0.05).结论:AAT能够通过抑制Caspase家族蛋白的激活进而抑制血管内皮细胞的凋亡,终保护血管组织,阻止其形成动脉夹层.
作者：李继军；夏利民；宋凯；田爱丽；陆树洋；亚尔麦麦提·穆萨；阿迪力江·居麦 刊期： 2018年第12期
目的:探讨IL-17在大鼠肾移植急性排斥反应过程中的表达特点及其意义.方法:将大鼠随机分为正常对照组、同系基因对照组、同种异体移植组、免疫抑制剂干预组,并建立肾移植急性排斥反应模型,用RT-PCR及免疫组织化学方法检测急性排斥时IL-17在肾组织中的表达.结果:同种异体移植组在移植后第3天、5天和7天,移植肾IL-17均明显升高,与其他组相比,均有统计学意义(P＜0.05),其中以第5天为高,差异具有统计学有意义(P＜0.05).结论:IL-17参与了大鼠肾移植急性排斥反应的发生,并为早期事件,IL-17检测可能为人类肾移植早期急性排斥反应的诊断和治疗提供理论依据.
作者：滕昊林；于金宇；刘念；赵军；高宝山；薛立娟 刊期： 2018年第12期
医学免疫学内容抽象,难学难懂.作为教师如果做到以下六个方面“巧开篇、明主线、重内涵、接地气、多互动、善总结”,可以有效地提高教学水平,增加学生学习兴趣.
作者：米娜；吴瑗；赵汉宁；冯胜军；唐小梅；徐军发 刊期： 2018年第12期
目的:探究迷迭香酸(RA)对急性T细胞白血病Jurkat细胞存活的作用及机制.方法:将细胞随机分为Jurkat组、RA(5μmol/L)组、RA(10 μmol/L)组和RA(20μmol/L)组,分别用0、5、10和20 μmol/L的RA处理细胞,CCK8检测培养不同时间的细胞增殖倍数,克隆形成实验检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,免疫印迹检测Beclin1、P62、LC3、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt和mTOR的表达,免疫荧光检测LC3的表达.结果:RA处理细胞4d后,RA(5、10、20 μmol/L)组细胞增殖倍数与Jurkat组比较明显降低,存活细胞数明显减少,细胞凋亡率明显升高;同时与Jurkat组比较,RA(5、10、20 μmol/L)组细胞Beclin1表达水平和LC3Ⅱ/LC Ⅰ的比值明显降低,P62表达水平明显升高,LC3阳性表达与Jurkat组比较也明显减少;此外,RA(5、10、20μmol/L)还能显著降低p-PI3 K/PI3K、p-Akt/Akt的比值和mTOR的表达水平.结论:RA可诱导急性T淋巴白血病Jurkat细胞自噬和细胞凋亡,作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路激活有关.
作者：郑晓强；董金凤；芮红兵 刊期： 2018年第12期
目的:观察茯苓多糖灌胃对甲醛诱导小鼠体内DNA加合物含量的影响,探讨茯苓多糖的抗遗传毒性效应.方法:40只成年昆明种雄性小鼠随机分成阳性对照组(甲醛染毒)、茯苓多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只.阳性对照组灌注0.4 ml浓度为0.5 g/L的甲醛溶液,茯苓多糖组小鼠除了灌胃0.2 ml浓度为1.0 g/L的甲醛溶液外,还灌胃0.2 ml不同浓度的茯苓多糖溶液(低剂量组2.0 g/L,中剂量组4.0 g/L和高剂量组8.0 g/L).1周后摘眼球取血,用ELISA法测定各组小鼠血清DNA加合物含量.结果:4组间DNA加合物浓度差异有统计学意义(P＜0.01),茯苓多糖中剂量组和高剂量组DNA加合物浓度均低于阳性对照组(P＜0.01).茯苓多糖剂量越高,DNA加合物浓度越低,呈现明显的剂量-效应关系(rs=-0.869,P＜0.01).结论:茯苓多糖小鼠灌胃可抑制DNA加合物的形成,且存在剂量-效应关系,作用随茯苓多糖剂量的提高而增强.
作者：张志军；黄雪梅；胡昌军 刊期： 2018年第12期
传统教学模式下开设免疫荧光实验项目成本较高,限制因素较多,采用虚拟仿真教学模式有望解决该问题.本文结合当前虚拟仿真教学平台构建的主流技术,设计了免疫荧光实验项目虚拟仿真教学模式的构建方法,为该实验项目虚拟仿真教学软件开发提供指导.
作者：唐超智；刘庆荟；张顺利 刊期： 2018年第12期
胰腺癌肿瘤微环境在胰腺癌的发生发展中起重要作用,也是导致胰腺癌患者对放、化疗不敏感及预后效果差的主要原因.免疫治疗主要通过激活人体自身免疫系统来对抗肿瘤,是继手术及放、化疗之后又一重要的抗肿瘤手段.但是,由于胰腺癌特有的肿瘤微环境的存在,限制了免疫治疗的效果.因此,从胰腺癌肿瘤微环境出发,设计新的免疫治疗策略来克服胰腺癌肿瘤微环境的影响,或根据肿瘤特点采取联合治疗的策略,对于提高胰腺癌的疗效具有重要的意义.本文就胰腺癌的肿瘤微环境特点及对其进行免疫治疗策略的研究进展进行综述.
作者：刘文增；胡渊；张彩 刊期： 2018年第12期
目的:分析预测幽门螺杆菌(Hp)外膜蛋白Omp18的免疫优势表位,并进一步验证确定其免疫优势片段的免疫原性.方法:通过生物信息学软件DNAStar分析预测幽门螺杆菌外膜蛋白Omp18的潜在优势表位,并由北京赛百盛基因技术有限公司合成相应的优势片段;片段通过口服免疫的方式免疫接种雌性BALB/c小鼠,每周1次共免疫4次.末次免疫10 d后处死小鼠,取血清检测IgG、IgA水平,取肠道灌洗液检测sIgA水平;取小鼠脾细胞ELISA法检测细胞上清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6水平,并通过MTT比色法检测脾细胞增殖情况;末次免疫10d后Hp标准株攻击小鼠2次,4周后处死小鼠,取胃组织进行快速尿素酶实验,并计算每组的感染率.结果:ELISA法检测各片段免疫小鼠血清IgG、IgA以及肠道sIgA水平均高于对照组,且差异有显著统计学意义(P＜0.05);各免疫组脾细胞上清INF-γ、IL-2水平均显著高于对照组(P＜0.05),而IL-4、IL-6水平较对照组则差异无显著统计学意义(P＞0.05);MTT比色法结果显示各片段刺激后小鼠淋巴细胞均有显著增殖(P＜0.05);快速尿素酶实验结果提示各片段免疫后均能显著减少小鼠胃组织中Hp的感染(P＜0.05).结论:通过生物信息学软件分析预测的外膜蛋白Omp18优势片段均具有较好的免疫原性,且对Hp感染有一定的保护作用.
作者：卿蕊；向晴可；刘众齐；肖非；阳帆 刊期： 2018年第12期
目的:探讨钩状效应对化学发光法测定甲胎蛋白(AFP)的影响与解决方案.方法:将所有AFP仪器测定结果＞2 000 ng/ml标本都进行稀释重测.结果:39 484份标本中发现3例由于钩状效应而导致的错误结果.结论:当前的仪器和试剂无法对超高浓度AFP标本进行正确的测定或提示,必须对化学发光法测定AFP时可能存在钩状效应而导致错误结果的现象引起重视.
作者：崔怀中；王莹；孙少丹 刊期： 2018年第12期
目的:研究芍药苷(PF)对佐剂性关节炎(AA)大鼠关节滑膜成纤维样滑膜细胞(FLS)异常增殖的影响.方法:采用完全弗氏佐剂足跖注射法制备AA大鼠,造模后第28天股动脉放血处死大鼠,分离培养FLS,大鼠足爪肿胀评分法检测PF灌胃治疗对AA大鼠的治疗作用,ELISA检测PF对AA大鼠FLS细胞因子IL-8表达的影响,MTT检测PF加入FLS培养液对AA大鼠FLS增殖的影响,Real time qPCR检测PF加药对AA大鼠FLS促凋亡基因Bax、凋亡因子Caspase 3、抗凋亡基因Bcl-2、RA病理基因Fibronectin表达的影响.结果:PF显著抑制AA大鼠足爪肿胀程度,PF加入FLS培养液后对FLS增殖具有一定的抑制作用,对AA大鼠FLS中Bax、Caspase 3表达具有显著上调作用,对Bcl-2、Fibronectin、IL-8表达具有显著抑制作用.结论:PF可能通过抑制AA大鼠FLS异常增殖抑制AA大鼠病理发展.
作者：缪成贵；周丽丽；熊友谊；魏伟；陈兵兵；常俊 刊期： 2018年第12期
肺癌是世界上发病率和死亡率高的肿瘤.手术、化疗、放疗、靶向治疗等已在很大程度上改善了患者无病生存期和总生存期.CAR-T细胞疗法作为一种免疫治疗手段,已在血液系统恶性肿瘤的治疗中获得显著疗效.近年来,CRA-T细胞疗法应用于实体瘤的治疗研究也取得了突破性的进展.本文就CAR-T细胞疗法的发展历程及在晚期肺癌治疗中的应用研究进展作一综述.
作者：刘睿；李亚荣 刊期： 2018年第12期
中国免疫学杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中国免疫学会,吉林省医学期刊社
